高中生物实验

第一讲高中生物■课本实验

课前检测

1.（东城零模）下列实验操作最合理的是

A.轻敲载玻片上的盖玻片，以使洋葱根尖细胞分散更均匀

B.向DNA粗提取液中加入2moi/L的NaCl溶液以析出DNA

C.低温、无菌条件下暗培养胡萝卜外植体以获得愈伤组织

D.新鲜葡萄进行发酵的初期加入适量蔗糖以增加果酒的甜度

2.（三十四校联考零模）下列实验材料的选择不正确的是

A.一般选用黑藻的叶进行叶绿体的观察

B.脂肪的鉴定实验中常常选用花生子叶

C.微生物的培养与分离实验常用大肠杆菌

D.一般选用胡萝卜的叶片部分作为组织培养材料

3.（丰台一模）下列生物实验技术能实现的是（）

A.通过调整植物激素的比例影响愈伤组织的分化方向

B.通过密封给醋酸杆菌创造无氧环境制作果醋

C.用蒸储水处理鸡血红细胞并离心获得纯净细胞膜

D.用分子杂交技术检测目的基因是否成功转录DNA

4.（石景山一模）下表是不同筛选的方法或结果，完全正确的一组是（）

选项目的方法或结果

筛选耐盐的杨树品种用不同浓度的NaCl液处理不同品种杨树幼苗，净

A光合效率最大的为耐盐品种

筛选土壤中能分解尿素培养基应以尿素为唯一氮源，同时添加酚红指示剂

B

的细菌

基因工程中筛选含目的用作载体的质粒应含有某种抗生素抗性基因

C基因的细胞

筛选产生特定抗体的杂在具有筛选作用的选择培养基上培养

D

交瘤细胞

5.（东城一模）以下方法不能达到实验目的的是

A.粗提取DNA分子时可利用不同浓度的NaCl溶液去除杂质

B.利用无水乙静、碳酸钙和二氧化硅可分离绿叶中的色素

C.采用稀释涂布平板法接种可在固体培养基上获得单个菌落

D.制备单克隆抗体时可利用选择培养基筛选杂交瘤细胞

【考纲要求】理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实

验涉及的方法和技能进行综合运用。

1.必修实验

1.1光学显微镜

（1）光学显微镜的结构

光学部分：目镜、镜筒、物镜、遮光器（有大小光圈）和反光镜（有平面镜和凹面镜）

机械部分：镜座、倾斜关节、镜臂、载物台（上有通光孔、压片夹）、镜头转换器、粗、细

准焦螺旋。

呈像原理：映入眼球内的是倒立放大的虚像。（物镜质量的优劣直接影响成像的清晰程度）

放大倍数：目镜和物镜二者放大倍数的乘积）

注：显微镜放大倍数是指直径倍数，即长度和宽度，而不是面积。

（2）显微镜的使用

置镜（装镜头）T对光一置片一调焦一观察

注：换高倍物镜时只能移动转换器，换镜后，只准调节细准焦和反光镜（或光圈）。

装片的制作和移动：制作：滴清水T放材料一盖片

移动：物像在何方，就将载玻片向何处移。

（原因：物像移动的方向和实际移动玻片的方向相反）

污点判断：

1）污点随载玻片的移动而移动，则位于载玻片上；

2）污点不随载玻片移动，换目镜后消失，则位于目镜；换物镜后消失，则位于物镜；

3）污点不随载玻片移动，换镜后也不消失，则位于反光镜上。

完毕工作。

使用完毕后，取下装片，转动镜头转换器，逆时针旋出物镜，旋进镜头盒；取出目镜，插进

镜头盒，盖上。把显微镜放正。

1.2观察DNA、RNA在细胞中的分布

实验目的：初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法

实验原理：

甲基绿和吐罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA呈现绿色，毗罗

红使RNA呈现红色。利用甲基绿、毗罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示DNA和RNA

在细胞中的分布。

盐酸能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色休中的DNA和蛋白质分

离，有利于DNA与染色剂结合。

方实验步骤:

操作步骤注意问题解释

取口腔上皮载玻片要洁净，滴一滴质量分数为防止污迹干扰观察效果

细胞制片0.9%的NaCl溶液保持细胞原有形态

用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁消毒为防止感染，漱口避免取材失败

上轻刮几下取细胞固定装片

将载玻片在酒精灯下烘干

水解将烘干的载玻片放入质量分数为8%改变细胞膜的通透性，加速染色剂进

的盐酸溶液中，用300C水浴保温5min入细胞，促进染色体的DNA与蛋臼

质分离而被染色

冲冼涂片用蒸僧水的缓水流冲洗载玻片10S洗去残留在外的盐酸

染色滴2滴吐罗红甲绿染色剂于载玻片上

染色5min

观察先低倍镜观察，选择染色均匀、色泽使观察效果最佳

浅的区域，移至视野中央，调节清晰

后才换用高倍物镜观察

1.3检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质

实验目的：

尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质

实验原理：

某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。

可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu20

沉淀。

脂肪可以被苏丹III染液染成橘黄色（或被苏丹IV染液染成红色）。淀粉遇碘变蓝色。

蛋白质与双缩腺试剂发生作用，产生紫色反应。

（蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性NaOH溶液中能与双缩版试剂中的Cu2+作用，产生

紫色反应。）

实验材料

做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色为白色的植物组织，如苹果、梨。（因为组

织的颜色较浅，易于观察。）

做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡3~4小时

（也可用蔑麻种子）。

做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。

实验试剂

斐林试剂（包括甲液:质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液和乙液:质量浓度为0.05g/mLCuS04

溶液）、苏丹IH或苏丹IV染液、双缩麻试剂（包括A液：质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液

和B液：质量浓度为0.01g/mLCuSO4溶液）、体积分数为50%的酒精溶液，碘液、蒸福

水。

实验步骤：

(-)可溶性糖的鉴定:

操作方法注意问题解释

1.制备组织样液。苹果或梨组织液必须临时制备。因苹果多酚氧化酶含量高，

(去皮、切块、研磨、过组织液很易被氧化成褐色，

滤)将产生的颜色掩盖。

2.取1支试管，向试管内

注入2mL组织样液。

3.向试管内注入1mL新应将组成斐林试剂的甲液、乙液斐林试剂很不稳定，甲、乙

制的斐林试剂，振荡。分别配制、储存，使用前才将甲、液混合保存时，生成的Cu

乙液等量混匀成斐林试剂；(OH)2在70-900C下

分解成黑色CuO和水；

切勿将甲液、乙液分别加入苹果甲、乙液分别加入时可能会

组织样液中进行检测。与组织样液发生反应，无

Cu(OH)2生成。

4.试管放在盛有50-650C最好用试管夹夹住试管上部，使防止试管内的溶液冲出试

温水的大烧杯中，加热约2试管底部不触及烧杯底部，试管管，造成烫伤；

分钟，观察到溶液颜色：口不朝向实验者。

浅蓝色T棕色T砖红也可用酒精灯对试管直接加热。缩短实验时间。

色(沉淀)

(-)脂肪的鉴定:

操作方法注意问题解释

花生种子浸泡、去皮、切下一些子干种子要浸泡3~4小因为浸泡时间短，不易切片，

叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴时，新花生的浸泡时浸泡时间过长，组织较软，切

中，用吸水纸吸去装片中的水。间可缩短。下的薄片不易成形。切片要尽

可能薄些，便于观察。

在子叶薄片上滴2~3滴苏丹ni或苏染色时间不宜过长。

丹IV染液，染色1分钟。

用吸水纸吸去薄片周围染液，用酒精用于洗去浮色，不洗去浮

50%酒精洗去浮色，吸去酒精。色，会影响对橘黄色脂肪滴的

观察。同时，酒精是脂溶性溶

剂，可将花生细胞中的脂肪颗

粒溶解成油滴。

用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上滴上清水可防止盖盖玻片时产

1~2滴蒸储水，盖上盖玻片。生气泡。

低倍镜下找到花生子叶薄片的最装片不宜久放。时间一长，油滴会溶解在乙醇

薄处，可看到细胞中有染成橘黄色中。

或红色圆形小颗粒。

三、蛋白质的鉴定:

操作方法注意问题解释

制备组织样液。黄豆浸泡1至2天，容易研磨成浆，

(浸泡、去皮研磨、过滤。)也可购新鲜豆浆以节约实验时间。

鉴定。加样液约2ml于试管A液和B液也要分开配先加NaOH溶液，为Cu2+与蛋白

中，加入双缩胭试剂A,摇匀；制，储存。鉴定时先加质反应提供一个碱性的环境。A、

再加入双缩胭试剂B液3~4A液后加B液。B液混装或同时加入,会导致Cu2+

滴，摇匀，溶液变紫色。变成Cu(OH)2沉淀，而失效。

否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的

CuS04溶液不能多加。真实颜色。

可用蛋清代替豆浆。蛋清要先稀释。如果稀释不够，在实验中蛋清粘在

试管壁，与双缩服试剂反应后会粘

固在试管内壁上，使反应不容易彻

底，并且试管也不易洗干净。

附：淀粉的检测和观察碘液不要滴太多以免影响颜色观察

用试管取2ml待测组织样液，

向试管内滴加2滴碘液，观

察颜色变化。

1.4高倍镜观察线粒体和叶绿体

实验目的：

使用高倍镜观察叶绿体和线粒体的形态分布。

实验原理：

叶绿体的辨认依据：叶绿体是绿色的，呈扁平的椭圆球形或球形。线粒体辨认依据：线粒体

的形态多样，有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞

染料，可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色。

实验材料：

观察叶绿体时选用：辞类的叶、黑藻的叶。取这些材料的原因是：叶子薄而小，叶绿体清楚，

可取整个小叶直接制片，所以作为实验的首选材料。

若用菠菜叶作实验材料，要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。因为表皮细胞不含叶绿体。

实验步骤：

步骤注意问题分析

1.制片。用镜子取一片黑藻制片和镜检时，临时装片中的否则细胞或叶绿体失水收缩，

的小叶，放入载玻片的水滴叶片不能放干了，要随时保持将影响对叶绿体形态和分布

中，盖上盖玻片。有水状态的观察。

2.低倍镜下找到叶片细胞

3.高倍镜下观察叶绿体的形

态和分布

4.制作人的口腔上皮细胞临在洁净载玻片中央滴一滴健

时装片那绿染液一用牙签取碎屑一

盖盖玻片

5.观察线粒体蓝绿色的是线粒体，细胞质接

近无色。

讨论：

1、细胞质基质中的叶绿体，是不是静止不动的？为什么？

答：不是。呈椭球体形的叶绿体在不同光照条件下可以运动，这种运动能随时改变椭球体的

方向，使叶绿体既能接受较多光照，又不至于被强光灼伤。

2、叶绿体的形态和分布，与叶绿体的功能有什么关系？

答：叶绿体的形态和分布都有利于接受光照，完成光合作用。如叶绿体在不同光照条件下改

变方向。又如叶子上面的叶肉细胞中的叶绿体比下面的多，这可以接受更多的光照。

通过模拟实验探究膜的透性

实验目的：

1.5说明生物膜具有选择透过性

实验原理：

某些半透膜（如动物的膀胱膜、肠衣等），可以让某些物质透过，而另一些物质不能透过。

或者（玻璃纸）水分子可以透过，而蔗糖分子因为比较大，不能透过。可以用半透膜将不同

浓度的溶液分隔开，然后通过观察溶液液面高低的变化，来观察半透膜的选择透过特性，进

而类比分析得出生物膜的透性。

实验步骤：

取两个长颈漏斗，分别在漏斗口处封上一层玻璃纸。

在A漏斗中注入硫酸铜溶液，B漏斗中注入蔗糖溶液，并加入少许红墨水，使其略呈红色。

将两个漏斗分别浸入盛有蒸储水的烧杯中，在两漏斗的液面处做标记

静置一段时间后，观察烧杯中蒸储水颜色的变化及长颈漏斗的液面变化，并将观察到的结果

设计表格进行记录。

1.6观察植物细胞的质壁分离和复原

实验目的：

学会观察植物细胞质壁分离与复原的方法。

了解植物细胞发生渗透作用的原理。

实验原理：

质壁分离的原理：当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而失水，

细胞液中的水分就透过原生质层进入到溶液中，使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。

由于原生质层比细胞壁的收缩性大，当细胞不断失水时，原生质层就会与细胞壁分离。

质壁分离复原的原理：当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而吸

水，外界溶液中的水分就通过原生质层进入到细胞液中，整个原生质层就会慢慢地恢复成原

来的状态，紧贴细胞壁，使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。

实验材料：

紫色洋葱鳞片叶的外表皮。

因为液泡呈紫色，易于观察。也可用水绵代替。0.3g/ml的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做质壁

分离剂对细胞无毒害作用。

实验步骤:

步骤注意问题分析

1.制作洋葱表皮的临时装片。

在载玻片上滴一滴水，撕取洋葱

鳞片叶外表皮放在水滴中展平盖盖玻片应让盖防止装片产生气泡。

（也可挑取几条水绵放入水滴玻片的一侧先触

中）。盖上盖玻片。及载玻片，然后

轻轻放平。

2.观察洋葱（或水绵）细胞

可看到：液泡大，呈紫色，原生液泡含花青素，所以液泡呈紫色。

质层紧贴着细胞壁。（或水绵细胞

中有带状叶绿体，原生质层呈绿先观察正常细胞与后面的“质壁分离”

色，紧贴着细胞壁。起对照作用。

3.观察质壁分离现象。蔗糖溶液浓度大于细胞液浓度，细胞

从盖玻片的一侧滴入0.3g/ml的通过渗透作用失水，细胞壁伸缩性小

蔗糖溶液，在另一侧用吸水纸吸原生质层的伸缩性大，液泡和原生质

引，重复几次。镜检。观察到：层不断收缩，所以发生质壁分离。

液泡由大变小，颜色由浅变深，重复几次为了使细胞完全浸入蔗糖溶液中。

原生质层与细胞壁分离。原生质糖液浓度不能过否则，细胞严重失水死亡，看不到质

层与细胞壁之间充满蔗糖溶液。高壁分离的复原。

4.观察细胞质壁分离的复原现细胞液的浓度高于外界溶液，细胞通

象。发生质壁分离的过渗透作用吸水，所以发生质壁分离

从盖玻片的一侧滴入清水，在另装片，不能久置，复原现象。

一侧用吸水纸吸引，重复几次。要马上滴加清因为细胞失水过久，也会死亡。

镜检。观察到：液泡由小变大，水，使其复原。

颜色由深变浅，原生质层恢复原重复几次。为了使细胞完全浸入清水中。

状。

实验讨论答案:

I.如果将上述表皮细胞浸润在高浓度的硝酸钾溶液中，这些表皮细胞会出现什么现象？

2.当红细胞细胞膜两侧的溶液具有浓度差时，红细胞会不会发生质壁分离？为什么？

1.7探究影响酶活性的因素

实验目的：

探究不同温度和PH对过氧化氢酶活性的影响。

培养实验设计能力。

实验步骤：

提出问题一作出假设一设计实验T（包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设

计实验记录表格）T实施实验一分析与结论一表达与交流。

实例：比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率

-）.实验原理:

鲜肝提取液中含有过氧化氢酶，过氧化氢酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出02。经计算,

质量分数为3.5%的FeC13溶液和质量分数为20%的肝脏研磨液相比，每滴FeC13溶液中

的Fe3+数，大约是每滴肝脏研磨液中过氧化氢酶分子数的25万倍。

~）实验步骤:

步骤注意问题解释

取4支洁净试管，编号，分别不让H2O2接触皮H2O2有一定的腐蚀性

加入2mLH2O2溶液肤

将2号试管放在900C左右的

水浴中加热，观察气泡冒出情

况，与1号对照

向3号、4号试管内分别滴入不可用同一支滴管由于酶具有高效性，若滴入的FeC13溶

2滴FeC13溶液和2滴肝脏研液中混有少量的过氧化氢酶，会影响实

磨液，观察气泡产生情况肝脏研磨液必须是验准确性

新鲜的肝脏在制成

研磨液因为过氧化氢酶是蛋白质，放置过久，

可受细菌作用而分解，使肝脏组织中酶

分子数减少，活性降低

研磨可破坏肝细胞结构，使细胞内的酶

释放出来，增加酶与底物的接触面积

2-3min后，将点燃的卫生香放卫生香时，动作现象：3号试管产生气泡多，冒泡时间

分别放入3号和4号试管内液要快，不要插到气短，卫生香猛烈复燃，4号试管产生气

面的上方，观察复燃情况泡中泡少，冒泡时间长，卫生香几乎无变化

避免卫生香因潮湿而熄灭

实例：温度对酶活性的影响

-）实验目的：

初步学会探索温度对酶活性的影响的方法。

探索淀粉酶在不同温度下催化淀粉水解的情况。

二）实验原理：

淀粉遇碘后，形成紫蓝色的复合物。

淀粉前可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖（淀粉水解过程中，不同阶段的中间产物遇碘

后，会呈现红褐色或红棕色。）麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。（市售a-淀粉酶的最适温度约

6000

三）实验步骤:

操作注意问题解释

取3支试管，编上号，然后分别注

入2mL可溶性淀粉溶液

另取3支试管，编上号，然后分别

注入1mL新鲜淀粉酶溶液

将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分不能只用不同温度处防止混合时，由于两种溶液的

成3组，分别放入热水（约6000,理淀粉溶液或酶溶液温度不同而使混合后温度发生

沸水和冰块中，维持各自的温度变化，反应温度不是操作者所

5min要控制的温度，影响实验结果。

分别将淀粉酶溶液注入相同温度下保持各自温度时间不淀粉醐催化淀粉水解需要一定

的淀粉溶液中，摇匀后，维持各自能太短时间

的温度5min

在3支试管中各滴入1-2滴碘液，碘液不能滴加太多防止影响实验现象的观察

摇匀后观察这3支试管中溶液颜色

变化并记录

用表格的形式显示实验步骤

序加入试剂或处理方法试管

号

ABcabc

1可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL///

新鲜淀粉酶溶液///1mL1mL1mL

2保温5min600C1000Cooc600C1000C1000C

3将a液加入到A试管，b液加入到B

试管，c液加入到C试管中，摇匀

4保温5min600C1000Cooc

5滴入碘液，摇匀2滴2滴2滴

6观察现象并记录

实例：PH值对酶活性的影响

操作步骤：用表格显示实验步骤：（注意操作顺序不能错）

序号加入试剂或处理方法试管

123

1注入新鲜的淀粉酶溶液1mL1mL1mL

2注入蒸储水1mL//

3注入氢氧化钠溶液/1mL/

4注入盐酸//1mL

5注入可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL

6600C水浴保温5min

7加入斐林试剂，边加边振荡2mL2mL2mL

8水浴加热煮沸Imin

9观察3支试管中溶液颜色变化变记录

1.8叶绿体色素的提取和分离

实验目的：

尝试用过滤方法提取叶绿体中的色素和用纸层析法分离提取到的色素。

分析实验结果，探究叶绿体中有几种色素，以及各自所呈现的颜色。

实验原理：

叶绿体中的色素是有机物，不溶于水，易溶于丙酮等有机溶剂中，所以用丙酮、乙醇等能提

取色素。层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂。叶绿体色素在层析液中的溶解度不同，分子

量小的溶解度高，随层析液在滤纸上扩散得快，溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。所

以用层析法来分离四种色素。

实验材料：幼嫩、鲜绿的菠菜叶

实验步骤：

步骤注意问题分析

1.提取色素加SiO2加SiO2为了研磨得更充分。

5克绿叶剪碎，放入研钵，加SiO2、力口CaCO3加CaCO3防止研磨时叶绿素受到破坏。

CaC03和5mL丙酮（或10mL无因为叶绿素含镁，可被细胞液中的有机酸

水乙醇）迅速、充分研磨。（若没产生的氢代替，形成去镁叶绿素，CaCO3

有无水乙醇，也可用体积分数为加丙酮可中和液泡破坏释放的有机酸，防止叶绿

95%的乙醇，但要加入适量的无迅速体被破坏。

水碳酸钠，除去水分）叶绿体色素易溶于丙酮等有机溶剂。

减少研磨过程叶绿素的分解，减少有毒性

的丙酮挥发。

2.收集滤液

漏斗基部放一单层尼龙布，研磨尼龙布起过滤作用。

倒入漏斗内挤压，将滤液收集到

小试管中，用棉花塞塞住试管口。试管口用棉花塞塞紧是为了防止丙酮挥

发。

3.制备滤纸条干燥

将干燥的滤纸，顺着纸纹剪成长顺着纸纹剪可吸收更多的滤液。

5cm,宽1cm的纸条，一端剪去成长条层析时，色素分离效果好。

二个角，并在距这一端1cm处划一端剪去二可使层析液同时到达滤液细线。

一铅笔线。个角

4.划滤液细线

用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅滤液细线越防止色素带之间部分重叠。

笔线划出细、齐、直的一条滤液细、越齐越

细线，干后重复三次。好。增加色素在滤纸上的附着量，实验结果更

重复三次。明显。

5.纸层析法分离色素层析液不能

将3mL层析液倒入烧杯中，将滤没及滤纸条。防止色素溶解在层析液中，

纸条（划线一端朝下）插入层析烧杯要盖培

液中，用培养皿盖盖上烧杯。养皿盖。层析液中的苯、丙酮、石油酸易挥发。

6.观察实验结果

扩散最快是四种色素之所以能被分离，是因为四种色

1胡萝卜素（橙黄色）

胡萝卜素，扩素随层析液在滤纸上的扩散速度不同。

叶黄素（黄色）散最慢是叶

叶绿素a（蓝绿色）绿素b,含量

叶绿素b（黄绿色）最多的是叶

U绿素a。

实验讨论：

1）.滤纸条上的滤液细线，为什么不能触及层析液?

2）.提取和分离叶绿体色素的关键是什么？

1.9探究酵母菌的呼吸方式

实验目的：

了解酵母菌的无氧呼吸和有氧呼吸情况。

学会运用对比实验的方法设计实验。

实验原理：

酵母菌是一种单细胞真菌，在有氧和无氧的条件下都能生存，属于兼性厌氧菌，因此便于用

来研究细胞呼吸的不同方式。方程式（略）

C02可使澄清石灰水变混浊，也可使漠麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。根据石灰水混

浊程度或澳麝香草酚蓝水溶液变成黄色的时间长短，可以检测酵母菌培养C02的产生情况。

橙色的重倍酸钾溶液，在酸性条件下与乙醇（酒精）发生化学反应，在酸性条件下，变成灰

绿色。

实验步骤：

提出问题T作出假设T设计实验一（包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设

计实验记录表格）一实施实验一分析与结论一表达与交流。

1）.酵母菌培养液的配制

取20g新鲜的食用酵母菌，分成两等份，分别放入锥形瓶A（500mL）和锥形瓶B（500mL）

中，再分别向瓶中注入240mL质量分数为5%的葡萄糖溶液

2）.检测CO2的产生

用锥形瓶和其他材料用具组装好实验装置（如图），并连通橡皮球（或气泵），让空气间断而

持续地依次通过3个锥形瓶（约50min）。然后将实验装置放到25-350C的环境中培养8-10h»

3）.检测洒精的产生

各取2mL酵母菌培养液的滤液，分别注入2支干净的试管中。向试管中分别滴加0.5mL

溶有0.1g重铭酸钾的浓硫酸溶液（体积分数为95%-97%）并轻轻振荡，使它们混合均匀，

观察试管中溶液的颜色变化。

1.10观察细胞的有丝分裂

实验目的：

制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片。

观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期，比较细胞周期不同时期的时间长

短。

绘制植物细胞有丝分裂简图。

实验原理：

在高等植物体内，有丝分裂常见于根尖、芽尖等分生区细胞。由于各个细胞的分裂是独立进

行的，因此在同一分生组织中可以看到处于不同分裂时期的细胞。

染色体容易被碱性染料（如龙胆紫溶液）着色，通过在高倍显微镜下观察各个时期细胞内染

色体（或染色质）的存在状态，就可判断这些细胞处于有丝分裂的哪个时期，进而认识有丝

分裂的完整过程。

实验材料：

洋葱（可用葱、蒜代替）。因为根尖生长点属于分生组织，细胞分裂能力强，易观察到有丝

分裂各个时期的细胞。

实验步骤：

步骤注意问题分析

一、根尖的培养

实验前3~4天，让洋葱放在广口瓶上，置于温暖处，常换因为细胞分裂和生长需要水

底部接触清水。根长约5cm时可用。水。分、适宜的温度和氧气。

二、装片的制作

（解离-漂洗-染色一制片）解离时间要保证，细目的：溶解细胞间质，使组

1.解离：上午10时至下午2时，剪取胞才能分散开来。织中的细胞相互分离开来。

洋葱根尖2~3mm,立即放入盛有质量分此时，细胞已被盐酸杀死。

数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒解离时间也不宜过否则，根尖过于酥软，无法

精溶液的混合液（1：1）的玻璃皿中，长。取出。

室温下解离3~5min。

2.漂洗：待根尖酥软后，用镜子取出，漂洗要充分，可换水目的：洗去解离液，便于染

放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约101~2次。色。

min。

3.染色：把洋葱根尖放进盛有质量浓度染色时间不宜过长，龙胆紫等为碱性染料，可使

为0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫溶否则显微镜下一片染色体着色。

液的玻璃皿中染色3~5min。紫色，无法观察。醋酸洋红溶液也能使染色体

着色

4.制片：用镶子将这段洋葱根尖取出来，要弄碎根尖，再垂直目的：使细胞分散，避免细

放在载玻片上，加一滴清水，并用镜子向下均匀用力压片，胞重叠，便于观察。做得成

尖把洋葱根尖弄碎，盖上盖玻片，在盖不可移动盖玻片，功的装片，标本被压成云雾

玻片上再加一片载玻片。然后，用拇指状。

轻轻地压载玻片，使细胞分散开来。

三、观察

1.低倍镜观察：把装片放在低倍镜一定要找到分生区。分生区细胞特点是：细胞呈

下，慢慢移动装片，找到分生区细胞。正方形，排列紧密，有的细

胞正处于分裂期。

2.高倍镜观察：移走低倍镜，换上高倍在一个视野里，往往

镜，用细准焦螺旋和反光镜把视野调整不容易找全有丝分

清晰，仔细观察，找出处于细胞分裂期裂过程中各个时期

中期的细胞，再找出前期、后期、末期的细胞。如果是这

的细胞。样，可以慢慢地移动

装片，从邻近的分生

区细胞中寻找。

讨论：

制作好洋葱根尖有丝分裂装片的关键是什么？

(1)剪取洋葱根尖材料时，应该在洋葱根尖细胞一天之中分裂最活跃的时间；

(2)解离时，要将根尖细胞杀死，细胞间质被溶解，使细胞容易分离；

(3)压片时:用力的大小要适当，要使根尖被压平，细胞分散开。

1.11模拟探究细胞表面积与体积的关系

实验目的：

通过探究细胞大小，即细胞的表面积与体积，与物质运输效率之间的关系，探讨细胞不能无

限长大的原因。

实验原理：

用琼脂块模拟细胞。琼脂块越小，其表面积越大，则其与外界效换物质的表面积越大，经交

换进来的物质在琼脂块中扩散的速度快；琼脂块中含有酚献，与NaOH相遇，呈紫红色，

可显示物质(NaOH)在琼脂块中的扩散速度。

实验步骤：

操作方法注意问题解释

用塑料餐刀将含酚麟的琼脂块切成三块边长分别为

3cm、2cm、1cm的正方体

将3块琼脂块放在烧杯内，加入NaOH溶液，将琼不要用勺子将琼脂块避免干扰实

脂块淹没，浸泡10min»用塑料勺不时翻动琼脂块。切开或挖动其表面验结果

戴上手套，用塑料勺将琼脂块从NaOH溶液中取出。应避免NaOH与皮肤NaOH有腐蚀

用纸巾把它们吸干，用塑料刀把琼脂块切成两半。和眼睛等接触。如泼性

仔细观察切面的颜色变化，变成红色的部分代表洒出来，应立即用水

NaOH扩散的深度，测量每一块上NaOH扩散后着冲洗泼洒处。

色的浓度。记录测量结果每两次操作之间必须避免干扰实

把刀擦干验结果

根据测量结果进行计算，并将结果填在记录表中

结论：

琼脂块的表面积与体积之比随着琼脂块的增大而减小；NaOH扩散的体积与整个琼脂块的体

积之比随着琼脂块的增大而减小。

课后讨论题答案：

1).当NaOH与含酚猷;的琼脂块相遇时，其中的酚酬变成紫红色，这是常用的检测NaOH

的方法，从琼脂块的颜色变化就知道NaOH扩散到多远；在相同时间内，NaOH在每一琼脂

块内扩散的深度基本相同，说明NaOH在每一琼脂块内扩散的速率是相同的。

2).根据球体的体积公式V=4/37rr3,表面积公式S=4兀r2,计算结果如下表。

细胞直径表面积体积

比值(表面积/体积)

(gm)(pm2)()xm3)

2()125641870.30

302826141300.20

3).细胞越大，物质运输的效率越低，所以多细胞生物体是由许多细胞而不是由少数体积更

大的细胞构成的。细胞越大，需要与外界环境交流的物质越多；但是细胞体积越大，其表面

积相对越小，细胞与周围环境之间物质交流的面积相对小了，所以物质运输的效率越低。

1.12观察细胞的减数分裂

实验目的：

通过观察蝗虫精母细细胞减数分裂固定装片，识别减数分裂不同的阶段染色体的形态、位置

和数目，加深对减数分裂过程的理解。

实验原理：

蝗虫的精母细胞进行减数分裂形成精细胞，再形成精子。此过程要经过两次连续的细胞分裂:

减数第一次分裂和减数第二次分裂。在此过程中，细胞中的染色体形态、位置和数目都在不

断地发生变化，因而可据此识别减数分裂的各个时期。

实验步骤：

课后讨论题：

1).减数第一次分裂会出现同源染色体联会、四分体形成、同源染色体在赤道板位置成对排

列、同源染色体分离、移向细胞两极的染色体分别由两条染色单体组成等现象。

减数第二次分裂的中期，非同源染色体成单排列在细胞赤道板位置，移向细胞两极的染色体

不含染色单体。

2).减数第一次分裂的中期，两条同源染色体分别排列在细胞赤道板的两侧，末期在细胞两

极的染色体由该细胞一整套非同源染色体组成，其数目是体细胞染色体数的一半，每条染色

体均由两条染色单体构成。

减数第二次分裂的中期，所有染色体的着丝点排列在细胞的赤道板的位置。末期细胞两极的

染色体不含染色单体。

3).同一生物的细胞，所含遗传物质相同；增殖的过程相同；不同细胞可能处于细胞周期的

不同阶段。因此，可以通过观察多个精原细胞的减数分裂，推测出一个精原细胞减数分裂过

程中染色体的连续变化。

1.13低温诱导染色体加倍

实验目的：

学习低温诱导植物染色体数目变化的方法。

理解低温诱导植物细胞染色体数目变化的作用机制。

实验原理：

进行正常有丝分裂的植物分生组织细胞，在有丝分裂后期，染色体的着丝点分裂，子染色体

在纺维丝的作用下分别移向两极，最终被平均分配到两个子细胞中去。

用低温处理植物组织细胞，使纺维体的形成受到抑制，以致影响染色体被拉向两极，细胞也

不能分裂成两个子细胞，于是，植物细胞染色体数目发生变化。

实验步骤：

低温_____＞培养洋葱根。待洋葱根长出1cm左右时，将整个装置

诱导放入冰箱的低温室内(4℃).诱导培养36h

剪取诱导处理的根尖约0.5-lcm,放入卡诺氏液中浸

固定

泡0.5-lh,以固定形态，然后用体积分数为95%的酒

精冲冼2次

制作_____＞解离一漂洗一染色一制片

装片

观察-----►用显微镜观察，并寻找发生了染色体数目变化的细胞

课后讨论题答案：

两者都是通过抑制分裂细胞内纺锤体的形成，使染色体不能移向细胞两极，而引起细胞内染

色体数目加倍。

1.14探究植物生长调节剂对杆插枝条生根的作用

实验目的：

了解植物生长调节剂的作用。

进一步培养进行实验设计的能力

实验原理：

植物插条经植物生长调节剂处理后，对植物插条的生根情况有很大的影响，而且用不同浓度、

不同时间处理其影响程度亦不同。其影响存在一个最适浓度，在此浓度下植物插条的生根数

量最多，生长最快。

实验步骤：

1).选择生长素类似物：2,4-D或a-蔡乙酸(NAA)等。

2）.配制生长素类似物母液：5mg/mL（用蒸储水配制，加少许无水乙醇以促进溶解）。

3）.设置生长素类似物的浓度梯度：用容量瓶将母液分别配成0.2、0.4、0.6、0.8、1、

2、3、4）.5mg/mL的溶液，分别放入小磨口瓶，及时贴上相应标签。NAA有毒，配制时

最好戴手套和口罩。

剩余的母液应放在4℃保存，如果瓶底部长有绿色毛状物，则不能继续使用。

5）.选择插条：以1年生苗木为最好（1年或2年生枝条形成层细胞分裂能力强、发育快、

易成活）实验表明，插条部位以种条中部剪取的插穗为最好，基部较差，梢部插穗仍可利用。

实验室用插穗长5〜7cm,直径1~1.5cm为宜。

6）.处理插条：枝条的形态学上端为平面，下端要削成斜面，这样在托插后可增加吸收塔水

分的面积，促进成活。每一枝条留3-4个芽，所选枝条的芽数尽量一样多。

处理方法：

浸泡法：把插条的基部浸泡在配制好的溶液中，深约3cm,处理几小时至一天。（要求的溶

液浓度较低，并且最好是在遮阴和空气湿度较高的地方进行处理）

沾蘸法：把插条基部在浓度较高的药液中蘸一下（约5s）,深约1.5cm即可。

7）.探究活动：

提出问题一作出假设t设计实验t（包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设

计实验记录表格）一实施实验一分析与结论一表达与交流。

1.15探究培养液中酵母菌数量的动态变化

实验目的：

通过探究培养液中酵母菌种群数量的变化，尝试建构种群增长的数学模型。

用数学模型解释种群数量的变化。

学会使用血球计数板进行计数。

实验原理：

在含糖的液体培养基（培养液）中醵母菌繁殖很快,迅速形成一个封闭容器内的酹母菌种群，

通过细胞计数可以测定封闭容器内的酵母菌种群随时间而发生的数量变化。

养分、空间、温度和有毒排泄物等是影响种群数量持续增长的限制因素。

实验步骤：

提出问题一作出假设一讨论探究思路-制定计划-实施计划-按计划中确定的工作流程

认真操作，做好实验记录一分析结果得出结论一将记录的数据用曲线图表示出来。

注意：

1）、提出的问题可以是：培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？也可以提出其他

的探究问题，例如，在不同温度（以及通氧、通CO2等）条件下酵母菌种群数量增长的情

况如何？不同培养液（如加糖和不加糖）中酵母菌种群数量增长的情况如何？等等。

2）、本实验时间较长（7天），因此事前一定要做好周密的计划，定程序、定时间、定人员。

3）、酵母菌计数方法：抽样检测法。

先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入。

多余培养液用滤纸吸去。稍待片刻，待细菌细胞全部沉降到计数室底部，将计数板放在载物

台的中央，计数一个小方格内的酵母菌数量，再以此为根据，估算试管中的酵母菌总数。

4）、从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震荡几次。

1.16土壤中动物类群丰富度的研究

实验目的:

初步学会动物类群丰富度的统计方法。

能对土壤中部分常见的动物进行分类。

学会设计表格进行观察和统计。

实验原理：

土壤不仅为植物提供水分和矿质元素，也是一些动物的良好栖息场所。研究土壤中动物类群

的丰富度，操作简便，有助于理解群落的基本特征与结构。

实验步骤：

1.提出问题：如土壤中有哪些小动物？它们的种群密度是多少？

2.制定计划。

3.实施计划

本研究包括三个操作环节：取样、观察和分类、统计和分析。

1）准备：

2）取样：

取样可以在野外用取样器取样的方法进行采集、调查，即：用一定规格的捕捉器（如采集缺

罐、吸虫器等进行取样），（不适于用样方法或标志重捕法）在实验室进行观察。

3）采集小动物：使用诱虫器取样，比较方便，且效果较好，但时间可能要长一些。也可采

用简易采集法：将采集到的土壤放在瓷盆内，用放大镜观察，同时用解剖针寻找。发现体形

较大的动物，可用包着纱布的镜子取出；体形较小的动物可用吸虫管采集。采集到的小动物

可放入酒精中，也可将活着的小动物放入试管中。

4）观察和分类：“观察和分类”需要借助动物分类的专业知识。

5）统计和分析：“统计和分析“，要求设计一个数据收集和统计表，并据此进行数据分析。

丰富度的统计方法：记名计算法和目测估计法。

记名计算法是指在一定面积的样地中，直接数出各种群的个体数目，这一般用于个体较大，

种群数量有限的群落。

目测估计法是按预先确定的多度等级来估计单位面积上个体数量的多少。等级的划分和表示

方法有：“非常多、多、较多、较少、少、很少”等等。

课后讨论：

如果要调查水中小动物类群的丰富度，应如何对研究方法进行改进？

答:主要是取样和采集方式要进行改进。根据调查水中小动物种类的不同，取样设备也不同，

例如用网兜、瓶子等。取样和采集时要考虑定点、定量等因素。定点就是要选取有代表性的

地点取样；定量就是每次取样的数量（例如一瓶、一网等）要相同。

探究水族箱（或鱼缸）中群落的演替

实验目的：

设计一个生态缸，观察这一人工生态系统中群落的演替情况。

实验原理：

在有限的空间内，依据生态系统原理，将生态系统具有的基本成分进行组织，构建一个

人工微生态系统是可能的。但同时，这个人工生态系统的稳定性是有条件的，也可能是短暂

的，它会发生群落的演替。

实验步骤：

按100cmx70cmx50cm的标准制作生态缸框架。

在生态缸内底部铺垫沙土和花土，花土在下，一边高，一边低；沙土城上，沙土层厚

5-10cmo在缸内低处倒进水。将收集或购买的动物和植物放在生态缸中，其中浮萍、水草

与小乌龟放在水中，仙人掌或仙人球移植到沙土上，蕨类植物和杂草移植到花土上，蚯蚓与

蜗牛也放置在花土上。

封上生态缸盖。将生态缸放置于室内通风、光线良好的地方，但要避免阳光直接照射。

每一天观察一次生态缸内生物种类与数量变化，并且进行记录，连续观察一星期。

可将观察结果记录于下表。

2.选修实验

2.1DNA的粗提取与鉴定

实验原理

提取方法：提取生物大分子的基本思路是选用一定的物

理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。

对于DNA粗提，就是利用DNA和RNA,蛋白质和脂质在物

理、化学性质方面的差异，提取DNA,去除其他成分。

DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度

的NaCI溶液中的溶解度不同，选择适当的盐浓度就能使DNA

充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离的目的。DNA不溶于酒精，但是细胞中

某些蛋白则溶于酒精。

DNA对前、高温和洗涤剂的耐受性：蛋白酶能水解蛋白质但对DNA没有影响。洗涤

剂能瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。

DNA鉴定：沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

实验步骤：

①实验材料选取。凡是含有DNA的生物材料都可以考虑，优先选择DNA含量相对较

高并且容易获得、容易操作的生物组织，如鸡血，菜花等。

②破碎细胞，获取含DNA的溶液。在鸡血细胞液中加入一定量的蒸储水，同时用玻璃

棒搅拌，过滤后收集滤液。如果是植物细胞，需要先用洗涤剂溶解细胞膜。

③去除滤液中的杂质。加入NaCI使其浓度为2moi/L—过滤除杂一调节NaCI浓度到

0.14mol/L,析出DNA一过滤留沉淀（DNA）一用2moi/LNaCI溶解DNA。

④DNA的析出。加入与DNA溶液体积相等的冷却的体积分数95%的酒精溶液，静置

2-3min,溶液中出现的白色丝状物就是粗提的DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状

物，用滤纸吸去上面的水分。

⑤DNA的鉴定：取2支20mL试管，各加入2mol/L的NaCI溶液5mL->DNA溶于一支试管

中一向两支试管中加入4mL二苯胺试剂，混匀一沸水浴加热5minT冷却后对比颜色变化。

【课堂练习】

1.（通州一模）下列分离鉴定实验中，一般需要使用显微镜进行观察的是

A.绿叶中色素的提取和分离B.花生子叶中脂肪的鉴定

C.菜花中DNA的提取和鉴定D.生豆浆中蛋白质的鉴