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文档简介

高中生物实验DNA的粗提取与鉴定

高中生物学习中掌握重点实验是生物学习方法中最有效的

一种，生物实验掌握之后在学习起来会变的轻松很多，下面

是整理的高中生物实验之DNA的粗提取与鉴定，希望对高中

生的生物学习有帮助。

高中生物实验：DNA的粗提取与鉴定

DNA的粗提取与鉴定知识

1.DNA的粗提取与鉴定实验原理

⑴粗提取原理：在NaCI溶液浓度低于O.14mol/L时，DNA的

溶解度随NaCI溶液浓度的增加而降低;在0.14mol/L时，DNA

的溶解度最小;当NaCI溶液浓度继续增加时，DNA溶解度又

增大。

(2)纯化原理：DNA不溶于酒精，但细胞中的某些蛋白质溶于

酒精。

⑶鉴定DNA原理：在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染

成蓝色。

2.实验材料的选择及处理

⑴不选择猪血等哺乳动物的血液，因为哺乳动物成熟的红细

胞无细胞核。

(2)需要在鸡血中加入抗凝剂一一柠檬酸钠溶液，防止血液凝

固。

⑶需除去鸡血中的血浆，因为血浆中无DNA。

特别提醒：不同生物的组织中DNA含量不同在选取材料时,

应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。

3.生物实验过程

步骤:提取细胞核物质f溶解核内DNAf析出DNA粘稠物f

滤取含DNA的粘稠物fDNA粘稠物的再溶解f过滤含有

DNA的氯化钠溶液f提取含杂质较少的DNAfDNA的鉴定。

操作要点：(1)2次加蒸储水：第一次是在是为了使血细胞吸

水膨胀破裂，加水后必须充分搅拌使血细胞充分破裂;第二次

加蒸储水是为了稀释氯化钠溶液。

(2)3次加氯化钠溶液：第一次加氯化钠后，必须充分晃动烧

杯，使二者混合均匀，加速染色质中DNA与蛋白质分离，使

DNA充分游离并溶解在氯化钠溶液中;第二次加氯化钠溶液

也是为了DNA的再溶解，这时溶液中的蛋白质含量已很少;

第三次加氯化钠溶液还是为溶解DNAO

(3)6次搅拌：除最后一次搅拌外前5次搅拌均朝一个方向:,

并且在析出DNA、DNA再溶解和提取中，各步搅拌都要轻缓

玻璃棒，不要直插烧杯底部防止DNA分子断裂。

(4)3次过滤：第一次过滤，留滤液;第二次过滤，留粘稠物;

第三次过滤，留滤液。注意这3次过滤都用纱布，获得沉淀

物或粘稠物的通常为多层，获得滤液的纱布层数适当减少。

特别提醒：若以植物为实验材料，步骤上大致相同，在材料

的处理上有几点不同：一是增加研磨步骤，目的是破坏细胞

壁;二是加入洗涤剂，目的是溶解细胞膜及核膜;三是加食盐,

可加速细胞膜及核膜的破裂。

4.DNA的粗提取与鉴定实验注意事项

⑴用冷酒精浓缩和沉淀DNA时所用的95%酒精,必须经过充

分预冷后才能使用，冷酒精与含DNA的氯化钠溶液体积比

是2：1。如果用冷酒精处理后，悬浮于溶液中的丝状物较

少，可将混合液放于冰箱中再冷却几分钟，然后再用玻璃棒

卷起丝状物。

(2)鸡血细胞破碎以后释放的DNA,容易被玻璃容器吸附，由

于细胞内DNA的含量本来就比较少，再被玻璃容器吸附去一

部分，提取到

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