临床检验中心PCR实验室标准操作程序

****医院

临床检验中心

临床基因扩增实验室

管理程序

标准操作程序（SOP）

起草人：

批准人：

生效日期：年月H

目录

临床基因扩增实验室的设置..............................................4

临床基因扩增实验室内部管理规章.......................................12

临床基因扩增实验室人员管理、配置及培训...............................16

临床基因扩增实验室的设施和环境.......................................19

临床基因扩增实验室清洁制度规章.......................................20

临床基因扩增实验室仪器设备管理规章...................................22

Roche480II实时荧光定量PCR仪操作规程、维护方法、校准(S0P-1)未修改27

Finnpipette可调式移液器的使用与维护标准操作(SOP-2)........................................36

Finnpipette可调式移液器校准标准管理程序(SOP-3)..................................................40

温度计及湿温度计的校正标准管理程序(SOP-4)........................................................41

离心机使用与维护标准操作程序(SOP-5)....................................................................42

超净工作台使用与维护标准操作程序(SOP-6)............................................................46

恒温水浴箱使用、维护与校正(SOP-7)...................................................................47

旋涡振荡器使用与维护标准操作程序(SOP-8).....................................................50

冰箱的使用与维护标准操作程序(SOP-9).............................................................51

可移动紫外灯标准操作程序(SOP-10)....................................................................53

仪器故障时标记、放置标准操作程序(SOP-11)....................................................54

仪器设备发生故障时的应急处理程序(SOP-12)....................................................55

临床标本的收集管理标准操作程序(SOP-13)........................................................58

检验标本的验收和保存标准操作程序(SOP-14)....................................................59

样本编号的标准操作程序(SOP-15).............................................................................64

PCR标本管理标准操作程序(SOP-16)...................................................................66

标本前处理标准操作程序(S0P-17)........................................................................68

核酸扩增及产物分析检测标准操作程序(S0P-18)................................................69

乙型肝炎病毒基因扩增检测标准操作程序(S0P-19).............................................71

基因扩增检测实验结果分析标准操作程序(SOP-20).................................................76

实验结果有效性判断标准操作程序(S0P-21)........................................................79

室内质量控制标准操作程序(SOP-22).........................................................................80

实验室试剂耗材购买、验收和贮存的标准操作程序(SOP-23)............................86

试剂质检标准操作程序(SOP-24)..............................................................................92

实验室耗材质检标准操作程序(SOP-25)..................................................................95

手套使用及左右手分开的原则(SOP-26)..................................................................98

实验室化学试剂贮存使用、废弃物处理及生物防护(SOP-27)..............................99

抱怨的处理程序(SOP-28)........................................................................................102

实验室记录管理规章标准操作程序(SOP-29)........................................................106

检验报告单管理标准操作程序(SOP-30)................................................................109

实验室台面摆放顺序程序(SOP-31)........................................................................113

实验室常用溶液配置标准操作程序(SOP-32)........................................................114

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临床基因扩增实验室设置标准操作程序笫4页共114页

临床基因扩增实验室的设置

1目的：依照实验室设置规范实现核酸扩增荧光检测实验室配置合理，以保证

实验工作健康有序及实验结果的可靠性

2范围：临床基因扩增实验室及相关工作人员，并明确各项规章制度

3操作人：****

4实验室设置规章：

4.1依据:

本实验室按《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》（卫医发[2002]10

号）中临床基因扩增检验实验室基本设置标准结合本实验室的条件进行设

置，并严格按照《临床基因扩增检验实验室工作规范》（卫检字2002第8

号）的要求开展临床基因扩增工作（拟开展基因扩增检验项目见附表1）

4.2实验室设置：

4.2.1实验室主要由试剂储存和准备区（PCR-I）、标本制备区（PCRTI）、PCR

扩增及产物分析区（PCRTH）三个工作室组成。这三区各自独立，每个区设有

缓冲间。其布局见实验室平面图（见附图1）。

4.2.2设立各区的门牌，分别是：“试剂储存和准备区（PCR-I）”、“标本制备

区（PCR-H）”、“PCR扩增及产物分析区（PCRTII）”,并在各区门上贴有“非

本室工作人员不得进入”标记。

4.2.3建立实验室内务管理，并放在进入实验室的明显位置（如置于缓冲区的

墙上；内务管理应有进入实验的工作流程、进入实验室的要求、实验前的准

备及清洁等）。

4.2.4三个工作区各配备专用的设备、仪器、辅助设施、耗材、清洁用品、办

公用品、专用工作服，并有明显的区分标识：试剂准备区一蓝色，标本制备

区一紫色，PCR扩增及产物分析区一黑色。各区的实验物品不得混用（实验

室主要设备一览表见表3）。

4.2.5进入各区的工作流程为：试剂储存和准备区一标本制备区一PCR扩增及产

物分析区。

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4.2.6进入实验室必须更换有本室标识的工作服及清洁鞋套，工作人员离开某

一工作区时，该区物品不得带出本区（包括工作服等）。

4.3各区实验设备及用品配置：

4.3.1试剂储存和准备区：

冰箱（2〜8c和T5C）、可调式移液器（覆盖0.5〜lOOOul）、紫外消毒

车、固定紫外线灯，混匀器，专用工作服，一次性用品（手套、带滤心的吸

头、鞋套、吸水纸、耐高压处理的离心管），专用实验记录本及记号笔等。

4.3.2标本制备区：

冰箱（2〜8℃和-15℃）、台式高速离心机、水浴锅、净化工作台、混匀

器、可调式移液器（覆盖1〜lOOOul）、紫外消毒车、固定紫外线灯，专用工

作服，一次性用品（手套、带滤心的吸头、鞋套、吸水纸、耐高压处理的离

心管），专用实验记录本及记号笔等。

4.3.3PCR扩增及产物分析区：

Line-Gene全自动荧光定量PCR核酸扩增仪、紫外消毒车、固定紫外线

灯，专用工作服，一次性用品（手套、鞋套、吸水纸等），专用实验记录本及

记号笔等。

4.4实验室人员设置：

实验室人员配置：我院PCR实验室配备有3名工作人员，其中1人具检

验师职称，2人具主管检验师职称。已全部经过安徽省临床检验中心培训，

并取得培训合格证（实验室工作人员一览表见表2）。

起草人批准人生效日期

年月日

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附表1拟开展临床基因扩增检验项目一览表

项目方法备注

HBVDNAPCR荧光实时扩增Line-Gene扩增仪

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表2临床基因扩增检验实验室工作人员一览表

一

备

年

学

性

序所学毕业从事本培训合

注

龄

历

别

号姓名职务职称

专业时间

」E专业时间格证号

1XXX//OC主管检验82.7422002000**

中

2XXX〃OO主管检验81.7442003000**

专

中

3XXX〃专S检验师检验95.7312003000**

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表3临床基因扩增检验实验室仪器设备一览表

接

放

接

受

置

收

仪器备

序人

注

地

设备生产厂家仪器型号仪器序号接收日期状启用日期

号签

点

名称态

字

试

剂

紫外

江阴市光全

消

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线

新

1一电仪器有ZXC类型2003-4-18

毒IB2002-5-9

备

车

限公司区

试

剂

美菱

XX美菱全

冰

准

电

股份有限新

2箱BCD-109624172003-4-192003-4-19

备

公司区

试

剂

可

调

上海雷勃全

准

式

移

3分析仪器4500120Y55777新2003-5-9

2003-4-19备

液E

有限公司区

试

剂

调

可

上海雷勃全

移

准

式

分析仪器4500020Y500412003-4-19新2003-5-9

备

4液

器

有限公司区

试

剂

可调

上海雷勃全

准

式

移

5分析仪器4500100Y458492003-4-19新2003-5-9

备

液

器

，

有限公司区

试

剂

调

可

上海雷勃全

准

移

式

6分析仪器4500090Y567342003-4-19新2003-5-9

器

备

拗

有限公司区

试

剂

湘仪天平调准

7TG3282003-5-82003-5-8

仪器厂拨备

天平区

样

菌

无

本

化

净浙江大学

全准

作

8工净化设备GEM-SHGEM-SH-012003-4-162003-5-9

备

台新

r区

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接

放

接

受

收

仪器置

序人备

状

设备生产厂家仪器型号仪器序号接收日期启用日期地

签

号态注

点

名称字

样

本

紫外江阴市光

消

准

线电仪器有全

9一ZXCI类B型2003-4-182003-5-9

毒

备

车限公司械新

厂区

样

本

高

速上海安亭

心

准

离全

10科学仪器TGL-16B172003-3-12003-3-19

机

新备

)'

区

样

本

美菱

XX美菱

冰

准

电全

股份有限BCD-109624222003-4-192003-4-19

11箱

新备

公司区

样

用

三

本

热

电

上海跃进

温

准

恒全

12010062003-3-30

浴医疗器械S.HH.W21.4202003-2-15

备

水新

区

箱厂

样

本

微型

上海医科全

匀

准

混

13大学仪器XW-80AQ/DAALC2-20002003-2-15新2003-3-30

器

备

「区

样

本

可调

上海雷勃全

准

移

式

新

14引分析仪器4500020Y500402003-4-192003-5-9

备

液

菩

有限公司区

样

本

调

可上海雷勃

移

准

式全

15分析仪器4500100Y458502003-4-192003-5-9

备

利新

有限公司区

样

本

可调

上海雷勃全

准

移

式

16分析仪器45000902003-4-19新2003-5-9

生Y56733

备

液

器

有限公司区

样

本

可

调

上海雷勃全

准

式

移

17分析仪器4500050F599682003-4-19新2003-5-9

备

液

暑,

有限公司区

Line-杭州lbhe全PCR

扩

新

18GeneThermo-FGD-33ABYQ6079-2442003-4-162003-5-9增

扩增Magnetic

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接

放

接

受

收

仪器