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专题20现代生物科技专题

1.(202L6浙江月选考)采用CRISPR/Cas9基因编辑技术可将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)

基因定点插入到受精卵的Y染色体上,获得转基因雄性小鼠。该转基因小鼠与野生型雌性小

鼠交配,通过观察荧光可确定早期胚胎的性别。下列操作错误的是()

A.基因编辑处理的受精卵在体外培养时,不同发育阶段的胚胎需用不同成分的培养液

B.基因编辑处理的受精卵经体外培养至2细胞期,须将其植入同期发情小鼠的子官,才可获

得表达EGFP的小鼠

C.分离能表达EGFP的胚胎干细胞,通过核移植等技术可获得大量的转基因小鼠

D.通过观察早期胚胎的荧光,能表达EGFP的即为雄性小鼠胚胎

【答案】B

【解析】B受精卵经体外培养至囊胚期,须将其植入同期发情小鼠的子官

2.(202L1月浙江选考)下图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是()

①切取组织②制备细胞悬浮液③原代培养④传代培养

A.步骤①的操作不需要在无菌环境中进行

B.步骤②中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离

C.步骤③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶处理

D.步骤④培养过程中不会发生细胞转化

【答案】C

【分析】

动物细胞培养过程:取动物组织块分剪碎组织少用胰蛋白酶处理分散成单个细胞玲制成细胞

悬液好转入培养液中(原代培养)垃放入二氧化碳培养箱培养好贴满瓶壁的细胞用能分散为

单个细胞,制成细胞悬液)转入培养液(传代培养))放入二氧化碳培养箱培养。

【详解】

A、动物细胞培养过程需要无菌操作,故步骤①的操作需要在无菌环境中进行,A错误;

B、动物细胞培养过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织,分散成单个细胞,制成

细胞悬液,B错误;

C、传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞,使之分散成单个细胞,再分瓶培养,

C正确;

D、步骤④为传代培养过程,该过程中部分细胞可能发生细胞转化,核型改变,D错误。

故选Co

3.(2021•湖南高考真题)M基因编码的M蛋白在动物A的肝细胞中特异性表达。现设计

实验,将外源DNA片段F插入M基因的特定位置,再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等

技术获得M基因失活的转基因克隆动物A,流程如图所示。回答下列问题:

成纤维细胞去核卵母细胞

\胚胎培养

早期胚胎

[胚胎移植

代孕母亲

克隆动物A

(1)在构建含有片段F的重组质粒过程中,切割质粒DNA的工具酶是,这类酶

能将特定部位的两个核甘酸之间的断开。

(2)在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的原代和传代培养时,需要定期更

换培养液,目的是

(3)与胚胎细胞核移植技术相比,体细胞核移植技术的成功率更低,原因是。从

早期胚胎中分离获得的胚胎干细胞,在形态上表现为(答出两点即可),功能上具

有。

(4)鉴定转基因动物:以免疫小鼠的淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合,筛选融合

杂种细胞,制备M蛋白的单克隆抗体。简要写出利用此抗体确定克隆动物A中M基因是否

失活的实验思路。

【答案】(1)限制性核酸内切酶(限制酶)磷酸二酯键

(2)清除代谢产物,防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害

(3)动物胚胎细胞分化程度低,恢复其全能性相对容易,动物体细胞分化程度高,恢复其

全能性十分困难细胞体积小,细胞核大,核仁明显(任选两点作答)发育的全能性

(4)B用特定抗原刺激小鼠,然后取出已免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,看筛

选出杂交瘤细胞能否产生M蛋白的单克隆抗体,如果不能产生,说明M基因在克隆动物A

中已失活

【分析】

1、基因工程技术的基本步骤:

(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成;

(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、

终止子和标记基因等;

(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导

入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最

有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法;

(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插

入目的基因-DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术;③

检测目的基因是否翻译成蛋白质-抗原-抗体杂交技术,个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病

鉴定、活性鉴定等。

2、核移植:

(1)概念:将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组

并发育成•个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称

为克隆动物;

(2)原理:动物细胞核的全能性;

(3)动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。体细胞核移植的难度明显高

于胚胎细胞核移植。原因:动物胚胎细胞分化程度低,恢复其全能性相对容易,动物体细胞

分化程度高,恢复其全能性十分困难。

【详解】

(1)基因工程中切割DNA的工具酶是限制性核酸内切酶(限制酶),故在构建含有片段F

的重组质粒过程中,切割质粒DNA的工具酶是限制性核酸内切酶(限制酶)。限制性内切核

酸内切酶是作用于其所识别序列中两个脱氧核甘酸之间的磷酸二酯键。不同的限制酶可以获

得不同的末端,主要分为黏性末端和平末端。

(2)在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的原代和传代培养时,需要定期更

换培养液,目的是清除代谢产物,防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。

(3)由于动物胚胎细胞分化程度低,恢复其全能性相对容易,动物体细胞分化程度高,恢

复其全能性十分困难,故与胚胎细胞核移植技术相比,体细胞核移植技术的成功率低。胚胎

干细胞在形态上表现为细胞体积小,细胞核大,核仁明显;在功能上具有发育的全能性,可

分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外,在体外培养的条件下,可以增殖而不发生分

化,可进行冷冻保存,也可进行遗传改造。

(4)先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应,之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴

细胞;诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合,利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞,制备M蛋白的

单克隆抗体:若要利用此抗体确定克隆动物A中M基因是否失活,如果M基因已经失活,

则克隆动物A中无法产生M蛋白的单克隆抗体,则可利用抗原一抗体杂交技术进行检测。

用特定抗原刺激小鼠,然后取出已免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,看筛选出杂交瘤细

胞能否产生M蛋白的单克隆抗体,如果不能产生,说明M基因在克隆动物A中己失活。

【点睛】

本题结合图示考查基因工程、核移植、胚胎移植、单克隆抗体的相关知识,涉及知识点较多,

但难度不大,要求考生掌握基础知识,属于考纲中识记与理解层次。

4.(2021•全国乙卷高考真题)用DNA重组技术可以赋予生物以新的遗传特性,创造出更符

合人类需要的生物产品。在此过程中需要使用多种工具酶,其中4种限制性核酸内切酶的切

割位点如图所示.

IIII

GAATTCCCCGGGCTGCAGGATATC

CTTAAGGGGCCCGACGTCCTATAG

tttt

限制酶:EcoRISmalPstIEcoRV

回答下列问题:

(1)常用的DNA连接酶有E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。上图中酶切割后

的DNA片段可以用f.CO//DNA连接醐连接。上图中酶切割后的DNA片段可以

用T4DNA连接酶连接。

(2)DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是。

(3)DNA重组技术中所用的质粒载体具有一些特征,如质粒DNA分子上有复制原点,可以

保证质粒在受体细胞中能;质粒DNA分子上有,便于外源DNA

插入;质粒DNA分子上有标记基因(如某种抗生素抗性基因),利用抗生素可筛选出含质粒

载体的宿主细胞,方法是。

(4)表达载体含有启动子,启动子是指。

【答案】(1)EcoRkPstlEcoRKPstl、Smal和EcoRV

(2)磷酸二酯键

(3)自我复制一至多个限制酶切位点用含有该抗生素的培养基培养宿主细胞,能

够存活的即为含有质粒载体的宿主细胞

(4)位于基因首端的一段特殊DNA序列,是RNA聚合酶识别及结合的部位,能驱动转录

过程

【分析】

基因工程至少需要三种工具:限制性核酸内切酶(限制酶)、DNA连接酶、运载体。

【详解】

(1)限制酶EcoRI和Pstl切割形成的是黏性末端,限制酶Smal和EcoRV切割形成的是平末

端,E.coliDNA连接酶来源于大肠杆菌,只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二

酯键连接起来,而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体,可用于连接黏性末端和平末端,但连接

效率较低。因此图中EcoRI和Pstl切割后的DNA片段(黏性末端)可以用E.coliDNA连接酶

连接,除了这两种限制醐切割的DNA片段,限制醐Smal和EcoRV切割后的DNA片段(平

末端)也可以用T4DNA连接酶连接。

(2)DNA连接酶将两个DNA片段连接形成磷酸二酯键。

(3)质粒是小型环状的DNA分子,常作为基因表达的载体,首先质粒上含有复制原点,能

保证质粒在受体细胞中自我复制。质粒DNA分子上有一个至多个限制性核酸内切酶的酶切

位点,便于目的基因的导入。质粒上的标记基因是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,

具体做法是川含有该抗生素的培养基培养宿主细胞,能够存活的即为含有质粒载体的宿主细

胞。

(4)启动子是•段特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,它是RNA聚合酶识别和结合

的部位,有了它才能驱动基因转录出mRNA,最终获得需要的蛋白质。

【点睛】

本题考查基因工程的相关知识,要求考生识记基因工程的概念、原理及操作步骤,掌握各操

作步骤中需要注意的细节,能结合所学的知识准确答题。

5.(2021•广东高考真题)非细胞合成技术是一种运用合成生物学方法,在细胞外构建多酶

催化体系,获得目标产物的新技术,其核心是各种酶基因的挖掘、表达等。中国科学家设计

了4步酶促反应的非细胞合成路线(如图),可直接用淀粉生产肌醇(重要的医药食品原料),

以期解决高温强酸水解方法造成的严重污染问题,并可以提高产率。

磷酸肌雷

水解酶

肌醇

回答下列问题:

(1)研究人员采用PCR技术从土壤微生物基因组中扩增得到目标前基因。此外,获得酶基

因的方法还有。(答出两种即可)

(2)高质量的DNA模板是成功扩增出目的基因的前提条件之一。在制备高质量DNA模板

时必须除去蛋白,方法有。(答出两种即可)

(3)研究人员使用大肠杆菌BL21作为受体细胞、pET20b为表达载体分别进行4种酶的表

达。表达载体转化大肠杆菌时,首先应制备细胞。为了检测目的基因是否成功

表达出酶蛋白,需要采用的方法有。

(4)依图所示流程,在一定的温度、pH等条件下,将4种酶与可溶性淀粉溶液混合组成一

个反应体系。若这些酶最适反应条件不同,可能导致的结果是。在分子水平上,

可以通过改变,从而改变蛋白质的结构,实现对酶特性的改造和优化。

【答案】(1)基因文库中获取、人工合成法

(2)盐析法、酶解法或高温变性

(3)感受态抗原-抗体杂交技术

(4)有的醐失活而使反应中断基因的碱基序列

【分析】

基因工程技术的基本步骤:

(1)目的基因的获取:从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、

终止子和标记基因等。

(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导

入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最

有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插

入目的基因-DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术;③

检测目的基因是否翻译成蛋白质-抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病

鉴定、活性鉴定等。

【详解】

(1)分析题意,研究人员从土壤微生物基因组中扩增得到目标酶基因采用了PCR技术,此

外获得酶基因的方法还有从基因文库中获取和人工合成法。

(2)高质量的DNA模板是成功扩增出目的基因的前提条件之-»在制备高质量DNA模板

时必须除去蛋白,可根据DNA和蛋白质的溶解性、对酶、高温和洗涤剂的耐受性去除蛋白

质,方法有盐析、酶解法或高温变性法等。

(3)研究人员使用大肠杆菌BL21作为受体细胞、pET20b为表达载体分别进行4种酶的表

达。表达载体转化大肠杆菌时,首先应制备感受态细胞,即利用钙离子处理大肠杆菌,使

其成为感受态细胞,使其易于接受外来的DNA分子。基因工程中,随基因(目的基因)成

功表达的产物酶蛋白的化学本质是蛋白质,常用抗原-抗体杂交技术进行检测。

(4)依图所示流程,在一定的温度、pH等条件下,将4种酶与可溶性淀粉溶液混合组成一

个反应体系。由于酶的作用条件较温和,若这些酶最适反应条件不同,则可能导致有的酶失

活而使反应中断。在分子水平上,可以通过改变基因的碱基序列,从而改变蛋白质的结构,

实现对酶特性的改造和优化。

【点睛】

本题考查基因工程、DNA的粗提取和鉴定的相关知识,意在考查考生把握知识间的联系、

理论与实际相结合解决实际问题的能力,难度中等。

6.(2021•全国甲卷高考真题)PCR技术可用于临床的病原菌检测。为检测病人是否感染了

某种病原菌,医生进行了相关操作:①分析PCR扩增结果;②从病人组织样本中提取DNA;

③利用PCR扩增DNA片段;④采集病人组织样本。回答下列问题:

(1)若要得到正确的检测结果,正确的操作顺序应该是(用数字序号表示)。

(2)操作③中使用的酶是,PCR反应中的每次循环可分为变性、复性、

三步,其中复性的结果是o

(3)为了做出正确的诊断,PCR反应所用的引物应该能与特异性结合。

(4)PCR(多聚酶链式反应)技术是指。该技术目前被广泛地应用于疾病诊断等方

面。

【答案】(1)④②③①

(2)hq酶(热稳定DNA聚合酶)延伸7dq酶从引物起始进行互补链的合成

(3)两条单链DNA

(4)一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术

【分析】

PCR是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。通过这一技术,可以在短时间

内大量扩增目的基因。利用PCR技术扩增目的基因的前提,是要有一段已知目的基因的核

甘酸序列,以便根据这一序列合成引物。

【详解】

(1)PCR技术可用于临床的病原菌检测,若要得到正确的检测结果,正确的操作顺序应该

是④采集病人组织样本玲②从病人组织样本中提取DNA玲③利用PCR扩增DNA片段好①分

析PCR扩增结果。

(2)在用PCR技术扩增DNA时,DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似,操作③中使

用的酶是Taq酶(热稳定DNA聚合酶),PCR反应中的每次循环可分为变性、复性、延伸三

步,其中复性的结果是Taq酶从引物起始进行互补链的合成。

(3)DNA复制需要引物,为了做出正确的诊断,PCR反应所用的引物应该能与两条单链DNA

特异性结合。

(4)据分析可知,PCR(多聚酶链式反应)技术是指一项在生物体外复制特定DNA片段的

核酸合成技术。该技术目前被广泛地应用于疾病诊断等方面。

【点睛】

本题考查PCR技术及应用,难度较小,解答本题的关键是明确PCR技术的原理,具体反应

过程,以及在临床病原菌检测中的应用。

7.(2021•河北高考真题)采矿污染和不当使用化肥导致重金属镉(Cd)在土壤中过量积累。

利用植物修复技术将土壤中的Cd富集到植物体内,进行后续处理(例如,收集植物组织器

官异地妥善储存),可降低土壤中Cd的含量。为提高植物对Cd污染土壤的修复能力,研究

者将酵母液泡Cd转运蛋白(YCF1)基因导入受试植物,并检测了相关指标。

回答下列问题:

(1)为获取YCF1基因,将酵母细胞的全部DNA提取、切割后与载体连接,导入受体菌的

群体中储存,这个群体称为。

(2)将DNA序列插入Ti质粒构建重组载体时,所需要的两种酶是。构建的重

组基因表达载体中必须含有标记基因,其作用是.

(3)进行前期研究时,将含有YCF1基因的重组载体导入受试双子叶植物印度芥菜,采用最

多的方法是o研究者进一步获得了转YCF1基因的不育杨树株系,采用不育株系

作为实验材料的目的是。

(4)将长势一致的野生型和转基因杨树苗移栽到Cd污染的土壤中,半年后测定植株干重

(图1)及不同器官中Cd含量(图2)。据图1可知,与野生型比,转基因植株对Cd具有

更强的(填"耐性"或"富集能力”);据图2可知,对转基因植株的进

行后续处理对于缓解土壤Cd污染最为方便有效。

(5)已知YCF1特异定位于转基因植物细胞的液泡膜上。据此分析,转基因杨树比野生型能

更好地适应高Cd环境的原因是。相较于草本植物,采用杨树这种乔

木作为Cd污染土壤修复植物的优势在于(写出两点即可)。

【答案】(1)基因组文库

(2)限制酶和DNA连接酶便于目的基因的筛选和鉴定

(3)农杆菌转化法避免目的基因在自然界中的扩散

(4)耐性茎叶

(5)YCF1可通过主动运输将Cd离子运到液泡中,提高了细胞液的浓度,有利于植株吸水

杨树具有发达的根系和高大的树冠,更适应污染矿区等不良环境,同时可充分吸收土壤中的

Cd,木材也方便运输、利用

【分析】

1、基因文库包括基因组文库和CDNA文库,基因组文库包含该物种的全部基因,CDNA文库

是部分基因文库。

2、据图1可知,与野生型比,转基因植株地上部分、地下部分和整株干重均增加;据图2

可知,转基因植株的茎、叶中Cd含量高于野生型。

【详解】

(1)为获取YCF1基因,将酵母细胞的全部DNA提取、切割后与载体连接,导入受体菌的

群体中储存,这个群体含有酵母菌的全部基因,称为基因组文库。

(2)将DNA序列插入Ti质粒构建重组载体时,需要用限制酶切割供体DNA和质粒,以产

生相同的黏性末端,然后用DNA连接酶进行连接。基因表达载体中的标记基因可用于目的

基因的筛选和鉴定.

(3)农杆菌容易侵染双子叶植物,其质粒中的T-DNA可转移并插入到受体细胞DNA中,将

含有YCF1基因的重组载体导入受试双子叶植物印度芥菜,采用最多的方法是农杆菌转化法。

考虑转基因技术的安全性,采用不育株系作为实验材料,可避免目的基因在自然界中的扩散。

(4)根据分析可知,与野生型比,转基因植株地上部分、地下部分和整株干重均增加,说

明转基因植株在Cd污染的土壤中生长较好,即对Cd具有更强的耐性:据图2分析,转基

因植株的茎、叶中Cd含量高于野生型,因此对转基因植株的茎、叶进行后续处理,可使转

基因植株持续发挥富集Cd的作用,对于缓解土壤Cd污染最为方便有效。

(5)YCF1特异定位于转基因植物细胞的液泡膜上,可通过主动运输将Cd离子运到液泡中,

提高了细胞液的浓度,有利于植株吸水,所以转基因杨树比野生型能更好地适应高Cd环境。

相较于草本植物,杨树具有发达的根系和高大的树冠,更适应污染矿区等不良环境,同时可

充分吸收土壤中的Cd,木材也方便运输、利用,作为Cd污染土壤修复植物更具有优势。

【点睛】

本题结合图示考查基因工程的相关知识,要求学生掌握基因工程的工具、步骤,难度适中,

意在考查考生理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,要求能运用所学知识解决生活

中的一些实际问题,或运用所学知识解释生活中的一些现象。

8.(202L6浙江月选考)(15分)回答下列(二)小题:

(-)斑马鱼是一种模式动物,体外受精发育,胚胎透明、便于观察,可用于水质监测,基

因功能分析以及药物毒性与安全性评价等。

(1)由于人类活动产生的生活污水日益增多,大量未经处理的污水直接排入河流、湖泊会

引起水体,导致藻类大量繁殖形成水华。取水样喂养斑马鱼,可用斑马鱼每周的

体重和死亡率等指标监测水体污染程度。

(2)为了研究某基因在斑马鱼血管发育过程中的分子调控机制,用DNA连接酶将该基因

连接到质粒载体形成,导入到大肠杆菌菌株DH5a中•为了能够连接上该目的

基因、并有利于获得含该目的基因的DH5a阳性细胞克降,质粒载体应含有

____________________________________________________(答出2点即可)。提取质粒后,

采用法,将该基因导入到斑马鱼受精卵细胞中,培养并观察转基因斑马鱼胚胎血

管的发育情况。

(3)为了获取大量斑马鱼胚胎细胞用于药物筛选,可用分散斑马伍囊胚的内细

胞团,取分散细胞作为初始材料进行培养。培养瓶中添加成纤维细胞作为

,以提高斑马鱼胚胎细胞克隆的形成率。

(-)(1)富营养化

(2)重组DNA分子限制性核酸内切酶的识别序列、抗生素抗性基因显微注射

(3)胰蛋白酶原代饲养层细胞

9.(202L1月浙江高考真题)回答下列(二)小题:

(二)三叶青为蔓生的藤本植物,以根入药。由于野生三叶青对生长环境要求非常苛刻,以

及生态环境的破坏和过度的采挖,目前我国野生三叶青己十分珍稀。

(1)为保护三叶青的多样性和保证药材的品质,科技工作者依据生态工程原理,

利用技术,实现了三叶青的林下种植。

(2)依据基因工程原理,利用发根农杆菌侵染三叶青带伤口的叶片,叶片产生酚类化合物,

诱导发根农杆菌质粒上前系列基因表达形成和限制性核酸内切酶等,进而从质粒

上复制并切割出一段可转移的DNA片段(T-DNA)。T-DNA进入叶片细胞并整合到染色体上,

T-DNA上r。/系列基因表达,产生相应的植物激素,促使叶片细胞持续不断地分裂形成

,再分化形成毛状根.

(3)剪取毛状根,转入含头抱类抗生素的固体培养基上进行多次培养,培养基中

添加抗生素的主要目的是。最后取毛状根转入液体培养基、置于摇床上进行悬浮培

养,通过控制摇床的和温度,调节培养基成分中的,获得大量毛状根,用

于提取药用成分。

【答案】(二)(1)遗传间种

(2)DNA聚合酶愈伤组织

(3)继代杀灭发根农杆菌转速营养元素以及生长调节剂的种类和浓度

【解析】(二)(1)生物多样性包括遗传多样性、物种多样性和生态系统多样性,为保护三

叶青的遗传多样性和保证药材的品质;三叶青的林下种植,是利用间种技术。

(2)分析题意可知,从质粒上复制并切割出一段可转移的DNA片段(T-DNA),DNA复制需

要DNA聚合酶,故可知,酚类化合物诱导发根农杆菌质粒上"系列基因表达,形成DNA

聚合前和限制性核酸内切醐等。根据植物组织培养技术过程可知,相应植物激素可以促使叶

片细胞脱分化形成愈伤组织,再分化形成毛状根。

(3)剪取毛状根,转入含头抱类抗生素的固体培养基上进行多次继代培养,培养基中添加

抗生素的主要目的是杀灭发根农杆菌。最后取毛状根转入液体培养基、置于摇床上进行悬浮

培养,通过控制摇床的转速和温度,调节培养基成分中的营养元素以及生长调节剂的种类和

浓度,获得大量毛状根,用于提取药用成分。

10.(2020年山东省高考生物试卷(新高考)•13)两种远缘植物的细胞融合后会导致一方

的染色体被排出。若其中一个细胞的染色体在融合前由于某种原因断裂,形成的染色体片段

在细胞融合后可能不会被全部排出,未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上

而留存在杂种细胞中。依据该原理,将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获

得了耐盐小麦新品种,过程如下图所示。下列说法错误的是()

普通小麦细胞一二普通小麦原牛.质体、③杂种培养杂种筛选

中间偃麦草细胞一上中间偃麦草原生质体)一细胞"馅株"耐,皿小上

不同剂量的紫外线照射—

A.过程①需使用纤维素酶和果胶醐处理细胞

B.过程②的目的是使中间偃麦草的染色体断裂

C.过程③中常用灭活的病毒诱导原生质体融合

D.耐盐小麦的染色体上整合了中间偃麦草的染色体片段

【答案】C

【解析】

【分析】

从图中看出①是去掉植物细胞壁,②是用紫外线诱导染色体变异,③融合形成杂种细胞。

【详解】

A、过程1是获得植物细胞的原生质体,需要用纤维素酶和果胶酶将细胞壁分解,A正确;

B、根据题干信息"将其中一个细胞的染色体在融合前断裂,形成的染色体片段在细胞融合后

可能不会被全部排出,未排出的染色体片段可以整合到另•个细胞的染色体上而留存在杂种

细胞中,将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种,"故

过程②通过紫外线照射是使中间偃麦草的染色体断裂,B正确:

C、灭活的病毒诱导是动物细胞融合特有的方法,诱导植物原生质体融合常用物理法、化学

法,C错误;

D、实验最终将不抗盐的普通小麦和抗盐的偃麦草整合形成耐盐小麦,说明耐盐小麦染色体

上整合了中间偃麦草的染色体片段,D正确。

故选Co

【点睛】

本题的难点是对过程②的分析,考生需要结合题干中的信息作答。

11.(2020年山东省高考生物试卷(新高考)•14)经遗传改造的小鼠胚胎干细胞注入囊胚,

通过胚胎工程的相关技术可以获得具有不同遗传特性的实验小鼠。下列说法错误的是()

A.用促性腺激素处理雌鼠可以获得更多的卵子

B.体外受精前要对小鼠的精子进行获能处理

C.胚胎移植前要检查胚胎质量并在囊胚或原肠胚阶段移植

D.遗传改造的小鼠胚胎干细胞可以通过转基因等技术获得

【答案】C

【解析】

【分析】

1、胚胎移植的基本程序主要包括:

①对供、受体的选择和处理。选择遗传特性和生产性能优秀的供体,有健康的体质和正常繁

殖能力的受体,供体和受体是同一物种。并用激素进行同期发情处理,用促性腺激素对供体

母牛做超数排卵处理。

②配种或人工授精。

③对胚胎的收集、检查、培养或保存。配种或输精后第7天,用特制的冲卵装置,把供体母

牛子宫内的胚胎冲洗出来(也叫冲卵)。对胚胎进行质量检查,此时的胚胎应发育到桑根或

胚囊胚阶段。直接向受体移植或放入-196℃的液氮中保存。

④对胚胎进行移植。

⑤移植后的检查•对受体母牛进行是否妊娠的检查。

2、体外受精主要包括:卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。

【详解】

A、促性腺激素可以使雌鼠超数排卵,获得更多的卵子,A正确;

B、精子只有获能后才能完成受精,故体外受精前要对小鼠的精子进行获能处理,B正确;

C、胚胎移植通常选择囊胚期之前的阶段,如桑根胚或囊胚阶段,C错误;

D、转基因技术可以定向改造小鼠的基因,所以遗传改造的小鼠胚胎干细胞可以通过转基因

等技术获得,D正确。

故选C,

【点睛】

本题考查胚胎工程的基本知识,考生需要识记基本操作,D项中需要结合基因工程的目的进

行解答。

12.(2020年江苏省高考生物试卷•23)小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞、

制备流程如图所示。下列叙述簿送的是()

A.为获得更多的囊胚,采用激素注射促进雄鼠产生更多的精子

B.细胞a和细胞b内含有的核基因不同,所以全能性高低不同

C.用胰蛋白酶将细胞a的膜白消化后可获得分散的胚胎干细胞

D.胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养

【答案】ABC

【解析】

【分析】

1、胚胎干细胞简称ES或EK细胞,来源于早期胚胎或原始性腺(即囊胚期的内细胞团)。

2、ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中,能够维持不分化的状态.在培养

液中加入分化诱导因子,如牛黄酸、丁酰环腺甘酸等化学物质时,就可以诱导ES细胞向不

同类型的组织细胞分化,这为揭示细胞分化和细胞凋亡机理提供了有效的手段。

【详解】

A、为了获得更多的囊胚,可以采用激素促进成熟雌性个体超数排卵,然后将卵细胞从母体

内取出,在试管内与人工采集的精子进行体外受精,培育成胚胎,A错误;

B、细胞a和细胞b是由同一个受精卵经过有丝分裂形成的,故核基因相同,B错误;

C、运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞,首先必须用胰蛋白酶

处理内细胞团,分解细胞间的胶原蛋白等,使之分散成单个细胞,C错误;

D、动物细胞培养时需要在5%C02的培养箱中进行培养,以维持培养液的pH,D正确。

故选ABC。

13.(2020年天津高考生物试卷•1)在克隆哺乳动物过程中,通常作为核移植受体细胞的

是去核的()

A.卵原细胞

B.初级卵母细胞

C.次级卵母细胞

D.卵细胞

【答案】C

【解析】

【分析】

体细胞核移植过程:

植g

【详解】

在克隆哺乳动物过程中,通常选择减数第二次分裂中期的去核卵母细胞作为受体细胞,即次

级卵母细胞。

故选Co

14.阅读下列材料,回答下列小题。

在应用基因工程改变生物遗传特性,进而利用种间关系进行生物防治方面,中国科学家取得

了许多重要进展。

资料一:人类使用化学农药防治害虫,致使环境不断恶化。王成树等从黄肥尾蝎中克隆出一

种神经毒素基因AalT,将其导入能寄生在许多害虫体内的绿僵菌中,增强绿僵菌致死害虫的

效应,可有效控制虫害大规模爆发。

资料二:小麦赤霉病是世界范围内极具毁灭性的农业真菌病害。王宏伟、孔令让等从长穗偃

麦草中克隆出抗赤霉病主效基因Fhb7。将Fhb7导入小麦,其表达产物可减轻赤霉菌对小麦

的感染,从而避免小麦赤霉病大规模爆发。

资料三:疟疾由受疟原虫感染的雌按蚊通过叮咬在人群中传播。王四宝等从几种微生物中克

隆出5种不同抗疟机制的基因,将它们导入按蚊的肠道共生菌AS1中。在按蚊肠道内,AS1

工程菌分泌的基因表达产物可杀灭疟原虫。因AS1可在按蚊亲代和子代种群中扩散,所以在

含AS1工程菌按蚊的群落中,疟疾传播一般可被阻断。

11.(2020年天津高考生物试卷)目的基因是基因工程的关键要素。关于上述资料中涉及的

目的基因,下列分析正确的是()

A.来源:必须从动物、植物或微生物的基因组文库中直接获取

B.作用:上述基因表达产物一定影响防治对象的生长或存活

C.转化:均可采用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞

D.应用:只有将目的基因导入防治对象才能达到生物防治目的

12.在利用种间关系进行生物防治的措施中,下列分析第送的是()

A.施用绿僵菌工程菌减少虫害,不改变绿僵菌与害虫之间存在寄生关系

B.引入Fhb7增强小麦的抗菌性,目的是调节真菌对植物的寄生能力

C.AS1工程菌分泌的多种表达产物不改变AS1与按蚊之间存在共生关系

D.使AS1工程菌分泌多种表达产物杀灭疟原虫,目的是调节按蚊对人的寄生能力

【答案】

11.B

12.D

【解析】

【分析】

1、基因工程技术的基本步骤:

(1)目的基因的获取:从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

(2)基因表达载体的构建:基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、

终止子和标记基因等。

(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导

入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最

有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插

入目的基因一一DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA一一分子杂交技术;

③检测目的基因是否翻译成蛋白质一一抗原一抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、

抗病鉴定、活性鉴定等。

2、生物的种间关系包括竞争、捕食、互利共生和寄生。互利共生是指两种生物共居一起,

彼此创造有利的生活条件,较之单独生活时更为有利;相互依赖,相互依存,一旦分离,双

方都不能正常地生活。寄生是指一种生物生活在另一种生物的体内或体表,并从后者摄取营

养以维持生活的种间关系。前者称寄生物,后者称寄主。大都为一方受益,一方受害,甚至

引起寄主患病或死亡。

11.

A、目的基因可以从基因文库中获取、利用PCR技术扩增或是人工合成,A错误;

B、资料一中神经毒素基因AalT导入绿僵菌中可以增强绿僵菌致死害虫的效应,资料二中

Fhb7基因导入小麦,其表达产物可减轻赤霉菌对小麦的感染,资料三,将5种不同抗疟机

制的基因导入按蚊的肠道共生菌AS1中,AS1工程菌分泌的基因表达产物可杀灭疟原虫,因

此上述基因表达产物一定影响防治对象的生长或存活,B正确;

C、基因AalT导入绿僵菌中可用感受态细胞法,Fhb7基因导入小麦可用农杆菌转化法、基

因枪法和花粉管通道法,将5种不同抗疟机制的基因导入按蚊的肠道共生菌AS1中可用感受

态细胞法,C错误;

D、要想达到生物防治的目的不一定要将目的基因导入防治对象,如资料一,可将目的基因

导入能寄生在多种害虫体内的绿僵菌中,如资料三,可将目的基因导入按蚊的肠道共生菌

AS1中,这种方法同样可以达到生物防治的目的,D错误。

故选Bo

12.

A、导入AalT基因的绿僵菌只是增强了致死害虫的效应,没有改变绿僵菌与害虫之间存在的

寄生关系,A正确:

B、Fhb7基因导入小麦后,其表达产物可减轻赤霉菌对小麦的感染,调节了真菌对植物的寄

生能力,B正确;

C、AS1工程菌分泌的基因表达产物可杀灭疟原虫,并不会改变AS1与按蚊之间存在的共生

关系,C正确;

D、使AS1工程菌分泌多种表达产物杀灭疟原虫,目的是阻断疟疾的传播,不会改变按蚊对

人的寄生能力,D错误。

故选D。

15.(2020年浙江省高考生物试卷(7月选考)•15)下列关于病毒的叙述,错误的是()

A.有的病毒经灭活处理后,可用于细胞工程中介导动物细胞的融合

B.适当增加机体内参与免疫的细胞数量与活性,可提高对新型冠状病毒的抵御能力

C.在某人的分泌物中检测到新型冠状病毒,推测该病毒的增殖不依赖于宿主细胞

D.用高温高压处理病毒使其失去感染能力,原因之一是病毒的蛋白质发生了热变性

【答案】C

【解析】

【分析】

诱导细胞融合的方法有三种:生物方法(病毒)、化学方法(聚乙二醇PEG)、物理方法(离

心、震动、电刺激)。某些病毒如:仙台病毒、副流感病毒和新城鸡瘟病毒的被膜中有融

合蛋白,可介导病毒同宿主细胞融合,也可介导细胞与细胞的融合,因此可以用紫外线灭活

的此类病毒诱导细胞融合。

【详解】

A、有的病毒经灭活处理后,可用于细胞工程中介导动物细胞的融合,如灭活的病毒,A正

确;

B、适当增加机体内参与免疫的细胞数量与活性,可以参与免疫调节中的体液和细胞免疫,

尽可能杀死更多的病毒,可提高对新型冠状病毒的抵御能力,B正确;

C、在某人的分泌物中检测到新型冠状病毒,是因为病毒浸入细胞后大量繁殖,病毒从细胞

中释放出来,不能说明该病毒的增殖不依赖于宿主细胞,C错误;

D、用高温高压处理病毒使其失去感染能力,原因之一是病毒的蛋白质在高温高压下,空间

结构发生变化,肽链松散,发生了变性,D正确。

故选C»

16.(2020年浙江省高考生物试卷(7月选考)24)下列关于基因工程的叙述,正确的是()

A.若受体大肠杆菌含有构建重组质粒时用到的限制性核酸内切酶,则一定有利于该重组质

粒进入受体并保持结构稳定

B.抗除草剂基因转入某抗盐植物获得2个稳定遗传转基因品系,抗性鉴定为抗除草剂抗盐

和抗除草剂不抗盐。表明一定是抗盐性的改变与抗除草剂基因的转入无关

C.抗除草剂基因转入某植物获得转基因植株,其DNA检测均含目的基因,抗性鉴定为抗除

草剂和不抗除草剂。表明一定是前者表达了抗性蛋白而后者只表达抗性基因RNA

D.已知不同分子量DNA可分开成不同条带,相同分子量的为一条带。用某种限制性核酸内

切酶完全酶切环状质粒后,出现3条带。表明该质粒上一定至少有3个被该酶切开的位置

【答案】D

【解析】

【分析】

基因工程中通常要有多种工具酶、目的基因、载体和宿主细胞等基本要素,并按一定的程序

进行操作,包括目的基因的获得、重组DNA的形成、重组DNA导入受体细胞、筛选含有目

的基因的受体细胞和目的基因的表达等几个方面。

【详解】

A、若受体大肠杆菌含有构建重组质粒时用到的限制性核酸内切酶,则该酶会对进入受体的

重组质粒进行切割,不利于其保持结构稳定,A错误;

B、抗除草剂基因转入抗盐植物,获得了抗除草剂抗盐品系和抗除草剂不抗盐品系,不抗盐

品系的产生可能是转入的抗除草剂基因插入到抗盐基因内,影响其表达造成,B错误;

C、转基因植物中均含抗除草剂基因,但存在抗除草剂和不抗除草剂两种植株,前者表达了

抗性蛋白,后者可能抗除草剂基因未转录出mRNA,或转录出的mRNA未能翻译成蛋白质,

C错误;

D、某种限制性内切酶完全醐切环状质粒后,出现3条带,即3种不同分子量DNA,因此环

状质粒上至少有3个醐切位点,D正确。

故选D。

17.(2019北京卷•4)甲、乙是严重危害某二倍体观赏植物的病害。研究者先分别获得抗

甲、乙的转基因植株。再将二者杂交后得到Fi,结合单倍体育种技术,培育出同时抗甲、

乙的植物新品种,以下对相关操作及结果的叙述,错误的是

A.将含有目的基因和标记基因的载体导入受体细胞

B.通过接种病原体对转基因的植株进行抗病性鉴定

C.调整培养基中植物激素比例获得Fi花粉再生植株

D.经花粉离体培养获得的若干再生植株均为二倍体

【答案】D

【解析】

【分析】由题意可知,同时抗甲、乙的植物新品种的培养过程为:把含抗甲的目的基因

的重组质粒导入植物细胞,获得抗甲植株,同时把含抗乙的目的基因的重组质粒导入植

物细胞,获得抗乙植株,通过杂交获得B(二倍体植株),取B的花粉经花药离体培养

获得单倍体植株,用秋水仙素处理单倍体植株获得纯合的同时抗甲、乙的植物新品种(二

倍体)。

【详解】要获得转基因的抗甲或抗乙植株,需要构建基因表达载体(含目的基因、标记

基因、启动子、终止子、复制原点),再把基因表达载体导入受体细胞中,A正确;对转

基因植株进行检测时,可以通过抗病接种实验进行个体水平的检测,B正确;对B的花

粉进行组织培养时,需要经过脱分化和再分化过程,其中生长素/细胞分裂素比例高时利

于根的分化,比例低时利于芽的分化,C正确;经花粉离体培养获得的植株是单倍体,

D错误。因此,本题答案选D。

18.(2019江苏卷•16)下列生物技术操作对遗传物质的改造,不会遗传给子代的是

A.将胰岛素基因表达质粒转入大肠杆菌,筛选获得基因工程菌

B.将花青素代谢基因导入植物体细胞,经组培获得花色变异植株

C.将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵,培育出产低乳糖牛乳的奶牛

D.将腺甘酸脱氨酶基因转入淋巴细胞后回输患者,进行基因治疗

【答案】D

【解析】

【分析】转基因技术的原理是基因重组。基因重组和基因突变、染色体变异均属于可遗

传的变异。

基因治疗:指把正常基因导入病人体内,使该基因的表达产物发挥功能,从而达到治疗

疾病的目的,这是治疗遗传病的最有效的手段。

【详解】将含胰岛素基因表达载体的重组质粒转入大肠杆菌获得的转基因菌,可以通过

二分裂将胰岛素基因传给后代,A不符合题意;将花青素代谢基因导入植物体细胞,再

经植物组织培养获得的植株所有细胞均含有花青素代谢基因,花青素代谢基因会随该植

物传给后代,B不符合题意;将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵,培育出产低乳糖牛乳的

奶牛所有细胞均含有肠乳糖酶基因,可以遗传给后代,C不符合题意:该患者进行基因

治疗时,只有淋巴细胞含有该腺甘酸脱氨酶基因,性原细胞不含该基因,故不能遗传给

后代,D符合题意。

19.(2019江苏卷•23)下图为杂交瘤细胞制备示意图。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄喋吟磷

酸核糖转移酶(HGPRT-),在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA,无法生长。下列叙

述正确的是

免疫B细胞骨®5痛细胞

体外长期融合的细胞在HAT

培养中死亡培养液中死亡

A.可用灭活的仙台病毒诱导细胞融合

B.两两融合的细胞都能在HAT培养液中生长

C.杂交瘤细胞需进一步筛选才能用于生产

D.细胞膜的流动性是细胞融合的基础

【答案】ACD

【解析】

【分析】(1)动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性、细胞的增殖,诱导手段有电激、

聚乙二醇、灭活的病毒等,结果产生杂交细胞,主要用于制备单克隆抗体.

(2)单克隆抗体制备的原理包括:①免疫理:B淋巴细胞能产生特异性抗体;②细胞融

合原理:利用病毒对宿主细胞的穿透性使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合;③动物细胞培

养技术:对杂交瘤细胞进行体内、体外培养。

(3)制备单克隆抗体过程中的几种细胞:①免疫B细胞(浆细胞):能产生单一抗体,

但不能无限增殖;②骨髓瘤细胞:能无限增殖,但不能产生抗体;③杂交瘤细胞:既能

产生单一抗体,又能在体外培养条件下无限增殖。

【详解】诱导动物细胞融合的方法有电激、聚乙二醇、灭活的病毒(如灭活的仙台病毒)

等,A正确;

两两融合的细胞包括免疫B细胞与免疫B细胞融合的具有同种核的细胞、骨髓瘤细胞与

骨髓瘤细胞融合的具有同种核的细胞、免疫B细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞,骨

髓瘤细胞虽然能无限增殖,但缺乏次黄喋吟磷酸核糖转移酶,免疫B细胞虽然有次黄喋

吟磷酸核糖转移酶,但不具有无限增殖的本领,所以在HAT筛选培养液中,两两融合的

具有同种核的细胞都无法生长,只有杂交瘤细胞才能生长,B错误;因每个免疫B细胞

只分泌一种特异性抗体,因此在HAT筛选培养液中筛选出来的众多的杂交瘤细胞所分泌

的抗体,不一定都是人类所需要的,还需要进一步把能分泌人类所需要抗体的杂交瘤细

胞筛选出来,C正确;动物细胞融合是以细胞膜的流动性为基础的,D正确。

20.(2020年全国统一高考生物试卷(新课标1)・38)为研制抗病毒A的单克隆抗体,某

同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。

制备单细胞悬液

筛选1筛选2

小鼠甲B淋巴细胞-

骨确瘤细胞一

回答下列问题:

(1)上述实验前必须给小鼠甲注射病毒A,该处理的目的是。

(2)写出以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤:<,

(3)为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞,需要进行筛选。图中筛选1所

采用的培养基属于,使用该培养基进行细胞培养的结果是

。图中筛选2含多次筛选,筛选所依据的基本原理是。

(4)若要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖,可采用的方法有

________________(答出2点即可)。

【答案】(1)诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞

(2)取小鼠甲脾脏剪碎,用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞,加入培养液制成单细胞悬

(3)选择培养基只有杂交瘤细胞能够生存抗原与抗体的反应具有特异性

(4)将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖;将杂交瘤细胞在体外培养

【解析】

【分析】

由图可知,筛选1指用选择培养基筛选出杂交瘤细胞,筛选2指进行克隆化培养和专一抗体

检测,筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。

【详解】

(1)实验前给小鼠甲注射病毒A,是为了诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴

细胞。

(2)取小鼠的脾脏,剪碎组织,用胰蛋白酶处理获得单个细胞,加入培养液可以制成单细

胞悬液。

(3)图中筛选1需要用到选择培养基,只有杂交瘤细胞可以存活。筛选2是为了获得能产

生特定抗体的杂交瘤细胞,该过程要用到抗原抗体杂交,故筛选所依据的原理是抗原-抗体

反应具有特异性。

(4)获得能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞后,可以在体外培养液中进行培养,

或在小鼠的腹腔中进行培养,使杂交瘤细胞大量增殖。

【点睛】

制备单克隆抗体的过程中,需要用到动物细胞融合和动物细胞培养,需要用到两次筛选,第

一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞,第二次筛选的目的是获得能产生特定抗体的杂交瘤细

胞。

2L(2020年全国统一高考生物试卷(新课标H)・38)植树造林、"无废弃物农业"、污水净

化是建设美丽中国的重要措施。回答下列有关生态工程的问题:

(1)在植树造林时,一般认为,全部种植--种植物的做法是不可取的。因为与混合种植方

式所构建的生态系统相比,按照种植一种植物方式所构建的生态系统,其抵抗力稳定性

。抵抗力稳定性的含义是。

(2)"无废弃物农业”是我国利用生态工程的原理进行农业生产的一种模式,其做法是收集

有机物质。包括人畜粪便、枯枝落叶等,采用堆肥和泄肥等多种方式,把它们转变为有机肥

料,再施用到农田中。施用有机肥料的优点是(答出3点即可)。在有机

肥料的形成过程中,微生物起到了重要作用,这些微生物属于生态系统组分中的。

(3)在污水净化过程中,除发挥污水处理厂的作用外,若要利用生物来回收污水中的铜、

镉等金属元素,请提供一个方案:。

【答案】(1)低生态系统抵抗外界干扰并使自身的结构与功能保持原状或不受损害的能

(2)改善了土壤结构;培育了土壤微生物;实现了土壤养分的循环利用

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