山东专用2024年高考生物一轮复习专题24发酵工程-模拟检测含解析

PAGEPAGE27第七单元生物技术与工程专题24发酵工程【5年高考】考点一传统发酵技术与发酵工程1.(2024山东,12,2分)我国的酿酒技术历史悠久,古人在实际生产中积累了很多阅历。《齐民要术》记载:将蒸熟的米和酒曲混合前需“浸曲发,如鱼眼汤,净淘米八斗,炊作饭,舒令极冷”。意思是将酒曲浸到活化,冒出鱼眼大小的气泡,把八斗米淘净,蒸熟,摊开冷透。下列说法错误的是 ()A.“浸曲发”过程中酒曲中的微生物代谢加快B.“鱼眼汤”现象是微生物呼吸作用产生的CO2释放形成的C.“净淘米”是为消退杂菌对酿酒过程的影响而实行的主要措施D.“舒令极冷”的目的是防止蒸熟的米温度过高导致酒曲中的微生物死亡答案C2.(2024江苏单科,18,2分)某同学在线提交了在家用带盖玻璃瓶制作果酒和果醋的试验报告,他的做法错误的是 ()A.选择簇新的葡萄略加冲洗,除去枝梗后榨汁B.将玻璃瓶用酒精消毒后,装满葡萄汁C.酒精发酵期间,依据发酵进程适时拧松瓶盖放气D.酒精发酵后去除瓶盖,盖一层纱布,再进行醋酸发酵答案B3.(2024江苏单科,9,2分)下列关于传统发酵技术应用的叙述,正确的是 ()A.利用乳酸菌制作酸奶过程中,先通气培育,后密封发酵B.家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是纯种发酵C.果醋制作过程中发酵液pH渐渐降低,果酒制作过程中状况相反D.毛霉主要通过产生脂肪酶、蛋白酶和纤维素酶参与腐乳发酵答案B4.(2024江苏单科,16,2分)某高校采纳如图所示的发酵罐进行葡萄酒主发酵过程的探讨,下列叙述错误的是 ()A.夏季生产果酒时,常需对罐体进行降温处理B.乙醇为挥发性物质,故发酵过程中空气的进气量不宜太大C.正常发酵过程中罐内的压力不会低于大气压D.可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来确定何时终止发酵答案B5.(2016课标全国Ⅱ,39,15分)苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的。回答下列问题:(1)酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段,在酵母菌细胞的中进行,其产物乙醇与试剂反应呈现灰绿色,这一反应可用于乙醇的检验;过程③在酵母菌细胞的中进行。与无氧条件相比,在有氧条件下,酵母菌的增殖速度。

(2)其次阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程,依据醋酸杆菌的呼吸作用类型,该过程须要在条件下才能完成。

(3)在生产过程中,第一阶段和其次阶段的发酵温度不同,第一阶段的温度(填“低于”或“高于”)其次阶段的。

(4)醋酸杆菌属于核生物,其细胞结构中(填“含有”或“不含有”)线粒体。

答案(1)细胞质基质重铬酸钾线粒体快(2)有氧(3)低于(4)原不含有考点二微生物的培育技术与应用6.(2024江苏单科,19,2分)为纯化菌种,在鉴别培育基上划线接种纤维素降解细菌,培育结果如右图所示。下列叙述正确的是 ()A.倒平板后需间歇晃动,以保证表面平整B.图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多,应从Ⅲ区挑取单菌落C.该试验结果因单菌落太多,不能达到菌种纯化的目的D.菌落四周的纤维素被降解后,可被刚果红染成红色答案B7.(2024浙江7月选考,19,2分)下列关于微生物培育及利用的叙述,错误的是 ()A.利用尿素固体培育基可快速杀死其他微生物,而保留利用尿素的微生物B.配制培育基时应依据微生物的种类调整培育基的pHC.酵母菌不能干脆利用糯米淀粉发酵得到糯米酒D.相宜浓度的酒精可使醋化醋杆菌活化答案A8.(2016江苏单科,25,3分)漆酶属于木质素降解酶类,在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。下图是分别、纯化和保存漆酶菌株的过程,相关叙述正确的是(多选) ()A.生活污水中含有大量微生物,是分别产漆酶菌株的首选样品B.筛选培育基中须要加入漆酶的底物,通过菌落特征挑出产漆酶的菌落C.在涂布平板上长出的菌落,再通过划线进一步纯化D.斜面培育基中含有大量养分物,可在常温下长期保存菌株答案BC9.(2024课标全国Ⅰ,37,15分)某种物质S(一种含有C、H、N的有机物)难以降解,会对环境造成污染,只有某些细菌能降解S。探讨人员依据如图所示流程从淤泥中分别得到能高效降解S的细菌菌株。试验过程中须要甲、乙两种培育基,甲的组分为无机盐、水和S,乙的组分为无机盐、水、S和Y。回答下列问题:(1)试验时,盛有水或培育基的摇瓶通常采纳的方法进行灭菌。乙培育基中的Y物质是。甲、乙培育基均属于培育基。

(2)试验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107个/mL,若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液,且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个,则至少应将摇瓶M中的菌液稀释倍。

(3)在步骤⑤的筛选过程中,发觉当培育基中的S超过某一浓度时,某菌株对S的降解量反而下降,其缘由可能是(答出1点即可)。

(4)若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数,请写出主要试验步骤:

。

(5)上述试验中,甲、乙两种培育基所含有的组分虽然不同,但都能为细菌的生长供应4类养分物质,即。

答案(1)高压蒸汽灭菌琼脂选择(2)104(3)S的浓度超过某一值时会抑制菌株的生长(4)取淤泥加入无菌水中,涂布(或稀释涂布)到乙培育基上,培育后计数(5)水、碳源、氮源和无机盐10.(2024课标全国Ⅱ,37,15分)物质W是一种含氮有机物,会污染土壤。W在培育基中达到肯定量时培育基表现为不透亮。某探讨小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌(目标菌)。回答下列问题。(1)要从土壤中分别目标菌,所用选择培育基中的氮源应当是。

(2)在从土壤中分别目标菌的过程中,发觉培育基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落(如图所示)。假如要得到目标菌,应当选择菌落进一步纯化,选择的依据是。

(3)土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计试验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源,请简要写出试验思路、预期结果和结论,即。

(4)该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌,使大肠杆菌产生能降解W的酶(酶E)。为了比较酶E与自然酶降解W实力的差异,该小组拟进行如下试验,请完善相关内容。①在含有肯定浓度W的固体培育基上,A处滴加含有酶E的缓冲液,B处滴加含有相同浓度自然酶的缓冲液,C处滴加,三处滴加量相同。

②一段时间后,测量透亮圈的直径。若C处没有出现透亮圈,说明;若A、B处形成的透亮圈直径大小相近,说明。

答案(1)W(2)乙乙菌落四周出现透亮圈,说明乙菌能降解W(3)将甲、乙菌分别接种在无氮源培育基上,若细菌能生长,则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源(4)①缓冲液②缓冲液不能降解W酶E与自然酶降解W的实力相近11.(2024课标全国Ⅲ,37,15分)回答下列与细菌培育相关的问题。(1)在细菌培育时,培育基中能同时供应碳源、氮源的成分是(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常,制备培育基时要依据所培育细菌的不同来调整培育基的pH,其缘由是。硝化细菌在没有碳源的培育基上(填“能够”或“不能”)生长,缘由是。

(2)用平板培育细菌时一般须要将平板(填“倒置”或“正置”)。

(3)单个细菌在平板上会形成菌落,探讨人员通常可依据菌落的形态、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物,缘由是。

(4)有些运用后的培育基在丢弃前须要经过处理,这种处理可以杀死丢弃物中全部的微生物。

答案(1)蛋白胨不同细菌生长繁殖所需的最适pH不同能够硝化细菌可以利用空气中的CO2作为碳源(2)倒置(3)在肯定的培育条件下,不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征(4)灭菌12.(2024课标全国Ⅰ,37,15分)将马铃薯去皮切块,加水煮沸肯定时间,过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入肯定量蔗糖和琼脂,用水定容后灭菌,得到M培育基。回答下列问题:(1)M培育基若用于真菌的筛选,则培育基中应加入链霉素以抑制的生长,加入了链霉素的培育基属于培育基。

(2)M培育基中的马铃薯浸出液为微生物生长供应了多种养分物质,养分物质类型除氮源外还有(答出两点即可)。氮源进入细胞后,可参与合成的生物大分子有(答出两点即可)。

(3)若在M培育基中用淀粉取代蔗糖,接种土壤滤液并培育,平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是,该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是

。

(4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量,在同一稀释倍数下得到以下结果:甲同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是110、140和149,取平均值133;乙同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是27、169和176,取平均值124。有人认为这两位同学的结果中,乙同学的结果可信度低,其缘由是

。

答案(1)细菌选择(2)碳源、无机盐蛋白质、核酸(3)碘液淀粉遇碘液显蓝色,产淀粉酶的菌落四周淀粉被水解,形成透亮圈(4)乙同学的结果中,1个平板的计数结果与另2个相差悬殊,结果的重复性差13.(2016课标全国Ⅰ,39,15分)空气中的微生物在重力等作用下,可以肯定程度地沉降。某探讨小组欲用平板收集教室空气中的微生物,以了解教室内不同高度空气中微生物的分布状况。试验步骤如下:①配制培育基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O);②制作无菌平板;③设置空白比照组和若干试验组,进行相关操作;④将各组平板置于37℃恒温箱中培育一段时间,统计各组平板上菌落的平均数。回答下列问题:(1)该培育基中微生物所需的氮来源于。若要完成步骤②,该培育基中的成分X通常是。

(2)步骤③中,试验组的操作是。

(3)若在某次调查中,某一试验组平板上菌落平均数为36个/平板,而空白比照组的一个平板上出现了6个菌落,这种结果说明在此次调查中出现了现象。若将30(即36-6)个/平板作为本组菌落数的平均值,该做法(填“正确”或“不正确”)。

答案(1)牛肉膏、蛋白胨琼脂(2)将各试验组平板分别放置在教室不同高度的位置上,开盖暴露一段时间(3)污染不正确[老师专用题组]【5年高考】考点一传统发酵技术与发酵工程阅读下列材料,回答1、2题。甜瓣子是豆瓣酱的重要成分,风味受蚕豆蛋白分解产生的氨基酸影响,也受发酵过程中不同微生物的多种代谢产物影响。其生产工艺如图所示。蚕豆瓣豆瓣曲酱醅甜瓣子某探讨团队对加盐水后的发酵阶段的传统工艺(盐度15%,温度37℃,发酵30天)进行了改良,改良后甜瓣子风味得以提升。新工艺参数如下表所示。时期时段(天)盐度(%)温度(℃)前期0~12612中期12~16637后期16~301537两种工艺的结果比较见图。1.(2024天津,9,4分)下列关于本探讨的试验方法与原理的描述,错误的是 ()A.发酵起先阶段的微生物主要来源于制曲过程的积累B.蚕豆瓣可供应微生物生长繁殖所需的碳源和氮源C.温度与盐度都影响微生物的生长繁殖D.定期取样,运用平板划线法统计活细菌总数答案D制曲是发酵的重要工序,实质是创建曲霉等相应微生物生长的相宜条件,保证相应微生物得以充分生长繁殖,用于发酵起先阶段,A正确;蚕豆瓣中含有糖类、蛋白质等养分物质,可为微生物的生长繁殖供应碳源、氮源,B正确;微生物生长繁殖须要相宜的温度和盐度,温度过高和过低都会影响微生物的生长繁殖,盐度过高会抑制微生物的生长繁殖,C正确;统计活细菌总数常用的方法是稀释涂布平板法,D错误。2.(2024天津,10,4分)下列对试验结果的分析,错误的是 ()A.新工艺中期活霉菌总数下降由温度上升导致B.新工艺后期活细菌总数下降由温度、盐度均上升导致C.新工艺中期氨基酸产生速率较前期末加快,是因为温度上升提高了蛋白酶活性D.新工艺中甜瓣子风味提升,与前、中期活微生物总数高和氨基酸终产量高均有关答案B据图可知,新工艺中期活霉菌总数下降,相对新工艺前期比较,盐度不变,温度上升到37℃,可推知活霉菌总数下降是由温度上升导致的,A正确;对比新工艺前期和中期,盐度不变,温度上升,对活细菌总数影响不大,对比新工艺中期和后期,温度不变,盐度上升,活细菌总数下降,说明活细菌总数下降是由盐度上升导致的,B错误;对比新工艺前期末和中期,盐度不变,温度上升,会影响酶的活性,可推知新工艺中期温度上升提高了蛋白酶的活性,使分解蚕豆蛋白产生氨基酸的速率加快,C正确;据题意可知,甜瓣子风味受蚕豆蛋白分解产生的氨基酸影响,也受发酵过程中不同微生物的多种代谢产物影响,据图可知新工艺中甜瓣子风味提升,与前、中期活微生物总数和氨基酸终产量高均有关,D正确。3.(2013江苏单科,14,2分)某探讨性学习小组以樱桃番茄为材料进行果酒、果醋发酵试验。下列相关叙述正确的是 ()A.酵母菌是嗜温菌,所以果酒发酵所需的最适温度较高B.先供氧进行果醋发酵,然后隔绝空气进行果酒发酵C.与人工接种的发酵相比,自然发酵获得的产品品质更好D.适当加大接种量可以提高发酵速率、抑制杂菌生长繁殖答案D本题考查果酒和果醋的制作的相关学问。果酒发酵一般将温度限制在18~25℃,而果醋发酵的相宜温度为30~35℃,因此果醋发酵所需的最适温度较高;应当先隔绝空气进行果酒发酵,然后植入醋酸杆菌,通入空气,进行果醋发酵,因为醋酸杆菌可以将酒精转变为醋酸;与人工接种的发酵相比,自然发酵过程中菌种量比较少,且菌种本身品质不好,因此,自然发酵获得的产品品质较差;适当加大接种量,能提高发酵速率、抑制杂菌生长繁殖。解题思路①确定菌种,并比较两菌种的代谢类型及温度范围;②联系已学的相关学问,确定培育的先后依次;③接种量大,有利于菌种快速达到肯定数量,且可抑制其他杂菌的生长。4.(2011江苏单科,3,2分)下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述,正确的是 ()A.腐乳制作所须要的相宜温度最高B.果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵C.运用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌D.运用的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA答案D果酒制作用的是酵母菌,酵母菌发酵时,最适温度在18~25℃;制果醋时用到的醋酸菌是一种好氧菌,最适生长温度为30~35℃;制腐乳时主要用的菌种是毛霉,其最适温度在15~18℃;酵母菌、醋酸菌和毛霉都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA,故D正确。5.(2024课标全国Ⅲ,37,15分)回答下列与酵母菌有关的问题:(1)分别培育酵母菌通常运用(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麦芽汁琼脂”)培育基,该培育基应采纳灭菌法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上,培育一段时间后可视察到菌落,菌落的含义是。

(2)酵母菌液体培育时,若通入氧气,可促进(填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”);若进行厌氧培育,可促进(填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”)。

(3)制作面包时,为使面包松软通常要在面粉中添加肯定量的酵母菌,酵母菌引起面包松软的缘由是。

答案(1)麦芽汁琼脂高压蒸汽由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体(2)菌体快速增殖乙醇产生(3)酵母菌分解葡萄糖会产生CO2,CO2使面包松软解析本题通过问题并列的命题方式考查酵母菌的培育与应用,属于对科学探究素养的考查。(1)常用含葡萄糖较多的麦芽汁琼脂培育基分别培育酵母菌。培育基常采纳高压蒸汽灭菌法灭菌。菌落是由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。(2)有氧气存在时,酵母菌有氧呼吸产生的大量能量可用于快速增殖;无氧气存在时,酵母菌进行无氧呼吸产生乙醇和CO2。(3)酵母菌进行细胞呼吸可产生CO2,故用酵母菌制作的面包会变得松软。易错警示不同培育基的用途牛肉膏蛋白胨培育基常用于培育细菌,MS培育基常用于植物组织培育,麦芽汁琼脂培育基常用于培育酵母菌。6.(2017课标全国Ⅱ,37,15分)豆豉是大豆经过发酵制成的一种食品。为了探讨影响豆豉发酵效果的因素,某小组将等量的甲、乙两菌种分别接入等量的A、B两桶煮熟大豆中并混匀,再将两者置于相宜条件下进行发酵,并在32h内定期取样观测发酵效果。回答下列问题:(1)该试验的自变量是、。

(2)假如发觉发酵容器内上层大豆的发酵效果比底层的好,说明该发酵菌是。

(3)假如在试验后,发觉32h内的发酵效果越来越好,且随发酵时间呈直线上升关系,则无法确定发酵的最佳时间;若要确定最佳发酵时间,还须要做的事情是。

(4)从大豆到豆豉,大豆中的成分会发生肯定的改变,其中,蛋白质转变为,脂肪转变为。

答案(1)菌种发酵时间(2)好氧菌(3)延长发酵时间,观测发酵效果,最好的发酵效果所对应的时间即为最佳发酵时间(4)氨基酸和肽脂肪酸和甘油解析本题考查传统发酵技术的相关学问。(1)依据题中“甲、乙两菌种”和“32h内定期取样观测发酵效果”可确定该试验的自变量是菌种类型和发酵时间。(2)发酵容器底层缺氧,上层氧气相对足够,上层大豆的发酵效果比底层的好,说明该发酵菌属于好氧菌。(3)由于32h内发酵效果随发酵时间呈直线上升,所以若要确定最佳发酵时间,应当接着延长发酵时间,观测发酵效果,最好发酵效果所对应的时间即为最佳发酵时间。(4)发酵过程中微生物会产生多种蛋白酶和脂肪酶,蛋白酶可使蛋白质分解为小分子的肽和氨基酸,脂肪酶可使脂肪分解为甘油和脂肪酸。学问归纳关于传统发酵技术的3个误区(1)误认为微生物培育基中都需有机碳源、氮源,自养型微生物的培育不需加有机碳源、固氮菌的培育不需加氮源。(2)误认为泡菜制作过程中乳酸和亚硝酸盐的含量都是先增加后削减,在泡菜制作过程中乳酸含量先增加后保持稳定。(3)误认为果酒、果醋制作过程中都须要无氧条件,果醋制作过程中利用的是醋酸菌的有氧呼吸,因此须要有氧条件。7.(2015广东理综,29,16分)泡菜是我国的传统食品之一,但制作过程中产生的亚硝酸盐对人体健康有潜在危害。某爱好小组打算参与“科技创新大赛”,查阅资料得到图。(1)制作泡菜时,泡菜坛一般用水密封,目的是。乳酸菌发酵第一阶段的产物有。

(2)据图,与第3天相比,第8天后的泡菜更适于食用,因为后者;pH呈下降趋势,缘由是。

(3)该小组得到一株“优选”乳酸菌(亚硝酸盐还原酶活力比一般乳酸菌高5倍),拟参照资料的试验方案和食盐浓度(4%~10%),探究与一般乳酸菌相比用“优选”乳酸菌制作泡菜过程中亚硝酸盐含量的凹凸,并确定其最适条件。请你设计一个试验结果记录表,并推想试验结论。答案(16分)(1)创建无氧环境(1分)丙酮酸、[H]、ATP(3分)(2)亚硝酸盐含量已接近最低水平(1分)乳酸积累(2分)(3)结果记录表(6分)亚硝酸盐含量(单位:mg/kg)食盐浓度(%)乳酸菌发酵时间(d)123456789104一般优选7一般优选10一般优选注:其他合理答案酌情给分。推想试验结论:①用“优选”乳酸菌制作泡菜,亚硝酸盐含量更低(1分)②最适条件是亚硝酸盐含量最低时的食盐浓度和发酵时间(2分)解析(1)由于乳酸菌是厌氧细菌,制作泡菜时,泡菜坛一般用水密封,目的是隔绝空气,创建无氧环境。乳酸菌发酵第一阶段的产物是丙酮酸、[H]和ATP。(2)析图可知,8天后的泡菜中亚硝酸盐含量低,更适于食用。制作泡菜过程中,由于乳酸的积累,pH呈下降趋势。(3)该试验的目的是比较“优选”乳酸菌和一般乳酸菌在制作泡菜过程中亚硝酸盐含量的凹凸,并确定最适条件,故表格的设计要体现不同时间不同食盐浓度下两种乳酸菌的亚硝酸盐含量的差异。试验结论应是优选乳酸菌制作的泡菜中亚硝酸盐含量更低,并确定亚硝酸盐含量最低时的食盐浓度和发酵时间。方法技巧设计试验结果记录表时留意将自变量、试验对象和发酵时间三个维度设计在一个表格中。8.(2012海南单科,30,15分)回答下列关于腐乳制作的问题:(1)腐乳是豆腐经微生物发酵后制成的食品。多种微生物参与了该发酵过程,其中起主要作用的微生物是,其产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解为和;其产生的能将豆腐中的脂肪水解为和。

(2)发酵完成后需加盐腌制,加盐还可以抑制生长。

(3)腐乳制作的后期可加入由酒和多种香辛料配制而成的卤汤。卤汤除具有肯定的防腐作用外,还能使腐乳具有独特的。

答案(1)毛霉肽氨基酸脂肪酶甘油脂肪酸(每空2分,共12分)(2)微生物(2分)(3)风味(1分,其他合理答案也给分)解析本题考查腐乳制作过程的相关学问。(1)腐乳制作时是以豆腐为原料,在毛霉以及多种微生物参与下发酵而制成的食品,富含易被人体汲取的多种养分物质,如多肽、氨基酸等。腐乳制作过程中,豆腐中的蛋白质在蛋白酶的作用下被水解为多肽,进而在肽酶的作用下被水解为各种氨基酸;脂肪在脂肪酶的作用下被分解为甘油和脂肪酸。(2)在发酵完成后的腌制过程中,盐能抑制微生物的生长,防止豆腐块腐败变质。(3)卤汤除能防腐外,还可使腐乳具有独特的风味。考点二微生物的培育技术与应用9.(2024江苏单科,31,9分)产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。为筛选产脂肪酶酵母菌株,科研人员开展了相关探讨。请回答下列问题:(1)常规微生物试验中,下列物品及其灭菌方法错误的是(填编号)。

编号①②③④物品培育基接种环培育皿涂布器灭菌方法高压蒸汽火焰灼烧干热臭氧(2)称取1.0g某土壤样品,转入99mL无菌水中,制备成菌悬液,经后,获得细胞密度不同的菌悬液。分别取0.1mL菌悬液涂布在固体培育基上,其中10倍稀释的菌悬液培育后平均长出了46个酵母菌落,则该样本中每克土壤约含酵母菌个。

(3)为了进一步提高酵母菌产酶实力,对分别所得的菌株,采纳射线辐照进行育种。将辐照处理后的酵母菌涂布在以为唯一碳源的固体培育基上,培育一段时间后,依据菌落直径大小进行初筛,选择直径的菌落,纯化后获得A、B两突变菌株。

(4)在处理含油废水的同时,可获得单细胞蛋白,实现污染物资源化。为评价A、B两菌株的相关性能,进行了培育探讨,结果如图。据图分析,应选择菌株进行后续相关探讨,理由是。

答案(1)④(2)梯度稀释4.6×105(或460000)(3)诱变脂肪(或油脂)较大(4)B该菌株增殖速度快,单细胞蛋白产量高;降解脂肪实力强,净化效果好解析(1)涂布器应当用酒精引燃灭菌。(2)将制备的菌悬液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌悬液分别涂布到固体培育基的表面,进行培育,在稀释度足够高的菌悬液里,聚集在一起的酵母菌将被分散成单个细胞,从而能在培育基表面形成单个菌落。依据每克样品中的菌株数=(C÷V)×M可知,该样本中每克土壤约含酵母菌数量为46÷0.1×103=4.6×105。(3)射线辐照可导致菌株发生基因突变,属于诱变育种。因要筛选产脂肪酶酵母菌株,故培育基要以脂肪(或油脂)为唯一碳源。培育基上形成的菌落直径越大,说明产脂肪酶越多,酵母菌产酶实力越强。(4)由图可知,菌株B增殖速度快,单细胞蛋白产量高;降解脂肪实力强,净化效果好,所以应选择菌株B。10.(2024江苏单科,31,8分)酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半,可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培育,这样既可削减污染又可降低生产成本。探讨人员拟从土壤样品中分别该类酵母,并进行大量培育。下图所示为操作流程,请回答下列问题:(1)配制培育基时,依据培育基配方精确称量各组分,将其溶解、定容后,调整培育基的,刚好对培育基进行分装,并进行灭菌。

(2)取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培育皿中,在步骤③中将温度约(在25℃、50℃或80℃中选择)的培育基倒入培育皿混匀,冷凝后倒置培育。

(3)挑取分别平板中长出的单菌落,按步骤④所示进行划线。下列叙述合理的有。

a.为保证无菌操作,接种针、接种环运用前都必需灭菌b.划线时应避开划破培育基表面,以免不能形成正常菌落c.挑取菌落时,应挑取多个菌落,分别测定酵母细胞中甲醇的含量d.可以通过逐步提高培育基中甲醇的浓度,获得甲醇高耐受株(4)步骤⑤中,为使酵母数量快速增加,培育过程中需保证足够的养分和供应。为监测酵母的活细胞密度,将发酵液稀释1000倍后,经等体积台盼蓝染液染色,用25×16型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数,理论上色细胞的个数应不少于,才能达到每毫升3×109个活细胞的预期密度。

答案(8分)(1)pH高压蒸汽(湿热)(2)50℃(3)a、b、d(4)氧气无30解析本题主要考查微生物的培育与计数的相关学问。(1)培育基在定容后、分装前须要调整pH;分装后还须要进行高压蒸汽(湿热)灭菌。(2)倒平板时温度不宜过高,以防烫伤;同时温度也不能太低,以防培育基凝固而无法形成平板,因此倒平板时温度应选择50℃左右。(3)平板划线时,需保证无菌操作,以防混入杂菌而影响分别结果。因此操作过程中所用的接种针、接种环在运用之前都必需灭菌;划线时不能划破培育基表面,以免影响菌落的正常形态进而影响后期视察;挑取菌落时,应挑取单个菌落;通过逐步提高培育基中甲醇的浓度,可获得利用甲醇实力强的菌株,即甲醇高耐受株。(4)⑤为扩大培育过程,欲使酵母数量快速增加,应为酵母菌供应足够的养分和O2。台盼蓝染液能将死的酵母菌染成蓝色,而活的酵母菌不能被染色。假设5个中方格中有x个活酵母菌,由题意可知:[(x×5)÷10-4]×1000×2=3×109,由此解得x=30。方法技巧酵母菌计数的常用方法——血细胞计数板(1)以25格×16格的计数板为例,计数时除了4个角上的中方特别,还要加上中心的一个中方格,共计数5个中方格(共80个小方格)内的酵母菌。(2)计数公式:1mL悬液中的酵母菌数量=(80个小方格内酵母菌数量/80)×400×104×稀释倍数。11.(2017江苏单科,31,7分)苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严峻危害。小明同学打算依据下图操作步骤,从处理废水的活性污泥中分别筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题:(1)酚降解菌富集培育基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作为碳源的有。

(2)将采集到的样品接种培育,苯酚用量应随转接次数增加而渐渐,以达到富集酚降解菌的目的。若如图平板中菌落过于密集,应进一步,以便于菌落计数与分别。制备平板培育基时除了须要水、养分物质外,还必需添加。

(3)如图为连续划线法示意图,在图中(填图中序号)区域更易获得单菌落。

(4)采纳比色测定法(运用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应,下表中1~5号比色管的苯酚浓度应分别为。

管号123456苯酚浓度(mg/L)1假如废水为50mg/L苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,则需将残留液稀释(填序号:①5②10③20)倍后,再进行比色。

答案(7分)(1)蛋白胨、苯酚(2)增加稀释涂布凝固剂(3)③(4)0、0.2、0.4、0.6、0.8③解析本题考查微生物分别的相关学问。(1)酚降解菌培育基中的蛋白胨和苯酚为酚降解菌生长供应碳源。(2)转接的目的之一是富集降解苯酚实力强的酚降解菌,随转接次数增多,培育基中的苯酚含量应渐渐增加。若平板中菌落过于密集,则需进一步稀释,降低菌体密度后再涂布培育,以便于菌落分别与计数。制备平板培育基时,需添加琼脂等凝固剂。(3)连续划线时,在划线的末端菌体密度最低,即在划线的末端最易获得单菌落。(4)1号比色管应为空白比照组,由6号比色管中苯酚浓度知,1~5号比色管苯酚浓度应为0mg/L、0.2mg/L、0.4mg/L、0.6mg/L、0.8mg/L。废水为50mg/L苯酚溶液,降解后残留的苯酚浓度约为50×21%=10.5(mg/L),则需对残留液进行20倍稀释后[10.5÷20=0.525(mg/L)],才可以进行比色。12.(2016课标全国Ⅲ,39,15分)某同学用簇新的泡菜滤液为试验材料分别纯化乳酸菌。分别纯化所用固体培育基中因含有碳酸钙而不透亮,乳酸菌产生的乳酸能溶解培育基中的碳酸钙。回答下列问题:(1)分别纯化乳酸菌时,首先须要用对泡菜滤液进行梯度稀释,进行梯度稀释的理由是

。

(2)推想在分别纯化所用的培育基中加入碳酸钙的作用有和。分别纯化时应选择出的菌落作为候选菌。

(3)乳酸菌在-20℃长期保存时,菌液中常须要加入肯定量的(填“蒸馏水”“甘油”或“碳酸钙”)。

答案(1)无菌水(2分)泡菜滤液中菌的浓度高,干脆培育很难分别得到单菌落(3分)(2)鉴别乳酸菌中和产生的乳酸(或酸)(每空3分,共6分)具有透亮圈(2分)(3)甘油(2分)解析(1)分别纯化乳酸菌时,由于泡菜滤液中菌的浓度高,因此须要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释,其目的是将聚集在一起的乳酸菌分散成单个细胞,以便在培育基表面形成单菌落。(2)乳酸菌代谢过程中可产生乳酸,若在培育基中加入碳酸钙,则碳酸钙既可以中和乳酸,又可以在乳酸菌菌落的四周出现明显透亮圈,据此可以用于乳酸菌的鉴别。(3)乳酸菌在-20℃长期保存时,为了避开水结冰产生冰晶损伤细胞,在菌液中常须要加入肯定量的甘油。13.(2015课标全国Ⅰ,39,15分)已知微生物A可以产生油脂,微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题:(1)显微视察时,微生物A菌体中的油脂通常可用染色。微生物A产生的油脂不易挥发,可选用(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取。

(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落,可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样,并应选用以为碳源的固体培育基进行培育。

(3)若要测定培育液中微生物B的菌体数,可在显微镜下用干脆计数;若要测定其活菌数量,可选用法进行计数。

(4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度,某同学测得相同时间内,在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg,则上述三个温度中,℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度,应围绕℃设计后续试验。

答案(1)苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)萃取法(每空2分,共4分)(2)油脂(3分)(3)血细胞计数板稀释涂布平板(每空2分,共4分)(4)4540(每空2分,共4分)解析本题主要考查了植物油脂的染色和提取方法、选择培育基的配制、微生物的计数以及确定酶的最适温度的试验设计等。(1)脂肪可用苏丹Ⅲ染液(或苏丹Ⅳ染液)进行染色。微生物A产生的油脂不易挥发,不能用水蒸气蒸馏法提取,应用萃取法加以提取。(2)能产生脂肪酶的微生物B可存在于含有油料作物种子的腐烂物的土壤中,为了选择培育,固体培育基上应以油脂作为唯一碳源。(3)测定培育液中的微生物的菌体数,可在显微镜下用血细胞计数板干脆计数;而要测定活菌数,则可利用稀释涂布平板法进行计数。(4)酶量须要最多的温度下,其酶活力最小,即酶活力最小的温度应为45℃。三个温度下酶活力最大的温度是40℃,但40℃不肯定是该酶的最适温度,故应围绕40℃设计后续试验。14.(2015江苏单科,31,8分)人工瘤胃仿照了牛羊等反刍动物的胃,可用来发酵处理秸秆,提高秸秆的养分价值。为了增加发酵效果,探讨人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株,并对其降解纤维素实力进行了探讨。请回答下列问题:(1)在样品稀释和涂布平板步骤中,下列选项不须要的是(填序号)。

①酒精灯②培育皿③显微镜④无菌水(2)在涂布平板时,滴加到培育基表面的菌悬液量不宜过多的缘由是。

(3)向试管内分装含琼脂的培育基时,若试管口粘附有培育基,须要用酒精棉球擦净的缘由是。

(4)刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。探讨人员在刚果红培育基平板上,筛到了几株有透亮降解圈的菌落(见图)。图中降解圈大小与纤维素酶的有关。图中降解纤维素实力最强的菌株是(填图中序号)。

(5)探讨人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4,在不同温度和pH条件下进行发酵,测得发酵液中酶活性的结果见下图,推想菌株更适合用于人工瘤胃发酵,理由是

。

答案(1)③(2)培育基表面的菌悬液会出现积液,导致菌体积累,影响分别效果(3)避开培育基污染棉塞(4)量与活性①(5)J4发酵过程会产热和产酸,J4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高解析本题考查微生物培育与分别的相关学问。(1)样品稀释需用无菌水,在培育基中涂布接种时需在酒精灯的火焰旁进行。(2)涂布平板时,滴加到培育基表面的菌液一般为0.1mL,量过大将导致菌体密度过大而影响分别效果。(3)分装含琼脂的培育基时,试管口粘有培育基易造成杂菌滋生,故应用酒精棉球擦净。(4)纤维素酶活性越大,菌落四周被分解的纤维素量也越大,菌落四周的透亮圈也就越大。故图中降解纤维素实力最强的菌株为①。(5)发酵过程中由于呼吸作用产生较多的热量和有机酸,故应选择较高温度和酸性环境中活性较高J4酶。15.(2014课标全国Ⅰ,39,15分)植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题:(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶,其中的葡萄糖苷酶可将分解成。

(2)在含纤维素的培育基中加入刚果红(CR)时,CR可与纤维素形成色复合物。用含有CR的该种培育基培育纤维素分解菌时,培育基上会出现以该菌的菌落为中心的。

(3)为从富含纤维素的土壤中分别获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培育基(成分见下表):酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水培育基甲++++-++培育基乙+++-+++注:“+”表示有,“-”表示无。据表推断,培育基甲(填“能”或“不能”)用于分别和鉴别纤维素分解菌,缘由是;培育基乙(填“能”或“不能”)用于分别和鉴别纤维素分解菌,缘由是

。

答案(1)纤维二糖葡萄糖(2)红透亮圈(3)不能液体培育基不能用于分别单菌落不能培育基中没有纤维素,不会形成CR—纤维素红色复合物,即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌解析(1)纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分:C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶,前两种酶使纤维素分解成纤维二糖,葡萄糖苷酶将纤维二糖分解成葡萄糖。(2)刚果红可与纤维素形成红色复合物,但并不与水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。用含有刚果红的纤维素培育基培育纤维素分解菌时,由于纤维素被分解,红色复合物无法形成,培育基中会出现以纤维素分解菌为中心的透亮圈。(3)培育基甲未运用琼脂,为液体培育基,不能用于分别单菌落。含有纤维素和刚果红(CR)的培育基可分别和鉴别纤维素分解菌。16.(2014四川理综,10,11分)有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期运用会污染环境。探讨发觉,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分别降解苯磺隆的菌株和探究其降解机制的试验过程如图甲、乙所示。(1)微生物生长繁殖所需的主要养分物质有碳源、水、四类,该试验所用的选择培育基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其缘由是。

(2)与微生物培育基相比,植物组织培育的培育基常需添加生长素和,这些植物激素一般须要事先单独配制成保存备用。

(3)纯化菌株时,通常运用的划线工具是。划线的某个平板培育后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,其次划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有

。

(4)为探究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培育液过滤离心,取上清液做图乙所示试验。该试验的假设是,该试验设计是否合理?为什么?。

答案(1)氮源和无机盐只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长繁殖(2)细胞分裂素母液(3)接种环①接种环灼烧后未冷却;②划线未从第一区域末端起先(4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质不合理,缺少空白比照解析(1)微生物生长繁殖所需的主要养分物质包括水、碳源、氮源和无机盐;在培育基中加入苯磺隆作为唯一碳源,可将只能利用此碳源的菌种筛选出来。(2)植物组织培育基与微生物培育基相比,经常须要添加植物激素,包括生长素和细胞分裂素;这些植物激素事先按肯定的质量浓度单独配成母液保存备用。(3)纯化菌株时,通常用接种环进行划线操作;其次区域划第一条线时,接种环灼烧后未冷却,致使所划第一条线上无菌落。若其次次划线未从第一区域末端起先,则也会导致其次划线区域第一条线上无菌落。(4)由图乙可知本试验的目的是探究能降解苯磺隆的物质是否是该菌种所产生的蛋白质。为使试验设计更合理还需再设置一个比照组,将蛋白酶溶液改为等量的蒸馏水,其余设置不变。17.(2011课标,39,15分)有些细菌可分解原油,从而消退由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题:(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培育基上。从功能上讲,该培育基属于培育基。

(2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采纳的接种方法有两种,即和。

(3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落四周分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解实力。

(4)通常状况下,在微生物培育过程中,试验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、和。无菌技术要求试验操作应在酒精灯旁边进行,以避开四周环境中微生物的污染。

答案(1)原油选择(2)平板划线法稀释涂布平板法(3)强(4)干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰解析(1)从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株,运用的培育基应是以原油为唯一碳源的选择培育基,通过限制碳源这种养分成分,来促进能高效降解原油的菌株的生长,抑制其他微生物的生长。(2)菌种纯化培育时,常采纳平板划线法和稀释涂布平板法接种。(3)当固体培育基上长出单菌落后,可通过比较菌落四周分解圈的大小,来推断菌株降解原油实力的大小。一般来说,分解圈越大说明该菌株的降解实力越强,反之则越弱。(4)试验室培育微生物的过程中,常用灼烧灭菌法对接种环、接种针、试管口、瓶口等进行灭菌;用高压蒸汽灭菌法对培育基、试管等进行灭菌;用干热灭菌法对玻璃器皿(吸管、培育皿)和金属用具等进行灭菌。试验操作应在酒精灯火焰旁进行,因为酒精灯火焰旁可形成一个无菌环境,可防止微生物的污染。【3年模拟】时间:40分钟分值:45分一、单项选择题(每小题2分,共14分)1.(2025届山东威海月考,13)下列有关果酒、果醋制作的说法中,正确的是 ()A.制作果酒过程中,须要往接种酵母菌的簇新葡萄汁中始终通入无菌空气B.发酵过程中全部材料都须要进行严格的灭菌处理,以避开杂菌污染C.将果酒流经发酵瓶制成果醋,需保证发酵瓶中有足够的O2D.在用果汁制作果酒的过程中,发酵瓶中溶液pH的改变是渐渐增大答案C2.(2024山东等级考模拟,13)在试验室中可利用酵母菌发酵的方式制作葡萄酒,下列说法正确的是 ()A.葡萄糖在酵母菌细胞的线粒体内被分解B.制作葡萄酒时酵母菌先在有氧条件下大量增殖C.制作过程中酵母菌始终处于碱性环境D.酵母菌的发酵产物不会抑制自身的代谢活动答案B3.(2024山东烟台一模,14)如图是以鲜蓝莓为原料自然发酵制作蓝莓酒和蓝莓醋的过程简图。下列叙述错误的是 ()A.去除蓝莓枝梗应在冲洗之后,目的是防止杂菌污染B.过程③在氧气、糖源足够条件下可干脆发酵为蓝莓醋C.在过程④时,榨出的蓝莓汁需经过高压蒸汽灭菌后才能密闭发酵D.过程⑤中酒精可作为醋酸菌的碳源和能源答案C4.(2024山东济南莱芜一中开学考,13)泡菜(乳酸发酵过的蔬菜)是很多亚洲国家的传统食品,在发酵液中通常发觉的微生物包括乳酸菌、酵母和丝状真菌。如图表示这3种不同微生物群中活细胞数和卷心菜乳酸发酵过程中pH的改变。发酵液中的溶解氧随时间下降,在第22天被完全耗尽。下列说法错误的是 ()A.pH从第1天到第3天的下降主要由乳酸菌产生的乳酸引起B.酵母细胞从第10天到第22天的生长与发酵液中的氧气有关C.酵母细胞在第26天后起先产生酒精D.一些丝状真菌在低pH下表现出较高的耐受性答案C5.(2024山东济宁一中一轮检测,14)图甲是果酒和果醋发酵的装置图,图乙是果酒和果醋制作过程中发生的物质改变。下列有关叙述中,正确的是 ()A.甲装置可先用于果醋的制作,后用于果酒的制作B.用甲装置制作果酒时,要加入适量的酵母菌,且始终关紧阀bC.酵母菌是嗜温菌,所以果酒发酵所需的最适温度高于果醋发酵D.过程③和④都须要氧气的参与,但反应场所不同答案D6.(2025届山东菏泽月考,20)下列有关微生物培育的叙述,正确的是 ()A.菌种分别和菌落计数都可以运用固体培育基B.培育微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌C.纯化培育时,培育皿应倒置放在恒温培育箱内的摇床上培育D.视察菌落时,应将培育皿盖拿掉以利于看清菌落的形态特征答案A7.(2024山东聊城开学检测,13)某些土壤细菌可将尿素分解成NH3,NH3再转化为NO3-、NH4+等被植物汲取。下列关于土壤中分解尿素的细菌的分别A.分解尿素的细菌是以尿素的分解产物CO2为碳源的B.倒平板时应将打开的培育皿盖放到一边,以免培育基溅到皿盖上C.培育基中KH2PO4等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定D.若试验组菌落平均数为37个/平板,空白比照平板上有3个菌落,则本组菌落数的平均值为34个/平板答案C二、不定项选择题(每小题3分,共12分)8.(2024山东潍坊寿光一中3月月考,18)下列关于果酒、果醋、腐乳和泡菜制作的叙述,错误的是 ()A.利用酵母菌酿酒时,发酵时间越长,产生的酒精量就越多B.制作果醋的醋酸菌,属于严格的厌氧型微生物C.毛霉、曲霉等真核生物参与了腐乳的发酵D.参与泡菜制作的微生物是一种需氧