2025届青海省青海师范大学第二附属中学生物高三第一学期期末学业水平测试试题含解析

2025届青海省青海师范大学第二附属中学生物高三第一学期期末学业水平测试试题注意事项：1．答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其它答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上，写在本试卷上无效。3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．如图为显微镜下观察到的洋葱根尖有丝分裂过程图，相关叙述正确的是（）A．①时期的细胞已经完成中心粒的复制B．②时期染色体形态数目最清晰C．④时期细胞中部质膜向内凹陷缢裂D．①与③细胞中的核DNA数量相同2．某淡水湖曾经水草稀少，经过治理后，现在水草茂盛、鱼游虾嬉、鸟戏湖面，生物资源逐渐丰富。下列有关叙述错误的是（）A．可以用标志重捕法调查湖中某种鱼的种群密度B．湖泊浅水区和深水区生物种类不同体现的是群落的水平结构C．该淡水湖中的水草、鱼、虾、鸟构成了一个群落D．该湖由曾经的水草稀少演替至现在的水草茂盛属于次生演替3．下列有关糖类的叙述中正确的是：（）A．在细胞膜上糖类均与蛋白质结合形成糖蛋白B．所有糖类都是生物体的主要能源物质C．在ATP、RNA和DNA中均有核糖D．葡萄糖是构成纤维素、淀粉、糖原的基本单位4．施用植物生长调节剂调控植物生长发育是农业生产中的一项重要措施，多效唑是应用广泛的一种植物生长调节剂。研究小组探究不同浓度的多效唑对小麦植株内源激素和叶绿素含量的影响，实验结果如下表。据表推断合理的是（）组别及处理条件激素种类及测量值ABCD蒸馏水10mg/kg多效唑15mg/kg多效唑20mg/kg多效唑细胞分裂素（mg/kg）0.020.030.050.04赤霉素（mg/kg）0.50.410.320.44叶绿素含量（SPAD值）50556156A．多效唑可通过增加细胞分裂素含量，减少赤霉素的含量，使叶绿素含量增加B．多效唑影响叶绿素含量的最适浓度是15mg/kgC．不同浓度的多效唑溶液作用效果一定不同D．叶绿素含量是多效唑、细胞分裂素和赤霉素等多种植物激素共同调节的结果5．关于生物体内物质和结构的叙述，正确的是（）A．蛋白质分子在水浴高温下肽键断裂而变性失活B．人体细胞的核DNA和转运RNA中均含有碱基对C．线粒体内膜和叶绿体内膜上都有ATP的产生D．生物膜系统的主要作用体现在细胞间的协调配合6．近些年，研究人员在细胞减数分裂研究中有一些新发现，如图所示。下列叙述错误的是（）A．图示过程表示卵细胞的形成，细胞②表示初级卵母细胞B．常规减数分裂过程中等位基因的分离和自由组合都发生在MⅠ后期C．逆反减数分裂中MⅠ后期姐妹染色体分开，MⅡ后期同源染色体分离D．常规和逆反减数分裂形成的子细胞中的染色体和核DNA数目都会减半二、综合题：本大题共4小题7．（9分）在肯尼亚草原上，举腹蚁居住在金合欢树的空心刺状叶中，取食小叶叶尖富含蛋白质的组织-Beltian小体。举腹蚁常常为金合欢树清除其他的遮光植物枝叶，驱赶长颈鹿等植食性动物。长颈鹿细长的舌头有厚皮质，还能灵巧地避开叶刺；金合欢树叶被啃食后，会产生有苦味的单宁酸，同时释放一种气体告知周围的金合欢树分泌单宁酸。长颈鹿尝到苦味后，迅速逆风寻找还未接收到信号的金合欢树。回答下列问题：（l）除了捕食关系外，举腹蚁与金合欢树的种间关系还有____。金合欢树的叶刺向长颈鹿传递的信息类型是____信息。（2）金合欢树叶被啃食后产生的单宁酸让动物有强烈的恶心感，植食性动物会转食其他植物，这说明生态系统中的信息传递具有____作用。上述物种在相互影响中发展，进化出了适应性的特征或行为的现象称为____。（3）环境保护者曾为了保护一棵有18000多年的金合欢树，用栅栏将它隔绝起来，以防止大象、长颈鹿等大型动物啃食。一段时间后，金合欢树叶分泌Beltian小体减少，最终死亡了。从种间关系的角度出发，你在保护生物多样性上得到了什么启示？____。8．（10分）羽毛的成分主要是角蛋白，是一类结构稳定、不溶于水的蛋白质。目前缺乏对其高效降解的处理方法。实验人员从废弃羽毛堆积处的土壤中分离筛选出具有高效降解羽毛角蛋白的细菌。请回答下列问题：（1）筛选高效降解羽毛角蛋白的细菌需从废弃羽毛堆积处的土壤中取样，其原因是_________________。（2）筛选高效降解羽毛角蛋白的细菌的培养基中应加入__________作为唯一碳源，该培养基中还需要加入适量的K2HPO4和KH2PO4，其作用是__________，对培养基灭菌的常用方法是__________。（3）角蛋白酶是羽毛降解菌的一种分泌蛋白，为了获得角蛋白酶以测定其活性，应让羽毛降解菌发酵，然后将发酵液离心，再从__________（填“沉淀物”或“上清液”）取样。为了将角蛋白酶和其他蛋白质分离，可用电泳法分离蛋白质，电泳法可以根据蛋白质分子__________的不同，将蛋白质分离。不同角蛋白酶活性不同的直接原因是____________________。9．（10分）萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。10．（10分）已知某果蝇的翅型有正常翅、斑翅、残翅三种，受两对等位基因控制。纯合的残翅雄果蝇和纯合的正常翅雌果蝇杂交，F1全为正常翅，F1的雌雄果蝇自由交配，F2中斑翅：残翅：正常翅=3：4：9，且斑翅全为雄性。据此回答下列问题：（1）这两对等位基因在何种染色体上：______________________。（2）F2的正常翅果蝇基因型有_______种。F2的正常翅果蝇中雌性与雄性比值为________。（3）若F2残翅果蝇自由交配，则后代表现型为___________。（4）若F2斑翅果蝇与纯合的残翅果蝇杂交，后代中残翅所占的比例为___________。11．（15分）海带是我国北方大规模养殖的食用海藻，具有重要的经济价值。养殖区重金属离子超标会造成海带大幅减产。（1）研究发现，在一定浓度的Cu2+溶液中，短时间内海带细胞中叶绿素含量显著下降，同时Cu2+还可通过抑制光合电子传递过程，使ATP的合成受阻，直接抑制暗反应中__________过程。（2）科研人员定量研究了水体中Cu2+对海带光合作用、呼吸作用的影响。①将海带分别放入含不同浓度Cu2+溶液的透明瓶中，测定初始时瓶内溶氧量为A。将瓶口密封置于光下一段为时间后，测定瓶内溶氧量为B。本实验用单位质量海带在单位时间内引起的溶氧量变化来表示海带的净光合作用速率。计算公式为：_______/（t·w）（w：海带湿重；t：反应时间）。在利用同样装置研究呼吸作用时，需要对装置进行_________________处理。②由图可知，在Cu2+浓度为1．22mg/L时，呼吸耗氧率_______光合产氧率，此浓度下的真光合速率_______Cu2+浓度为2．52mg/L的下的真光合速率。综合分析，不同浓度的Cu2+对海带光合作用的影响是_____________，对海带呼吸作用的影响是___________。（3）究若想进一步从细胞水平上探究Cu2+对海带光合作用及呼吸作用的影响，可在电子显微镜下观察相关细胞器的形态、结构、数量。根据上述实验信息，推测Cu2+对__________（填细胞器名称）破坏较小。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、D【解析】

分析图示，表示显微镜下观察到的洋葱根尖细胞有丝分裂部分细胞图象，其中①—④分别处于有丝分裂的中、后、前、末期，据此分析作答。【详解】A、洋葱为高等植物，无中心体，A错误；B、②为有丝分裂后期，染色体形态数目最清晰的时期为中期，B错误；C、植物细胞有丝分裂末期不会发生质膜向内凹陷缢裂的现象，C错误；D、①有丝分裂中期与③有丝分裂前期，细胞中的核DNA数量相同，D正确。故选D。【点睛】本题考查观察细胞有丝分裂实验、细胞观察实验，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验操作步骤、实验现象、实验仪器的使用方法等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。2、C【解析】

1、种群是在一定空间和时间内，同种生物所有个体的集合体。种群的特征包括数量特征、遗传特征和空间特征，其中种群密度是种群最基本的数量特征。种群是生物进化和繁殖的基本单位，生物进化的实质是种群基因频率的定向改变。2、群落的空间结构：（1）垂直结构：植物群落的垂直结构表现垂直方向上的分层性，其中植物的垂直结构决定了动物的垂直分层。（2）水平结构：水平方向上由于光照强度地形明暗湿度等因素的影响，不同地段上分布着不同的生物种群。3、调查种群密度常用样方法和标志重捕法，样方法适用于植物和活动能力弱、活动范围小的动物，标志重捕法适用于活动能力强、活动范围广的动物。调查物种丰富度可用取样器取样法调查。【详解】A、鱼活动范围较大，可以用标志重捕法调查其种群密度，A正确；B、湖泊浅水区和深水区生物种类不同体现的是群落的水平结构，B正确；C、群落是指同一时间内聚集在一定区域中各种生物种群的集合，而该淡水湖中的水草，鱼、虾、鸟属于该淡水湖的部分生物，C错误。D、该湖由曾经的水草稀少演替至现在的水草茂盛属于次生演替，D正确。故选C。【点睛】本题主要考查种群和群落，考查学生的理解能力。3、D【解析】

生物大分子以碳链为骨架。多糖、蛋白质、核酸等都是生物大分子，都是由许多基本的组成单位连接而成的，这些基本单位称为单体，这些生物大分子又称为单体的多聚体。例如，组成多糖的单体是单糖，组成蛋白质的单体是氨基酸，组成核酸的单体是核苷酸。每一个单体都以若干个相连的碳原子构成的碳链为基本骨架，由许多单体连接成多聚体。糖类分类与功能元素

类别存在生理功能

糖类

C、H、O

单糖核糖（C5H10O5）

主细胞质核糖核酸的组成成分；

脱氧核糖C5H10O4

主细胞核脱氧核糖核酸的组成成分

六碳糖：葡萄糖

果糖C6H1②O6

主细胞质是生物体进行生命活动的重要能源物质二糖C1②H②②O11

麦芽糖、蔗糖植物

乳糖

动物多糖

淀粉、纤维素

植物细胞壁的组成成分，重要的储存能量的物质；

糖原（肝、肌）

动物【详解】A、在细胞膜上有些糖类和脂质（主要是固醇）结合，形成糖脂，A错误；B、纤维素是多糖，是植物细胞壁的主要成分，但不是植物细胞的能源物质，动物也不能利用纤维素，B错误；C、在ATP、RNA中均有核糖，而在DNA中的是脱氧核糖，C错误；D、葡萄糖是多糖的单体，因此葡萄糖是构成纤维素、淀粉、糖原的基本单位，D正确。故选D。4、A【解析】

植物激素：植物体内一定部位产生，从产生部位运输到作用部位，对植物的生长发育有显著影响的微量有机物，包括生长素、赤霉素、细胞分裂素、脱落酸和乙烯生长素促进植物的伸长生长、促进插枝生根。主要作用于植物分生区和嫩芽的尖端。赤霉素促进细胞伸长，从而引起茎秆伸长和增高，主要作用于植物茎部分生区。细胞分裂素促进细胞分裂和扩大，诱导芽的分化，延缓叶片衰老的作用，主要作用于植物根部分生区。【详解】A、通过表格数据分析可知，使用多效唑的组别中的赤霉素水平低于对照组，细胞分裂素的水平高于对照组，实验组的叶绿素含量都高于对照组，A正确；B、由实验数据可知，多效唑影响叶绿素含量的最适浓度应该在10～20mg/kg，无法确定15mg/kg即为最适浓度，B错误；C、通过表格数据分析可知，多效唑影响叶绿素含量的在10～20mg/kg之间，先增加后下降，所以，不同浓度的多效唑溶液作用效果可能相同，C错误；D、植物的生长发育是多种激素共同作用的结果，由实验数据分析可知，叶绿素含量是细胞分裂素和赤霉素等多种植物激素共同调节的结果，多效唑是一种植物生长调节剂，不是植物激素，D错误。故选A。5、B【解析】

高温、强酸、强碱破坏蛋白质的空间结构，使蛋白质变性。线粒体和叶绿体都可以产生ATP，其中有氧呼吸第二、三阶段分别在线粒体基质和线粒体内膜上进行，两阶段均产生ATP；光合作用光反应阶段在叶绿体类囊体薄膜上进行，产生ATP。生物膜系统包括细胞器膜、细胞膜和核膜等，作用：细胞膜使细胞具有一个相对稳定的内部环境，并在细胞与外部环境进行物质运输、能量转换和信息传递的过程中起着决定性的作用；广阔的膜面积为多种酶提供了大量的附着位点，有利于许多化学反应的进行；生物膜将细胞器分开，使细胞内同时进行的多种化学反应互不干扰，使生命活动高效、有序地进行。【详解】A、高温破坏蛋白质分子的空间结构，不会使肽键断裂，A错误；B、人体细胞的核DNA分子中碱基成对存在，转运RNA中含有部分碱基对，B正确；C、有氧呼吸第三阶段在线粒体内膜上产生ATP，但叶绿体内膜上不能产生ATP，C错误；D、生物膜的组成成分和结构很相似，在结构和功能上紧密联系，体现了细胞内各种结构之间的协调配合，D错误；故选B。6、B【解析】

分析题图可知：1.常规减数分裂过程：MⅠ时同源染色体分离，姐妹染色单体未分离；MⅡ时，姐妹染色单体分开。2.逆反减数分裂过程：MⅠ时姐妹染色单体分开，同源染色体未分离；MⅡ时，同源染色体分离。【详解】A、由题图可知，在减数分裂过程中细胞质的分配是不均等的，因此是卵细胞形成的过程，A正确；B、常规减数分裂过程中，等位基因的分离和非等位基因的自由组合发生在MⅠ后期，B错误；C、逆反减数分裂过程：MⅠ时姐妹染色单体分开，同源染色体未分离，MⅡ时，同源染色体分离，C正确；D、常规和逆反减数分裂形成的子细胞中的染色体和核DNA数目都会减半，D正确。故选B。【点睛】本题以卵细胞的形成过程图解，结合“逆反减数分裂”图，考查了减数分裂的有关知识，要求考生能够准确获取图示信息，识别其中各细胞的名称；明确一个卵原细胞只能产生一个卵细胞。二、综合题：本大题共4小题7、互利共生物理调节生物种间关系，以维持生态系统的稳定共同进化捕食者的存在对被捕食者并不是有害无益，长颈鹿等动物啃食金合欢树的叶片一定程度上能促进金合欢树叶生长。生态系统的各个成分之间是紧密联系的一个统一整体，因此，保护生物多样性不能人为地阻断食物链，破坏种间关系【解析】

1、信息包括：物理信息：如光、声、温度、湿度、磁力等；化学信息：如生物碱、有机酸等物质；行为信息：如动物的行为。2、信息传递在生态系统中的作用：（1）个体：生命活动的正常进行，离不开信息的传递。（2）种群：生物种群的繁衍，离不开信息的传递。（3）群落和生态系统：能调节生物的种间关系，以维持生态系统的稳定。3、共同进化：不同物种之间，生物与无机环境之间在相互影响中不断进化和发展，这就是共同进化。【详解】（1）据题干信息“举腹蚁居住在金合欢树的空心刺状叶中，取食小叶叶尖富含蛋白质的组织-Beltian小体。举腹蚁常常为金合欢树清除其他的遮光植物枝叶，驱赶长颈鹿等植食性动物”，举腹蚁与金合欢树的种间关系是捕食和互利共生。金合欢树的叶刺向长颈鹿传递的信息类型是物理信息。（2）信息使植食性动物会转食其他植物，这说明生态系统中的信息传递能调节生物种间关系，以维持生态系统的稳定。上述物种在相互影响中发展，进化出了适应性的特征或行为的现象称为共同进化。（3）合欢树被保护后反而死亡，说明了捕食者的存在对被捕食者并不是有害无益，长颈鹿等动物啃食金合欢树的叶片一定程度上能促进金合欢树叶生长。生态系统的各个成分之间是紧密联系的一个统一整体。因此，保护生物多样性不能人为地阻断食物链，破坏种间关系。【点睛】本题考查种间关系、生态系统的信息传递和生物多样性的相关知识，同时（3）需要结合共同进化的知识进行分析。8、废弃羽毛堆积处的土壤中含有丰富的羽毛降解菌角蛋白提供无机盐，并调节pH高压蒸汽灭菌法上清液带电性质的差异以及分子本身的大小、形状等酶的空间结构不同【解析】

1.培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。培养基的分类：①按物理性质分物，分为固体培养基和液体培养基和半固体培养基，固体培养基中含有凝固剂，一般为琼脂；根据化学成分分，分为天然培养基和合成培养基。两者的区别是天然培养基成分不确定，合成培养基成分的含量是确定的；按培养目的分，分为选择确养基和鉴别培养基，选择培养基主要是培养基主要是培养、分离特定的微生物，培养酵母菌可在培养基中加入青霉素，鉴别培养基可以鉴定不同的微生物。比如鉴别饮用水中是否含有大肠杆菌，可以用伊红-美蓝培养基。如果菌落呈深紫色，并有金属光泽，说明含有大肠杆菌。2.电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上正电或负电。在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。

电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。【详解】（1）废弃羽毛堆积处的土壤中含有丰富的羽毛降解菌，因此需要从废弃羽毛堆积处的土壤中取样，以达到筛选高效降解羽毛角蛋白的细菌的目的。（2）筛选高效降解羽毛角蛋白的细菌的培养基中应加入角蛋白作为唯一碳源，该培养基中还需要加入适量的K2HPO4和KH2PO4，起到提供无机盐，并调节pH的作用，通常用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。（3）角蛋白酶是羽毛降解菌的一种分泌蛋白，羽毛降解菌将其分泌到培养液中，因此，为了获得角蛋白酶，应从羽毛降解菌的发酵液中获取，具体做法为：让羽毛降解菌发酵，然后将发酵液离心，获取上清液，从中取样再用电泳法分离蛋白质，电泳法的原理是根据蛋白质分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状等的不同，将蛋白质分离。蛋白质的空间结构决定了蛋白质的活性，因此不同角蛋白酶活性不同的直接原因是酶的空间结构不同。【点睛】熟知分离微生物的原理和操作过程是解答本题的关键，利用电泳分离蛋白质的原理也是本题的考查点之一。9、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术．此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。3、重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第四步：目的基因的检测和表达1、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。2、其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。3、最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原——抗体杂交。4、有时还需进行个体生物学水平的鉴定，如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。【详解】（1）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA连接酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒；大肠杆菌作为受体细胞，需要用氯化钙处理，以便重组质粒的导入。（2）①根据题意和图示分析，经过4次PCR技术后获得了新的基因，这是一种定点的基因突变技术。②与研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），因此4次PCR应该分别选择如图所示的引物如下表所示：引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√（3）根据实验中的对照原则，若要比较新蛋白A的表达效率是否提高，则需设置三组实验实验变量的处理分别为：仅含新蛋白质A的重组质粒，仅含蛋白A的重组质粒和空白对照（仅含空质粒，以排除空质粒可能产生的影响）。因此，将含有新蛋白A基因的重组质粒和含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用抗原——抗体杂交方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。由于蛋白A（或新蛋白A）具有抗菌作用，所以为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较抑菌圈的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，是因为蛋白A基因的发酵产物对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高。【点睛】本题主要考查基因工程、PCR技术等相关知识，考生需要理解和记忆相关知识，并学会应用所学知识正确答题。10、一对位于常染色体上，另一对位于X染色体上62：1全为残翅1/3【解析】

由题意可知，果蝇的翅型受两对等位基因的控制，根据子二代中斑翅：残翅：正常翅=3：4：9，可以判断两对等位基因符合基因的自由组合定律；又因为子二代中斑翅均为雄性，即雌雄的表现型不一致，故可以确定其中一对等位基因位于X染色体上。【详解】（1）F2代斑翅全为雄性，说明有性状与性别相联系，有基因在X染色体上。F1代自由交配产生的F2代至少有16种配子的组合方式（9+3+4），即两对等位基因自由组合。因此两对等位基因一对位于常染色体上，另一对位于X染色体上。（2）设两对等位基因为A、a，B、b，则亲本为aaXbY，AAXBXB.F1代为AaXBXb，AaXBY，F1代自由交配后F2代为A_XB_（正常）：A_XbY（斑翅）：aa__（残翅）=9：3：4