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文档简介
生物技术实践一、单选题1.某学者欲探讨被石油污染过的土壤中细菌数量,并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是()A.利用平板划线法对细菌进行计数B.用以石油为唯一碳源的培育基筛选C.采纳稀释涂布平板法分别菌种D.称取和稀释土壤样品时应在火焰旁2.下列有关生物技术实践操作的叙述错误的是()A.果醋发酵过程中,要适时充气,有利于醋酸菌的代谢B.制作腐乳时,加盐腌制可使豆腐块变硬且能抵制杂菌生长C.制备固定化酵母细胞时,配制海藻酸钠溶液需小火或间断加热D.家庭制作果酒时,需用洗涤剂反复冲洗葡萄表面,发酵效果才好3.以下关于猪血红蛋白提纯的描述,不正确的是()A.洗涤红细胞时,运用生理盐水可防止红细胞裂开B.猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少C.血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分别过程的监测D.在凝胶色谱法分别过程中,血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢4.下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述,正确的是()A.腐乳制作所须要的相宜温度最高B.果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵C.运用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌D.运用的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA5.能够测定样品活菌数的方法是()A.稀释涂布平板法B.干脆计数法C.质量法D.比浊法6.在泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量变更曲线正确的是()A.答案AB.答案BC.答案CD.答案D7.下图中所示的酶固定化技术中属于包埋法的一组是()A.①②B.①③④C.①④D.③④8.某探讨小组从有机废水中分别微生物用于废水处理。下列叙述正确的是()A.培育基分装到培育皿后进行灭菌B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C.接种后的培育皿须放在光照培育箱中培育D.培育过程中每隔一周视察一次9.本试验中有三次过滤:⑴过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液⑵过滤含粘稠物的0.14mol/LNaCl溶液⑶过滤溶解有DNA的2mol/LNaCl溶液以上三次过滤分别为了获得()A.含核物质的滤液、纱布上的粘稠物、含DNA的滤液B.含核物质的滤液、滤液中DNA粘稠物、含DNA的滤液C.含核物质的滤液、滤液中DNA粘稠物、纱布上的DNAD.含较纯的DNA滤液、纱布上的粘稠物、含DNA的滤液10.通过选择培育基可以从混杂的微生物群体中分别出所需的微生物。在缺乏氮源的培育基上大部分微生物无法生长;在培育基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长;在培育基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分别出()①大肠杆菌②霉菌③放线菌④固氮细菌A.④②③B.①②③C.①③④D.只有③④11.探讨者从冰川土样中分别获得了具有较高脂肪酶活性的青霉菌菌株,为了在此基础上获得脂肪酶活性更高的菌株,最可行的做法是()A.用紫外线照耀青霉菌菌株,再进行筛选B.将青霉菌菌株与能高效水解蛋白质的菌株混合培育,再进行筛选C.将能高效水解蛋白质的菌株的基因导入青霉菌菌株,再进行筛选D.设置培育基中各种养分成分的浓度梯度,对青霉菌菌株分别培育,再进行筛选12.下列有关生物技术实践的叙述正确的是A.在用酒精析出DNA时,要运用冷酒精B.在50~60℃水浴中,DNA遇二苯胺试剂后即呈蓝色C.加酶洗衣粉可快速去除各种衣料上的顽固污渍D.利用固定化酵母细胞进行发酵,糖类的作用只是作为反应底物13.下列有关微生物试验的叙述,不正确的是A.获得纯净培育物的关键是防止杂菌污染B.平板划线法可用于微生物的计数C.分别不同的微生物要采纳不同的稀释度D.视察菌落的特征可以用来进行菌种的鉴定14.某爱好小组拟用组织培育繁殖一种珍贵花卉,其技术路途为“取材→消毒→愈伤组织培育→出芽→生根→移栽”。下列有关叙述,错误的是()A.消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又削减消毒剂对细胞的损害B.在愈伤组织培育中加入细胞融合的诱导剂,可获得染色体加倍的细胞C.出芽是细胞再分化的结果,受基因选择性表达的调控D.生根时,培育基通常应含α-萘乙酸等生长素类调整剂15.下列是关于“检测土壤中细菌总数”试验操作的叙述,其中错误的是()A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培育基,经高温、高压灭菌后倒平板B.取104,105,106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL,分别涂布于各组平板上C.将试验组和比照组平板倒置,37℃恒温培育24~48小时D.确定比照组无菌后,选择菌落数在300以上的试验组平板进行计数16.用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数量,其结果与实际值相比()A.比实际值高B.比实际值低C.和实际值一样D.可能比实际值高,也可能比实际值低17.无菌技术是植物组织培育能否获得胜利的关键,以下说法正确的是()①由于植物组织培育所利用的植物材料体积小、抗性差,对无菌操作的要求特别严格②对培育基及器械用高压蒸汽灭菌③对培育材料进行表面灭菌时,一方面要考虑药剂的消毒效果,另一方面还要考虑植物材料的耐受实力④培育中不同药剂、不同植物材料,甚至不同器官要区分对待⑤对培育材料可用高压蒸汽灭菌⑥假如不当心引起污染,将可能造成培育工作前功尽弃A.①②③④⑤B.①②③④C.①②③④⑥D.①②③④⑤⑥18.下列关于细菌的叙述,错误的是()A.硝化细菌能以NH3作为氮源和能源物质B.某些细菌可以利用光能固定CO2合成有机物C.生长因子是某些细菌生长过程中须要额外补充的养分物质D.含伊红和美蓝试剂的培育基不能用来鉴别牛奶中的大肠杆菌19.卵原细胞在进行DNA复制时,细胞中不行能出现的是()A.解旋B.蛋白质合成C.基因突变D.基因重组20.欲从土壤中分别出能分解尿素的细菌,下列试验操作中不正确的是()A.将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释B.同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板C.可将未接种的培育基在相同条件下培育作为比照D.用加入刚果红指示剂的培育基可筛选出分解尿素的细菌二、非选择题21.某生物爱好小组开展DNA粗提取的相关探究活动,详细步骤如下:材料处理:称取簇新的花菜、辣椒和蒜黄各2份,每份10g。剪碎后分成两组,一组置于20℃、另一组置于-20℃条件下保存24h。DNA粗提取:第一步:将上述材料分别放入研钵中,各加入15mL研磨液,充分研磨。用两层纱布过滤,取滤液备用。其次步:先向6只小烧杯中分别注入10mL滤液,再加入20mL体积分数为95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌,使絮状物缠绕在玻璃棒上。第三步:取6支试管,分别加入等量的2mol/LNaCl溶液溶解上述絮状物。DNA检测:在上述试管中各加入4mL二苯胺试剂,混合匀称后,置于沸水中加热5min,待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果如下表。(注:“+”越多表示蓝色越深)分析上述试验过程,回答下列问题:(1)该探究性试验课题名称是________________________________________________。(2)其次步中“缓缓地”搅拌,这是为了削减____________。(3)依据试验结果,得出结论并分析。①结论1:与20℃相比,相同试验材料在-20℃条件下保存,DNA的提取量较多。结论2:_________________________________________________________________。②针对结论1,请提出合理的说明:_____________________________________。(4)氯仿密度大于水,能使蛋白质变性沉淀,与水和DNA均不相溶,且对DNA影响微小。为了进一步提高粗提取时DNA纯度,依据氯仿的特性,在DNA提取第三步的基础上接着操作的步骤是:______________________________________________________________,然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出。22.生物柴油是一种可再生的清洁能源,其应用在肯定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗。科学家发觉,在微生物M产生的脂肪酶作用下,植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如下图)。(1)用于生产生物柴油的植物油不易挥发,宜选用________、________方法从油料作物中提取。(2)筛选产脂肪酶的微生物M时,选择培育基中添加的植物油为微生物生长供应________,培育基灭菌采纳的最适方法是________法。(3)测定培育液中微生物数量,可选用________法干脆计数;从微生物M分别提取的脂肪酶通常须要检测________,以确定其应用价值;为降低生物柴油生产成本,可利用________技术使脂肪酶能够重复运用。(4)若需克隆脂肪酶基因,可应用耐热DNA聚合酶催化的________技术。23.下面是分别分解尿素的细菌所用的培育基配方:请依据以上配方,回答下列问题:(1)该培育基含有微生物所须要的________类养分物质。其中最主要的碳源是________,氮源是________。(2)该培育基按物理性质划分是________培育基;按培育基的作用划分是________培育基。(3)该培育基具有选择作用的缘由是___________________________________________________________________________________________________________________。(4)在该培育基中,可通过检测pH的变更来推断尿素是否被分解,依据的原理是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。所用方法是在培育基中加入________指示剂,假如尿素被分解,则培育基变成________色。24.微生物在人类生括、生产与科研中发挥着重要作用,请回答下列问题:(1)制作果酒需利用________(填“微生物名称”)进行发酵。由果酒转变成果醋的制作时,须要变更的环境条件是__________和_________。(2)腐乳制作过程中加盐的作用是___________和____________。(3)土壤中富含各种微生物,将土壤浸出液接种到特定培育基上,可获得能分解纤维素的细菌,试验室中获得纯净菌的接种方法有________和________。虽然各种培育基的详细配方不同,但一般都含有水、氨源________和________。
答案解析1.【答案】A【解析】分别细菌常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法,但平板划线法不能对细菌进行计数;筛选能分解石油的细菌,要以石油作为培育基中唯一的碳源;筛选细菌的整个操作过程都须要在无菌条件下进行,所以应在火焰旁进行。2.【答案】D【解析】果醋发酵是需氧发酵;制作腐乳,加盐腌制可使豆腐块变硬且能抵制杂菌生长;制备固定化酵母细胞时,配制海藻酸钠溶液需小火或间断加热;家庭制作果酒时,利用的是附着在葡萄皮的表面酵母菌,反复冲洗葡萄,附着的酵母菌越少,不利于发酵。3.【答案】D【解析】猪血红蛋白提纯过程中,采纳凝胶色谱法分别时,血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动快。4.【答案】D【解析】果酒、果醋和腐乳制作所运用的菌种分别是酵母菌(单细胞真菌)、醋酸杆菌(属于需氧型细菌)和毛霉(多细胞真菌),它们均有细胞结构,D正确。A选项,三者制作时的相宜温度范围,其中果醋制作的相宜温度最高,为30℃-35℃;醋酸杆菌为需氧型细菌,因此进行的是有氧发酵;C中腐乳制作的菌种明显有误。5.【答案】A【解析】选A;干脆计数法是利用特定的计数板,在显微镜下计算肯定容积量样品中微生物的数量,不能区分死菌与活菌;质量法是用于微生物生长测定的一种方法,有湿重法和干重法,也可以通过测蛋白质和DNA含量反映细胞的物质质量;比浊法是在肯定范围内,悬液中细胞浓度与浑浊度成正比,即与光密度成正比,菌越多,光密度越大;活菌在相宜培育基和良好生长条件下通过生长形成菌落,此法又称活菌计数法,可采纳稀释涂布平板法接种。6.【答案】C【解析】泡菜腌制过程中,由于坛内环境中硝酸还原菌的繁殖,促进硝酸盐还原为亚硝酸盐,但随腌制时间延长,乳酸菌大量繁殖,产生乳酸,抑制硝酸盐还原菌繁殖,同时亚硝酸盐又被分解,使亚硝酸盐含量渐渐下降。7.【答案】D【解析】包埋法即将酶包埋于网格或胶囊中如图③、④所示,图中①为吸附法,②为化学结合法。8.【答案】B【解析】倒平板操作时,培育基的灭菌应在分装之前进行,A错误;为使下一次划线的菌种只是从上一次划线的末端起先,故每次划线前都要灼烧接种环,B正确;培育微生物时,视察的时间应据详细状况而定,D错误。9.【答案】A【解析】用蒸馏水稀释鸡血细胞液,使血细胞的细胞膜、核膜裂开,释放出核物质,此时过滤只能得到含DNA和其他物质如蛋白质的滤液,这种滤液必需经过试验中其他步骤得相继处理,方能得到较纯的DNA。DNA在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最低,成丝状粘稠物,可经过滤留在纱布上。10.【答案】A【解析】选A;缺乏氮源的培育基上大部分微生物无法生长,而固氮细菌能生长;在培育基中加青霉素可以抑制细菌和放线菌等原核生物细胞壁的合成,而霉菌属于真核生物,故能生长;在培育基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长,对放线菌的生长无影响。11.【答案】A【解析】B.将青霉菌菌株与能高效水解蛋白质的菌株混合培育,再进行筛选。得到的可能性小。C.将能高效水解蛋白质的菌株的基因导入青霉菌菌株,再进行筛选,操作困难,技术要求高。D.设置培育基中各种养分成分的浓度梯度,对青霉菌菌株分别培育,再进行筛选,不能变更活性。12.【答案】A【解析】A、在用酒精析出DNA时,要运用体积分数为95%的冷酒精,A正确;B、在沸水浴中,DNA遇二苯胺试剂后即呈蓝色,B错误;C、酶的作用具有专一性,因此加酶洗衣粉能快速去除某些顽固污渍,C错误;D、利用固定化酵母细胞进行发酵,糖类除了作为反应底物,还为酵母菌供应养分,D错误.故选:A.13.【答案】B【解析】本题主要考查微生物培育的主要内容,考查识记、理解与运用实力。难度较小。微生物培育获得纯净培育物的关键是防止杂菌污染,A正确;稀释涂布平板法可以用于微生物的计数,B错误;分别微生物时涂布接种须要对培育液进行梯度稀释,分别不同的微生物要采纳不同的稀释度,C正确;不同的微生物具有不同的菌落特征,视察菌落的特征可以用来进行菌种的鉴定,D正确。14.【答案】B【解析】消毒剂的运用既要杀死表面微生物,又要防止损害组织细胞,影响组织培育,A项正确;植物细胞融合是指经纤维素酶和果胶酶处理后得到的原生质体的诱导融合,带有细胞壁的愈伤组织细胞不能诱导融合形成染色体加倍的细胞,B项错误;出芽和生根都是细胞再分化的结果,其实质是基因的选择性表达,C项正确;α-萘乙酸为生长素类似物,可诱导愈伤组织生根,D项正确。15.【答案】D【解析】采纳稀释涂布平板法统计菌落数目时,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。16.【答案】B【解析】本题考查微生物的计数问题,弄清稀释涂布平板法的原理是正确解答该题的前提。因为当两个或多个细胞连在一起时,平板上视察到的只是一个菌落,而样品稀释度无论多高都很难使其中的细菌都单个分布于培育基上,故计数结果比实际值低。17.【答案】C【解析】植物组织培育的材料大部分来自田间,带有大量病毒,须要进行灭菌。运用高压蒸汽灭菌不仅把病毒杀灭,而且也杀死了外植体,应采纳化学药物消毒法。18.【答案】D【解析】某些细菌如蓝细菌(蓝藻)、光合细菌以及红螺菌都能进行光合作用。生长因子是指微生物生长不行缺少的微量有机物,主要包括维生素、氨基酸和碱基等。而微生物的养分物质包括水、无机盐、碳源、氮源和生长因子,它们都是要从外界获得补充的。常用的伊红美蓝乳糖培育基,可用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌,假如有大肠杆菌,因其剧烈分解乳糖而产生大量的混合酸,菌体带H+,故菌落被染成深紫色,从菌落表面的反射光中还可以看到金属光泽。19.【答案】D【解析】卵原细胞在进行DNA复制可能会出现基因突变。20.【答案】D【解析】本题考查微生物的分别与培育,意在考查考生的试验分析实力。为了获得单个菌落,应将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释,A正确;为了使结果更加精确,同一浓度的土壤稀释液至少要涂布3个平板进行重复试验,然后计算平均值,B正确;加入刚果红的培育基用来筛选纤维素分解菌,D错误。21.【答案】(1)探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响;(2)DNA断裂;(3)①等质量的不同试验材料,在相同的保存温度下,从蒜黄提取的DNA量最多;②低温抑制了相关酶的活性,DNA降解速度慢;(4)将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合,静置一段时间,吸取上清液。【解析】(1)该探究性试验课题名称是:探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响;(2)其次步中“缓缓地”搅拌,这是为了削减DNA断裂;(3)依据试验结果,可得出结论:①结论1:与20℃相比,相同试验材料在-20℃条件下保存,DNA的提取量较多。结论2:等质量的不同试验材料,在相同的保存温度下,从蒜黄提取的DNA量最多;②针对结论1,可请提出合理的说明为:低温抑制了相关酶的活性,DNA降解速度慢;(4)为了进一步提高粗提取时DNA纯度,依据氯仿的特性,在DNA提取第三步的基础上接着操作的步骤是:将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合,静置一段时间,吸取上清液。22.【答案】(1)压榨;萃取(注:两空依次无先后);(2)碳源;高压蒸汽灭菌;(3)显微镜干脆计数;酶活性(或:酶活力);固定化酶(或:固定化细胞);(4)PCR(或:多聚酶链式反应,聚合酶链式反应)。【解析】(1)植物油的提取方法有蒸馏、压榨和萃取,蒸馏常应用于挥发性较强的植物油的提取。(2)筛选产脂肪酶的微生物M时,选择培育基中添加的植物油为微生物生长供应碳源,这样不能产脂肪酶的微生物就无法利用植物油,将不能在该培育基上存
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