2024年华师大新版选择性必修3生物上册月考试卷含答案

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①克隆人只是某些人出于某种目的制造出的“产品”；没有“父母”，这可能导致他们在心理上受到伤害。

②生殖性克隆技术可能带有一定的致癌风险。

③由于技术问题；可能孕育出有严重生理缺陷的克隆人。

④克隆人的家庭地位难以认定；可能使以血缘为纽带的父子；兄弟和姐妹等人伦关系消亡。

⑤生殖性克隆人冲击了现有的一些有关婚姻；家庭和两性关系的伦理道德观念。

⑥克隆人作为一项科学研究属于中性的；但可能带来严重的基因歧视。

⑦生殖性克隆人是对人类尊严的侵犯⑧生殖性克隆人破坏了人类基因多样性的天然属性，不利于人类的生存和进化A.①②③④⑤⑥B.①③④⑤⑦⑧C.①②③⑤⑦⑧D.①④⑤⑥⑦⑧3、在利用葡萄自然发酵产生果酒的过程中，未经杀菌，但其他杂菌不能生长的原因是（）A.经冲洗后的葡萄上只有野生型酵母菌无其他杂菌B.其他杂菌不能利用葡萄汁中的糖作碳源C.在缺氧和呈酸性的发酵液中，酵母菌能生存，其他杂菌不适应环境而被抑制D.酵母菌发酵产生大量酒精，杀死了其他杂菌4、研究人员比较了不同储藏条件对棉叶DNA纯度及提取率（提取率越高；获得的DNA越多）的影响，实验结果如图所示。下列有关叙述错误的是（）

A.提纯DNA时可加入75%酒精去除蛋白质等物质B.新鲜棉叶提取的DNA纯度最高，但提取DNA的量不是最多C.用二苯胺试剂鉴定，蓝色最深的是冷冻3d处理后提取的DNAD.DNA不溶于酒精，在NaCl溶液中的溶解度随溶液浓度的不同而不同5、下列有关培养基配制原则的叙述，正确的是（）A.培养基中至少要有一种有机物，除水以外的无机物只提供无机盐B.任何培养基都必须含有水、碳源、氮源、无机盐及特殊营养物质C.配制培养基时，要注意各种营养物质的浓度和比例D.无机碳源和氮源不能为微生物提供能量6、利用放射免疫检测技术检测血浆中甲胎蛋白含量的基本过程是：将定量的放射性同位素标记的甲胎蛋白、定量的相应抗体和被检测者的血浆混合，标记的和未标记的甲胎蛋白会争夺定量的抗体。一段时间后，通过测定抗原抗体复合物中的放射性强度，从而计算出未标记的甲胎蛋白含量，该技术使微量的甲胎蛋白得以精确定量。下列相关叙述错误的是（）A.可使用3H对甲胎蛋白进行标记B.该技术的原理之一是抗原与抗体的特异性结合C.甲胎蛋白可随血液流至全身，故可抽取外周静脉血进行测定D.抗原抗体复合物中的放射性越强，表明体内越易出现癌细胞评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)7、厨余垃圾是指居民日常生活及食品加工、饮食服务、单位供餐等活动中产生的垃圾。废液中的淀粉、蛋白质、脂肪等微溶性物质，易腐烂变质，滋生病原微生物等。若处理不当，可能造成严重的污染。圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌组合可以将有机厨余垃圾迅速分解成水和二氧化碳，减轻环境污染。为制备分解有机厨余垃圾的微生物菌剂，某科研小组对两菌种进行了最佳接种量比的探究实验，并得出下图的实验结果。下面叙述错误的是（）

A.巨大芽孢杆菌生长过程中需要氮源，圆褐固氮菌生长过程中不需要氮源B.要统计活菌数量可采用平板划线法和稀释涂布平板法C.将1mL菌液稀释100倍，在3个平板上分别接0．1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为42、39和36。据此可得出每升菌液中的活菌数为3．9×105D.处理该类厨余垃圾废液，两菌种的最佳接种量比为1：18、常乳是母牛泌乳期一周后直到泌乳停止前一周这个时间段内分泌的乳汁。奶牛自身乳房和乳头中可能含有的细菌，加上挤乳过程中产生的少量污染，常乳中会有一定量的细菌存在。研究小组要检测一份常乳样品中细菌的总量（不考虑菌种），检测流程如下图，每个平板上接种菌液量为0.1mL。下列说法正确的是（）

A.倒平板时将培养皿打开一条细缝，不要完全打开，防止杂菌污染B.上述方法是稀释涂布平板法，培养基要营养全面，适合各种细菌生长C.也可以通过连续划线的方法接种，通过菌落数计算样品中的细菌总数D.若三个平板上的菌落平均数为59，则所每毫升样品中细菌总数为5.9×1079、青蒿素主要用于恶性疟疾的症状控制以及耐氯喹虫株的治疗。为了快速检测青蒿素；科研人员利用细胞工程技术制备了抗青蒿素的单克隆抗体，其基本操作过程如下图。以下相关叙述正确的是（）

A.过程②体现了细胞膜的流动性，过程⑤若在体内进行则操作更简单B.过程③常使用选择培养基，过程④常使用抗原-抗体杂交技术C.若细胞乙均由细胞两两融合而成，则细胞乙、丙、丁的染色体组数一定相同D.骨髓瘤细胞通常是从小鼠脾脏中提取的，其表面糖蛋白减少，培养时失去接触抑制10、基因工程在农牧业、医药卫生和食品工业等多方面的应用发展迅速，如图表示利用基因工程技术生产人血清白蛋白的两条途径。下列叙述错误的是（）

A.若某基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列B.扩增目的基因时，利用耐高温的DNA连接酶从引物a、b的3'-端进行子链合成C.导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞是乳腺细胞D.利用农杆菌转化法可将含有目的基因的重组质粒整合到植物受体细胞的染色体DNA上11、科学家在蛙的核移植实验中发现，肠上皮核移植实验中有1％～2％能形成蝌蚪，囊胚核移植实验中有50％能形成蝌蚪或成蛙。下列叙述错误的是（）A.核移植得到的重组细胞须立即移植到蛙体内B.由于科技的进步，用猴进行体细胞核移植实验的成功率与用蛙的相当C.该实验说明胚胎细胞分化程度较低，全能性的表达更容易D.核移植得到的克隆蛙的遗传性状与供核蛙的完全相同12、全球首个鼻喷新冠肺炎疫苗已获准临床试验，该疫苗是在流感病毒载体上，插入新冠病毒基因片段，制成活病毒载体疫苗，模拟呼吸道病毒天然感染途径，激活局部免疫应答和全身性免疫应答，从而发挥保护作用。下列相关叙述正确的是（）A.疫苗制备过程中，对流感病毒进行改造利用的原理是基因突变B.从接种方式来看，该疫苗的优点是通过鼻喷接种，无针、无痛C.该疫苗需侵入人体细胞中经基因表达后才能发挥作用D.该疫苗可通过激活淋巴细胞，产生细胞免疫和体液免疫评卷人得分三、填空题(共5题，共10分)13、生化武器散布途径：将病原体_____或者通过_____、_____等散布到敌方，会对军队和平民造成大规模杀伤后果。14、载体具备的条件：①_____。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③______。15、_________℃左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵时一般将温度控制在_______________℃。16、生态工程的设计所依据的是______和______原理17、植物体细胞杂交的意义：_____。评卷人得分四、判断题(共2题，共18分)18、基因工程技术已被广泛用于改良动植物品种、提高作物和畜产品的产量等方面。（选择性必修3P87）()A.正确B.错误19、生殖性克隆是指通过克隆技术产生独立生存的新个体。（选择性必修3P106）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共2题，共12分)20、酵母菌与人们的日常生活密切相关；也是现代生物技术研究常用的生物。

(1)利用酵母菌发酵产生酒精的过程中，要先充气后闭气，原因是_____。

(2)利用玉米秸秆生产酒精时，水解秸秆所用的纤维素酶可来自微生物，分离产生该酶的微生物时，所需要的培养基为_____（按功能分），培养基中的碳源为_____。

(3)虽然不同的生物对营养物质的需求不同，但是培养这些微生物的培养基，一般都含有四大营养成分，即_____、_____、_____和碳源。培养基灭菌的常用方法为_____。

(4)接种微生物常用的两种方法是_____、_____。实验室接种微生物时，常在酒精灯火焰旁进行，这样操作的目的是_____。21、干燥综合征（SS）是临床常见的一种自身免疫病；患者血清中存在多种抗体，其中以SSB抗体特异性最强。下图表示科研人员利用基因工程技术获得SSB蛋白及利用SSB蛋白对小鼠进行免疫的过程。回答下列问题：

(1)利用RNA通过①过程获得cDNA需要________酶。已知真核生物mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保护尾部不被降解。为了针对性获得cDNA，应如何设计逆转录第一步时的DNA引物______，设计引物的目的是______。

(2)为确保与pET41a质粒定向连接，对逆转录得到的cDNA扩增时，应在相应引物的_______（填“5'”或“3'”）端加上______酶切位点。

(3)③过程用重组质粒转染大肠杆菌时，需要用Ca2+处理大肠杆菌，目的是______，然后将处理后的大肠杆菌先接种在添加_______的培养基（A）上培养，待长出菌落后再利用无菌膜同位置转移到添加______的培养基（B）上培养，收集_______菌落进一步纯化后将菌体破碎处理；筛选得到SSB蛋白。

(4)将改造后的大肠杆菌生产的SSB蛋白注入到小鼠体内是为了检测该蛋白是否具有抗原性，则后续实验内容应为抽取小鼠血液_______。评卷人得分六、综合题(共4题，共32分)22、下图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病（基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素）的过程设计图解。请据图回答：

（1）图中①②所示的结构分别是_________________、_______________。

（2）图中③④所示的生物工程技术分别是________________、____________________。

（3）过程③通常用去核卵细胞作受体细胞的原因除了它体积大、易操作，含有丰富营养物质外，还有_____________________________。

（4）过程④的完成需要用到的基因工程操作工具有_____________________。

（5）图示方法与一般的异体移植相比最大的优点是_____________________。23、新型冠状病毒可通过表面的刺突蛋白（S蛋白）与人呼吸道粘膜上皮细胞的ACE2受体结合；侵入人体，引起肺炎。单克隆抗体可阻断病毒的粘附或入侵，故抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。下图为筛选；制备抗S蛋白单克隆抗体的示意图。请据图回答下列问题：

（1）在制备抗S蛋白单克隆抗体的过程中，先用纯化的______对小鼠进行免疫，并从小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞。请完善以小鼠的脾脏为材料制备细胞悬液的主要实验步骤：对新鲜脾脏进行处理，__________________。

（2）将提取的B淋巴细胞与小鼠的______细胞融合，用HAT培养基筛选获得的杂交瘤细胞还需要进行______和______；经多次筛选，获得分泌抗S蛋白单克隆抗体的细胞。

（3）将能分泌抗S蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或______。在体外培养时，除需满足营养条件外，还需要满足的其他条件有__________________（答出两点即可）。

（4）与从动物血清中分离出的抗体相比，抗S蛋白单克隆抗体的优势体现在：________________________（答出两点即可）。24、土壤盐渍化影响水稻生长发育。将水稻耐盐碱基因OsMYB56导入不耐盐碱水稻品种吉粳88中，培育耐盐碱水稻新品种，其操作流程及可能用到的限制酶如图，其中bar为抗除草剂基因，Tetr为四环素抗性基因，Ampr为氨苄青霉素抗性基因；①~⑦表示操作过程。

限制酶BamHⅠBclⅠSmaⅠSau3AⅠ识别位点及切割位点-G↓GATCC--T↓GATCA--CCC↓GGG--↓GATC-(1)过程①PCR扩增OsMYB56需要添加引物，应选用的引物组合为_____。A．5′-CTTGGATGAT-3′和5′-TCTGTTGAAT-3′B．5′-CTTGGATGAT-3′和5′-TAAGTTGTCT-3′C．5′-ATTCAACAGA-3′和5′-ATCATCCAAG-3′D．5′-ATTCAACAGA-3′和5′-GAACCTACTA-3′(2)根据基因表达载体的结构组成分析，Ti质粒中的CaMV35S是_______。其功能是______。

(3)过程③应选用______切割质粒，利用所选限制酶进行操作的优势是________。切割后需要用________进行连接才能获得重组质粒。

(4)为了筛选出含重组质粒的受体细胞，应在添加________的选择培养基上培养。培养后获得的菌落不能判定是否含有重组质粒，原因是_______。25、中国甜柿的自然脱涩与乙醛代谢关键酶基因（PDC）密切相关；推测涩味程度可能与PDC基因的表达情况有关。

（1）启动子位于基因首端，是RNA聚合酶识别和结合的位点，同时启动子区域还存在着许多调控蛋白的结合位点，RNA聚合酶和调控蛋白共同影响了基因的___________。

（2）为筛选PDC基因的调控蛋白；科研人员进行了下列实验。

①PDC基因的启动子序列未知，为获得大量该基因启动子所在片段，可利用限制酶将基因组DNA进行酶切，然后在___________的作用下将已知序列信息的接头片段连接在PDC基因的上游，根据___________和PDC基因编码序列设计引物进行PCR．利用质粒A(图1）构建含有PDC基因启动子片段的重组质粒并导入代谢缺陷型酵母菌，用不含___________的培养基可筛选出成功转化的酵母菌Y1H。

②质粒G(图2）上的AD基因表达出的AD蛋白与启动子足够靠近时，能够激活后续基因转录，因此需获得待测蛋白与AD蛋白的融合蛋白用于后续筛选。科研人员从中国甜柿中提取RNA，将逆转录形成的各种cDNA与质粒G连接后导入酵母菌，此时应选择质粒G中的位点______（填序号1~5）作为cDNA的插入位点；最终获得携带不同cDNA片段的酵母菌群Y187。

③重组酵母Y187与Y1H能够进行接合生殖，形成的接合子含有两种酵母菌质粒上的所有基因。若接合子能在含有金担子素的培养基中生存，则推测待测蛋白是PDC基因的调控蛋白，请结合图示阐述作出该推测的理由______。

参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、D【分析】【分析】

植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞；进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株，在进行植物体细胞杂交时需要使用纤维素酶和果胶酶去掉植物细胞的细胞壁，使用化学方法（聚乙二醇）或物理方法诱导原生质体融合，不能用灭活的病毒诱导，不同种植物的细胞所含染色体的种类和数目是不同的，故我们可以根据细胞中染色体的种类和形态的差异来鉴定杂种细胞.。

【详解】

A；制备原生质体时不可以用低渗溶液配制纤维素酶和果胶酶溶液；否则会导致制备的原生质体吸水涨破，A错误；

B；由分析可知；不可以用灭活的病毒诱导原生质体融合，B错误；

C；植物细胞细胞杂交的目的是获得杂种植物；原生质体融合是植物体细胞杂交的一个过程，C错误；

D；利用植物的体细胞杂交；可以获得杂种细胞，进而培育成杂种植株，由于不同种植物的染色体的种类和数目不同，所以可以获得多倍体的杂种植株，D正确。

故选D。

【点睛】2、B【分析】【分析】

1；生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的；即用于产生人类个体。

2；中国政府：禁止生殖性克隆人；坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆人。

【详解】

①克隆人只是某些人出于某种目的制造出的“产品”；没有“父母”，这可能导致他们在心理上受到伤害，①符合题意；

②生殖性克隆人不会带有致癌风险；②不符合题意；

③由于技术问题；可能孕育出有严重生理缺陷的克隆人，③符合题意；

④克隆人的家庭地位难以认定；可能使以血缘为纽带的父子；兄弟和姐妹等人伦关系消亡，④符合题意；

⑤生殖性克隆人冲击了现有的一些有关婚姻；家庭和两性关系的伦理道德观念；⑤符合题意；

⑥生殖性克隆人不涉及转基因技术；因此不存在基因歧视，⑥不符合题意；

⑦生殖性克隆人是对人类尊严的侵犯；⑦符合题意；

⑧生殖性克隆人破坏了人类基因多样性的天然属性；不利于人类的生存和进化，⑧符合题意。

故选B。

【点睛】

3、C【分析】【分析】

酵母菌发酵酿酒的原理：在有氧条件下酵母菌大量繁殖；在无氧条件下酵母菌进行酒精发酵产生酒精。缺氧和呈酸性的发酵液抑制杂菌的生长。

【详解】

A；冲洗的目的是洗去浮尘；在冲洗过程中，杂菌和酵母菌被洗掉的机会是均等的，A错误；

B；异养微生物都能利用糖；B错误；

C；在缺氧和呈酸性的发酵液中；酵母菌能生存，其他杂菌不能生长的根本原因是其他微生物不适应缺氧和酸性环境，C正确；

D、酵母菌发酵产生大量酒精和CO2；缺氧和呈酸性的发酵液杀死了其他杂菌，D错误。

故选C。4、A【分析】【分析】

1；DNA粗提取和鉴定的原理：

（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶；高温和洗涤剂的耐受性。

（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

2；DNA粗提取和鉴定的过程：

（1）实验材料的选取：凡是含有DNA的生物材料都可以考虑；但是使用DNA含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大。

（2）破碎细胞；获取含DNA的滤液：动物细胞的破碎比较容易，以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞，需要先用洗涤剂溶解细胞膜。例如，提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。

（3）去除滤液中的杂质：

方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；

方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白；从而使提取的DNA与蛋白质分开；

方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同；从而使蛋白质变性，与DNA分离。

（4）DNA的析出与鉴定。

①将处理后的溶液过滤；加入与滤液体积相等；冷却的酒精溶液，静置2～3min，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取的DNA．用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水分。

②取两支20ml的试管；各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5ml，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后，向两支试管中各加入4ml的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，待试管冷却后，比较两支试管溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变蓝。

【详解】

A；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精，所以DNA的粗提取和鉴定实验中，提纯DNA时，加入冷却的、体积分数为95%的酒精溶液是为了除去蛋白质，形成含杂质较少的DNA丝状物，A错误；

B；新鲜棉叶提取的DNA纯度最高；但提取率不高，因此新鲜棉叶提取DNA的量不是最多的，B正确；

C；冷冻3d处理提取的DNA量是最多的；因此用二苯胺试剂鉴定，颜色最深的是冷冻3d处理后提取的DNA，C正确；

D；DNA在不同氯化钠溶液中的溶解度不同；DNA在0.14mol/L的氯化钠溶液中的溶解度最低，高于或低于该浓度，DNA的溶解度都会增大，D正确。

故选A。5、C【分析】【分析】

培养基的概念及营养构成。

（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求；配制出的供其生长繁殖的营养基质；

（2）营养构成：各种培养基一般都含有水；碳源、氮源、无机盐；此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。

【详解】

A；自养微生物培养基中不一定需要有机物；无机物还可充当碳源和氮源，A错误；

B、不同微生物的营养需求不同，如自生固氮菌能以空气中的N2为氮源；因此培养自生固氮菌的培养基中不需要含有氮源，B错误；

C；配制培养基时；要注意各种营养物质的浓度和比例，从而能为微生物的生长提供合适的营养，同时也可保证营养液的渗透压，C正确；

D、NH3既是硝化细菌的氮源；又能为其提供能量，D错误。

故选C。6、D【分析】【分析】

题意分析；将定量的放射性同位素标记的甲胎蛋白；定量的相应抗体和被检测者的血浆混合，标记的和未标记的甲胎蛋白会争夺定量的抗体。一段时间后，通过测定抗原抗体复合物中的放射性强度，当检测的具有放射性的抗原抗体复合物较多时，说明更多的定量加入的甲胎蛋白与抗体结合，则可推测待测个体血浆中的甲胎蛋白较少。

【详解】

A、甲胎蛋白含C、H、O、N等元素，所以可用3H对甲胎蛋白进行标记；A正确；

B；甲胎蛋白与相应抗体可发生特异性结合；根据形成的抗原抗体复合物的放射性强度确定体内甲胎蛋白的含量，B正确；

C；甲胎蛋白形成后可进入血液并流至全身；成为血液的成分，所以可抽取外周静脉血对其含量进行测定，C正确；

D；抗原抗体复合物中的放射性越强；说明标记的甲胎蛋白更多的与抗体结合，因而说明体内的甲胎蛋白含量越低，表明体内越不易出现癌细胞，因为甲胎蛋白增多是癌细胞可能出现的标志，D错误。

故选D。二、多选题(共6题，共12分)7、A:B:C:D【分析】【分析】

微生物接种的方法很多；最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。若要对微生物进行取样计数，接种方法只能是稀释涂布平板法。稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

【详解】

A；微生物的生长需要碳源、氮源、无机盐等物质；只是有些固氮菌由于能利用氮气作为氮源，不需要在培养基中添加氮源，A错误；

B；平板划线法不能用于计数；B错误；

C、将1mL菌液稀释100倍，在3个平板上分别接0．1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为42、39和36。据此可得出每升菌液中的活菌数为（42+39+36）÷3÷0．1×100×1000=3．9×107；C错误；

D；根据图示可知；两菌种的接种量比为1:1时比两菌种的接种量比为2:1时效果好，但由于该实验设置的两菌种的接种量比例的组数过少，所以无法判断处理该类厨余垃圾废液的两菌种的最佳接种量比，D错误。

故选ABCD。8、A:B:D【分析】【分析】

分析题文描述和题图：图示为采用稀释涂布平板法分离常乳样品中细菌总量的流程图。首先将常乳样品进行一系列梯度稀释，然后取1×105倍稀释的稀释液0.1mL分别涂布到3个平板上进行培养。为了防止杂菌污染；稀释涂布平板的所有操作都应控制无菌条件。

【详解】

A；为了防止杂菌污染；倒平板时应将培养皿打开一条细缝，不要完全打开，A正确；

B；为了检测一份常乳样品中细菌的总量；图示对常乳样品进行了一系列梯度稀释，由此可见，上述方法是稀释涂布平板法，培养基要营养全面，适合各种细菌生长，B正确；

C；通过连续划线的方法接种；不易分离出单个菌落，不能用于微生物的计数，C错误；

D、取1×105倍稀释的稀释液0.1mL分别涂布到3个平板上进行培养，若三个平板上的菌落平均数为59，则所每毫升样品中细菌总数为59÷0.1×105＝5.9×107；D正确。

故选ABD。9、A:B:C【分析】【分析】

题图分析：过程①为注射抗原；诱导小鼠产生具有免疫能力的B细胞；过程②为将具有免疫能力的B细胞和骨髓瘤细胞融合；过程③用选择性培养基筛选杂交瘤细胞；过程④用抗体检测和克隆培养得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞；过程⑤为提取单克隆抗体。

【详解】

A；过程②为将具有免疫能力的B细胞和骨髓瘤细胞融合；体现了细胞膜的流动性；过程⑤为提取单克隆抗体，若在体内进行（可从小鼠腹水中提取），则操作更简单，A正确；

B；过程③是筛选杂交瘤细胞；常使用选择培养基（未融合的细胞，融合的具有相同核的细胞均死亡，杂交瘤细胞能正常生存）；过程④用抗体检测和克隆培养得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞，常使用抗原—抗体杂交技术，B正确；

C；因细胞甲和细胞乙均来源于小鼠；若细胞乙均由细胞两两融合而成，则细胞乙和经筛选后的丙、丁的染色体组数一定相同，C正确；

D；骨髓瘤细胞是从小鼠的骨髓中提取的；脾脏中无骨髓瘤细胞，D错误。

故选ABC。10、B:C:D【分析】【分析】

将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可整合到受体细胞的染色体DNA上。基因表达载体常包括目的基因；启动子、终止子、标记基因。标记基因是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

【详解】

A；mRNA是由基因启动子后面的序列编码而来的；若某基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列，A正确；

B、扩增目的基因时，利用耐高温的DNA聚合酶从引物a、b的3'-端进行子链合成；B错误；

C；导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞不是乳腺细胞；而是受精卵或早期胚胎细胞，C错误；

D；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞；并且整合到受体细胞染色体的DNA上，根据农杆菌的这一特点，将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上，将基因转入动物细胞常用显微注射法，D错误。

故选BCD。11、A:B:D【分析】【分析】

1.细胞核移植技术；是指将一个动物细胞的细胞核移植至去核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。

2.高度分化的植物细胞具有全能性；已分化的动物体细胞的细胞核具有全能性。

【详解】

A；蛙是体外受精；生殖发育过程都是在体外完成的，所以实验中用到核移植技术得到的重组细胞，不用移植到蛙体内，A错误；

B；蛙是体外受精；生殖发育过程都是在体外完成的，猴子是体内受精、体内发育的，用猴进行体细胞核移植实验的成功率与用蛙无可比性，B错误；

C；题意显示；肠上皮核移植实验中有1%～2%能形成蝌蚪，囊胚核移植实验中有50%能形成蝌蚪或成蛙，该实验说明胚胎细胞分化程度较低，全能性的表达更容易，C正确；

D；蛙的性状有些是核基因控制；有些是质基因控制，核移植得到的克隆蛙的遗传性状与供核蛙的不完全相同，D错误。

故选ABD。12、B:C:D【分析】【分析】

分析题文描述：题述的疫苗是借助基因工程研制而成的；改造利用的原理是基因重组。疫苗属于抗原，在抗原的刺激下，机体可以产生特异性免疫反应。特异性免疫包括体液免疫与细胞免疫。

【详解】

A；该疫苗是在流感病毒载体上；插入新冠病毒基因片段制成的，改造利用的原理是属于基因重组，A错误；

B；鼻喷疫苗都配有鼻喷装置；以鼻喷接种方式外用，是一种无针、无痛的接种方式，B正确；

C；该疫苗插入的新冠病毒基因片段；需要在细胞内经表达产生蛋白质后，才能发挥作用，C正确；

D；该疫苗可以侵入到人体细胞中；使机体既能产生细胞免疫，又能产生体液免疫，D正确。

故选BCD。三、填空题(共5题，共10分)13、略

【分析】【详解】

生物武器种类：包括致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等。把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。【解析】①.直接②.食物③.生活必需品14、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】能在受体细胞中复制并稳定保存具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】2018～2516、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】生态学工程学17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】克服了远缘杂交不亲和的障碍。四、判断题(共2题，共18分)18、A【分析】【详解】

目前，基因工程技术已被广泛用于改良动植物品种、提高作物和畜产品的产量等方面，例如转基因抗虫植物；将植物花青素代谢相关的基因导入牵牛花中，使其呈现自然界没有的颜色，提高了观赏价值；将外源生长素基因导入鲤鱼体内，转基因鲤鱼生长速率加快等，所以正确。19、A【分析】【详解】

生殖性克隆，即通常所说的克隆人，通过克隆技术产生独立生存的新个体，即通常所说的克隆人，该说法正确。五、实验题(共2题，共12分)20、略

【分析】【分析】

1；培养基的种类及用途：（1）按物理性质可分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基。液体培养基应用于工业或生活生产；固体培养基应用于微生物的分离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。（2）按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴别培养基。

2；灭菌（1）灭菌是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物；包括芽孢和孢子。（2）灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、湿热灭菌。①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法；②玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱；③培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅。

【详解】

（1）利用酵母菌发酵产生酒精的过程中；要先充气后闭气，原因是酵母菌是兼性厌氧菌，因此果酒发酵时先通气使酵母菌大量繁殖，后闭气使酵母菌进行酒精发酵。

（2）利用玉米秸秆生产酒精时，水解秸秆所用的纤维素酶可来自微生物，由于该培养基以秸秆（纤维素）为唯一碳源，原则上，只有能分解纤维素的微生物才能在该培养基上生存，因此按功能分，该培养基属于选择培养基。

（3）虽然不同的生物对营养物质的需求不同；但是培养这些微生物的培养基，一般都含有水；无机盐、碳源、氮源（基本成分）和生长因子等。培养基灭菌的常用方法为高压蒸汽灭菌法。

（4）分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的菌落。采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。实验室接种微生物时，常在酒精灯火焰旁进行，这样操作的目的是酒精灯火焰旁存在无菌区域，可以避免周围环境中的微生物的污染。【解析】(1)先充气有利于酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖；当酵母菌繁殖到一定数量后，需要闭气造成无氧环境，让酵母菌进行无氧呼吸产生酒；

(2)选择培养基纤维素。

(3)水无机盐氮源高压蒸汽灭菌法。

(4)平板划线法稀释涂布平板法避免周围环境中的微生物的污染21、略

【分析】【分析】

1；基因工程的四个步骤：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

2、在基因工程操作中，常用原核生物作为受体细胞，其中以大肠杆菌应用最为广泛。研究人员一般先用Ca2＋处理大肠杆菌细胞；使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，然后再将重组的基因表达载体导入其中。

【详解】

（1）利用RNA通过①过程（逆转录）获得cDNA需要逆转录酶；已知真核生物基因的mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保护尾部不被降解。逆转录第一步以mRMA为模板合成DNA单链；新链与模板链反向平行，由于新链只能由5'端向3'端延伸，所以逆转录第一步的引物应与mRNA尾部的PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）互补配对，即用多聚胸腺嘧啶脱氧核苷酸序列为引物；设计引物的目的是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。

（2）对逆转录得到的cDNA扩增时；引物的5'端结合母链的3'端之后DNA聚合酶开始扩增DNA。为确保其与pET41a质粒定向连接，应使用不同种的限制酶切割质粒和目的基因，由图可知，使用EcoRI酶会破环SSB基因，故应在相应引物的5'端加上BamHI和XhoⅠ酶切位点。

（3）由题图分析可知：质粒上存在卡那霉素和氯霉素抗性基因，由于XhoⅠ酶破坏了氯霉素抗性基因，所以成功组装的重组质粒不能在添加了氯霉素的培养基上生长，③过程用重组质粒转染大肠杆菌时，需要用Ca2+处理大肠杆菌；目的是使大肠杆菌成为易于吸收外源DNA的状态，然后分别将处理后的大肠杆菌先接种在添加卡那霉素的培养基（A）上培养，待长出菌落后再利用无菌膜同位置转移到添加氯霉素的培养基（B）上培养，收集能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素培养基上生长的菌落进一步纯化后将菌体破碎处理，经筛选即可得到SSB蛋白。

（4）将改造后的大肠杆菌生产的SSB蛋白注入到小鼠体内是为了检测该蛋白是否具有抗原性，如果该蛋白有抗原性，会引起机体的免疫反应，产生相应抗体。则后续实验内容应为抽取小鼠血液提取其中的抗体，利用抗原—抗体杂交的方法检测其是否含有抗SSB的抗体。【解析】(1)逆转录用多聚胸腺嘧啶脱氧核苷酸序列为引物

使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸

(2)5’BamHⅠ和XhoI

(3)使大肠杆菌成为易于吸收外源DNA的状态卡那霉素氯霉素能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素培养基上生长的。

(4)提取其中的抗体，利用抗原—抗体杂交的方法检测其是否含有抗SSB的抗体六、综合题(共4题，共32分)22、略

【分析】【分析】

分析题图：①是分离得到的细胞核；②是囊胚中的内细胞团细胞；具有发育的全能性；③是核移植技术；④是基因工程技术，过程图中涉及到的现代生物技术有基因工程；核移植技术、动物细胞培养、早期胚胎培养等技术。

（1）

由以上分析可知：图中①是分离体细胞后获得的细胞核；②是囊胚中的内细胞团细胞，因为这些细胞还未分化，具有全能性，可以定向诱导分化成各类细胞；组织、器官。

（2）

由以上分析可知：图中③将细胞核移植到去核的卵细胞中；表示核移植技术；④将健康胰岛B细胞基因导入内细胞团细胞中，表示转基因技术（或重组DNA技术或基因工程）。

（3）

）核移植时；通常用去核卵细胞作受体细胞，原因是：卵细胞体积大；易操作，含有的营养物质丰富，还含有促进细胞核全能性表达的物质。

（4）

过程④运用的基因工程技术需要用到的基因操作工具有限制酶；DNA连接酶和运载体。

（5）

图示方法属于体外基因治疗；因为同一生物体的人类淋巴细胞抗原相同，且细胞核来自患者自身的体细胞，所以与一般的异体移植相比，该方法不发生免疫排斥反应。

【点睛】

本题结合治疗遗传性糖尿病的过程设计图解，考查基因工程、细胞工程及胚胎工程的相关知识，意在考查考生的识图能力和识记能力；能理解所学知识要点的能力；能综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力。【解析】（1）细胞核内细胞团细胞。

（2）核移植技术转基因技术（或重组DNA技术或基因工程）

（3）含有促进细胞核全能性表达的物质。

（4）限制酶；DNA连接酶、运载体。

（5）不发生免疫排斥反应23、略

【分析】【分析】

1；单克隆抗体的制备时动物细胞融合技术的应用之一；此过程中需要先注射抗原，使生物体产生具有免疫能力的B淋巴细胞，再将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，并筛选出能产生特异性抗体和大量增殖的杂交瘤细胞，最后经过体内和体外培养获取单克隆抗体。

2；单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高；并可能大量制备的优点。

【详解】

（1）根据题意“新型冠状病毒可通过表面的刺突蛋白（S蛋白）与人呼吸道粘膜上皮细胞的ACE2受体结合；单克隆抗体可阻断病毒的粘附或入侵”可知，制备抗新冠病毒的单克隆抗体，首先需要给小鼠注射纯化的S蛋白，以获得可生产抗S蛋白的抗体的B淋巴细胞。以小鼠的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤：取小鼠脾脏剪碎，用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶，或机械的方法）处理使其分散成单个细胞，再加入培养液制成单细胞悬液。

（2）用灭活的病毒诱导免疫的淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后；在HAT培养基把杂交瘤细胞选出来，之后还需要进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得能分泌单一抗体的杂交瘤细胞。

（3）该杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或注射到小鼠的腹腔内使其增殖；从培养液或小鼠腹水中提取大量的单克隆抗体。体外培养与体内培养相比，除需满足营养条件外，还需要提供无菌；无毒的环境，（适宜的）温度、pH和渗透压；（适宜的）气体环境。

（4）抗S蛋白单克隆抗体比一般抗血清优越得多；原因是纯度高；灵敏度高、识别抗原部位专一，能准确的识别抗原的细微差别，与S蛋白发生特异性结合，而且可以大量制备。

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