2024-2025学年高中生物第一章无菌操作技术实践第二节分离特定的微生物并测定其数量知能演练轻巧夺冠苏教版选修1

PAGEPAGE1其次节分别特定的微生物并测定其数量[随堂检测][学生用书P19]学问点一微生物分别和纯化方法1．下列关于微生物分别的叙述中，错误的是()A．平板分别法能将单个微生物经过培育形成便于移植的菌落B．只有细菌才可以形成菌落，所以只有分别细菌时才可能获得菌落C．平板分别法有涂布平板法和混合平板法等D．涂布平板法得到的菌落仅在平板的表面生长解析：选B。大多数细菌、很多真菌和单细胞藻类均能在固体培育基上形成菌落。2．分别纯化大肠杆菌最常用的方法是平板划线法和涂布平板法。下列有关这两种方法的叙述错误的是()A．均将大肠杆菌接种在固体培育基的表面B．获得的每个菌落均是由一个细菌繁殖而来的子细胞群C．都应在酒精灯火焰旁边进行操作，以防止杂菌污染D．稀释分散菌种的原理不同，均能达到分别纯化大肠杆菌的目的解析：选B。用涂布平板法时，假如稀释得当，在平板表面或琼脂培育基中就可出现分散的单个菌落，这个菌落可能是由一个细菌细胞繁殖形成的。3．漆酶属于木质降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。下图是分别、纯化和保存漆酶菌株的过程，下列相关叙述错误的是()A．生活污水中含有大量微生物，是分别产漆酶菌株的首选样品B．筛选培育基中须要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落C．在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步纯化D．在相宜温度下，接种后的斜面培育基上菌落长成后，可在低温下临时保存菌株解析：选A。生活污水中含有大量微生物，但不确定含有产漆酶的菌株，A错误；筛选培育基中须要加入漆酶的底物，只有产漆酶的微生物才能在该培育基上生长，进而通过菌落特征挑出产漆酶的菌落，B正确；由图可知，在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步纯化，C正确；在相宜温度下，接种后的斜面培育基上菌落长成后，可在低温下临时保存菌株，D正确。学问点二土壤微生物的分别和计数4．下列关于纤维素分解菌分别试验的说法，不正确的是()A．通常采纳刚果红染色法筛选纤维素分解菌B．从土壤中分别含量较多的微生物时，选择培育可以省略C．该试验用到选择和鉴别培育基D．在用刚果红染色法中，若将微生物培育在事先加入刚果红的培育基上，出现透亮圈的菌落确定为所需菌种解析：选D。刚果红能鉴别纤维素，可采纳刚果红染色法筛选纤维素分解菌，A正确；从土壤中分别含量较多的微生物时，选择培育可以省略，但须要进行鉴别培育，B、C正确；有些微生物具有降解色素的实力，它们在长时间培育过程中会降解刚果红而形成明显的透亮圈，故出现透亮圈的菌落不确定为所需菌种，D错误。5．如图为“土壤中分解尿素的细菌的分别和计数”试验中样品稀释示意图。据图分析正确的是()A．3号试管的稀释倍数为103倍B．4号试管中稀释液进行平板培育得到的菌落平均数恰好为5号试管的10倍C．5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×109个D．该试验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高答案：C6．某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物汲取和利用。回答下列问题：(1)有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，缘由是前者能产生________________________。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源，缘由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是________________________________________________________________________(答出两点即可)。(2)为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培育基时，应选择________(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”)作为氮源，不选择其他两组的缘由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)用来筛选分解尿素细菌的培育基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有________________________________________________________________________(答出两点即可)。解析：(1)土壤中的某些细菌之所以能够分解尿素，是因为它们能产生脲酶。尿素分解菌是异养生物，不能利用CO2来合成有机物，必需利用现成的有机物(如葡萄糖)作为碳源；葡萄糖通过呼吸作用被分解时，能为细胞生命活动供应能量，同时，葡萄糖还可以转化成脂肪、某些氨基酸等物质，所以进入细菌体内的葡萄糖能为其他有机物的合成供应原料。(2)选择培育基是只允许特定种类的微生物(目的微生物)生长，同时抑制或阻挡其他种类微生物生长的培育基。本试验的目的菌是可分解尿素的细菌，因此，配制的培育基应只允许尿素分解菌生长，NH4NO3可以作为全部细菌的氮源，培育基中如含有NH4NO3，将不能起到筛选作用。(3)KH2PO4和Na2HPO4能为细菌生长供应钾盐、钠盐和磷酸盐，而H2POeq\o\al(－,4)/HPOeq\o\al(2－,4)可以使培育基中pH保持相对稳定。答案：(1)脲酶分解尿素的细菌是异养生物，不能利用CO2来合成有机物为细胞生命活动供应能量，为其他有机物的合成供应原料(2)尿素其他两组都含有NH4NO3，能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3，不能起到筛选作用(3)为细菌生长供应无机养分，作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定[课时作业][学生用书P65(单独成册)]一、选择题1．下图所示的四种菌落分布图中，用平板划线分别法得到的是()解析：选D。平板划线法是指用带有微生物的接种环在平板培育基表面通过分区划线而达到纯化分别微生物的一种方法，如图D所示。2．产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培育基分别是()A．一个细菌、液体培育基B．很多细菌、液体培育基C．一个细菌、固体培育基D．很多细菌、固体培育基解析：选C。菌落是单个微生物在相宜的固体培育基表面或内部生长、繁殖到确定程度，形成的肉眼可见的、有确定形态结构的子细胞生长群体。3．欲从土壤中分别出能分解尿素的细菌，下列试验操作中不正确的是()A．将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释B．同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板C．可将未接种的培育基在相同条件下培育作为比照D．用加入刚果红指示剂的培育基可筛选出分解尿素的细菌解析：选D。A选项：为防止土壤浸出液浓度过高，不能获得单菌落，要将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释，A正确。B选项：同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板，防止偶然因素对试验结果的影响，B正确。C选项：可以将未接种的培育基在相同条件下培育作为比照，以推断培育基灭菌是否彻底，C正确。D选项：用加入刚果红指示剂的培育基可筛选出分解纤维素的细菌，D错误。4．将0.1mL101、102、103倍稀释的土壤悬液分别接种在固体平板上，得到的平均菌落数为2760、585和46，则细菌总数(个/mL)为()A．2.76×105 B．5.86×105C．4.6×105 D．4.4×105解析：选C。留意菌落计数法计算的是不同稀释度的平均菌落数。首先选择平均菌落数在30～300之间的，只有一个稀释倍数的平均菌落数符合此范围，所以细菌总数为：46÷(0.1)×103(个/mL)，即4.6×105个/mL。5．下列能选择出分解尿素的细菌的培育基是()A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、水C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、水D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水解析：选A。能选择出分解尿素的细菌的培育基，应是只以尿素作为唯一氮源的培育基，B选项没有氮源；C选项没有碳源；D选项没有尿素，有蛋白胨和牛肉膏。6．下列有关涂布平板操作的叙述，不正确的是()A．将涂布器在酒精灯火焰上灼烧，直到烧红B．取少量菌液滴加在培育基表面C．将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8～10s再运用D．涂布时可转动培育皿，使涂布匀称答案：A7．苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，探讨人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，①为土壤样品。下列相关叙述错误的是()A．图中②培育目的菌株的选择培育基中应加入苯酚作为碳源B．假如要测定②中活细菌数量，常采纳涂布平板法C．若图中④为比照组，则其中应以苯酚作为唯一碳源D．运用平板划线法可以在⑥上获得单菌落答案：C8．分别土壤中分解尿素菌的试验操作中，对于获得纯化的尿素分解菌的单菌落影响最大的是()A．制备浸出液的土壤取自土壤的表层B．涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌C．牛肉膏蛋白胨培育基中添加尿素作为氮源D．接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒解析：选C。制备浸出液的土壤取自土壤的表层与纯化的尿素分解菌的单菌落有关但影响不大，A错误；涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌可能会造成污染，与纯化的尿素分解菌的单菌落有关但影响不大，B错误；该培育基必需以尿素为唯一的氮源，不能运用牛肉膏蛋白胨培育基或在其中添加尿素作为氮源，该操作对试验影响最大，C正确；接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒，可能会造成污染，与纯化的尿素分解菌的单菌落有关但影响不大，D错误。9．利用农作物秸秆等纤维质原料生产的乙醇，经加工可制成燃料乙醇，从而削减了对石油资源的依靠，下图为生产燃料乙醇的简要流程，据图分析错误的是()A．要得到微生物A，最好选择富含纤维素的土壤采集土样B．图中②过程常用的微生物B是酵母菌C．微生物A和微生物B可利用的碳源相同D．可用纤维素酶制剂代替微生物A起作用解析：选C。微生物A所用碳源为纤维素，微生物B所用碳源为纤维素降解物。10．在做分别分解尿素的细菌试验时，甲同学从对应106倍稀释的培育基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。甲同学的结果产生缘由可能有()①土样不同②培育基污染③操作失误④没有设置比照A．①②③ B．②③④C．①③④ D．①②④解析：选A。甲同学比其他同学的试验数据大很多，可能由于选取的土样不同，培育基灭菌不彻底或操作过程中杂菌污染，也可能操作失误，如配制的培育基中混入其他含氮物质、稀释度不够精确等。11．原油中含有大量有害的、致癌的多环芳烃。土壤中有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源，在培育基中形成分解圈。为筛选出能高效降解原油的菌株并投入除污，某小组同学设计了相关试验。下列有关试验的叙述，不正确的是()A．应配制来源于被原油污染土壤的土壤稀释液备用B．配制以多环芳烃为唯一碳源的选择培育基C．将土壤稀释液灭菌后接种到选择培育基上D．在选择培育基上能形成分解圈的即为所需菌种解析：选C。为了筛选、获得能利用多环芳烃为碳源的菌种，首先取材，配制来源于被原油污染土壤的土壤稀释液备用，A项正确；其次配制以多环芳烃为唯一碳源的选择培育基，B项正确；然后进行接种，在无菌环境下，将土壤稀释液接种到选择培育基上，在相宜的条件下进行培育，若将土壤稀释液灭菌，就不能筛选出能高效降解原油的菌株，C项错误；在选择培育基上形成的菌落，若该菌落四周有分解圈，即为所需菌种，D项正确。12．下面是鉴别纤维素分解菌的培育基，推断鉴别纤维素分解菌的现象应是()羧甲基纤维素钠5～10g酵母膏1gKH2PO40.25g琼脂15g土豆汁100mL用蒸馏水定容到1000mLA.在液体培育基中有微生物存活B．在固体培育基的表面有菌落的形成C．加入刚果红溶液，在固体培育基上有透亮圈形成D．培育基的表面有微生物进行细胞分裂解析：选C。该培育基是含有丰富自然有机养分成分的固体培育基。不仅有分解纤维素的微生物的生长，还有其他微生物的生长，它们都能形成相应的菌落，但只有能分解纤维素的微生物，用刚果红溶液染色，能在其菌落四周出现透亮圈，而其他微生物的菌落四周因为没有纤维素的分解，不能形成透亮圈。微生物个体微小，并不能用肉眼视察微生物的细胞分裂。二、非选择题13．从自然菌样中筛选较志向生产菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培育→纯种分别→性能测定。(1)不同微生物的生存环境不同，获得志向微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按确定的方法分别、纯化。培育嗜盐菌的菌样应从________(填“高盐”或“低盐”)环境采集，培育厌氧菌的菌样应从________(填“有氧”或“无氧”)环境采集。(2)富集培育指创设仅适应于该条件的微生物旺盛生长的特定的环境条件，使待分别微生物在群落中的数量大大增加，从而达到从自然界中分别到所需的特定微生物目的的微生物培育方法。对嗜盐菌富集培育的培育基应是________培育基；对含耐高温淀粉酶的微生物富集培育应选择________________的培育基，并在________条件下培育。(3)试验室最常用的灭菌方法是利用高温处理达到杀菌的效果。高温灭菌的原理是高温使微生物的蛋白质和核酸等物质发生________。________灭菌法是微生物探讨和教学中应用最广、效果最好的湿热灭菌法。(4)如图是采纳纯化微生物培育的两种接种方法接种后培育的效果图解，请分析接种的详细方法。获得图A效果的接种方法是____________________________________________；获得图B效果的接种方法是____________________________________。解析：(1)在长期自然选择的作用下，生物与其生活环境相适应，培育嗜盐菌的菌样应从高盐环境中采集，培育厌氧菌应从无氧环境中采集。(2)对嗜盐菌富集培育的培育基应是加盐培育基，对含耐高温淀粉酶的微生物富集培育应选择以淀粉为唯一碳源的培育基且在高温条件下培育。(3)高温能使蛋白质和核酸发生不行逆转的变性，高压蒸汽灭菌法是应用最广、效果最好的湿热灭菌法。(4)从培育基中菌落分布看，获得图A用的是涂布平板法，获得图B用的是平板划线法。答案：(1)高盐无氧(2)加盐以淀粉为唯一碳源高温(3)变性高压蒸汽(4)涂布平板法平板划线法14．植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解，回答下列问题：(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合物，其中的葡萄糖苷酶可将__________分解成______________。(2)在含纤维素的培育基中加入刚果红(CR)时，CR可与纤维素形成_______________色复合物。用含有CR的该种培育基培育纤维素分解菌时，培育基上会出现以该菌的菌落为中心的___________________。(3)为从富含纤维素的土壤中分别获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培育基(成分见下表)。酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水培育基甲＋＋＋＋－＋＋培育基乙＋＋＋－＋＋＋注：“＋”表示有，“－”表示无。据表推断，培育基甲____________________(填“能”或“不能”)用于分别和鉴别纤维素分解菌，缘由是________________；培育基乙________________(填“能”或“不能”)用于分别和鉴别纤维素分解菌，缘由是______________________。解析：(1)微生物产生的纤维素酶是一种复合酶，包括Cx酶、C1酶和葡萄糖苷酶，其中的葡萄糖苷酶可将纤维二糖分解成葡萄糖。(2)在含纤维素的培育基中加入刚果红(CR)时，CR可与纤维素形成红色复合物，用含有CR的该种培育基培育纤维素分解菌时，培育基上会出现以该菌的菌落为中心的透亮圈。(3)分析表格可知，培育基甲为液体培育基，不能用于分别和鉴别纤维素分解菌，纤维素分解菌鉴别培育基属于固体培育基。培育基乙不能用于分别和鉴别纤维素分解菌，缘由为培育基中没有纤维素，不会形成CR—纤维素红色复合物。答案：(1)纤维二糖葡萄糖(2)红透亮圈(3)不能液体培育基不能用于分别单菌落不能培育基中没有纤维素，不会形成CR—纤维素红色复合物15．土壤有“微生物的自然培育基”之称，下图表示对土壤中某种微生物进行分别和计数而进行的对样品的稀释和稀释液的取样培育流程示意图。请据图回答有关问题：(1)图示统计样品活菌数目的方法叫做________法，主要包括________操作和________操作。(2)当样品的稀释度足够高时，培育基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的________，一般选择菌落数在____________之间的平板进行计数。(3)图中各试管间的“箭头”表示的操作过程是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。这一操作过程中每一步都要在火焰旁边进行。(4)图中选择了104、105、106倍的稀释液进行平板培育，最可能是测定土壤中________的数量，这个平板须要在________的