核酸扩增技术分子生物学检验技术生物化学检验教研室82课件

分子生物学检验技术核酸扩增技术生物化学检验教研室学习目标掌握：PCR技术的基本原理及反应体系；及PCR产物电泳检测方法。熟悉：PCR常见问题及体系优化；实时荧光定量RCR的原理。了解：PCR衍生技术；产物的其他检测方法；PCR方法标准化。目录聚合酶链反应01PCR衍生技术02CONTENTS分子生物学检验技术CONTENTSPCR检测技术的临床应用03PCR检测技术的临床应用PART03PCR检测技术的临床应用01感染性疾病的诊断。02母婴传播的控制与观察。03遗传疾病的诊断。04肿瘤的诊断。05法医学鉴定。06早期诊断。07病情评估和预后判断。08抗病毒药物疗效的观察、指导。09新药验证。一、感染性疾病病原体含量与病情之间的关系。01病原体含量与用药之间的关系。02药物及疗法的研究与开发。03新的病原体分子诊断标准。04新的愈后指标。05传染病发病的监控、预测与预防。06HBV-DNA定量检测的临床意义01“两对半”：机体的免疫反应状态；FQ-PCR：检测的是HBV本身的遗传物质—DNA，是病毒存在和复制的最可靠、最直接的指标。02“携带者”、“大三阳”、“小三阳”等免疫学指标不能反应体内病毒复制水平与感染程度。HBV-DNA定量与HBV复制水平及传染性。HBV-DNA定量与乙肝药物疗效。a.专家提出<103copy/mL做为阴性或临床治愈标准;b.HBV-DNA定量分析与干扰素治疗（前、中、后）;c.拉咪呋啶。HBV-DNA定量与预后。a.含量高者急性肝炎患者易慢性化;b.癌变的几率明显高于含量低者。一、感染性疾病常见性传播疾病病原体淋球菌（NGH）沙眼衣原体（CT）解脲脲原体（UU）梅毒螺旋体（TP）单纯庖疹病毒（HSV）乳头瘤病毒（HPV）人类免疫缺陷病毒（HIV）淋球菌感染与致病人是淋球菌的唯一宿主。发病率最高，在所STD疾病中，高达60%左右。发病趋势：a.男性多于女性。b.城市走向农村;c.高收入阶层向低收入阶层扩展。人对淋球菌感染无天然抵抗力，免疫不持久，再感染和慢性患者普遍存在。如母亲为淋病患者，婴儿出生时易患上淋球菌性结膜炎。沙眼衣原体感染与致病01严格的细胞内寄生。02不仅可致眼部感染、肺部感染、也是STD的主要病原体。03近年来在欧美等国，沙眼衣原体的感染率和危害性已超过淋球菌而居STD之首。04在我国，在非淋球菌性尿道炎中，居首位。05泌尿生殖道感染，妨碍妊娠。06盆腔感染，可致生殖能力损害。解脲脲原体感染与致病合成尿素酶，分解尿素。在非淋球菌性尿道炎其感染率仅次于衣原体感染，居第二位。流产超过4次以上者，检出率高达80%。有30-40%男性尿道炎是由感染UU所致。与男性不育相关。男性不育患者精液中，脲原体检出率高达66.6％。检出率随精子数减少和精子活动力下降而升高。荧光定量PCR诊断NGH/CT/UU的意义01非培养或形态学检查的诊断技术，快速、特异、敏感。02对无症状或症状轻者，可以早期确诊。03对NGH、CT、UU等混合感染者，诊断和鉴别诊断。04指导用药、考核疗效。病毒实验室检测类型---病毒实验室诊断方法方法检测核酸检测病毒检测抗体/抗原ELISA/HI/PA蛋白印迹中和试验基因芯片病毒分离ELISA电镜免疫荧光RT-PCR实时荧光定量PCR二、肿瘤癌胚抗原、同工酶、抗体、激素、细胞因子、受体等。肿瘤标志物包括癌基因抗癌基因、肿瘤转移基因及转移抑制基因。肿瘤相