2024北京高三一模生物汇编：生物技术与工程

2024北京高三一模生物汇编

生物技术与工程

一、单选题

1.（2024北京延庆高三一模）安徽名菜“臭锻鱼”是以新鲜锻的为原料，配以食盐、花椒等辅料，由乳酸菌

等多种微生物共同发酵制成。下列相关叙述错••误的是（）

A.在制作过程中加入花椒、食盐是为了灭菌和提鲜

B.经过发酵，螂鱼的蛋白质被分解为肽和筑基酸，肉质变得更加鲜嫩

C.乳酸菌是厌氧微生物，家庭制作臭蹶鱼需要用保鲜膜将鱼裹好、用重物压实

D.利用从自然发酵的臭蹶鱼中分离的乳酸菌可以制作果酒、果醋等其它发酵产品

2.（2024北京延庆高三一模）研究发现，为心梗患者注射适量i・PA蛋白会诱发颅内出血，但若将t-PA第

84位的半胱氨酸换成丝氨酸，能显著降低出血等副作用，改良后的t-PA蛋白成为心梗和脑血栓的急救药。

下图所示，通过基因工程大量制备改良药物1-PA蛋白，下列说法第识的是（）

限制酶识别序列和切割位点

t-PA改良基因

B0口AGATCTCCGG

▼

NheIGCTAGC

▼

SmaICCCGCG

X?naICCCGGG

neor：新毒素抗性基因

mlacZz表达产物会使细胞呈蓝

色否则细胞呈白色

A.制备改良t・PA蛋白的过程属于蛋白质工程

B.利用重组pCLYll质粒可获得牛乳腺生物反应器

C.选用限制随Xmal和Bglll切割质粒pCLYll,构建重组质粒

D.成功导入重组质粒的受体细胞在含有新霉素的培养基上能存活，且呈现蓝色

3.（2024北京延庆高三一模）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，下列相关叙述正

确的是（）

成分蛋白陈乳糖蔗糖K2HPO4指示剂琼脂

含量（g）1().05.05.02.00.212.0

将上述物质溶解后，用蒸储水定容到1000mL

A.蛋白陈可为目标微生物提供氮源

B.根据用途划分，该培养基属于选择培养基

C.该培养基也可用来筛选土壤中的尿素分解菌

D.该培养基的制备流程为灭菌-加入琼脂—倒平板

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4.（2024北京延庆高三一模）下图为某生物工程操作流程模式图，①、②为具体制备方法。下列叙述正确

的是（）

①

A.若此图表示植物体细胞杂交，则①表示脱分化，②表示再分化

B.若此图表示单克隆抗体的制备，则①可用灭活的病毒进行诱导

C.若此图表示克隆羊的培育，则①涉及到体外受精、核移植等技术

D.若此图表示胚胎分割移植，则②要对囊胚和原肠胚进行分割处理

5.（2024北京延庆高三一模）下麦中有关人体细胞化合物的各项内容，正确的是（）

编号检测化合物检测试剂颜色反应组成单位主要功能

①脂肪苏丹【II染液橘黄色脂肪酸直接能源物质

蛋白质双缩嘛试剂紫色氨基酸承担生命活动

③糖原斐林试剂砖红色葡萄糖提供能量

④核酸二苯胺染液绿色核甘酸携带遗传信息

A.①B.②C.③D.@

6.（2024北京石景山高三一模）蛛丝蛋白是一种特殊纤维蛋白，具有强度高、韧性大等特点，在人工肌腱

等医学领域有着诱人的前景。某研究小组提取一种丝绒蜘蛛中的蛛丝蛋白基因，将其导入大肠杆菌生产蛛

丝蛋白。下列叙述正确的是（）

A.构建蛛丝蛋白基因表达载体需要限制酶和DNA聚合酷

B.可通过显微注射的方法将蛛丝蛋白基因导入大肠杆菌

C.基因表达载体上的复制原点可调控蛛丝蛋白基因的表达

D.可通过蛋白质工程设计与改造蛛丝蛋白的结构以增强其韧性

7.（2024北京石景山高三一模）应用植物体细胞杂交技术获得“人参-胡萝卜”杂种植株，拓展了植物的种质

资源。下列叙述正确的是（）

A.该技术能体现植物细胞具有全能性

B.该过程需要使用纤维素酶与胰蛋白醯

C.利用灭活的病毒诱导原生质体融合

D.该技术只适用于染色体数目相同的两个物种

8.（2024北京石景山高三一模）曲酸（KA）对沙门氏菌具有抑制作用。为研究荷叶提取物（LLE,用乙醵

作提取液）对沙门氏菌的抑菌效果，开展抑菌实验，结果如图。下列叙述不正确的是（）

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含LLE的滤纸片

对照含KA的滤纸片

A.培养皿和培养基都要经过灭菌处理

B.倒平板操作应在酒精灯火焰旁进行

C.对照组的漉纸片上滴加的是无菌水

D.LLE抑制沙门氏菌的效果比KA好

9.（2024北京石景山高三一模）下列高中生物学实验中，涉及“培养”的操作不正确的是（）

A.外植体脱分化的培养过程需要给予适当光照

B.多能干细胞的培养液中需添加动物血清

C.可在96孔板上培养并筛选特定的杂交瘤细胞

D.在体外受精前需要将精子进行获能培养

10.（2024北京丰台高三一模）以下实验操作能达成所述目标的是（）

A.用淀粉、淀粉酶、碘液探究pH对酶活性的影响

B.用平板划线法对培养的微生物进行分离和计数

C.用次氯酸对外植体进行消毒可杜绝微生物污染

D.制作腐乳时向豆腐接种毛霉可以加快发酵进程

11.（2024北京丰台高三一模）人白细胞介素-2（IL-2）是一种细胞因子，含有3个半胱氨酸，分别位于第

58、105、125位，其中58位与105位半胱氨酸之间形成的二硫键对保持IL-2活性起重要作用。用大肠杆

菌生产IL-2,为保证产物活性，将IL-2基因中编码125位半胱氨酸的序列突变为丝氨酸序列。下列叙述错

误的是（）

A.突变的IL-2基因的序列发生了碱基时的增添

B.天然的和基因工程生产的IL-2均在核糖体上合成

C.突变的IL-2基因的表达降低了二硫键错配的可能

D.大肠杆菌中IL-2基因的发制和表达遵循中心法则

二、非选择题

12.（2024北京延庆高三一模）大肠杆菌能进入实体瘤核心并保持较强活性，科研人员期望利用大肠杆菌构

建一种基因表达可控的工程菌，期望用于人体特定部位实体瘤的免疫治疗。

（1）科研人员利用温度敏感型转录调控蛋白构建温控表达的质粒系统，如下图。

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注：1.基因花出是抗四环素的抗性基因；G尸P基因是绿色荧光蛋白基因。

2.和是重组酶B功/作用位点，在其作用下可以发生1次同源重组。

3.是终止子，可以有限终止其上游基因的转录。

①利用来自九噬菌体的温度敏感型转录抑制因子Tcl42作为“开关”构建温控抑制元件，在（选填“噬菌

体”、“大肠杆菌”或“人”）中具强活性的启动子pLac可以使Tcl42持续性表达，抑制启动子pRL；当控温至

42c时才开启特定基因的表达。

②TC142开关仅在加热时瞬时激活特定基因，而免疫疗法需要数周才能见效，所以设计了“基因电路”———

次短暂的温度激活后可维持长期的基因表达。其核心基因包括重组酶Bxbl基因、分泌型aPD-Ll蛋白基因

（该蛋白可用免疫治疗）等。

请选择相关选项完善该“基因电路”的技术路线：及质粒，获基因电路一受体菌37C时，蛋白Tcl42

抑制启动子pRL—-免疫元件无功能（不表达aPD-Ll）--解除蛋白Tcl42对启动子pRL

的抑制—->->细菌合成GFP,并分泌大量aPD-Ll。

A、重组的Bxbl基因不表达B、菌体升温至42c时

C、用不同的限制酶、DNA连接酶分别处理温控抑制元件、重组元件、免疫元件

D、启动子p7启动荧光蛋白GFP基因、aPD-Ll基因的转录

E、重组随Bxbl基因表达，进而引起启动子p7两侧发生重组

（2）科研人员用处理大肠杆菌，使其处于感受态，从而将“基因电路''质粒导入菌体内，经过培养、涂布

后，筛选_____（选项），由此成功构建用于免疫治疗的温控工程菌（氏T）。

A、含有四环素的培养基上形成的菌落B、具有绿色荧光的菌落

C、同时具有A和B特征的菌落D、具有A或B特征的菌落均可

（3）使用聚焦超声（FUS）装置，可以使动物特定范围的组织快速升温至42℃,从而实现体内微生物治疗的

温度控制。为验证上述温控工程茵的治疗肿瘤效果，选取若干组生理状态相近的小鼠，经过7天的成瘤建

模后，分别进行如下处理，并检测记录小鼠体内肿瘤体积。

第I组：注射生理盐水，2天后FUS处理；

第2组：注射温控工程菌，2天后FUS处理。请评价并完善实验方案o

最终证明温控工程菌可被FUS处理局部激活，并具有持续性肿瘤免疫治疗效果。

（4）若期望将上述温控工程菌用于临床实验，还需利用小鼠开展方面的研究。

13.（2024北京丰台高三一模）研究人员利用水稻突变体对相关基因进行研究。

（1）洛水稻“中花11”的叶片愈伤组织与农杆菌共培养，外源T・DNA（含bar标记基因）会整合到水稻基因组,

获得水稻突变体库。该突变体库中包含株高、叶色、叶型、育性、分槃数等明显性状改变，构建该突变体

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库的过程中，引起性状改变的原因可能有

A.实验操作中其它微生物的污染

B.实验过程中偶然接触紫外线或化学药品

C.DNA复制过程中的DNA序列变化

D.外源T-DNA的插入导致DNA序列变化

E.组织培养过程中染色体的互换

（2）对突变体库进行自交和表型筛选获得纯合的早衰突变体。为研究早衰突变与T-DNA整合之间的关系，将

纯合的早衰突变体与“中花II”回交之后，分析F2的性状分离情况和对'bar基因的PCR检测结果:

①若出的正常植株：早衰植株=3：1,则突变体的早衰性状是由__________控制的；

②若F2的所有植株中含bar基因与不含bar基因之比为3：1,则T-DNA是单个插入；

③若F?的,则该突变为T-DNA插入引起。

经检验，实验结果与预期相符。请在下图中标出bar基因（用表示）可能的位置.

—衰老相关基因一

（3）为获得该衰老相关基因，研究人员设计了外源接头介导的PCR进行扩增，主要过程见下图。外源接头包

括长单链接头和短单链接头，二者部分互补。以长单链接头的部分序列为引物a和b,根据T-DNA已知序

列设计引物c、d、c、fo

实验的主要流程为：用限制瞄切割基因组DNA产生多种片段一分别连接上外源接头一以d为引物合成一条

子桂，再以为引物合成互补链，得到PCR产物I-为减少非特异性扩增，以为引物

进行PCR得到产物3（同理得到产物2和产物4）一对产物3和产物4进行序列分析和功能鉴定。

4限制酶切割

壮长单链接头

1外源街头连接应电链接头

（4）引起衰老的主要因素有环境因素、植物激素的调节和等。该研究为延缓水稻衰老、提高水稻

产量提供了理论依据。

14.（2024北京石景山高三一模）贝氏不动杆菌（A菌）是一种非致病性细菌，可从环境中吸收DNA并整

合到自身基因组中，此过程被称为基因水平转移（HGT）。科学家试图利用A菌的HGT能力检测结肠癌。

（1）通常用含蛋白豚的培养基培养A菌，蛋白陈能提供碳源、氮源等成分，其中氮源可用于合成—等物质

（答出2个即可〉。

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(2)结肠癌常由KRAS基因中GI2位点突变导致，科学家以其作为结肠癌检测点。

G12位点启动子

KRAS基因I,二

表达载体三=

KRASKRAS

片段1片段2

注：kad为卡那霉素抗性基因

图1图2

①如图1所示，将针对KRAS基因设计的表达载体导入结肠癌细胞，某种酶能从相同序列特定位点切断—

键，修复过程中切口被重新连接，从而实现特定基因片段的替换，获得转基因癌细胞。

②为验证A菌具有吸收特定DNA片段的能力，依据①中的原理，构建图2所示的表达载体，导入A菌中

获得传感器A。将传感器A与转基因癌细胞裂解液混合，一段时间后，观察传感器A在不同培养基中的生

长情况。请从a〜e中选择I、H、川分别对应的序列—。

a.KRAS片段1

b.KRAS片段2

c.kaiiR

d.specR(壮观霉素抗性基因)

c.G12位点

能证明传感器A发生特异性HGT的实验结果是—。

(3)肿瘤细胞可将DNA释放到肠腔中，临床检测时需将细菌传感器定植于待测者结肠处，一段时间后对粪便

中的细菌进行培养，观察生长情况。为实现上述目的，需改造A菌使其仅能降解正常的KRAS序列，并对

图2所示表达载体进行进一步改造(如图3)。请分析其能检测tl结肠癌的机理―。

kaM抑制基因启动子

诱导型kanR

启动子

图3

15.(2024北京丰台高三一模)太谷核不育小麦是完全的雄性不育突变体，是国宝级的种质资源。它的花药

的退化在减数分裂早期阶段开始，导致所有花药败育。

(1)小麦的太谷核不育和矮变一号均为单基因突变体，太谷核不育为高秆核不育，矮变一号为矮秆可育，株

高基因用A、a表示，育性基因用R、r表示。为了获得矮秆核不育重组类型，进行以下实验：

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i.太谷核不育为母本与矮变一号杂交，得到日一半为矮秆核不育，一半为矮秆可育;

B矮杆核不自为母本与野生型测交，得到矮杆口J自152株和局杆核不自169株。

根据以上结果可知，太谷核不育和矮变一号的基因型分别为,两对等位基因的遗传(符合/

不符合)自由组合定律。

(2)重复上述实验并扩大数量，在得到的8374株测交子代中分离出14株矮秆不育株。进行细胞学检查发现,

仅有1株为正常二倍体。请设计杂交实验验证该正常二倍体的矮秆不育株为所需类型，并预期子代的表现

型及比例。

(3)推测P基因就是使太谷核不育小麦败育的基因。以下事实支持该推测的是二

A.显性的P基因一直处于杂合状态

B.P基因缺失或突变后小麦育性恢复

C.P基因的表达会引起转基因细胞的死亡

D.与核不育基因紧密连锁的分子标记与P基因也紧密连锁

E.P基因只在不育植株的花中表达，在可育植株中不表达

(4)为验证上述推测，研究人员在野生型小麦中获得了P等位基因的启动子，并发现所有的雄性不育植株都

特异性地携带了TRIM序列。然后利用Ti质粒构建表达载体，部分结构如下图所示，GFP表达后会发出绿

色荧光。

I

-左边界一抗除草剂基因1IIGFP兔ILJ右边界一

将载体转入小麦幼胚，获得转基因植株，对植株表型和P基因表达情况进行鉴定。从a~i中选择填表。

a.Ubi(通用的强启动子)b.P等位基因启动子c.插入TRIM序列的P等位基因启动子d.P编码区

e.P基因f.无关基因g.仅在花药发育S2期表达h.在花药发育各时期均不表达

i.在根、茎、叶、雌蕊中均不表达

实验材料转入载体组成IH植株表型P基因表达情况

核不育小麦雄性不育gi

野生型小麦可育hi

野生型小麦ad死亡

野生型小麦①________②—gi

在存活的转基因小麦花药中特异性检测到绿色荧光。以上实验结果显示,导致雄性不育。

(5)矮秆核不育小麦是便利的遗传改良工具，请说明雄性不育在育种中优势―o

16.(2024北京丰台高三•模)紫杉醇是存在于珍稀植物红豆杉体内的•种次生代谢产物，具有高抗癌活性。

(1)利用植物细胞培养生产紫杉醇的过程(体现/未体现)细胞的全能性,与从天然红豆杉植株中

提取相比，该技术的意义是。

(2)灵芝诱导了可能通过介导植物的防御反应来促进紫杉醉合成，在最佳诱导条件下对红豆杉进行细胞悬浮

培养，结果如图1。

第7页/共”页

25

P□对照

P20

。口灵芝诱导子

朝15

脩1

(0

u

、

)g5

法0

罩

S220

40

NI若

60

间80

(

m

?=)8

81012162124

细胞悬浮培养时间(d)

图1

PPO能催化酚类物质氧化导致细胞褐化，进而使细胞膜的结构遭到破坏。PAL是紫杉醉形成途径中的关键

酶，经灵芝诱导子处理后，PAL活性与对照相比明显上升。结合图1,在答题卡的图中()内填入或

"_______O

(3)过去普遍认为紫杉醇通过抑制有丝分裂来发挥抗癌作用。用标准剂量紫杉醉治疗后对患者的乳腺癌细胞

进行研究，结果如图2。

。对照▲紫杉醇处理

*

繇

泄

前150

潜

％(

)

—••

234

患者编号

注：有丝分裂指数器表细胞增殖的活跃程度。

图2

以上实验结果是否支持传统认知的紫杉醇抗癌机理，请说明理由一°

(4)新的研究发现只有染色体不稳定性(CIN)水平高的乳腺癌患者才对紫杉醇敏感，推测紫杉醇可能通过提

高这类患者体内含多极纺锤体癌细胞的比例诱导癌细胞死亡。选择一种药物，结合必需的实验材料和试剂,

补充实验进行验证。

药物a：能提高CIN水平，且抑制有丝分裂

药物b：能提高CIN水平，但不能抑制有丝分裂

药物c：不能提高CIN水平，但能抑制有丝分裂

将CIN水平低的乳腺癌细胞分两组，,培养一段时间，结果显示实验组多极纺锤体癌细胞比例、

癌细胞死亡率均高于对照组.

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参考答案

1.D

【分析】1、发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品。它

涉及菌种的选育和培养、产物的分离和提纯等方面。

2、直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次发酵保存下来的面团、卤汁等发酵物中的微生物进

行发酵、制作食品的技术一般称为传统发酵技术。

【详解】A、花椒是香辛料，香辛料和食盐都有调节风味、提鲜和灭菌的作用，A正确；

B、发酵是指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物的过程。

锻鱼发酵过程中，乳酸菌等多种微生物分泌蛋白酶把鳏鱼的蛋白质被分解为肽和氨基酸，使鳏鱼肉质变得

更加鲜嫩，B正确；

C、乳酸杆菌是厌氧型微生物，腌制时，用保鲜膜将鱼裹好、并用重物进行压实处理，营造无氧环境，有利

于乳酸杆菌发酵，C正确；

D、制作果酒利用的微生物是酵冏菌，制作果醋利用的微生物是醋酸菌，D错误.

故选D。

2.D

【分析】1、基因工程是指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人

们需要的新的生物类型和生物产品。从技术操作层面看，由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施

工的，因此又叫作重组DNA技术。包括四个基本程序：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将

目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

2、蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过改造或合戌基因，来改

造现有蛋白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求。

【详解】A、蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过改造或合成基

因，来改造现有蛋白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求。依题意，改良后的药物

t-PA蛋白将t-PA第84位的半胱熨酸换成丝氨酸改良而来，因此，制备改良t-PA蛋白的过程属于蛋白质工

程，A正确；

B、科学家将药用蛋白基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起，通过显微注射的方法

导人哺乳动物的受精卵中，由这个受精卵发育成的转基因动物在进入泌乳期后，可以通过分泌乳汁来生产

所需要的药物,这称为乳腺生物反应器或乳房生物反应器。因此.利用重组pCLYll质粒也可获得牛乳腺生

物反应器，B正确；

C、t-PA改良基因的黏性末端如图所示，则所选的限制前所获得的切口应与t-PA改良基因的黏性末端相同，

因此需选用限制酶Xmal和BglII切开质粒pCLYll,C正确；

D、结合图示可知，限制的Xma【和Bgll【会破坏质粒pCLYU上的mlacZ,但不会破坏新霉素抗性基因，导

入重组质粒的大肠杆菌具有新霉素抗性，但由于mlacZ基因被破坏，没有相应产物，因而菌落呈现白色，D

错误。

故选Do

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3.A

【分析】选择培养基是将允许特定种类的微生物生长、同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基;鉴别培养

基是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物的培养

基。

【详解】A、蛋白陈（含有蛋白质成分等）可为目标微生物主要提供氮源，A正确；

B、从配方表中可看出，该培养基中含有指示剂，可以用来鉴别微生物，故该培养基属于鉴别培养基，B错

误；

C、若要筛选出土壤中的尿素分解菌，需要以尿素作为唯一氮源，需要将蛋白陈改为尿素才能用来筛选土壤

中的尿素分解菌，C错误；

D、该培养基的制备流程为加入琼脂—灭菌-倒平板，D错误。

故选Ao

4.B

【分析】1、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经

免疫的B淋巴细胞：诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，

筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从

培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体；

2、胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有

健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）;

②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑

棋或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查；

3、动物核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成

一个新的胚胎“这个新的胚胎最终发育为克隆动物.

【详解】A、若此图表示植物体细胞杂交，则①表示植物细胞融合，②表示植物组织培养，A错误；

B、若此图表示单克隆抗体的制备，则①表示B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，可用灭活的病毒进行诱导二者

融合，B止确；

C、克隆羊是无性繁殖，不涉及体外受精，C错误；

D、胚胎分割移植时的胚胎应是囊胚及之前的胚胎，原肠胚不能进行分割移植，D错误。

故选Bo

5.B

【分析】生物组织中化合物的鉴定：

（1）斐林试剂可用于鉴定还原糖，在水浴加热的条件下，溶液的颜色变化为砖红色（沉淀）。斐林试剂只

能检验生物组织中还原糖（如葡萄糖、麦芽糖、果糖）存在与否，而不能鉴定非还原性糖（如淀粉、蔗糖）。

（2）蛋白质可与双缩腺试剂产生紫色反应。

（3）脂肪可用苏丹in染液鉴定，呈橘黄色。

（4）DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，因此二苯胺试剂可以作为鉴定DNA的试剂。

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【详解】A、脂肪的基本组成单位是甘油和脂肪酸，脂肪是主要的储能物质，直接能源物质是ATP,A错误;

B、蛋白质是生命活动的承担者，其基本组成单位是敏基酸，可与双缩胭试剂产生紫色反应，B止确；

C、斐林试剂用于鉴定还原糖，糖原不是还原糖，C错误；

D、核酸包括DNA和RNA,DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，因此二苯胺试剂可以作为鉴定DNA的试剂，

D错误。

故选B。

6.D

【分析】基因工程技术的基本步骤：

1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括H的基因、启动子、终止子和标记基

因等，标记基因可便于目的基因的鉴定和筛选。

3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法

有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将H的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将FI

的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

4、目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因一DNA

分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：

抗原•抗体杂交技术。个体水平.卜.的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】A.构建蛛丝蛋白基因表达载体需要限制能和DNA连接的，A错误；

B.可通过感受态细胞的方法将蛛丝蛋白基因导入大肠杆菌，B错误；

C.基因表达载体上的启动子可调控蛛丝蛋白基因的表达，C错误；

D.若需对蛛丝蛋白进行设计和改造以增强其韧性，可通过蛋白质工程来实现，D正确。

故答案为：D“

7.A

【分析】在植物体细胞杂交过程中，要用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，常用聚乙二醇诱导原生质体融合

而不是灭活的病毒。利用植物体细胞杂交可以获得某种多倍体植株，可根据细胞中染色体数目或形态的差

异来鉴定杂种细胞。

【详解】A、植物体细胞杂交技术能体现植物细胞具有全能性，A正确；

B、该过程需要使用纤维素酶与果胶防，去除植物的细胞壁，B错误；

C、利用灭活的病毒诱导动物细胞融合，C错误；

D、该技术适用于染色体数目相同的两个物种，也适用于染色体数目不同的两个物种，D错误。

故选Ao

8.C

【分析】倒平板操作的步骤：将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手

拔出棉塞；右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰；用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝

隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖：等待平板冷却凝固后，将平板倒

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过来放置，使皿盖在下、皿底在上，这样可以防止皿盖上的水分滴到培养基上造成培养基的污染。

【详解】A、为防止杂菌污染，培养皿和培养基都要经过火菌处埋才能使用，A止确；

B、倒平板时为了避免杂菌污染，故应在酒精灯火焰旁进行，B正确；

C、分析题图可知本实验LLE,用乙醇作提取液，因此对照组的滤纸片上滴加的是乙醉，C错俣；

D、从图中可以看出，LLE的抑菌圈更大，说明对沙门氏菌的抑菌效果更好，D正确。

故选C。

9.A

【分析】1、植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、

芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。

2、动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）―剪碎一用胰蛋白酶或胶原

蛋白酶处理分散成单个细胞一制成细胞悬液一转入培养瓶中进行原代培养一贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白

酹或胶原蛋白前处理分散成单个细胞继续传代培养。

【详解】A、外植体脱分化主要是培养出愈伤组织，一旦被光照以后会促进组织分化，无法达到实验H的，

所以脱分化避光，再分化过程芽发育成叶，叶肉细胞中的叶绿素的合成需要光照，再分化过程是形成根和

芽等营养器官，芽的形成需要光照的参与，才能形成叶绿素，A错误；

B、多能干细胞培养时，要在培养基中加入血清、血浆等天然成分，其内含有丰富的生长因子、激素和营养

物质等，B正确；

C、单克隆抗体技术的目的是得到既能无限繁殖，又能产生专一性抗体的杂交瘤细胞，通过在96孔板中进

行克隆化培养，可以筛选出能够稳定分泌所需抗体的杂交瘤细胞，从而获得单克隆抗体，C正确；

D、在体外受精前需要将精子进行获能培养，使精子获得受精的能力，再和处于减数第二次分裂中期的卵子

结合，形成受精卯，D正确。

故选A.

10.D

【分析11、20世纪60年代以前，医院里用的葡萄糖是用盐酸催化淀粉水解的方法来生产的。

2、接种、分离、纯化微生物的方法：平板划线法和稀释涂布平板法。微生物数量测定方法：稀释涂布平板

法和显微镜直接计数。

3、外植体的消毒方法：先用流水冲洗，酒精消毒30s,无菌水冲洗2到3次，次氯酸钠溶液处理30min,

无菌水冲洗2到3次。

4、多种微生物参与了豆腐的发酵，如酵母、曲毒和毛毒等，其中起主要作用的是毛霉,传统发酵计数中，

毛霉主要来自空气中的毛霉泡子。为了缩短发酵时间，确保品质稳定，工业上大规模生产时，通常会先通

过微生物培养技术获得单一菌种，再将它们接种到物料中进行发酵。

【详解】A、酸能催化淀粉水解，所以不能用淀粉、淀粉酶探究pH对旃活性的影响，A不符合题意；

B、平板划线法不能用为微生.物计数，B不符合题意；

C、外植体的消毒方法：先用流水冲洗，酒精消毒30s,无菌水冲洗2到3次，次氯酸钠溶液处理30min,

无菌水冲洗2到3次，用次氯酸对外植体进行消毒可能不能杜绝微生物污染，C不符合题意；

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D、为了缩短发酵时间，确保品质稳定，制作腐乳时向豆腐接种毛霉，D符合题意。

故选D。

11.A

【分析】蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合

成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。

【详解】A、由题意可知，为保证产物活性，将IL-2基因中编脩125位半胱氨酸的序列突变为丝氨酸序列，

只是一个氨基酸发生了改变，应该是发生了碱基替换，而不是碱基对的增添，A错误；

B、天然的和基因工程生产的IL-2的本质都是蛋白质，都是在核糖体上合成的，B止确；

C、58位与105位半胱氨酸之间形成的二硫键对保持IL-2活性起重要作用，突变的IL-2基因的表达降低了

二疏键错配的可能，C正确；

D、大肠杆菌是原核生物（细胞生物），其遗传物质是DNA,基因的发制和表达都遵循中心法则，D正确。

故答案为：Ao

12.（1）大肠杆菌CABED

（2）Ca2+A

（3）该实验方案无法排除改造后的温控工程菌在未热激活状态对肿瘤生长的影响，应增设温控工程菌在未热

激活状态的对照组

（4）温控工程菌或温控工程菌+FUS对哺乳动物重要脏器（肝、肾、神经系统等）的影响：与现行临床药物

相比，效果是否具有优势；温控工程菌在非FUS处理部位是否有非特异性激活

【分析】基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记

基因等，标记基因可便于目的基因的鉴定和筛选。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方

法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将

目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；

（4）目的基因的检测与鉴定：

分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测

目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原-抗体杂交技

术。

个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】（1）①“基因电路”的技术路线实验的目的是利用温度敏感型转录调控蛋白构建温控表达的大肠杆菌

质粒系统，因此，使Tcl42持续性表达的具强活性的启动子pLac应该来自大肠杆菌。

②“基因电路”的技术路线要起作用，第•步要构建“基因电路”，因此要先用不同的限制酶、DNA连接酶分

别处理温控抑制元件、重组元件、免疫元件及质粒，使这些元件能够连接成“基因电路”；依题意，当温度不

到42℃时具强活性的启动子pLac可以使Tcl42持续性表达，抑制启动子pRL,则与其构成一个表达单位的

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重组睡Bxbl基因不表达。重组醉的作用位点在免疫元件中，重组酹Bxbl基因不表达，则aPD-Ll不表达，

免设兀件无功能；当控温至42U时解除蛋白Tcl42对后动子pRL的抑制，重组酶Bxbl基因表达，进而引

起启动子p7两侧发生重组，启动子p7启动荧光蛋白GFP基因、aPD-Ll基因的转录。从而使细菌合成GFP,

并分泌大晨aPD-Ll。综合以上分析，“基因电路”的技术路线是：C、用不同的限制前、DNA连接酹分别处

理温控抑制元件、重组元件、免疫元件及质粒，获基因电路-受体菌37c时，蛋白Tcl42抑制启动子pRL

-A、重组酶Bxbl基因不表达一免疫元件无功能（不表达aPD-Ll）-B、菌体升温至42CE寸一解除蛋

白TC142对启动子pRL的抑制一E、重组前Bxbl基因表达，进而引起启动子p7两侧发生重组-D、启动子

p7启动荧光蛋白GFP基因、aPD-L1基因的转录->细菌合成GFP,并分泌大量aPD-Ll。

（2）在基因工程操作中，常用原核生物作为受体细胞，其中以大肠杆菌应用最为广泛。研究人员一般先用

Ca2+处理大肠杆菌细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，然后将“基因电路''质粒

导人菌体内。依题意，重组的质粒中带有抗四环素的抗性基因，因此，可含有四环素的培养基来筛选含重

组质粒的受体细胞，能在该培养基上形成的菌落就是成功构建用于•免疫治疗的温控工程菌菌落，A符合题

意，BCD不符合题意。

故选Ao

（3）依题意，该实验的目的是验证上述温控工程菌的治疗肿瘤效果，但若按照题意实验，则无法排除改造

后的温控工程菌在未热激活状态对肿瘤生长的影响，因此，应增设一组温控工程菌在未热激活状态的对照

组。

（4）若期望将上述温控工程菌用于临床实验，则还要检验工程菌的优势、作用效果、安全性等方面的影响

实验。因此，还需利用小鼠开展温控工程菌或温控工程菌+FUS对哺乳动物重要脏器（肝、仔、神经系统

等）的影响；与现行临床药物相比，效果是否具有优势；温控工程菌在非FUS处理部位是否有非特异性激

活方面的研究。

13.（I）ABCD

（2）隐性单基因早衰突变体全部具有bar基因

|<----衰老相关基因.

（3）abe

（4）基因的表达

【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增

和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、

终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）FI

的基因的检测与鉴定。

【详解】（1）生物的性状是由基因和环境共同影响的，将水稻“中花11”的叶片愈伤组织与农杆菌共培养，

外源T-DNA（含bar标记基因）会整合到水稻基因组，该过程中实验操作中其它微生物的污染、实验过程

中偶然接触紫外线或化学药品都可能导致基因改变，DNA复制过程中若出现差错导致DNA序列变化、外

源T-DNA的插入导致DNA序列变化都会引起DNA改变，而组织培养过程进行的是有丝分裂，染色体的互

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换（同源染色体非姐妹染色单体之间交换）发生在减数分裂过程中，ABCD止确，E错误。

故选ABCDo

（2）①若F2的正常植株：早衰植株=3：1,分离比符合一对等位基因控制的情况，即符合分离定律，且的

表现为1/4的突变体的早衰性状是陷性性状，即突变体的早衰性状是由随性单基因控制的。

③若突变为T-DNA插入引起，由「外源T-DNA（含bar标记基因）会整合到水稻基因组，则后代性状都会

发生改变，即Fz的早衰突变体全部具有bar基因；经检验，实验结果与预期相符，则bar基因应插入到衰老

相关基因片段上，故可绘制图形如下：

~—।

（3）PCR能够实现体外扩增DNA,分析题意，为获得该衰老相关基因，研究人员设计了外源接头介导的

PCR进行扩增，实验的主要流程为：用限制酶切割基因组DNA产生多种片段一分别连接上外源接头一以d

为引物合成一条子链（上面那条连扩增左半部分），再以a为引物合成互补链（结合右侧长单链结构与下侧

图示顺序可知，且引物与模板的3端结合），得到PCR产物1-为减少非特异性扩增，以be为引物进行PCR

得到产物3（同理得到产物2和产物4）一对产物3和产物4进行序列分析和功能鉴定。

（4）植物生命活动的调控是基因、环境和激素共同影响的，引起衰老的主要因素有环境因素、植物激素

的调节和基因的表达等。

14.（1）蛋白质、核酸（或ATP等）

（2）磷酸二酯bda能在含卡那霉素的培养基中形成菌落，不能在含壮观霉素的培养基中形成

菌落

（3）若患有结肠癌，肠腔中存在含突变基因的DNA片段，会将传感器中的抑制基因替换，从而解除对卡那霉

素抗性基因表达的抑制，使传感器可在同时添加诱导物与卡那霉素培养基中形成菌落

【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增

和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、

终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目

的基因的检测与鉴定。

【详解】（1）蛋白陈能提供碳源、氮源等成分，其中氮源可用于合成蛋白质（元素组成是C、H、O、N等）、

核酸（或ATP等）（元素组成是C、H、0、N、P）o

（2）①分析题意，该过程的酶能够切断DNA,DNA的基本单位是脱氧核甘酸，脱氧核甘酸之间通过磷酸

二雷键连接，故该能作用的位点是磷酸二酯键。

②本次设计的目的是验证A菌具有吸收特定DNA片段的能力，需要将G12位点突变切除，然后再重新连

接，结合图2启动子方向与图1的箭头方向可知，该过程中III对应的应是KRAS片段1,I是KRAS片段2,

两者之间需要插入标记基因，可选择dspeeR（壮观霉素抗性基因），故I、II、HI分别对应的序列是bda；

由于卡那霉素抗性基因被替换，而specR（壮观霉素抗性基因）导入，且A菌具有吸收特定DNA片段的能

力，故能证明传感器A发生特异性HGT的实验结果是：能在含卡那霉素的培养基中形成菌落，不能在含壮

观霉素的培养基中形成菌落。

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(3)肿瘤细胞可将DNA释放到肠腔中，临床检测时需将细菌传感器定植于待测者结肠处，一段时间后对

粪便中的细圜进仃培养，为实现上述目的，需改造A菌使其仅能降解正常的KRAS序列，结合图不可知，

若患有结肠癌，肠腔中存在含突变基因的DNA片段，会将传感器中的抑制基因替换，从而解除对卡那霉素

抗性基因表达的抑制，使传感器可在同时添加诱导物与卡那霉素培养基中形成菌落。

15.(1)aaRr、AArr不符合

(2)用矮秆核不育(作为母木)与野生型杂交，子代矮秆核不育：高秆可育=1：1

(3)ABCDE

(4)cd雄性不育TRIM插入引起启动子序列改变，导致P基因在花药发育的S2期表达

(5)杂交作母本省去人工去雄的麻烦；保留子代的杂种优势

【分析】1、自由组合定律的实质：控制不同性状的遗传因子的分离和组合是互不干扰的；在形成配子时，

决定同一性状的成对的遗传因子彼此分离，决定不同性状的遗传因子自由组合。

2、基因分离定律的实质：在杂合子的细胞中，位于一对同源染色体上的等位基因，具有一定的独立性；生

物体在进行减数分裂形成配子时，等位基因会随着同源染色体的分开而分离，分别进入到两个