高中生物一轮复习课后达标练：微生物的培养技术及应用

微牛物的培养技术及应用练习

一、选择题

1.防止杂菌污染，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的

前提。下列叙述错误的是（）

A.实验室里可用紫外线或化学药物对物体表面或空气进行消毒

B.实验室里不可吃东西，离开时一定要洗手以防被微生物感染

C.接种环、接种针等用具应在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌

D.使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环

境

2.下列关于微生物纯培养的叙述，错误的是（）

A.倒平板操作应等培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰

附近进行

B.微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养

等步骤

C.用平板划线法和稀释涂布平板法都能在固体培养基上得到单

菌落

D.涂布平板时应先将培养皿盖置于实验操作台上

3.下图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤，下列相关叙述

正确的是（）

①②③

A.对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌处理

B.步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置

C.步骤②的目的是使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落

D.步骤③划线结束后在培养皿皿盖上做好标注

4.为加速我国北方冬春季秸秆原位还田的腐化过程，研究人员

以冻牛粪为材料筛选出耐低温（10℃）的纤维素降解菌。下列相关叙

述正确的是（）

A.选用冻牛粪为材料与其富含纤维素及含耐低温微生物有关

B.初筛菌种前，要利用固体培养基在37℃条件下扩大培养目

标菌种

C.用于筛选的培养基是加入刚果红染料的牛肉膏蛋白陈培养基

D.应选择菌落直径与周围透明圈直径比值大的菌落进行纯化

5.为制备圆褐固氮菌和巨大芽胞杆菌微生物菌剂，以降解厨余

垃圾废液中淀粉、蛋白质、指肪等物质，研究人员探究了圆褐固氮

菌和巨大芽抱杆菌处理某厨余垃圾废液的最佳接种量比，将两种菌

液进行了不同配比的分组处理，如下表所示。下列叙述错误的是

B.实验过程中，需将.上述菌液分别接种于相同体积的厨余垃圾

废液中进行培养

C.本实验还需设置对照组，具体处理是将适量艮,组的菌液接种

到等帚无菌水中

D.可通过检测实验前后废液中淀粉、蛋白质、脂肪的含量，以

确定适宜的配比

6.耐高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。嗜热菌

可以在高温环境中生存，其出生的淀粉酶最适温度较高。筛选能产

生耐高温淀粉酶的嗜热菌过程如图1所示，其中【号培养基用碘液

处理的结果如图2所示。下列叙述正确的是（）

nee/挑山菌落、e

八。1匚＞亍u＞穹u＞⑥匚”

U①目②I号培n号培U

嗜热菌样品卬乙芥基芥基丙

图1

周围通蓝

厘町落

l°c＞周一不.

蓝色的菌落

图2

A.图2中周围不显蓝色的菌落含有所需菌种

B.倒平板后对培养皿进行高压蒸汽灭菌

C.淀粉是图2所示固体培养基的唯一碳源

D.甲、乙试管中均为选择培养基

7.自牛固氮菌是土壤中能独立进行固氮的细菌。科研人员进行

了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程

如下图所示。已知步骤④获得的3个平板的菌落数分别为90、95、

100,对照组平板为0。下列相关叙述正确的是（）

A.步骤②振荡20min的目的是扩大菌种数量，属于选择培养

B.步骤④使用接种环划线接种，使用前需要灼烧灭菌

C.1g土壤中平均自生固氮菌数约为9.5X10"个

D.所用培养基应加入碳源、氮源、无机盐、水和琼脂

8.毗咯瞳咻酿（PQQ）对生物体的繁殖、生长和发育有着重要的

作用，也是甲醇脱氢前的辅助因子，在以甲醇为初始底物的细胞呼

吸中具有重要作用。有研究人员以甲醇利用细菌为初始菌株，诱变

处理后进行多级选择培养，筛选出高产PQQ（FJNl；A26）菌株，流程如

下图所示，据此推测合理的是（）

高产PQQ

1%的甲

的菌株

醉浓度

(FJNU-A26)

初始菌株含2%甲静的含8%甲醉的

（FJNU-6）选择培养基选择培养基

A.选择培养基中还应添加大量的葡萄糖或蔗糖，为其生长提供

营养

B.已经突变的基因，在选择培养过程中将不再发生突变

C.逐级提高甲醇浓度，目的是提高目标菌株对渗透E的耐受性

D.逐级选择培养过程中，甲醇利用细菌发生了适应性进化

9.为了从土壤中筛选对抗生素有抗性、能高效降解淀粉的微生

物，研究人员利用土壤浸出液进行了下图所示操作。下列说法错误

的是（）

培养一

浸出液养基

培养出大址高效降

解淀粉的微生物

A.用稀释涂布平板法或平板划线法将土壤浸出液接种在X培养

基上

B.菌落①可能是硝化细菌，因不能产生淀粉酶所以无透明圈

C.X培养基是含有淀粉和抗生素的固体培养基，Y培养基是不

含琼脂的液体培养基

D.图中降解淀粉最高效的是菌落⑤，可根据菌落特征初步判断

微生物类型

10.为对某样品中的噬菌体进行计数，工作人员将0.1矶稀释

10“倍的噬菌体样品与敏感细菌混合后平铺在平板上培养一段时间，

长满细菌的平板因部分细菌被噬菌体裂解而形成圆形透明斑，即噬

菌斑（1个噬菌斑为1个pfu）,噬菌体效价可用每毫升样品中含有的

pfu数表示。下列叙述错误的是（）

A.透明的平板培养一段时间后变为不透明状态，是由细菌大量

繁殖造成的

B.噬菌体样品应有足够的稀释度，以保证初期一个细菌最多被

一个噬菌体吸附

C.若平均每个平板的噬菌斑数量为150,则该样品的噬菌体效

价为1.5X108pfu/mL

D.若有少数活噬菌体未能侵染细菌，则噬菌斑计数结果比样品

中实际活噬菌体数偏低

11.某兴趣小组为研究“使用公筷对餐后菜品细菌数量的影

响”，将每道菜分为三盘，一盘取样冷藏，一盘使用公筷，一盘不

使用公筷，实验过程如下图所示。下列叙述正确的是（）

「不食用组餐前取样冷藏L

9/'使用公㈱组一餐后取样冷藏一

菜品L不使用公筷组J-

冷藏老花固体培老也样一研有

计数"养基X"联件茄1OOOmL无菌水稀和

A.在固体培养基X上用稀释涂布平板法进行接种

B.固体培养基X对菜品中的细菌有选择作用

C.根据菌落的特征可以准确判断细菌的种类

D.理论匕不食用组的培养基上不会有菌落出现

12.某一质粒载体如图甲所示，力〃”表示氨芳青霉素抗性基

因，左「表示四环素抗性基因。有人将此质粒载体用扁础I梅切

后，与用BcMI酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连

接反应，用得到的混合物直接转化后得到多种大肠杆菌，并利用培

养基乙和丙筛选出导入重组质粒的大肠杆菌。下列叙达错误的是

()

培养范乙含四环素的培养期丙

注：影印接种指用灭菌后的“印章”

RamW\在培养基中轻按一下，将培养基乙中

图甲

菌落按相同位置接种到培养基丙。

A.图甲所示的质粒中还应含有复制原点和终止子等结构

B.将经转化处理后的大肠杆菌菌液接种至培养基乙使用的是稀

释涂布平板法

C.配制培养基乙时应加入氨茶青霉素

D.培养基丙中生长的菌落即为导入重组质粒的大肠杆菌

二、非选择题

13.生活垃圾是城市环境污染的主要原因之一，例如大量厨余

垃圾堆积会污染周围空气和水源。为解决相关问题，科研人员设计

了下图所示的选育无臭菌种方案，根据所学知识回答下列问题：

①称靖②梯度稀料③平板浇④划线⑤扩大

样品注分离纯化培养

(1)选育无臭菌种的培养基均是以厨余垃圾粉碎并严格灭菌后制

得的，目的是O

厨余垃圾产生的异味来自细菌发酵产物，因此③过程浇注分离时需

要检测。④过程划线纯化后应该在划线的末端选择

较大的菌落作为目的菌种，理由是

(2)厨余垃圾中高盐分、高油脂，影响细菌的正常生活，很难获

得高效无臭分解菌。因此研究人员从其他耐盐耐油菌种中获取了相

关耐性基因，并构建表达载体，此过程中使用含有抗青霉素基因的

质粒的作用是o将表达载体导入微生物受体

细胞的方法一般是用

处理，使其处于感受态。

(3)转基因无臭分解菌经过⑤扩大培养后获得大量菌体，烘干测

定发现其中蛋白质含量高达65%,有人提议大量培养该菌体，然后通

过分离获得丰宫的蛋白粉满足市场需求。你的意见是

14.研究者从航天器表面分离出N157菌株，利用抗敏片方法检

测该菌株对病原菌大肠杆菌和铜绿假单胞菌的抑菌活性，实验结果

中抑菌圈直径大小作为该菌种抑菌能力的评判指标，测菌株N157对

病原菌的抑菌作用，结果见二列图、表(LB培养基含有细菌所需的各

种营养物质，常用来培养细菌)。请回答下列问题：

aLB作用于bLB作用于cN157作用于dN157作用

铜绿假单胞菌大肠杆菌铜绿假单胞菌于大肠杆菌

注：横线代表抑菌图直径。

抑菌圈直径

病原菌菌种

/mm

大肠杆菌16±0

铜绿假单胞

8+0.5

菌

(1)将待测菌株N157和病原菌进行活化后，在LB(填

“液体”或“固体”)培养基中加入病原菌200uL,用________使

菌液分布均匀，放上无菌抗敏片，在抗敏片上加入20UL待测菌

液，以此作为实验组，密封后将其置于32°C恒温培养箱中培养，24

h后观察抑菌圈的大小。

(2)对照组在抗敏片上只加入,设置

对照组的作用是o

⑶图中a和b的结果表明

________________________________o图中c和d的结果表明

其中对________的抑制效果更好。

答案：

1.C

2.Do倒平板操作应等培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附

近进行，A正确；微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分

离和培养等步骤，其目的是获得纯培养物，B正确；平板划线法通过

连续划线操作可得到单菌落，稀释涂布平板法在稀释倍数足够高的

情况下，可通过将稀释液涂布在培养基上获得单菌落，即平板划线

法和稀释涂布平板法都能在固体培养基上得到单菌落，C正确；涂布

平板时不能完全打开培养肌，将皿盖置于实验操作台上，应在火焰

附近将培养皿打开一条缝隙，D错误。

3.Co对实验操作的空间、操作者的衣着和手需要进行消毒处理，A

错误；将培养基倒入培养皿后，立即盖上皿盖，待培养基冷却凝固

后将平板倒过来放置，B错误；步骤②多个方向划线，使接种物逐渐

稀释，培养后出现单个菌落，C正确；步骤③划线结束后需在培养皿

皿底标注菌种及接种日期等信息，而不是在培养皿皿盖上做标注，D

错误。

4.Ao冻牛粪中富含纤维素，有很多微生物，冻牛粪因温度低，其

内的微生物是耐低温微生物，故选用冻牛粪为材料筛选耐低温的纤

维素降解菌，A正确；初筛南种前，要利用液体培养基在37℃条

件下扩大培养目标菌种，B错误；用于筛选的培养基是以纤维素为唯

一碳源的固体培养基，加入的刚果红染料起鉴别作用，C错误；由于

刚果红染料与纤维素形成红色复合物，因此会出现以纤维素降解菌

为中心的透明圈，菌落直径与周围透明圈直径比值越小，菌株分解

纤维素的能力越强，故应选择菌落直径与周围透明圈直径比值小的

菌落进行纯化，D错误。

5.Co根据题意，厨余垃圾废液中含有淀粉、蛋白质、脂肪等物

质，由于酶具有专一性，说明微生物利用其合成分泌的淀粉酶、蛋

白酶、脂肪酚等分解废液中的相关物质，A正确；厨余垃圾废液中含

有营养物质，作用类似于培养基，其体积是无关变量，应该保持相

同，B正确；木实验还需设置对照组，以不接种的相同体枳的厨余垃

圾废液作为对照组，C错误；本实验的目的是探究圆褐固氮菌和巨大

芽抱杆菌处理某厨余垃圾废液的最佳接种量比，自变量是两种菌的

接种量比，可通过检测实验前后废液中淀粉、蛋白质、脂肪的含

量，以确定适宜的配比，消耗最多的比例最适宜，D正确。

6.Ao淀粉与碘液反应呈现蓝色，能分解淀粉的嗜热菌在培养基上

生长时可释放淀粉酶，分解培养基中的淀粉，故周围不显蓝色的菌

落含有所需菌种，A正确；倒平板时培养皿和培养基都已灭菌处理，

因此倒平板后不需要对培养皿再进行高压蒸汽灭菌，B错误；据题图

2可知，培养基上出现周围显蓝色的菌落和周围不显蓝色的菌落，因

此淀粉可能不是题图2所示固体培养基的唯一碳源，C错误；题图1

中①过程是梯度稀释，②过程是接种，因此甲、乙试管主要是对嗜

热菌样品讲行稀释，不具备诜择作用，不属于诜择培养基，D错误。

7.Co步骤②需充分振荡的主要目的是使土壤中的微生物充分释放

到无菌水中，A错误；由题图观察可知，步骤④平板中的前落分布均

匀，故步骤④所用的接种工具是涂布器，接种方法是稀释涂布平板

法，B错误；1g土壤中平均自生固氮菌数约为(90+95+

100)/3+0.IX104=9.5X10-(个)，C正确；本实验需要分离的自生

固氮菌可以利用空气中的氮气作为氮源，故所用培养基中不能加入

氮源，D错误。

8.Do为了筛选出能利用甲醇的目的菌株，选择培养基中应以甲醇

为唯一碳源，不能添加葡萄糖或蔗糖等，A不合理；基因突变具有随

机性、不定向性等特点，L1经突变的基因，在选择培养过程中可能

还会发生突变，B不合理；逐级提高甲醇浓度，目的是筛选出甲醇高

耐受菌株，即高产PQQ(FJMA26)菌株，C不合理；逐级选择培养过

程中，细菌的变异是不定向的，甲醇浓度不断增加，甲醇高耐受菌

株生存下来，甲醇耐受性低的菌株被淘汰，说明甲醇利用细菌发生

了适应性进化，D合理。

9.Ao根据X培养基上形成的菌落分布特征可知，将含目的菌的土

壤浸出液接种在X培养基上夹用的是稀释涂布平板法，A错误；菌落

①周围无透明圈，说明其不能降解淀粉，可能是硝化细菌，因不能

产生淀粉酶所以无透明圈，B正确；实验目的是筛选对抗生素有抗

性、能高效降解淀粉的微生物，可知X培养基上含有淀粉和抗生

素，Y培养基用于将筛选到的目的菌扩大培养，为不含琼脂的液体培

养基，C1E确；碘液遇淀粉会变蓝，淀粉被分解，形成透明圈，题图

中菌落⑤的透明圈最大，说明菌落⑤降解淀粉的能力最强，不同菌

落的特征不同，因此可根据菌落特征初步判断微生物类型，D正确。

10.Co细菌繁殖导致透明的平板培养一段时间后变为不诱明状态，

A正确；噬菌体样品应有足够的稀释度，以保证初期一个细菌最多被

一个噬菌体吸附，如果稀释度不够，则会有两个或多个噬菌体吸附

同一个细菌，从而导致噬菌斑数量减少，影响实验结果，B正确；若

平均每个平板的噬菌斑数量为150,则该样品的噬菌体效价为

1504-0.1X106=1.5X109pfu/mL,C错误；若有少数活噬菌体未能

侵染细菌，则会导致噬菌斑数量减少，从而导致噬菌斑计数结果比

样品中实际活噬菌体数偏低，D正确。

11.Ao由题图可知，该实验对菌落进行了计数，故采用的接种方法

是稀释涂布平板法，A正确；固体培养基X没有做任何处理，所以对

菜品中的细菌没有选择作用，B错误；在一定培养条件下，不同的微

生.物表现出各自稳定的菌落特征，根据菌落的形状、大小、颜色等

特征，可以初步区分出不同种微生物，但不能准确判断，c错误；不

食用的菜品，正常情况下也有微牛.物存在，故不食用组的培养基上

有菌落出现，D