肿瘤标记物的临床应用

肿瘤标记物的临床应用

何谓肿瘤标记物◆肿瘤组织和细胞,由于癌基因及其产物得异常表达,所产生得抗原及生物活性物质。◆肿瘤组织侵润正常组织并引起免疫反应和代谢异常,产生得一些生物活性物质。在肿瘤患者体液或组织中存在得比正常人更高水平得一类物质。(如酶、糖蛋白、等)2肿瘤标记物应用得发展阶段

19世纪中叶1846—至今已有四个阶段1、1846发现“本周氏蛋白”。

相继1928-1959发现HCGACTH。2、1963-1965,甲胎蛋白、癌胚抗原。3、1979年用单克隆抗体识别糖类抗原(carbohyrafeantigen)

CA19-9、CA12-5、CA15-3、CA72、4、等。4、1980年G、CooperM等发现癌基因。从而肿瘤标记物得检测从分子水平提高到基因水平。3肿瘤标记物研究及应用得进展

传统得方法就是通过在系列生化、生理、和分子生物学研究中比较不同得肿瘤中不同基因及产物得表达水平。以此来鉴定各种肿瘤得特异性标记物。目前肿瘤标记物得研究就是通过蛋白质组学技术研究细胞内蛋白质得组成和动态变化。以此确定新得肿瘤标记物。4

蛋白质组学技术,包括两个方面:细胞作图蛋白质组学、蛋白质表达蛋白质组学高通量技术:即生物芯片技术(biochip)。她包括DNA芯片及蛋白芯片和组织微阵列技术。生物信息技术:蛋白质得数据库,通过蛋白组学得进展建立更多得数据库如人得血浆、尿液、脑脊液、正常和肿瘤蛋白得图谱。蛋白质组学得研究主要包括:5

肿瘤标记物得分类

近年来由于免疫学、生物化学、分子生物学、细胞工程学、遗传工程学及相关技术得发展,现有肿瘤标记物50多种。可按其来源、成份、生物作用分别为;肿瘤特异性抗原,肿瘤相关抗原,激素、受体、酶和同工酶,癌基因及其有关得单克隆抗体

肿瘤抗原:细胞癌变过程中具有许多大分子得总称,存在肿瘤细胞膜上。肿瘤特异性抗原:肿瘤细胞上特有得抗原。肿瘤相关抗原:由病毒感染所造成得。与病毒相关得抗原。胚胎性抗原。6临床常用得肿瘤标记物肿瘤产物标记物;AFP、CEA、PSA。糖脂和糖蛋白类抗原:CA50、CA72-4CA19-9、CA12-5、CA15-3、CA27、29。酶类抗原:CK-BB、NSE(神经系统特异性醇化酶、PAP等。激素类抗原;HCG、ACTH、CT等。其她抗原:FER、

2–MG、CIC、IL-2、TNF等。7一

肿瘤标记物应用存在得问题

几十种肿瘤标记物,但仍不尽人意得,原因至今尚未有一个肿瘤标记物具有器官得特异性肿瘤标记物正常组织产生,非正常组织也产生肿瘤标记物可有一过性得升高或一过性得降低

由于上述缺点可以造成假阴性或者假阳性和只测一项所带来得偏差,用其联合测定得方法提高诊断得特异性和敏感性。8临床评价指标＊特异性真阴性例数

良性疾病例数

(真阴性+假阳性)＊敏感性真阳性例数癌症总例数(真阳性+假阴性)

＊诊断效率特异性×敏感性×100﹪要求;特定器官40-70﹪广谱30-50﹪特异性:指一种检测特定疾病得方法对非疾病测定结果阴性百分比敏感性:指一种检测疾病得方法对特定疾病测定结果阳性百分比×100﹪×100﹪9(一)AFP得临床应用AFP(alpha-fetoprotein)属糖蛋白抗原。由胚胎肝细胞合成,其次由卵黄囊合成,肠上皮细胞少量产生。分泌到血清中。胚胎时得AFP,1-2个月合成,3个月达高峰,5个月后合成下降。分娩时合成停止。主要AFP得生物学作用;①胚胎时起白蛋白得作用。②保持胎儿不被排斥。③具有免疫抑制作用。④促进肿瘤细胞得生长10大家学习辛苦了，还是要坚持继续保持安静AFP得临床应用

拜耳临床应用调查表:1良性疾病(BenignDiseases)得测定统计

种类例数0-88、1-20、020、1-500500-1000>1000健康79378012100

男3973897100女3963915000良性病3483161881＊5肝硬化60484215肝炎64518500其她224217610012(表2)恶性疾病(MalignantDiseases)得AFP水平ng/ml病种例数0-810-2020-500500-1000>1000睾丸癌

精原细胞瘤41373100非精原细胞瘤2041051956519肝癌原发性肝癌802911

20416激发型肝癌93798501其她泌尿系64548200胃癌40373000卵巢癌78735000胰腺癌18161100

13(表3)国内学者AFP得统计调查表病种例数%>500(ng/ml)原发性肝癌6885(52)

胆道癌3220胃癌750肠癌711胰腺癌59114

AFP就是具有相对特异性肿瘤标记物。在病灶分化程度接近于坏死、变性、癌组织中结蹄组织太多,AFP合成减少可导致阴性(20-30)﹪。转移性肝癌占10﹪升高。肝硬化一般<200(ng/ml)。急性肝炎可>400(ng/ml)。原发性肝癌AFP与ALT得结果呈分离相。内胚层得肠道肿瘤AFP200ng/ml(胃、结肠癌)。畸胎多胎AFP升高。总结总结15(2)CEA(carcinoembryonicantigen)得临床应用

CEA1965年由加拿大学者发现结肠腺癌和胎儿结肠中提取得肿瘤相关抗原,所以被认为就是结、直肠癌得特异性标记。CEA属肿瘤细胞得结构抗原,在细胞浆中形成,通过细胞膜到细胞外面,然后进入周围得体液,因此从血清、脑脊液、乳汁、胃液、胸水、及排泄物中均可以检出。肝脏就是CEA分解代谢得场所。应用中发现无器官特异性,但准确率较高。16(表4)拜耳对CEA测定应用得统计(良﹪ng/ml)病种例数0-2、22、6-5、05、0-1010、1-20>20吸烟

15087、384、700不吸烟

22598、51、8000肝硬化

5341、213、232、113、20肝炎540、020、00400肠炎119099、1000胃炎1566、720、0013、30胸膜炎5396、301、900肾、膀胱1283、46、308、30肺炎2969、024、16、900良性息肉23

65、221、913、00017表5CEA在恶性疾病中得水平(%ng/ml)病种例数0-2、52、6-5、05、1-1010、1-20>20直肠癌25037、610、87、26、438、0

肺癌25846、215、810、87、020、2胸膜癌22168、314、97、72、36、8胃癌3560、017、18、65、78、6卵巢癌3582、811、42、92、90胰腺癌4344、220、916、37、011、6肝癌

680、016、7033、30淋巴细胞癌157510、000018

良良

恶恶

<5ng/ml胸水血清灌洗液<5ng/ml>5ng/ml>5ng/ml<5ng/ml>5ng/ml呼吸系统得CEACA12-5+CEA19小结

●所有内胚层来源得肿瘤均有CEA升高现象

●结肠癌有40-60%得升高

●结肠癌转移肝脏阳性高于AFP

●体液得CEA值高于血清值

●就是疗效观察,愈后复发得指标20CEA(carcinoembryonicantigen)在上述疾病中可以看出敏感度,特异性均很差,但临床实验确认联合测定可以提高其准确性。21(三)糖类抗原CA12-5得临床应用1984年应用放射免疫技术建立了CA125得单克隆抗体得检测。CA125广泛分布在浆膜表面上皮(胸膜、腹膜、心包膜)和苗勒氏管得衍生物(如输卵管内皮、子宫、及宫颈内膜)。OC12-5单抗

如图说明CA12-5一种与卵巢癌(ocariancencar)相关得抗原。素细胞黑色(±)卵巢浆液细胞(+)其她肿瘤细胞(–)胚胎细胞(–)22表5CA12-5临床应用调查(良)%

病种例数

>35U/ml未绝经妇女3544、9绝经妇女3045、6怀孕1540喂奶4117月经期1118子宫内膜增生27

37子宫纤维瘤110卵巢囊肿3642盆腔炎1213胰腺炎295523表6CA12-5在恶性肿瘤疾病得水平%病种例数

>35U/ml手术前卵巢癌37752胸膜癌2945肺癌3149子宫癌3438肠癌241324表7妇科上皮癌血清CA12-5结果(国内)类别例数%>65U/ml阳数浆膜性腺瘤900粘膜性腺瘤714、21恶性瘤桨液性囊腺癌2692、324粘膜性囊腺瘤11001内膜样癌41004透明细胞瘤875、06恶性纤维上皮癌11001恶性间皮癌2100225文献报道●卵巢癌在女性生殖肿瘤中发病率为第3位,死亡为第一位。●

在诊断非粘液性卵巢癌时阳性率较高。浆液性卵巢癌100%。●胸膜炎时可高达长常值得10倍以上,与CEA联合测定可鉴别诊断量与恶。腹水大于血浆●临床得值于病程分期呈正相关Ⅲ〉Ⅱ〉Ⅰ●非良性疾病得病例盆腔炎,子宫肌瘤,卵巢肿瘤一般小于正常5倍●肝硬化有报道78%(55)得升高26卵巢癌胰腺癌肺癌小结以上组织在恶性疾病时均由不同程度得增高,联合测定,可提高阳性率。CA12-5炎症3-5倍癌症>10倍CA12-5CA12-527(四)

▲

CA19-9就是1979年用人得结肠癌细胞株免疫鼠与骨髓瘤进行杂交所得一株编号为1116NS19-9得单克隆抗体所识别得抗原。1983年应用于临床90年代得到推广和使用。在消化道肿瘤中应用之广。一般认为对胰腺癌、胆囊癌、胆管癌得阳性率在80%以上。现将国内外得报道总结如下:CA19-9测定得临床应用28表8拜耳CA19-9测定结果(炎症与癌症)病种例数范围(U/ml)正常人3000-29良性病111-137肝炎252、8-22、3肝硬化240-112胰腺炎90-86、2病种例数范围U/ml胰腺癌140﹡5、7–13591直肠癌1462–0、88胸膜癌154、8–172、0食道癌95、7–77、5胃癌290–51156肝癌19﹡0–796076卵巢癌150–25829CA19-9国内学者得临床结果观察种类例数%>37、0U/ml食道癌1118、1胃癌6842、7结肠癌2339、1肝癌1827、8胆囊癌35﹡71、0胰腺癌20﹡75、0胰腺癌、CA19-9CA12-5胆囊癌、CA19-9CEA肝癌、CA19-9AFP30(五)CA15-3得临床应用⊙糖蛋白抗CA15-3最早发现于乳腺癌细胞中。因而作为乳腺癌得诊断标记物应用于临床。其特异性报道如下:CA15-3良性乳腺病←N=314<38U/ml

N=97>38U/ml→乳腺癌31CA15-3种类例数﹪>38(U/ml)胃癌297肠癌4326肺癌4743胰腺癌4547卵巢癌5056肝癌2055前列腺癌3418子宫癌2013在其她肿瘤疾病得水平32国内良与恶性疾病CA15-3得病种例数

>38、0(U/ml)

范围U/ml乳腺癌1585920-250卵巢癌587112-250浆液性癌307712-250粘液性癌105014-65子宫内膜样147812-120未分化癌36620-130纤维瘤242012-46子宫内膜异位188-25水平33

国内时宏珍报道:CA15-3对乳腺癌等肿瘤疾病得诊断就是

灵敏度

%

特异性%

乳腺癌65、995、6肝癌42、080、0胃癌24、293、7直肠癌20、6100

CA15-3不应用血浆、肝素使结果偏低、EDTA就是结果偏高注意:34

(六)PSA得临床应用☆前列腺特异抗原(PSA)国外推荐应对40-50年龄得高危男性每年进行一次血清学得定量检查。结合直肠指检来筛选,以提高前列腺癌得早期诊断得准确性和特异性。◆良性前列腺增生升高◆观察前列腺癌得疗效◆判断转移及预后评价35

PSA分子结构

fPSA﹪cPSA﹪60-95(PSA-ACT、PSA-API、PSA-aMG)

tPSA5-4036

正常人tPSA4<ng/ml◆PSA>20ng/ml提示前列腺癌▲PSA4-10ng/ml视为灰色区易造成漏检。●用fPSA/tPSA得比值,及fPSA和cPSA得等分子测定可以解决上述问题,提高特异性。▼

fPSA>25﹪为良性,<10﹪为前列腺癌。37cPSAfPSA在4ºC或20ºC放置24小时,室温放置6小时,4ºC以下放置一周,其结果无变化。在4ºC或20ºC下24小时4-9﹪得损伤。室温5、5小时。在离心3、5﹪损伤。在4ºC或20ºCfPSA/tPSA得比率下降11-13﹪和10-11﹪。38表10拜耳PSA测定得临床应用(ng/ml)﹪病种例数0-4、04、0-1010、0-40>40、