甘肃省徽县三中2025届高考考前模拟生物试题含解析

甘肃省徽县三中2025届高考考前模拟生物试题考生请注意：1．答题前请将考场、试室号、座位号、考生号、姓名写在试卷密封线内，不得在试卷上作任何标记。2．第一部分选择题每小题选出答案后，需将答案写在试卷指定的括号内，第二部分非选择题答案写在试卷题目指定的位置上。3．考生必须保证答题卡的整洁。考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．下列四种现象中，可以用右面的数学模型表示的是（）A．条件适宜、底物充足时反应速率随酶量变化的情况B．萌发的种子中自由水与结合水的比值随时间变化的情况C．基因型为Aa的个体自交，后代中纯合子所占的比例随自交代数变化的情况D．在食物充裕、气候适宜等理想条件下，种群数量随时间变化的情况2．关于基因工程的叙述，正确的是A．基因工程获得的新品种可以直接投放到环境中不会影响生态环境B．细菌质粒是基因工程常用的运载体C．通常用一种限制酶处理含目的基因的DNA，用另一种处理运载体DNAD．为养成抗除草剂的农作物新品种导入的抗除草剂的基因只能以受精卵为载体3．据最新报道，国内某女大学生感染了“网红细菌”—MRSA，该细菌对26种抗生素都毫无反应。关于MRSA叙述正确的是（）A．网红细菌与动物细胞相比本质区别是细菌有细胞壁B．网红细菌的遗传物质主要分布在染色体上C．网红细菌是滥用抗生素造成的细菌的抗药性变异D．可根据细菌细胞膜的通透性判断细菌的存活情况4．人类利用微生物发酵制作果酒、果醋的历史源远流长。下列关于果酒、果醋制作原理的叙述正确的是（）A．在葡萄酒自然发酵的过程中，起主要作用的是野生型酵母菌B．变酸的酒表面的菌膜是酵母菌在液面大量繁殖形成的C．在缺氧、呈酸性的发酵液中，醋酸菌能大量生长繁殖D．在酸性条件下，溴麝香草酚蓝水溶液与酒精反应呈现灰绿色5．下列有关细胞和细胞结构的叙述，正确的是A．没有线粒体的细胞肯定不能进行有氧呼吸B．同一种细胞器在动植物细胞中的功能可能不同C．细胞中的色素不是分布在叶绿体中，就是分布在液泡中D．细胞质基质的pH比溶酶体的高，H＋进入溶酶体的方式为协助扩散6．蝎毒“染色剂”氯代毒素是由蝎子毒液中的一种蛋白质制成的，它可以选择性地绑定在癌细胞上，使癌症手术更加容易和有效。下列关于这种“染色剂”说法不正确的是（）A．蝎毒“染色剂”的化学成分中含有C、H、O、N等大量元素B．氯代毒素能选择性地绑定在癌细胞上，可能与癌细胞细胞膜表面的糖蛋白有关C．患者可以用口服的方法摄入这种“染色剂”D．这种染色剂的加工、分泌涉及的细胞器有核糖体、内质网、高尔基体、线粒体等二、综合题：本大题共4小题7．（9分）某种质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点，它们的识别序列和黏性末端各不相同，该质粒同时含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。科学家利用此质粒培育转基因抗盐作物，提高粮食种植面积取得重大进展。其培育过程如下图，请回答下列问题。（1）在构建重组质粒时，应选用________两种酶对质粒和含抗盐基因的DNA进行切割，以保证重组质粒序列的唯一性。（2）基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，下图表示运用影印培养法（使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法）检测重组质粒是否导入了土壤农杆菌。培养基除了含有土壤农杆菌生长繁殖必需的成分和琼脂外，培养基A和培养基B分别还要含有______、______________。从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是____（填数字）菌落中的细菌。（3）为了确定抗盐作物是否培育成功，要用__________标记的含抗盐基因的DNA片段作探针进行分子杂交检测，还要从个体水平用__________（方法）鉴定作物的耐盐性。（4）将转入抗盐基因的工程细胞培育成完整植株需要用组织培养技术，组织培养技术依据的原理是________________________。（5）将抗盐基因导入作物细胞内，使作物具有了抗盐性状，这种变异类型属于_________。8．（10分）请回答下列有关生物技术实践的问题。（1）下列关于尿素分解菌和纤维素分解菌的分离的叙述中，错误的是_____A．前者需要尿素作为唯一的氨源，后者需要以纤维索为唯一的碳源B．尿素分解菌能产生脲酶，纤维素分解菌能产生纤维素酶C．两个过程中都需要梯度稀释D．刚果红染色法也可用于鉴定尿素分解菌（2）为从土壤中筛选能有效降解尿素的分解菌。研究人员配制以尿素为唯一氨源的培养基，该培养基为______培养基（从用途角度分析）。在分离纯化、计数过程中，通常采用________法接种，该计数法统计的活菌数一般比实际活菌数低，原因是____________。除该活菌计数法外，__________计数也是测定微生物数量的常用方法。实验过程中还需设制空白培养基作为对照，其目的是______________________________。（3）在提取胡萝卜素时，常用的萃取剂具有沸点高且___________等特点。在鉴定胡萝卜素粗品时，常用________________法。9．（10分）某生物兴趣小组欲采用固定化酵母酿造啤酒，请根据其酿造过程回答下列相关问题。（1）利用海藻酸钠制备固定化酵母细胞，应使用图1-图3中的图_____________（填序号）所示方法。而制备固定化酶则不宜用此方法，原因是____________。用浓度较低的海藻酸钠溶液制作凝胶珠，酵母菌催化活性较低的原因是____________。（2）兴趣小组设计的实验操作步骤如下。第一步：将定量的海藻酸钠加入到定量的蒸馏水中，并和酵母菌充分混合；第二步：以恒定的速度缓慢地将注射器中的混合液滴加到配制好的CaCl2溶液中，并将形成的凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30min左右；第三步：将等量的凝胶珠分别加入到装有葡萄糖溶液的简易葡萄酒酿制装置中（如图4和图5）。①请订正上述步骤中的错误。______________。②与图5装置相比，图4装置酿制葡萄酒的优点是___________。葡萄汁装入图4装置时，要留有约1/3的空间，这种做法的目的是_______（答出两点即可）。10．（10分）患者男，48岁，发热伴寒战，入院进行血液B超及CT检查，疑似肝脓肿。其中细菌性肝脓肿的主要病原菌是：大肠埃希菌、克雷伯菌、链球菌、金黄色葡菊球菌、厌氧菌等。近年来，克雷伯杆菌感染导致的细菌性肝脓肿患者比例有增高的趋势，为确定致病原因需要进行细菌的培养及药敏实验检查病原体种类。请回答下列问题：（1）细菌培养一般在30~37℃，pH调至____________，进行无菌操作。对接种环等金属用具，直接在洒精灯火焰的____________灼烧，可以迅速彻底地灭菌。（2）微生物接种的方法很多，最常用的方法有____________法。虽然这些技术的操作方法各不相同，但是，其核心都是防止杂菌的污染，保证____________________________________。（3）区分细菌种类可以通过多种途径，如生化试验IMVC试验可用于肠道杆菌鉴定，其中大肠埃希菌、克雷伯菌鉴定结果分别是++--.--++；还可以通过菌落特征，如菌落的____________等的不同来区别。常用来统计样品中活菌数目的方法是_____________，测定细菌数量的方法还有____________法，无论哪种方法得到的细菌数量都是____________值。11．（15分）艾滋病药物能治疗新型冠状病毒肺炎吗?国家卫健委新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第七版）中提供了用于一般治疗的抗病毒药物，其中洛匹那韦/利托那韦是原本用于艾滋病治疗的药物。为什么治疗艾滋病的药物能治疗新型冠状病毒引起的肺炎?HIV病毒和新型冠状病毒都具有包膜，包膜上有侵染宿主细胞所必需的蛋白质，其中，新型冠状病毒包膜上的S蛋白能识别并结合呼吸道上皮细胞表面的受体血管紧张素转化酶2（ACE2），HIV病毒包膜上的gp120在宿主细地T细胞表面的受体则是CO4蛋白。HIV病毒和新型冠状病毒的遗传物质均为RNA，但两种病毒进入宿主细胞后所经历的生化历程不尽相同。HIV病毒侵入宿主细胞后经过逆转录—整合—转录—翻译—装配的过程，最终出芽释放。其中，翻译时会先表达出一个多聚蛋白，该多聚蛋白在一种HIV蛋白酶的催化下被剪切成多个有功能的蛋白质。而新型冠状病毒侵入宿主细胞后，其RNA可以直接作为模板进行翻译，翻译时产生的多聚蛋白也需要在其自身蛋白酶的催化下进行剪切以形成RNA复制酶等有功能的蛋白质。随后，新型冠状病毒RNA在RNA复制酶的催化下进行复制，与转录、翻译所得的其他成分装配后释放。洛匹那韦/利托那韦的作用对象正是这种HIV蛋白酶。它们与HIV蛋白酶的活性中心结合进而抑制其活性。冠状病毒切割多聚蛋白的主要蛋白酶是3CLPro，研究者通过分子动力学模拟的方法发现洛匹那韦/利托那韦能与SARS病毒的3CLPro活性中心结合。而SARS病毒和新型冠状病毒的3CLPro蛋白氨基酸序列一致性达96%。此前洛匹那韦/利托那韦在SARS治疗中也表现出一定的有效性，但在新型冠状病毒肺炎中使用洛匹那韦/利托那韦仍需谨慎乐观，其疗效和疗效仍需更多的实验研究和临床数据支持。（1）请写出构成新型冠状病毒遗传物质基本单位的中文名称_______________________。（2）据文中信息，两种病毒宿主细胞不同的原因是________________________。（3）据文中信息，洛匹那韦/利托那韦可能用于治疗新型冠状病毒的原因是什么？用这两种药物治疗新型冠状病毒的局限性体现在哪？______________________________________。（4）治疗艾滋病还有其他几种药物，如AZT和雷特格韦，它们作用的对象分别是HIV的逆转录酶和整合酶，请问AZT和雷特格韦能否用于治疗新型冠状病毒肺炎，请做出判断并阐述理由________________________________。（5）根据文中信息，新型冠状病毒治疗药物还有哪些其他可能的研发思路?请写出一种。_____________________________________

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、B【解析】

分析曲线图：在一定范围内，随着横轴因素的升高，纵轴所代表的数据逐渐增大；超过一定范围后，随着横轴因素的升高，纵轴所代表的数据不再升高，说明此时存在某种限制因素。【详解】A、条件适宜、底物充足时反应速率随酶量的变化是呈正比例关系，A错误；B、种子萌发过程中，细胞代谢逐渐增强，因此在一定的范围内，自由水与结合水的比值随时间延长而升高，该图可以表示萌发的种子中自由水含量随时间变化的情况，B正确；C、基因型为Aa的个体自交，后代中纯合子所占的比例起点应该为0，C错误；D、在食物（养料）充足和空间条件充裕、气候适宜的理想条件下，种群数量呈指数增长，呈现J型，D错误。故选B。【点睛】本题结合曲线图，考查探究影响酶活性的因素、水的存在形式、自交、种群数量增长等知识，要求考生识记相关知识，能运用所学的知识准确判断各选项。2、B【解析】

1、DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体。2、基因工程常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒，其中质粒是基因工程中最常用的运载体。3、基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定．构建基因表达载体时，需要用同种限制酶切割含有目的基因的DNA和运载体DNA，再用DNA连接酶连接形成重组DNA分子。【详解】基因工程获得的新品种有可能会扩散到种植区域外，或通过花粉传播进入近亲杂草，破坏这一区域的生态平衡，A错误；细菌质粒是基因工程常用的运载体，B正确；在基因工程中通常用同一种限制酶，能够获得相同的粘性末端，以利于连接，C错误；获得转基因植物时，因植物细胞的全能性容易表达，通常将目的基因导入植物的体细胞然后在对其进行组织培养即可，D错误，故选B。【点睛】本题考查基因工程的原理及技术、基因工程的应用，要求考生识记基因工程的基本工具及操作步骤，掌握基因工程的应用，能运用所学的知识对各选项作出正确的判断，属于考纲识记和理解层次的考查。3、D【解析】

“网红细菌”属于原核生物，没有由核膜包被的细胞核，无染色体，遗传物质主要存在于拟核中。“网红细菌”的耐药性是自然选择的结果。活细胞的细胞膜具有选择透过性。【详解】A、“网红细菌”属于原核生物，动物细胞属于真核生物，两者的本质区别在于有无以核膜包被的细胞核，A错误；B、“网红细菌”属于原核生物无染色体，遗传物质主要在拟核中，B错误；C、“网红细菌”原本就具有抗药性变异，抗生素对细菌的抗药性进行了选择，而不是造成细菌抗药性变异，C错误；D、只有活细胞的细胞膜才具有选择透过性，因此可根据细胞膜的通透性判断细菌的存活情况，D正确。故选D。【点睛】本题设置新情境“网红细菌”，考查原核生物、生物进化等有关内容。答题关键在于掌握原核生物与真核生物的异同。易错点是C选项，注意细菌原本就具有抗药性变异，抗生素只是对细菌的抗药性进行了选择，即自然选择的结果。4、A【解析】

酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下进行有氧呼吸；无氧条件下进行酒精发酵。【详解】A、在葡萄酒自然发酵的过程中，起主要作用的是野生型酵母菌，起无氧呼吸可以产生酒精，A正确；B、变酸的酒表面的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖形成的，B错误；C、醋酸菌是需氧生物，C错误；D、在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色，D错误。故选A。5、B【解析】

有氧呼吸和无氧呼吸的最本质的区别是有无相关的酶，真核生物有氧呼吸的酶主要在线粒体中，但是原核生物的酶分布在细胞质中，其没有线粒体也可以进行有氧呼吸。细胞质基质的pH比溶酶体的高，说明溶酶体中的H+浓度高。【详解】A.原核生物中的好氧菌可以进行有氧呼吸，但没有线粒体，A错误；B.高尔基体在动物细胞中与细胞分泌物的分泌有关，而在植物细胞中与细胞壁的形成有关，B正确；C.蓝藻细胞中有与光合作用有关的色素，但蓝藻细胞中没有叶绿体和液泡，C错误；D.细胞质基质的pH比溶酶体的高，H＋进入溶酶体的方式为主动运输，D错误；故选B。【点睛】知识易错点：1.pH大小与H+浓度有关，H+浓度高则溶液的pH低；2.原核细胞与真核细胞的区别是没有核膜包被的成形的细胞核和各种复杂的细胞器。6、C【解析】

1、组成蛋白质的基本组成元素是C、H、O、N，少量蛋白质还含有S等元素。

2、细胞膜表面的糖蛋白具有识别、保护、润滑等功能。3、分泌蛋白的合成、加工和运输过程：最初是在内质网上的核糖体中由氨基酸形成肽链，肽链进入内质网进行加工，形成有一定空间结构的蛋白质由囊泡包裹着到达高尔基体，高尔基体对其进行进一步加工，然后形成囊泡经细胞膜分泌到细胞外，该过程消耗的能量由线粒体提供。【详解】A、蝎毒“染色剂”的本质是蛋白质，含有C、H、O、N等元素，A正确；

B、氯代毒素能选择性地绑定在癌细胞上，说明氯代毒素能被癌细胞表面的受体特异性地识别，与识别功能有关的物质可能是癌细胞表面的糖蛋白，B正确；

C、蝎毒“染色剂”的本质是蛋白质，口服后会被消化道中的蛋白酶水解而失去药效，因此不能用口服的方法摄入这种“染色剂”，C错误；

D、由题意可知，这种染色剂属于分泌蛋白，合成场所是核糖体，加工场所是内质网和高尔基体，合成和分泌过程需要的能量由线粒体提供，D正确。

故选：C。二、综合题：本大题共4小题7、SalⅠHindⅢ氨苄青霉素四环素（或答氨苄青霉素和四环素）4和6放射性同位素（或荧光素）一定浓度的盐水浇灌作物（将作物移栽到盐碱地中种植）细胞的全能性基因重组【解析】

分析第一个图：图示为转基因抗盐作物的培育过程，首先构建基因表达载体；其次采用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞（作物细胞）；再采用植物组织培养技术将含有目的基因的作物细胞培养成转基因抗盐作物。分析第二个图：图示为筛选含有重组质粒的农杆菌的过程，培养基A和B中应该分别加入氨苄青霉素、四环素。【详解】（1）质粒和含有目的基因的外源DNA分子上都含有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点，其中BamHⅠ的切割位点位于目的基因上，用该酶切割会破坏目的基因；若只用SalⅠ一种限制酶切割可能会导致目的基因与运载体反向连接；因此在构建重组质粒时，应选用SalⅠ和HindⅢ两种限制酶对质粒和抗盐基因进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性。（2）用SalⅠ和HindⅢ两种限制酶对质粒进行切割时，会破会四环素抗性基因，但不会破坏氨苄青霉素抗性基因，因此导入重组质粒的农杆菌能在含有氨苄青毒素的培养基上能生存，但不能在含有四环素培养基上生存，所以培养基A和培养基B分别还含有氨苄青霉素、四环素，含目的基因的是4和6菌落中的细菌。（3）探针是指用放射性同位素标记的目的基因（抗盐基因）。除了从分子水平上进行检测，还可以从个体水平上进行鉴定，即用一定浓度的盐水浇灌作物来鉴定作物的耐盐性。（4）将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用植物组织培养技术，组织培养技术依据的原理是细胞的全能性。（5）将抗盐基因导入作物细胞内，使作物具有了抗盐性状，这属于基因工程技术，变异类型是基因重组。【点睛】本题结合转基因抗盐作物的培育过程图，考查基因工程、植物组织培养等知识，要求考生识记基因工程的原理、工具及操作步骤，能根据图中限制酶的位置及题干要求选择正确的限制酶；能根据题中信息判断培养基中抗生素的名称；识记植物组织培养过程及条件。8、D选择稀释涂布平板当两个或多个细胞连接在一起时，平板上观察的只有一个菌落显微镜直接（或血细胞计数板）验证培养基灭菌是否彻底或检测培养基平板灭菌是否合格水不溶性或不与水混溶纸层析【解析】

本题考查尿素分解菌和纤维素分解菌的分离、植物色素的提取内容。鉴定出分解尿素的细菌的方法是：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入刚果红染料，原理是刚果红可与纤维素形成红色复合物，培养几种细菌后，培养基中出现透明圈，就可以鉴定其中含有纤维素分解菌。【详解】（1）A、根据试题分析，前者需要尿素的唯一的氮源，后者需要以纤维素为唯一的碳源，A正确；

B、纤维素分解菌之所以能分解纤维素，是因为它们能产生纤维素酶，土壤中的尿素分解菌能分解尿素，是因为它们能合成脲酶将尿素分解，B正确；

C、分离尿素分解菌和纤维素分解菌都需要梯度稀释，C正确；

D、刚果红染色体可用于鉴定纤维素分解菌，不能用于鉴定尿素分解菌，D错误。

故选D。（2）为从土壤中筛选能有效降解尿素的分解菌。研究人员配制以尿素为唯一氨源的培养基，该培养基为选择培养基。接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法可对微生物进行计数，因此在分离、纯化、计数过程中，常采用稀释涂布法接种；该计数法统计的活菌数一般比实际活菌数低，原因是涂平板时当两个或多个细胞连接在一起时，平板上观察的只有一个菌落。除该活菌计数法外，显微镜直接（或血细胞计数板）计数也是测定微生物数量的常用方法。实验过程中还需设制空白培养基作为对照，其目的是验证培养基灭菌是否彻底或检测培养基平板灭菌是否合格。（3）在提取胡萝卜素时，常用的萃取剂具有沸点高且水不溶性或不与水混溶等特点，在鉴定胡萝卜素粗品时，常用纸层析法。【点睛】提取胡萝卜素的实验流程：胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素，胡萝卜素是化学性质稳定、橘黄色结晶，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂，根据胡萝卜素化学性质稳定、易溶于有机溶剂的特点，选用萃取法，胡萝卜素不具有挥发性，不能选用蒸馏法。萃取效率由萃取剂的性质和使用量，材料颗粒大小，紧密程度，含水量，萃取的温度和时间等条件决定，干燥的目的是尽可能除去水分，提高萃取效率。胡萝卜素溶于层析液中，并随层析液在滤纸条上扩散，故可用纸层析法进行鉴定，并以标准胡萝卜素样品作为对照。9、1酶分子很小，容易从包埋材料中漏出当海藻酸钠溶液浓度较低时，细微网格包埋不紧密，酵母菌细胞容易漏出，导致固定化酵母菌细胞数量较少溶化海藻酸钠溶液时要用酒精灯小火或者间断加热，边加热边搅拌，直至完全溶化不需要开盖放气，避免了因开盖引起的杂菌污染为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气，防止发酵旺盛时汁液溢出【解析】

1.果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，酵母菌酒精发酵时，一般在一般将温度控制在18~25℃，在葡萄酒自然发酵过程当中，其主要作用的是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。2.固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学的方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术。包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。固定化酶优点是使酶既能与反应物接触，又能与产物分离，还可以被反复利用；固定化细胞优点是成本更低，操作更容易，可以催化一系列的化学反应。题图分析：图1为包埋法，图2为化学结合法，图3为物理吸附法。【详解】（1）固定化酵母细胞利用的是包埋法，如图1所示方法；而酶分子很小，容易从包埋材料中漏出，所以制备固定化酶通常用图2和图3所示的方法。在用海藻酸钠包埋酵母细胞时，如果所用海藻酸钠溶液浓度低，则会导致细微网格包埋不紧密，酵母菌细胞容易漏出，固定的酵母菌细胞数量较少，因此，酵母菌催化活性较低。（2）①海藻酸钠加入到定量的蒸馏水中之后需要用酒精灯小火或者间断加热，边加热边搅拌，直至完全溶化，最后用蒸馏水定容至10mL。②图5装置与图4装置的不同在于没有外连长导管，所以在酿制葡萄酒的过程中还需要定时开盖放气，而图4装置就不需要进行专门的放气操作，因此图4装置与图5相比具有的典型优势为不需要开盖放气，避免了因开盖引起的杂菌污染。进行酒精发酵时，通常在发酵装置中要留有约1/3的空间，其目的是为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气，防止发酵旺盛时汁液溢出。【点睛】熟知固定化酶技术的方法以及操作要点是解答本题的关键！酒精发酵的操作流程也是本题的重要考查内容。海藻酸钠的配制是学生的易错点。10、中性或微碱性充分燃烧层平板划线法和稀释涂布平板培养物的纯度大小、形状、颜色稀释涂布平板法显微镜直接计数估计【解析】

统计细菌数量的方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数，在统计菌落数目时，采用稀释涂布平板法来培养细菌。当样品的稀释度足够高时培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个细菌，但菌落数往往比活菌的试剂数目低，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数。另一种方法是直接计数法，这种方法要借助显微镜，且统计的数目也包括死亡的细菌。【详解】（1）微生物生命活动需要一定的条件，不同的微生物需要不同的培养温度和pH，细菌生活的温度一般在30~37℃，pH调至中性或微碱性，霉菌一般在25~28℃，pH调至酸性培养。接种时，对接种环等金属用具通常用灼烧灭菌法，具体做法是：直接在洒精灯火焰的充分燃烧层灼烧。（2）微生物接种方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，还包括斜面接种和穿刺接种等方法。虽然这些技术的操作方法各不相同，但是其核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度。（3）区分细菌种类可以通过多种途径，如通过鉴别菌落的特征或通过生化试验完成，故大肠埃希菌、克雷伯菌鉴定结果可通过菌落的大小、形态、颜色等的不同来区别。常