2020北京PCR考试试题及答案

2020北京PCR考试试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）1.PCR技术的主要作用是（）A.基因表达分析B.基因克隆C.核酸扩增D.蛋白质合成答案：C2.在PCR反应中，起到催化合成新DNA链作用的是（）A.引物B.dNTPC.Taq酶D.模板DNA答案：C3.PCR反应的变性温度一般为（）A.50-55℃B.72℃C.94-95℃D.60-65℃答案：C4.以下哪种物质不是PCR反应的基本成分（）A.RNA酶B.模板DNAC.引物D.dNTP答案：A5.PCR反应中引物的长度一般为（）A.10-20个核苷酸B.1-5个核苷酸C.30-50个核苷酸D.50-100个核苷酸答案：A6.以下关于PCR的描述错误的是（）A.可以特异性扩增目的基因B.反应需要在一定的缓冲体系中进行C.不需要模板即可进行反应D.具有很高的灵敏度答案：C7.在PCR反应中，延伸阶段的温度通常为（）A.94-95℃B.50-55℃C.72℃D.60-65℃答案：C8.用于PCR反应的模板DNA可以来源于（）A.基因组DNAB.质粒DNAC.cDNAD.以上都可以答案：D9.如果PCR扩增没有得到预期的产物，可能的原因不包括（）A.引物设计错误B.模板量过多C.反应体系中没有加入Taq酶D.退火温度过低答案：D10.PCR技术是谁发明的（）A.KaryMullisB.JamesWatsonC.FrancisCrickD.RosalindFranklin答案：A二、多项选择题（每题2分，共10题）1.PCR反应体系包括以下哪些成分（）A.模板DNAB.引物C.Taq酶D.dNTPE.缓冲液答案：ABCDE2.影响PCR扩增特异性的因素有（）A.引物特异性B.退火温度C.模板纯度D.Taq酶的活性E.延伸时间答案：ABC3.以下哪些是PCR技术的应用领域（）A.遗传病诊断B.病原体检测C.基因分型D.法医学鉴定E.转基因检测答案：ABCDE4.在设计PCR引物时，需要考虑的因素有（）A.引物长度B.引物的GC含量C.引物的特异性D.引物的退火温度E.引物的溶解性答案：ABCD5.以下关于Taq酶的说法正确的是（）A.具有热稳定性B.是一种DNA聚合酶C.催化dNTP合成DNA链D.可以耐受高温变性步骤E.对引物有较高的特异性要求答案：ABCDE6.PCR反应中可能出现的问题有（）A.非特异性扩增B.无扩增产物C.扩增产物量过少D.扩增产物量过多E.引物二聚体形成答案：ABCDE7.以下关于PCR反应缓冲液的作用说法正确的是（）A.提供合适的pH环境B.提供必要的离子C.稳定Taq酶活性D.促进引物与模板结合E.促进dNTP合成DNA链答案：ABC8.以下哪些可以作为PCR反应的模板（）A.血液中的DNAB.组织中的DNAC.细胞中的RNA（先反转录为cDNA）D.细菌中的DNAE.病毒中的DNA答案：ABCDE9.为了提高PCR反应的特异性，可以采取的措施有（）A.优化引物设计B.提高退火温度C.降低模板浓度D.减少引物量E.更换Taq酶答案：ABD10.在PCR反应中，引物的作用有（）A.提供起始合成的位点B.决定扩增的特异性C.引导Taq酶合成DNA链D.提高反应的灵敏度E.稳定反应体系答案：ABC三、判断题（每题2分，共10题）1.PCR反应可以在常温下进行。（）答案：错误2.引物在PCR反应中是可以重复使用的。（）答案：错误3.所有的DNA聚合酶都可以用于PCR反应。（）答案：错误4.PCR反应中，退火温度越高，特异性越好。（）答案：正确5.只要有足够的dNTP，PCR反应就可以无限进行。（）答案：错误6.模板DNA的纯度对PCR反应结果没有影响。（）答案：错误7.在PCR反应中，延伸时间越长，扩增产物就越长。（）答案：错误8.引物的GC含量越高越好。（）答案：错误9.PCR技术只能用于检测DNA，不能用于检测RNA。（）答案：错误10.一个好的PCR反应体系不需要进行优化就可以得到理想的结果。（）答案：错误四、简答题（每题5分，共4题）1.简述PCR反应的基本原理。答案：PCR反应基于DNA的半保留复制原理。以DNA为模板，在Taq酶作用下，以四种dNTP为原料，在引物的引导下，经过变性（使模板DNA双链解开）、退火（引物与模板结合）、延伸（合成新的DNA链）三个步骤的多次循环，实现特定DNA片段的大量扩增。2.请说明引物设计的基本原则。答案：引物长度一般10-20个核苷酸；GC含量适中（40%-60%）；引物特异性要强，避免与非目的序列结合；引物之间不能形成二级结构，如引物二聚体；引物的退火温度要合适，可根据公式计算。3.简述PCR反应中出现非特异性扩增的原因及解决方法。答案：原因：引物特异性差、退火温度低、模板不纯等。解决方法：重新设计特异性好的引物、提高退火温度、纯化模板等。4.说明Taq酶在PCR反应中的作用。答案：Taq酶是一种热稳定的DNA聚合酶。在PCR反应中，它以dNTP为原料，按照模板DNA的序列，在引物引导下合成新的DNA链，使PCR反应得以进行。五、讨论题（每题5分，共4题）1.讨论PCR技术在新型冠状病毒检测中的应用及意义。答案：应用：可特异性扩增新冠病毒的核酸片段用于检测是否感染。意义：快速、灵敏地检测病毒，有助于早期诊断，控制疫情传播，对患者的隔离、治疗以及疫情防控策略的制定有着重要意义。2.如何优化PCR反应体系以提高扩增效率？答案：优化引物设计确保特异性和合适的退火温度；调整模板和引物浓度；选择合适的Taq酶；优化反应缓冲液成分；精确控制反应的温度和时间等。3.请阐述PCR技术在遗传病诊断方面的重要性。答案：可扩增与遗传病相关的基