2026届高三生物学一轮复习强化练52：动物细胞工程

强化练52动物细胞工程一、选择题1．(2024·武汉模拟)体外培养动物细胞时常需要提供一个类似该细胞在生物体内的环境条件，培养方式可分为悬浮培养和贴壁培养。下列叙述正确的是()A．悬浮培养一般使用液体培养基B．贴壁培养一般使用固体培养基C．悬浮培养会发生接触抑制现象D．血液中淋巴细胞适合贴壁培养2．(2024·张家口模拟)科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞，获得了类似胚胎干细胞的一种细胞，将它称为诱导多能干细胞(简称iPS细胞)，iPS细胞增殖分化后可形成多种组织细胞，用于多种疾病的治疗。如图为该技术的实验示意图，下列有关说法错误的是()A．体外培养小鼠成纤维细胞和iPS细胞时，定期更换培养液可以清除细胞的代谢物B．选取的小鼠成纤维组织需经胃蛋白酶或胶原蛋白酶处理成单个细胞后制成细胞悬液C．iPS细胞用于疾病治疗时存在分化为肿瘤细胞的风险D．若iPS细胞取自病人，经诱导并移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应3．(2024·安阳一模)研究人员诱导肺上皮干细胞增殖分化可生成不同肺类器官。肺类器官可自组装或与成熟体细胞组装成肺类装配体，过程如图所示。下列叙述正确的是()A．为提供无菌的环境，培养肺类装配体时应对细胞进行灭菌处理B．在培养肺上皮干细胞和体细胞时，培养液中通常需要加入血清C．培养肺类装配体时，需提供含95%O2和5%CO2的气体环境D．在组装肺类装配体的培养过程中，运用了动物细胞融合技术4．(2025·内蒙古自治区适应性演练)动物细胞培养时操作不当会造成“黑胶虫”细菌的污染，该菌对氯霉素敏感。下列叙述正确的是()A．配制细胞培养基时，加血清(含细胞生长必需蛋白)和氯霉素后湿热灭菌B．在加入氯霉素防治“黑胶虫”污染过程中，需要考虑细胞和细菌生长双重因素C．考察“黑胶虫”污染程度时，应取细胞培养液，直接涂布在平板上培养后计数D．采用更换培养基、胰蛋白酶处理和分瓶培养等操作可清除“黑胶虫”污染5．(2024·北京昌平一模)据报道，我国科研人员在太空中进行细胞电融合实验，获得烟草黄花品种叶肉细胞与烟草革新一号叶肉细胞的杂交细胞，又成功完成小鼠淋巴细胞和人骨髓瘤细胞杂交实验。下列相关叙述不正确的是()A．两个电融合实验中，融合前都需用一定浓度的特定酶预处理实验材料B．细胞经电融合处理后，需进一步筛选，以淘汰未融合细胞和多核细胞C．电融合处理后的烟草细胞经组织培养，可获得具双亲优良性状的植株D．经电融合获得的人、鼠杂交瘤细胞，培养过程中体现了细胞的全能性6．(2024·毕节一模)如图所示，核苷酸合成有两条途径，物质A可以阻断其中的全合成途径。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。现用加入了H、A、T三种物质的HAT培养基来筛选杂交瘤细胞。下列相关说法错误的是()A．已免疫的B淋巴细胞在HAT培养基中可大量增殖B．用该培养基筛选出的能产抗体的杂交瘤细胞有多种C．HAT培养基是选择培养基，可以满足部分细胞的生存D．杂交瘤细胞中，“核苷酸→DNA”主要发生于分裂间期7．(2025·唐山开学考试)在某药物研发过程中，需制备抗细胞膜蛋白N的抗体，流程如图所示。下列叙述错误的是()A．取脾组织之前应用蛋白N对健康小鼠进行免疫B．将培养B淋巴细胞的培养瓶置于培养箱并通入无菌氧气C．将杂交瘤细胞转入96孔板时，每个孔中尽量只接种一个细胞D．将药物与抗蛋白N的单克隆抗体结合，可实现特异性治疗8．(2024·邢台一模)为解决杂交瘤细胞在传代培养过程中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失问题，研究者将抗原刺激后的B淋巴细胞用EBV(一种病毒颗粒)感染，获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞。EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对乌本苷(Oua)敏感，骨髓瘤细胞不能在HAT培养基中存活，但对Oua不敏感。如图表示操作过程，下列有关分析错误的是()A．B淋巴细胞来源于抗原刺激后动物的脾脏B．HAT培养基可去除未与EBV转化细胞融合的骨髓瘤细胞和自身融合的骨髓瘤细胞C．杂交瘤细胞染色体丢失可能会导致抗体的产生能力下降D．杂交瘤细胞具有持续产生抗EBV抗体的能力9.(2022·山东，15)如图所示，将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是()A．双抗可同时与2种抗原结合B．利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞C．筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原D．同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞10．(2024·海南，7)海南龙血树具有药用和观赏价值，可利用植物组织培养技术产生愈伤组织，进而获得该种植株。动物细胞融合技术可将骨髓瘤细胞和产生特定抗体的B淋巴细胞融合形成杂交瘤细胞，进而制备单克隆抗体。下列有关这两种技术的叙述，正确的是()A．利用的原理均是细胞的全能性B．使用的培养基均需添加葡萄糖和血清C．培养时的温度和pH均相同D．产生的愈伤组织细胞或杂交瘤细胞均具有增殖能力11．(2025·芜湖检测)乳腺癌化疗的药物在杀伤肿瘤细胞的同时还会对健康细胞造成伤害，为降低药物对患者的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体—药物偶联物(ADC)，过程如图所示。下列相关说法正确的是()A．对过程①形成的融合细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可以获得能分泌所需抗体的细胞B．ADC通常由抗体、接头和药物三部分组成，ADC起作用时会被细胞吞噬，并在溶酶体内被分解后释放药物C．经步骤③筛选得到的杂交瘤细胞具有的特点是能准确识别抗原的细微差异并能大量制备D．ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，原因是药物能特异性地作用于乳腺癌细胞，避免其他细胞受损12．(2025·陕西适应性演练)我国科学家利用体细胞核移植技术成功克隆了濒临灭绝的某地方牛种。下列叙述错误的是()A．从该牛种耳上取的体细胞培养时需在合成培养基中加入血清B．从牛卵巢中采集的卵母细胞需要在体外培养至MⅡ期C．代孕母牛为重构胚发育提供空间和营养，不会影响犊牛的遗传物质D．胚胎移植前需要对供体牛与受体牛进行同期发情处理13．(2024·新余一模)如图为培育体细胞克隆猴的流程。据图分析，下列叙述错误的是()A．将成纤维细胞注入去核卵母细胞前，用灭活的仙台病毒短暂处理的目的是利于细胞融合B．图中克隆猴的细胞质基因来自猴A和猴BC．组蛋白的甲基化和乙酰化不利于重构胚完成细胞分裂和发育过程D．体细胞克隆猴的成功便于建立某些疾病模型和药物筛选14．(2024·邯郸月考)体细胞核移植技术在畜牧业、医药卫生、拯救濒危动物等方面有着广泛的应用前景。下列关于动物细胞核移植技术应用的叙述，错误的是()A．哺乳动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植的B．克隆动物与供核动物的遗传性状完全相同，原因是遗传物质主要分布在细胞核中C．利用体细胞核移植技术培育的转基因克隆动物，可作为生物反应器生产医用蛋白D．以患者作为供体培育的人核移植胚胎干细胞，经过诱导分化能形成相应的细胞、组织或器官，将它们移植给患者时可避免发生免疫排斥反应二、非选择题15．(16分)(2025·云南适应性演练)嵌合抗原受体-T细胞(CAR-T细胞)疗法在人类肿瘤治疗中取得了重要突破。CAR-T细胞疗法是将CAR基因导入T细胞成为CAR-T细胞，通过CAR蛋白上的scFv肽链(小肽不足以发挥抗原作用，但能发挥抗体识别作用)特异性识别肿瘤细胞膜上的抗原，并通过CAR蛋白上的其他肽链结构激活CAR-T细胞继而杀伤肿瘤细胞。回答下列问题：(1)获得含有scFv肽链的单克隆抗体，流程如图。①图中通过驱动细胞和测试细胞反复免疫小鼠产生抗体的过程属于________(填“细胞”或“体液”)免疫，参与该过程的免疫细胞来源于小鼠骨髓______________。实验小鼠机体产生免疫应答的过程中，辅助性T细胞的主要作用是_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。该实验最适用于筛选________(填标号)。A．大鼠肝细胞区别于兔肝细胞特殊抗原的抗体B．正常细胞区别于感染HIV细胞内特殊抗原的抗体C．衰老神经细胞区别于正常神经细胞抗原的抗体②取第二组小鼠分离脾细胞，加入______________诱导脾细胞和骨髓瘤细胞的融合。(2)CAR基因的构建，流程如图。在设计添加CAR基因两端限制酶识别序列并与表达载体正确连接的过程中，必须考虑的有________(填标号)。A．PCR使用的上、下游引物需含限制酶识别序列B．CAR基因内可以含有引物所含限制酶识别序列C．限制酶识别序列需位于载体启动子、复制原点和标记基因内D．上、下游引物所含限制酶识别序列不同E．CAR基因插入载体位点需位于启动子下游(3)从免疫学角度分析，如果用高特异性抗体DNA直接构建CAR基因，再通过载体导入T细胞并稳定表达，不但会使治疗效果大幅降低，同时还会________________________________。答案精析1．A[动物细胞培养均采用液体培养基，B错误；贴壁培养会发生接触抑制现象，悬浮培养不会发生接触抑制现象，C错误；体外培养动物细胞时常需要提供一个类似该细胞在生物体内的环境条件，因此血液中淋巴细胞适合悬浮培养，D错误。]2．B[选取的小鼠成纤维组织需经胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理成单个细胞后制成细胞悬液，由于动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性，B错误。]3．B[灭菌会导致细胞失活，A错误；肺类装配体需要在95%空气和5%CO2的气体环境中培养，C错误；由图可知，肺类装配体形成过程中没有利用动物细胞融合技术，仅是将不同类型的细胞组装起来，D错误。]4．B[配制细胞培养基时，湿热灭菌后通过过滤灭菌加入血清(含细胞生长必需的蛋白)和氯霉素，A错误；在加入氯霉素防治“黑胶虫”污染过程中，需要考虑细胞和细菌生长双重因素，保证动物细胞的正常生长，同时抑制细菌的生长，B正确；考察“黑胶虫”污染程度时，应取细胞培养液，等比例稀释后涂布在平板上培养，在涂布有适合浓度菌液的平板上计数，C错误；采用更换培养基、胰蛋白酶处理和分瓶培养等操作都不能清除“黑胶虫”污染，D错误。]5．D[经电融合获得的人、鼠杂交瘤细胞，培养过程中没有体现细胞的全能性，D错误。]6．A[免疫的B淋巴细胞因高度分化而不能大量增殖，A错误；用该培养基筛选出的能产抗体的杂交瘤细胞有多种，所以需进一步筛选后才能获得产生特定抗体的杂交瘤细胞，B正确；HAT培养基是选择培养基，可以满足部分细胞的生存，如杂交瘤细胞，C正确；杂交瘤细胞中，“核苷酸→DNA”即DNA复制过程，主要发生于分裂间期，D正确。]7．B[将培养B淋巴细胞的培养瓶置于二氧化碳培养箱中进行培养，其中存在氧气，不需要专门通入无菌氧气，B错误。]8．D[抗原刺激可引起机体产生相应的B淋巴细胞，且B淋巴细胞可分布于淋巴结和脾脏等处，故B淋巴细胞来源于抗原刺激后动物的淋巴结和脾脏等，A正确；据“EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对Oua敏感，骨髓瘤细胞不能在HAT培养基中存活，但对Oua不敏感”可知，HAT培养基可去除未与EBV转化细胞融合的骨髓瘤细胞和自身融合的骨髓瘤细胞，B正确；杂交瘤细胞具有持续产生针对特定抗原而不是EBV的抗体的能力，D错误。]9．D[根据抗原和抗体发生特异性结合的原理推测，双抗可同时与2种抗原结合，A正确；根据抗原与抗体能够发生特异性结合的特性，利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞，从而使药物发挥相应的作用，B正确；由于双抗是在两种不同的抗原刺激下，B细胞增殖、分化产生不同的浆细胞分泌形成的，因此，筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原来进行抗原－抗体检测，从而实现对双抗的筛选，C正确；同时注射2种抗原可刺激B细胞分化形成不同的浆细胞，而不是分化成产双抗的浆细胞，D错误。]10．D[利用植物组织培养技术获得海南龙血树，利用的原理是细胞的全能性；制备单克隆抗体使用了动物细胞培养技术和细胞融合技术，这两种技术利用的原理分别是细胞的增殖和细胞膜的流动性，A错误；利用植物组织培养技术获得海南龙血树，使用的培养基中添加的是蔗糖，不需添加葡萄糖和血清，B错误；由于植物细胞和动物细胞生长所需的适宜温度和pH存在差异，所以培养时的温度和pH均不相同，C错误；愈伤组织是外植体(离体的植物器官、组织或细胞)经脱分化形成的，杂交瘤细胞是由骨髓瘤细胞和产生特定抗体的B淋巴细胞融合后形成的，因此产生的愈伤组织细胞或杂交瘤细胞均具有增殖能力，D正确。]11．B[经过程①形成的融合细胞有同种核两两融合和不同核融合细胞，需要经过特定的选择性培养基筛选，A错误；步骤③是抗体检测，得到的杂交瘤细胞既能大量增殖又能产生专一性抗体，C错误；ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，原因是抗体能特异性地作用于乳腺癌(靶)细胞，避免其他细胞受损，D错误。]12．D[由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分，A正确；从牛卵巢中采集的卵母细胞需要在体外培养至MⅡ期才具备与精子受精的能力，B正确；代孕母牛为重构胚发育提供空间和营养，没有为犊牛提供遗传物质，不会影响犊牛的遗传物质，C正确；体细胞核移植技术中，通常不需要对供体进行同期发情处理，D错误。]13．C[灭活的仙台病毒具有促融的作用，因此，将成纤维细胞注入去核卵母细胞前，用灭活的仙台病毒短暂处理的目的是利于细胞融合，A正确；据图可知，体细胞克隆猴是由去核卵母细胞和成纤维细胞融合而成的重构胚发育而来的，故体细胞克隆猴的线粒体DNA来自去核卵母细胞和成纤维细胞，即图中克隆猴的细胞质基因来自猴A和猴B，B正确；结合题图，重构胚在加入Kdm4d的mRNA和TSA后，发育成克隆猴，而Kdm4d的mRNA表达产物为组蛋白去甲基化酶，可以使组蛋白去甲基化，TSA为组蛋白去乙酰化酶抑制剂，抑制组蛋白去乙酰化酶的作用，保持组蛋白乙酰化，即组蛋白乙酰化和去甲基化有利于重构胚完成细胞分裂和发育过程，C错误；克隆特定疾病模型的动物，可为研究该疾病的致病机制和开发相应的药物提供帮助，因此体细胞克隆猴的成功便于建立某些疾病模型和药物筛选，D正确。]14．B15．(1)①体液造血干细胞分泌细胞因子，促进B细胞增殖