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果蔬中致病性大肠杆菌的测定主讲教师：吴晨奇

苏州农业职业技术学院《技能大赛培训》食品质量与安全专业教学资源库TeachingResourceLibraryofFoodQualityandSafety目录Contents氨基甲酸酯农药残留量的测定1实验步骤43目的要求1实验原理2仪器与试剂34一、目的要求1.掌握微生物检验的一般方法。2.学会果蔬中致病性大肠杆菌的测定方法。果蔬中致病性大肠杆菌的测定34二、实验原理果蔬中致病性大肠杆菌的测定一般采用生物试验的方法进行细菌培养实验，经过增菌、分离等过程，然后采用合适的方法“试验”，以10m(g)样品中大肠南群最可能数(MPN)表示。果蔬中致病性大肠杆菌的测定34三、仪器与试剂1.仪器采样箱;灭菌搅拌棒;灭菌具塞广口瓶;灭菌塑料袋;酒精灯:冰箱:恒温培养箱:恒温水浴锅;显微镜;离心机;酶标仪;均质器(或灭菌乳钵);架盘药物天平;细菌浓度比浊管:灭菌广口瓶;灭菌锥形瓶;灭菌吸管;灭菌培养皿;灭菌试管;注射器;灭菌刀、剪、勺子、镊子等;小鼠;硝酸纤维素滤膜(150mmX50mm,0.45pm)，灭菌备用。果蔬中致病性大肠杆菌的测定34三、仪器与试剂2.试剂①乳糖胆盐发酵管。②营养肉汤。③肠道菌增菌肉汤。④麦康凯琼脂。⑤伊红美蓝琼脂(EMB)。⑥三糖铁琼脂(TSI)。⑦克氏双糖铁琼脂(KI)。⑧糖发酵管。⑨赖氨酸脱羧酶试验培养基。⑩尿素琼脂。果蔬中致病性大肠杆菌的测定34四、实训(实验)步骤1.增菌称取检样25g,加入装有225mLGN增菌液的500mL广口瓶内(固体食品）应用均质器以8000~0000r/min打碎1lmin,或用乳钵加灭菌砂磨碎，粉状食品应用灭菌金属匙或玻璃棒研磨使其乳化)，于36C士1C培养6~8h。2.分离取增菌液1环，划线接种于HE琼脂平板或SS琼脂平板一个，麦康凯琼脂平板或伊红美蓝琼脂平板一个，于36C士1C培养18~24h。3.生化试验挑取平板上的可疑菌落，接种三糖铁琼脂和半固体各一管。一般应多挑几个菌落以防遗漏。4.血清学试验5.结果报告果蔬中致

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