仪器分析刘英68课件

仪器分析环/境/与/生/化/工/程/学/院主讲人：刘英项目三色谱法定性定量分析方法3.21色谱定性分析方法2色谱定量分析方法CONTENTS目录学习目标知识目标：1、理解色谱定性分析方法；2、掌握色谱定量分析方法。能力目标：1、能利用色谱的定性分析方法对物质进行定性；2、学会利用色谱定量分析方法对物质进行定量分析。重难点：色谱定量分析方法一、色谱定性分析方法1.利用纯物质定性①利用保留值定性：通过对比试样中具有与纯物质相同保留值的色谱峰，来确定试样中是否含有该物质及在色谱图中位置。不适用于不同仪器上获得的数据之间的对比。②利用加入法定性：将纯物质加入到试样中，观察各组分色谱峰的相对变化。一、色谱定性分析方法1.利用纯物质定性①利用保留值定性：通过对比试样中具有与纯物质相同保留值的色谱峰，来确定试样中是否含有该物质及在色谱图中位置。不适用于不同仪器上获得的数据之间的对比。“相同的色谱条件”试样标样一、色谱定性分析方法①利用保留值定性一、色谱定性分析方法②利用加入法定性：将纯物质加入到试样中，观察各组分色谱峰的相对变化。试样加标试样“峰高加入法”“相同的色谱条件”一、色谱定性分析方法2.利用文献保留值定性相对保留值γ21：仅与柱温和固定液性质有关。

在色谱手册中都列有各种物质在不同固定液上的相对保留值数据，可以用来进行定性鉴定。一、色谱定性分析方法3.保留指数（I）又称Kovats指数，是一种重现性较好的定性参数。测定方法：将正构烷烃作为标准，规定其保留指数为分子中碳原子个数乘以100（如正己烷的保留指数为600）。待测物质X的保留指数（IX）是通过选定正构烷烃，其分别具有Z和Z＋n个碳原子。被测物质X的（调整）保留时间应在两个正构烷烃的调整保留值之间：一、色谱定性分析方法保留指数计算方法一、色谱定性分析方法4.与其他分析仪器联用的定性方法小型化的台式色质谱联用仪（GC-MS，LC-MS）；色谱-红外光谱仪联用仪；组分的结构鉴定。一、色谱定性分析方法二、色谱定量分析方法色谱定量分析依据色谱峰面积A或峰高h与组分的量（浓度或质量）成正比。一般多以峰面积A进行定量。二、色谱定量分析方法1.峰面积的测量方法（1）峰高（h）乘半峰宽（W1/2）：近似将色谱峰当作等腰三角形。此法算出的面积是实际峰面积的0.94倍：A=h·W1/2（2）峰高乘平均峰宽：当峰形不对称时，可在0.15h和0.85h处分别测定峰宽，由下式计算峰面积：

A=h·(W0.15+W0.85)/2（3）峰高乘保留时间：在一定操作条件下，同系物的半峰宽与保留时间成正比，对于难于测量半峰宽的窄峰、重叠峰（未完全重叠），可用此法测定峰面积：∵W1/2∝

tR，W1/2＝b·tR，A=1.064h·W1/2

∴

A=h·b·tR二、色谱定量分析方法（4）微机自动积分处理色谱峰分析结果二、色谱定量分析方法2.定量校正因子与组分性质及检测器性能有关。试样中各组分质量与其色谱峰面积成正比，即：mi=fiAi绝对校正因子：比例系数fi

，单位面积对应的物质量：

fi=mi/Ai定量校正因子与检测器响应值（灵敏度）成倒数关系：

fi=1/Si

二、色谱定量分析方法

相对校正因子fi'：即组分的绝对校正因子与标准物质的绝对校正因子之比。当mi、ms以质量为单位时，所得相对校正因子称为相对质量校正因子（f'm）；当mi、ms以摩尔为单位时，所得相对校正因子称为相对摩尔校正因子（f'M）。二、色谱定量分析方法3.常用的定量方法（1）归一化法特点及要求：

归一化法简便、准确；进样量的准确性和操作条件的变动对测定结果影响不大；

不足：仅适用于试样中所有组分全出峰的情况。二、色谱定量分析方法色谱峰分析结果（1）归一化法二、色谱定量分析方法（2）外标法（也称标准曲线法）依据峰面积A或峰高h与组分的含量或浓度成正比，绘制标准曲线。二、色谱定量分析方法（2）外标法(标准曲线法)标准系列溶液的配制与测定:二、色谱定量分析方法标准系列溶液的配制与测定:（2）外标法二、色谱定量分析方法外标法定量二、色谱定量分析方法（2）外标法(也称标准曲线法)特点及要求：外标法不使用校正因子，准确性较高;操作条件变化对结果准确性影响较大;对进样量的准确性控制要求较高，适用于大批量试样的快速分析。二、色谱定量分析方法（3）内标法适用于试样中不是所有组分都能出峰的情况。

1.内标物要满足以下四点要求：①试样中不含有该物质；②与被测组分性质比较接近；③不与试样发生化学反应；④出峰位置应位于被测组分附近，且与组分峰不重叠。二、色谱定量分析方法2.试样配制：准确称取一定量的试样m样(g)，准确加入一定量内标物ms(g)，则：二、色谱定量分析方法二、色谱定量分析方法如以内标物为基准，则其相应计算公式:提示：此时＝1.0。二、色谱定量分析方法内标法的特点(1)内标法的准确性较高，操作条件和进样量的稍许变动对定量结果的影响不大。(2)每个试样的分析，都要进行两次称量，不适合大批量试样的快速分析。

二、色谱定量分析方法（4）标准加入法测得样品中待测组分i（浓度为wi）的峰面积为Ai（或峰高hi）；

浓度为wi→Ai再向该样品中加入一定量的标准物质，总浓度为wiˊ(与样品相比，浓度增量⊿wi)

，测得峰面积为Aiˊ(或峰高hiˊ)，则：

浓度为wiˊ→Aiˊ

二、色谱定量分析方法（4）标准加入法测得样品中待测组分i（浓度为wi）的峰面积为Ai（或峰高hi）；

浓度为wi→A