细胞质膜翟中和第四2讲课文档

细胞质膜翟中和第四第一页，共60页。细胞表面是复合的结构体系与多功能的体系，细胞膜是细胞表面的核心结构。第二页，共60页。细胞质膜（plasmamembrane）又称质膜，曾称细胞膜（cellmembrane)，是围绕在细胞最外层，由脂质、蛋白质和糖类组成的生物膜。在细胞内部包绕各种细胞器的膜，称为细胞内膜。质膜和细胞内膜在起源、结构和化学组成的等方面具有相似性，故总称为生物膜（biomembrane）。生物膜是细胞进行生命活动的重要物质基础。基本概念第三页，共60页。本章主要内容细胞质膜的结构模型与基本成分细胞质膜的基本特征与功能第四页，共60页。第一节细胞质膜的结构模型与基本成分细胞质膜

（plasmamembrane）真核细胞内膜系统

（endomembranesystem）生物膜（biomembrane）第五页，共60页。一、细胞质膜的结构模型三明治模型单位膜模型流动镶嵌模型脂筏模型每种模型对认识生物膜的贡献及其局限性？第六页，共60页。1895年，E.Overton发现凡是溶于脂肪的物质很容易透过植物的细胞质膜，而不溶于脂肪的物质不易透过细胞质膜，因此推测质膜由连续脂类物质组成。1.质膜由双层脂分子构成的推测第七页，共60页。1925年，E.Gorter（戈顿）&F.Grendel（格伦德尔）用有机溶剂提取了人的红细胞质膜的脂类成分，将其铺展在水面，测出膜脂展开的面积二倍于细胞表面积，因而推测细胞质膜由双层脂分子组成。第八页，共60页。2.“蛋白质－脂质－蛋白质”三明治式结构模型1935年，J.Danielli&H.Davson发现质膜的表面张力比油－水界面的张力低得多，推测膜中含有蛋白质。提出蛋白质—脂质—蛋白质的三明治式的质膜模型（三夹板模型）。第九页，共60页。1959年，J.D.Robertson（罗伯逊）用超薄切片技术获得了清晰的细胞膜照片，显示出暗-明-暗三层结构，研究表明：它由厚约3.5nm的双层脂分子（明带）和内外表面各厚约2nm的蛋白质构成(暗带总厚约7.5nm）。当时认为膜上还具有贯穿脂双层的蛋白质通道，供亲水物质过，由此发展了三明治模型，提出了蛋白质－脂质－蛋白质的单位膜模型（unitmenbranemodel）。

3.单位膜模型电镜超薄切片中的细胞质膜显示出暗－亮－暗三条带第十页，共60页。4.流动镶嵌模型1972年，Singer和Nicolson①膜的流动性

②膜蛋白分布的不对称性Singer,S.J.;Nicolson,G.L.(1972)."Thefluidmosaicmodelofthestructureofcellmembranes".Science,175(4023):720–731.第十一页，共60页。该模型的主要论点是:

1）流动的脂双层构成膜的连续主体,球形的膜蛋白质以各种镶嵌形式与脂双分子层相结合。

2）构成膜的脂双层具有液晶态的特性,它既有晶体的分子排列的有序性,又有液体的流动性。该模型的突出特点是：

1）强调了膜的流动性：即膜蛋白和膜脂均可侧向运动；

2）强调了膜组分分布的不对称性：即膜蛋白有的镶在表面、有的嵌入、有的横跨脂双分子层。该模型的不足之处：

1）忽视了蛋白质分子对脂类分子流动性的限制作用；

2）忽视了膜各部分流动性的不均匀性等,从而使人们又提出了一些新的模型。第十二页，共60页。5.脂筏模型1988年，Simons胆固醇、鞘磷脂等富集区域形成相对有序的脂相，如同漂浮在脂双层上的“脂筏”载着执行特定生物学功能膜蛋白SimonsK,vanMeerG(August1988)."Lipidsortinginepithelialcells".Biochemistry,27(17):6197–202.SimonsK,IkonenE(June1997)."Functionalraftsincellmembranes".Nature,387(6633):569–72.第十三页，共60页。脂筏结构模型脂筏模型（lipidrafts）：脂质双分子层不是一个完全均匀的二维流体，膜中富含胆固醇和鞘磷脂的微区，其中聚集一些特定的蛋白质区。特点：这些区域比膜的其他部分厚，更有秩序且较少流动性。其周围是流动性较高的液态区。功能：参与信号转导、受体介导的内吞作用以及胆固醇代谢运输等。脂笩功能的紊乱涉及多种疾病的发生。第十四页，共60页。6.目前对生物膜结构的认识磷脂分子在水相中具有自发封闭的性质蛋白质分子以不同方式镶嵌在脂双层分子中或结合在其表面生物膜可看成是蛋白质在双层脂分子中的二维溶液细胞生命活动中，生物膜处于不断的动态变化中第十五页，共60页。生物膜结构示意图第十六页，共60页。质膜的化学组成质膜主要由膜脂和膜蛋白组成，另外还有少量糖，主要以糖脂和糖蛋白的形式存在。膜脂是膜的基本骨架，膜蛋白是膜功能的主要体现者。动物细胞膜通常含有等量的脂类和蛋白质。第十七页，共60页。二、膜脂(membranelipid)第十八页，共60页。（一）成分甘油磷脂鞘脂固醇第十九页，共60页。1.甘油磷脂具有一个极性头和两个非极性的尾脂肪酸碳链为偶数除饱和脂肪酸外常含1-2个双键的不饱和脂第二十页，共60页。脂分子极性头空间占位对脂双层曲度的影响PE极性头较小，更多地分布在脂双层曲度较小的一侧(磷脂酰乙醇胺)(磷脂酰胆碱)第二十一页，共60页。甘油磷脂与鞘磷脂PEPSPCSM第二十二页，共60页。2.鞘脂主要在高尔基体合成鞘磷脂形成的脂双层厚度较甘油磷脂厚度大A.卵磷脂B.鞘磷脂C.卵磷脂和胆固醇D.鞘磷脂和胆固醇第二十三页，共60页。3.固醇：胆固醇及其类似物含4个闭环，亲水的头部为一个羟基调节膜的流动性，增加膜的稳定性以及降低水溶性物质通透性脂筏基本结构成分，还是很多重要生物活性分子的前体化合物Figure10-4MolecularBiologyoftheCell(©GarlandScience2008)第二十四页，共60页。（二）膜脂的运动方式沿膜平面的侧向运动脂分子围绕轴心的自旋运动脂分子尾部摆动双层脂分子之间的翻转运动Figure10-11bMolecularBiologyoftheCell(©GarlandScience2008)第二十五页，共60页。（三）脂质体(liposome)脂质体：根据磷脂分子可在水相中形成稳定脂双层膜的现象而制备的人工膜用途：可嵌入不同的膜蛋白，

是研究膜脂与膜蛋白生物学性质以及转基因、药物靶向的好材料第二十六页，共60页。（三）脂质体(liposome)Figure10-8MolecularBiologyoftheCell(©GarlandScience2008)Lipidbilayerssealspontaneously第二十七页，共60页。三、膜蛋白(membraneprotein)膜蛋白种类繁多赋予生物膜重要的生物学功能第二十八页，共60页。（一）膜蛋白的三种基本类型外在膜蛋白或外周膜蛋白内在膜蛋白或整合膜蛋白脂锚定膜蛋白第二十九页，共60页。脂锚定膜蛋白的3种类型A：脂肪酸结合到膜蛋白N端的甘氨酸残基上B：烃链结合到膜蛋白C端的半胱氨酸残基上C：通过糖脂锚定在细胞质膜上第三十页，共60页。（二）内在膜蛋白与膜脂结合的方式内在膜蛋白为跨膜蛋白可分为：胞质外结构域、跨膜结构域和胞质内结构域第三十一页，共60页。内在膜蛋白与膜脂结合的方式膜蛋白的跨膜结构域与脂双层分子的疏水核心相互作用跨膜结构域两端带正电荷的氨基酸残基或带负电的氨基酸残基通过Ca2+、Mg2+与带负电的磷脂极性头部相互作通过自身在胞质一侧的半胱氨酸残基共价结合到膜脂肪酸分子上第三十二页，共60页。内在膜蛋白跨膜结构域与膜脂跨膜结构域形成α螺旋跨膜结构域主要由β折叠片组成某些α螺旋外侧非极性链与膜脂相互作用，内侧极性链形成特异极性分子的跨膜通道第三十三页，共60页。膜蛋白及其与膜脂关系的三维结构分析跨膜蛋白既有疏水区域(跨膜区)，也有亲水区域（膜表面区），其结构解析主要是应用低温电镜技术和X射线晶体衍射技术图4-12图4-13第三十四页，共60页。（三）去垢剂一端亲水、一端疏水的两性小分子，是分离与研究膜蛋白的常用试剂插入膜脂与膜脂或膜蛋白的跨膜结构域等疏水部位结合，形成可溶性的微粒第三十五页，共60页。（三）去垢剂离子型去垢剂：如SDS，可破坏蛋白质中离子键和氢键等非共价键，甚至改变蛋白质亲水部分的构象非离子去垢剂：如TritonX-100，对蛋白质作用比较温和，用于膜蛋白的分离与纯化第三十六页，共60页。四、膜糖糖脂糖蛋白Figure10-28bMolecularBiologyoftheCell(©GarlandScience2008)细胞质膜上的膜糖都位于质膜外表面，内膜系统中的膜糖则面向细胞器腔面！第三十七页，共60页。第二节细胞质膜的基本特征与功能流动性不对称性膜骨架质膜的基本功能第三十八页，共60页。一、膜的流动性膜的流动性是是所有的生物膜的基本特征，是细胞生长增殖等生命活动的必要条件膜的流动状态受细胞代谢过程的调节第三十九页，共60页。（一）膜脂的流动性脂肪酸链越短、不饱和程度越高，流动性越大温度对膜脂的运动有明显影响胆固醇对膜的流动性起着双重调节作用第四十页，共60页。（二）膜蛋白的流动性荧光标记人-鼠细胞融合实验成斑现象（patching）或成帽现象（capping）Figure10-35MolecularBiologyoftheCell(©GarlandScience2008)第四十一页，共60页。（二）膜蛋白的流动性膜蛋白流动性受多种因素限制：如紧密连接、细胞骨架的影响等第四十二页，共60页。（三）膜脂和膜蛋白运动速率的检测荧光漂白恢复（FRAP）技术Figure10-36aMolecularBiologyoftheCell(©GarlandScience2008)第四十三页，共60页。质膜的流动性是保证其正常功能的必要条件例如物质运输、细胞识别、细胞信号转导等，与细胞生长发育，抗寒性有关。当膜的流动性低于一定的阈值时，许多酶的活动和跨膜运输将停止，反之如果流动性过高，又会造成膜的溶解。膜流动性的生物学意义第四十四页，共60页。影响膜流动性的因素胆固醇：胆固醇的含量增加会降低膜的流动性。脂肪酸链的饱和度：脂肪酸链所含双键越多越不饱和，使膜流动性增加。脂肪酸链的链长：长链脂肪酸相变温度高，膜流动性降低。卵磷脂/鞘磷脂：该比例高则膜流动性增加，是因为鞘磷脂粘度高于卵磷脂。其他因素：温度、酸碱度、离子强度等。脂质和蛋白质的相互作用：内在蛋白越多，界面脂越多，膜的流动性降低。第四十五页，共60页。二、膜的不对称性膜脂和膜蛋白在生物膜上呈不对称分布糖蛋白和糖脂的糖基部分均位于细胞质膜的外侧电镜冷冻蚀刻技术第四十六页，共60页。（一）细胞质膜各膜面的名称质膜的细胞外表面（extrocytoplasmicsurface，ES）质膜的原生质表面（protoplasmicsurface，PS）细胞外小叶断裂面（extrocytoplasmicface，EF）原生质小叶断裂面（protoplasmicface，PF）第四十七页，共60页。EFPF小鼠肝细胞膜冰冻蚀刻第四十八页，共60页。（二）膜脂的不对称性膜脂的不对称性是指同一种膜脂分子在膜的脂双层中呈不均匀分布糖脂分布表现出完全不对称性：非胞质侧第四十九页，共60页。（二）膜脂的不对称性第五十页，共60页。（三）膜蛋白的不对称性所有的膜蛋白在质膜上都呈不对称分布，每种膜蛋白分子在质膜上都具有明确的方向性糖蛋白的糖残基均分布在生物膜的非胞质一侧Figure10-27MolecularBiologyoftheCell(©GarlandScience2008)第五十一页，共60页。三、细胞质膜相关的膜骨架Figure10-42aMolecularBiologyoftheCell(©GarlandScience2008)第五十二页，共60页。（一）膜骨架细胞质膜下与膜蛋白相连的由纤维蛋白组成的网架结构，参与维持质膜形状并协助质膜完成多种生理功能哺乳动物红细胞具有很好的