微生物复习资料2

微生物复习2

1、微生物的概念

微生物是一类体积微小、结构简单、肉眼直接看不见，务必用光学显微镜或者者电了•显微镜

放大后才能看得见的微小生物的总称。

2、微生物的生物学特点

微生物的六大共性：

1、体积小，面枳大（基础、微米纳米、物质交换）

2、汲取多，代谢旺

3、食谱杂，易培养

4、生长旺，繁殖快

5、习惯强，易变异

6、分布广，种类多

3、原核微生物与真核微生物的概念及区别

原核微生物是指细胞核分化程度低，仅有原始核质，没有核膜与核仁；细胞器不完善的原始

单细胞生物。

通常有细菌、螺旋体、支原体、立克次体、衣原体与放线菌这几种分类

真核微生物是一类具有真正细胞核，具有核膜与核仁分化的较高等的微生物。

真核微生物包含除蓝藻以外的藻类、酵母菌、霉菌、原生动物、微型后生动物等。

真核微生物：有一至多条线形染色体。

2.细胞分裂

原核微牛物：二分裂（无性繁殖、裂殖）.

真核微生物：有丝分裂，减数分裂，产生抱子（有性、无性）

3.生理特性

原核微生物：化能合成作用、生物固氮能力、专性厌氧生活、细胞膜进行呼吸

与光合作用

真核微生物：线粒体叶绿体进行呼吸与光合作用，但真菌没光合色素

原核微生物:有中体只有核糖体一个细胞器

真核微生物:无中体有维胞器:有线粒体、高尔基体、内质网、叶绿体、中心体。

原核微生物：70S（在细胞质中）。

原核微生物：80S(在细胞质中)；70S(在某些细胞器中)。

原核微生物：肽聚糖或者脂多糖。

真核微生物：几丁质、多聚糖或者寡糖。

7.运动器官

真核微生物：较粗鞭毛或者纤毛(9+2结构)。

8.细胞大小

原核微生物：较小，1—l()um。1

真核微生物：较大，10—lOOum1

4、革兰氏染色的步骤、原理及关键步骤

5.革兰氏染色、要紧步骤、结果及实际意义如下：

操作过程如下：涂片一干燥一固定一草酸铉结晶紫染色(Imin)一水洗一路哥氏碘液媒染

(Imin)一水洗一95%乙醇脱色(30s)一水洗一番红复染(Imin)一水洗一干燥一镜检。

(2)染色结果是：G+菌呈紫色，G一菌呈红色。

(3)革兰染色的意义：有助于鉴定细菌、指导用药、研究与熟悉细菌的染色性、致病性

等。

原理：革兰氏阳性细菌细胞壁肽聚糖含量高，肽聚糖层较薄厚，类脂质含量低，乙醇处

理使细胞壁脱水，肽聚糖层孔径变小，细胞壁通透性降低，结晶紫-碘复合物被保留在细胞

内，因此小被脱色。

革兰氏阴性菌细抱壁类脂质含量高，肽聚糖含量低，肽聚糖层较薄，乙醇溶解

了类脂质，使细胞壁通透性增加，结晶紫--碘复合物被洗脱出来，因此被脱色。

G+:特有磷壁酸

G-：特有脂多糖

类脂质不等于脂多糖

3细菌、放线菌、醉母菌与霉菌的细胞结构、繁殖方式与菌落特征

表3-5四大类盘生物菌落和细丝形态特征的比较

类别单细胞微生物菌丝状微生物

菌落特细胞酵母菌放线菌毒菌

主菌含水状态很湿或较湿较湿干像或较干燃干像

要落外观形态小而突起或大大而突起小而紧密大而疏松或

特而平坦大而致密

征相互关系单个分散或有单个分散或丝状交纵丝状交狼

细一定排列方式假丝状

胞形态特征小而均匀*,个大而分化细而均匀粗而分化

别有芽泡

菌落透明度透明或稍透明稍透明不透明不透明

菌落与培养基结不结合不结合牢固结合较牢固结合

合程度

菌落颜色多样单调，一般呈十分多样十分多样

参乳脂或旷烛

考色，少数红或

特黑色

征菌落正反面颜色相同相同一般不同一瓶不同

的差别

菌落边绦**一般看不到细可见球状、卵有时可见细丝可见粗丝状

胞圆状或假丝状细胞细胞

状细胞

细胞生长速度一般很快较快慢一般较快

气味一般有臭味多带酒香味常有泥腥味往往有霉味

*“均匀”指在高倍镜下看到的细胞只是均匀一团；而“分化”指可看到细胞

内部的一些模糊结构。

**用低倍镜观察。

4、噬菌体的繁殖过程

A.噬菌体将自己的DNA注入到细菌体内

B.噬菌体的DNA利用细菌体内的成分复制出DNA与蛋白质外壳

C.新合成的DNA与蛋白质外壳构成装成子代噬菌体

D.释放子代噬菌体

双选，请说出为什么

问题补充：

噬菌体侵染细菌的过程中能说明DNA分子是遗传物质的关键步骤

5、微生物的营养物质、营养类型与营养物质的汲取方式

微生物的营养物质六大类要素：碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐、水

（1）碳源；

能提供微生物营养所需碳（元）素或者碳架的营养物质祢之碳源。（提供细胞生命活动所需

的能量，提供合成产物的碳架）。关于为数众多的化能异养微生物来说，碳源兼有能源功能

的双功能营养物。

碳源在制作微生物培养基或者细胞培养基时有重要的作用，为微生物或者细胞的正常生长,

分裂提供物质基础。

（2）能源：

提供微生物生命活动所需的营养物质。

（3）氮源：

提供细胞原生质与其他结构物质中的夙源，通常不作为能源使用。但化能自养细菌中的亚硝

化细菌能从氨与二氧化氮等还原无机含氮化合物氧化中获得其生命活动所需的能源，因此对

它来说氮源兼有氮源与能源双重功能。

（4）无机盐：

A）提供微生物细胞化学构成中（除碳与氮外）的重要元素；B）参与并稳固微生物细胞的

结构；C）镁、铜与锌等是许多酶的激活剂，固氮酶含Fe、M。辅因子；D）调节与维持微生

物生长过程中诸如渗透压、氢离子浓度与氧化还原电位等条件：E）用作某些化能自养细菌

的能源物质；F）用作呼吸末端的氢受体。

（5）生长因子与生长抑制因子：

指在组织培养中，除了氨基酸、维生索、葡萄糖与尢机盐等止常成分之外，其能够代替

培养基血清高分子物质的而促进细胞生长的物质。具有刺激细胞生长活性的细胞因子。

（6）水：

水是营养物质代谢产物的良好溶剂，营养物质与代谢产物都是通过溶解与分散在水中而进

出细胞的。水还可保证细胞内的温度不可能因代谢过程中释放的能量骤然上升。它还有利于

生物大分子结构的稳固。

营养五大类型

I.光能无机自养型（光能自养型）

能以C02为唯一或者要紧碳源；进行光合作用获取生长所需要的能量；以无机物如H2、

H2S、S、H20等作为供氢体或者电子供体，使C02还原为细胞物质；

比如：藻类及蓝细菌等与植物一样，以水为电子供体（供氢体），进行产氧型的光合作用，

合成细胞物质。红硫细菌，以H2s为电子供体，产生细胞物质，并伴随硫元素的产生，

2.光能有机异养型（光能异养型）

不能以CO2为要紧或者唯一的碳源；以有机物作为供氢体，利用光能将CO2还原为

细胞物质；在生长时大多数需要外源的生长因子；

比如，红螺菌属中的一些细菌能利用异丙醇作为供氢体，将CO2还原成细胞物质，同

时积存丙酮。

3.化能无机自养型（化能自养型）

生长所需要的能量来自无机物氧化过程中放出的化学能；以CO2或者碳酸盐作为唯一

或者要紧碳源进行生长时，利用H2、H2S、Fe2+、NH3或者N02-等无机物作为电子供体使

CO2还原成细胞物质。

4.化能有机异养型（化能异养型）

生K所需要的能量均来自有机物氧化过程中放出的化学能：生长所需要的碳源要紫是一

些有机化合物，如淀粉、糖类、纤维素、有机酸等。

5.营养缺陷型

某些菌株发生突变〔自然突变或者人工诱变）后，失去合成某种（或者某些）对该菌

株生长必不可少的物质（通常是生长因子如氨基酸、维生素）的能力，务必从外界环境获得

该物质才能生长繁殖，这种突变型菌株称之营养缺陷型，相应的野生型菌株称之原养型。

营养物质的汲取方式：

6、培养基的概念及配制原则

培养基是经人工配制而成的、适合微生物生长繁殖或者产生代谢产物的营养基质。

配制原则：I、目的明确2、选择适宜的营养物质3、选择适宜的原料来源4、选择适宜的灭

菌方法5、操纵营养物质的比例及浓度6、操纵适宜的酸碱度7、操纵氧化还原电位

7、培养基的类型

L按照培养基的成分可分为天然培养基、合成培养基与半合成培养基三类。

2.按照培养基的物理状态可分为液体培养基、半固体培养基与固体培养基三类

3.按照培养基用途可分为基础培养基与加富培养基、选择培养基与鉴别培养基、生产培养

基五类

8、微生物生长量的测定方法

一、直接计数法（特点：测定死菌与活菌数）

I.显微镜计数法：

（1）血球计数板法血球汁数板中央有一个体积一定的计数室（O.lmm3）。将菌悬液或者担子悬

液在显微镜下计数，然后冉按一定公式计算出细菌总数.

（2）涂片计数法将一定体积（0.1ml）的样品，均匀地涂在载片的一定面积内（lcm2）。在显微镜

下计算细胞数量，推算1cm2所含细胞数目。

2、比浊法：菌体细胞培养液混浊，在一定范围内，菌体数量与浑浊成正比，故可通过分光

光度计或者比色计求出浑浊度，通过与标准曲线对比，求出样品中菌液浓度，算出个体数。

二、间接计数法（特点：仅测定活菌数）

3.平板菌落计数法：

是通过测定样品在培养基上形成的菌落数来间接确定其活菌数的方法.故又称平板计数法。

（I）涂布平板法用灭菌的涂布器将一定体积（不大于0.1ml）的适当稀释度的菌液涂布在琼脂

培养基的表面，然后保温培养有到菌落出现，记录菌落的数目并换算成每亳升试样中的活细

胞数量。

（2）倒平板法将样品稀释到一定浓度，取一定体积（0.1—1ml）倒入冷却至45℃的固体培养

基混合，制成平板，培养后，出现菌落，由菌落数推算出的菌总数。

4、薄膜过滤计数法：样品同过微孔滤膜后，细菌收集在滤膜上，然后将滤膜放在培养基中

培养，通过菌落计数求出样品活菌落。

5、液体稀释最大概率数法

三、重量;去（特点：适合与菌体浓度高的样品。表示菌体生长量

I.湿重法：将单位体积微生物培养液离心，收集沉淀物，然后再称重。

2.干重法：将肉心得到的细胞沉淀物,置于100—105°。的烘箱中干燥过夜除去水分，然后

再称重。

成分：

3、含氮量测定法：N在细胞内稳固，测定总N量，粗蛋白=N*6.25g。

4、DNA测定法：微生物细胞DNA含量稳固，使用荧光指示剂或者染色剂与菌体DNA作

用荧光比色或者分光光度法测得DNA的含量。

9、微生物生长曲线及其生长特点

各个时期的特点是：停滞期:（1）细胞物质开始增加；（2）有的细胞开始不习惯环境而死亡;

<3）细菌总数下降；（4）停滞期末期，细胞代谢活动能力强，细胞中RNA含量高，嗜碱

性强。对不良环境条件较敏感，呼吸速度、核酸及蛋白质的合成速度接近对数细胞，并开始

细胞分裂。

稳固期:（1）生长速率下降，死亡率上升；（2）细胞数达到最大值，新生的细菌数与死亡的

细菌数相当。

衰亡期：（1）死亡率增加，细菌少繁殖或者不繁殖；（2）细菌常出现多形态、畸形或者衰退

型，有的会产生芽扎1。

10、微生物的分离技术方法

11、灭菌锅的操作步骤及使用的注意事项

12、菌种保藏的目的是使菌种被保藏后不死亡、不变异、不被杂菌污染，并保持

其优良性状，以利于生产与科研应用。

13、菌种的保藏方法及其优缺点。

14、食品卫生标准中微生物指标有细菌总数、大肠菌群、致病菌的

检测。

15、细菌与酵母菌在食品中的应用。

酵母菌在酿造、食品、医药等工业上占有重要的地位。

酵母菌的维生素、蛋白质含量高，可作食用、药用与饲料用

16、油镜的使用注意问题。

A、将标木片放载物台上，用标本推进器固定，将欲检部分移至接物镜下。先用低倍镜找出

标本的位置，然后提高镜简，在标本的待检部位滴镜油一滴，再换油镜观察.

B、转动粗调节器使载物台徐徐上升（或者使镜筒慢慢下降），直至油镜头浸没至油中。

如今眼睛应从侧面观察，以免压碎标本片与损坏镜头。

C、然后双眼移至接目镜，一面从接目镜观察，一面反方向缓慢地转动粗调节器（下降

载物台，或者上升镜筒），当出现模糊物象时，换用细调节器，转动至物象清晰为I匕

D、观察完毕，应先提高镜筒，并