2025年大学《生物技术》专业题库- 生物技术在乙肝治疗中的应用

2025年大学《生物技术》专业题库——生物技术在乙肝治疗中的应用考试时间：______分钟总分：______分姓名：______一、选择题（每小题2分，共20分）1.乙型肝炎病毒（HBV）的遗传物质是？A.单链DNAB.双链DNAC.单链RNAD.双链RNA2.在HBV的复制周期中，持续存在且难以被现有药物清除的关键形式是？A.感染性病毒颗粒B.共价闭合环状DNA（cccDNA）C.包膜抗原（HBsAg）D.聚合酶前体（pre-core）3.以下哪种药物属于核苷（酸）类似物（NAs）？A.干扰素-αB.阿德福韦酯C.泛昔洛韦D.利巴韦林4.能够特异性沉默HBVmRNA的基因治疗技术是？A.基因编辑B.RNA干扰（RNAi）C.反义寡核苷酸（ASO）D.免疫检查点抑制剂5.HBsAg在乙肝诊断中的主要意义是？A.具有传染性B.提示急性感染或慢性感染C.是HBV复制活跃的直接指标D.是HBV感染后产生保护性免疫的标志6.以下哪项是干扰素（IFN）治疗慢性乙肝的主要机制？A.直接抑制HBVDNA聚合酶B.免疫调节，增强对病毒感染的细胞毒性C.破坏肝细胞，清除病毒D.促进cccDNA的降解7.HBVcccDNA的持续存在是导致慢性化及停药后易复发的主要原因。A.正确B.错误8.在乙肝免疫治疗中，使用PD-1/PD-L1抑制剂的主要目的是？A.直接中和HBV病毒B.抑制病毒在肝细胞内的复制C.减轻肝脏炎症，改善肝功能D.激活或增强宿主对HBV的特异性免疫应答9.下列哪项技术不属于利用基因转移载体将治疗物质递送至目标细胞？A.脂质体介导B.电穿孔C.直接注射治疗性RNAD.病毒载体转导10.乙肝病毒表面抗原（HBsAg）血清学转换（HBeAg阳性转HBeAg阴性）通常意味着？A.病毒被彻底清除B.传染性可能降低，病情趋于稳定C.患者免疫力完全恢复D.必将发展为肝硬化二、填空题（每空2分，共20分）1.乙型肝炎病毒（HBV）的基因组是部分双链的DNA，其中长链（+链）的末端通过__________与短链（-链）的末端连接，形成共价闭合环状DNA（cccDNA）。2.核苷（酸）类似物（NAs）治疗慢性乙肝的机制主要是通过模拟天然核苷（酸）掺入病毒DNA链，造成聚合酶的__________，从而抑制病毒复制。3.基因治疗中使用siRNA沉默HBV时，通常需要将其与__________载体共同递送至肝脏细胞，以实现高效的基因沉默效果。4.在乙肝的诊断和监测中，除了HBVDNA，__________也是重要的指标，其血清学转换是病情好转的重要标志。5.开发针对HBV_________的单克隆抗体，旨在阻断病毒与肝细胞的结合或病毒复制的关键环节。6.利用CRISPR/Cas9技术治疗乙肝，其核心是设计特定的向导RNA（gRNA）靶向HBV的__________，从而实现基因的敲除或编辑。7.乙肝疫苗主要诱导机体产生针对__________的免疫应答，提供对乙肝的免疫力。8.免疫治疗中，过继性T细胞疗法，特别是CAR-T细胞疗法，旨在改造患者的T细胞使其能够特异性识别并杀伤__________。9.除了直接抗病毒，生物技术也在探索通过调节宿主免疫微环境来治疗乙肝，例如使用__________药物来抑制免疫抑制性通路。10.由于cccDNA难以清除，现有NAs药物__________彻底治愈慢性乙肝。三、名词解释（每小题3分，共15分）1.共价闭合环状DNA（cccDNA）2.RNA干扰（RNAi）3.HBeAg血清学转换4.过继性T细胞疗法5.cccDNA四、简答题（每小题5分，共20分）1.简述核苷（酸）类似物（NAs）治疗慢性乙肝的主要机制及其存在的局限性。2.简述RNA干扰（RNAi）技术用于乙肝治疗的基本原理。3.简述乙肝疫苗的两种主要类型及其作用机制。4.简述利用单克隆抗体进行乙肝免疫治疗的潜在策略。五、论述题（10分）当前，乙肝的治疗仍面临诸多挑战，特别是难以清除cccDNA导致易复发。请结合您所学的生物技术知识，论述至少三种有前景的生物技术策略如何克服这一难题，并分析这些策略各自面临的挑战。试卷答案一、选择题1.B2.B3.B4.B5.B6.B7.A8.D9.C10.B二、填空题1.尾部互补2.滞后合成终止3.脂质体4.HBeAg5.病毒外壳蛋白（或HBsAg）6.基因编码区（或病毒基因组）7.HBsAg8.HBV感染的肝细胞9.免疫检查点抑制剂（或PD-1/PD-L1抑制剂）10.不能三、名词解释1.共价闭合环状DNA（cccDNA）：HBV的松弛circularDNA形式，存在于肝细胞核内，是病毒复制的模板，难以被现有药物清除，是慢性化的关键。2.RNA干扰（RNAi）：利用双链RNA（如siRNA）激活细胞内的降解机制，特异性沉默目标基因mRNA，从而抑制基因表达的技术。3.HBeAg血清学转换：在乙肝感染过程中，乙肝e抗原（HBeAg）转阴，乙肝e抗体（HBeAb）转阳的现象，通常提示病毒复制活动减低，传染性下降，病情可能好转。4.过继性T细胞疗法：将患者自身的或异体的、经过体外改造（如基因工程修饰）的T细胞回输体内，以增强其对抗特定抗原（如HBV）的免疫杀伤能力的一种细胞治疗策略。5.cccDNA：共价闭合环状DNA，HBV的基因组形式，结构像一个闭合的环，在肝细胞核内稳定存在，是病毒复制和转录的主要模板，不易被核苷类似物清除。四、简答题1.机制：NAs结构与HBVDNA链的天然核苷酸相似，能被HBV聚合酶错误地掺入延伸中的DNA链。一旦掺入，聚合酶通常会停止延伸，从而抑制病毒DNA的合成。部分NAs也能整合入宿主DNA，但在复制时可能被宿主DNA聚合酶切除。局限性：NAs主要抑制病毒DNA的合成，对已存在的cccDNA无效，因此不能彻底清除病毒库。停药后，cccDNA会再次启动病毒复制，导致病情反弹。长期使用可能导致耐药突变。2.原理：将针对HBV特定抗原（如核心抗原、表面抗原或聚合酶）的短干扰RNA（siRNA）或长干扰RNA（lncRNA）设计并递送入肝细胞。这些RNA分子作为引导，与靶标mRNA结合形成双链RNA（dsRNA）复合物。细胞内的RNA干扰通路（如RISC）被激活，识别并切割靶标mRNA，导致其降解，从而特异性下调HBV相关蛋白的表达，抑制病毒复制。3.类型：①重组蛋白疫苗：利用基因工程技术在大肠杆菌、酵母或哺乳动物细胞中表达HBsAg，纯化后制成疫苗，如酵母重组乙肝疫苗。②核酸疫苗：将编码HBsAg的质粒DNA或mRNA作为基因疫苗，直接递送入体内，诱导细胞表达HBsAg，激发免疫应答。作用机制是疫苗编码的抗原被递呈给免疫系统，刺激B细胞产生抗体和T细胞产生细胞因子，建立对HBV的免疫力。4.策略：*开发中和抗体：制备能特异性结合并中和病毒颗粒（如阻止其与肝细胞结合或阻断其入胞过程）的mAb。*开发治疗性抗体：制备能识别并激活补体系统裂解病毒，或能识别并杀伤HBVinfectedhepatocytes的效应细胞抗体（如抗体依赖性细胞介导的细胞毒性作用ADCC）。*开发免疫调节性抗体：制备能阻断抑制性免疫通路（如阻断PD-1/PD-L1相互作用）或增强Th1型免疫应答的抗体，以改善机体对HBV的清除能力。五、论述题克服cccDNA清除难的治疗策略主要包括：1.靶向cccDNA的药物/技术：*策略：开发能特异性识别cccDNA并诱导其降解的酶（如核酸内切酶）或小分子化合物；设计能干扰cccDNA与宿主染色体整合或其转录/复制过程的药物。*挑战：cccDNA结构稳定，位于细胞核内，难以进入；需要高度特异性以避免损伤宿主基因组；药物穿透肝细胞核的能力有限；cccDNA持续存在可能诱导耐药。2.基因编辑技术：*策略：利用CRISPR/Cas9等基因编辑系统，将靶向序列导向肝细胞中的cccDNA所在的区域，进行切割、修复或直接敲除cccDNA基因座。*挑战：脱靶效应（编辑非靶向位点）的风险；如何有效递送Cas9/gRNA系统至所有感染的肝细胞；如何克服宿主免疫反应；编辑后细胞表型的潜在影响；伦理问题。3.增强免疫清除能力：*策略：使用免疫检查点抑制剂（如PD-1/PD-L1抗体）解除T细胞的免疫抑制，增强对HBVinfectedhepatocytes的杀伤；开发治疗性疫苗或采用过继性T细胞疗法（如CAR-T），针对HBVinfectedhepatocytes进行特异性免疫攻击；利用RNA干扰技术沉默HBV编码的免疫抑制性蛋白或增强宿主抗病毒因子表达。*挑战：免疫增强可能导致过度炎症或自身免疫损伤；免疫治疗的效果可能存在个体差异；如何确保免疫应答精确针对病毒而非正常肝细胞；治疗持续时间及成本问题。---解析思路说明：*选择题解析：基于对乙肝病毒学、治疗机制和生物技术原理的基础知识进行判断。例如，第1题考查HBV遗传物质类型，正确答案是双链DNA但结构特殊；第2题考查cccDNA的重要性，它是持续存在的模板；第4题考查RNAi原理，是沉默mRNA。*填空题解析：要求准确回忆关键术语、机制细节或技术名称。例如，cccDNA形成涉及“尾部互补”；NAs机制是“滞后合成终止”；siRNA递送常用“脂质体”；HBeAg是重要“血清学”指标；抗体可靶向“病毒外壳蛋白”；CRISPR靶向“基因编码区”；疫苗诱导针对“HBsAg”的免疫；过继性T细胞针对“HBV感染的肝细胞”；免疫治疗药物是“免疫检查点抑制剂”；NAs“不能”彻底治愈是因为不清除cccDNA。*名词解释解析：要求对核心概念进行精确定义，说明其结构、功能或意义。例如，cccDNA解释需包含其结构（环状）、位置（细胞核）、作用（模板）、难清除性；RNAi解释需包含机制（沉默mRNA）、工具（siRNA）；HBeAg转换解释需说明现象（HBeAg转阴，HBeAb转阳）及意义（传染性下降，病情好转）；过继性T细胞解释需包含来源（患者自身/异体）、改造（基因工程）、作用（杀伤病毒细胞）；cccDNA解释同上。*简答题解析：要求对某个知识点或机制进行简要阐述。例如，NAs简答需说明“机制”（掺入干扰合成）和“局限性”（不清除cccDNA，易耐药，停药复发）；RNAi简答需说明“原理”（siRNA引导切割靶mRNA）；