2025年生化药品附录试卷及答案

2025年生化药品附录及答案一、单项选择题（每题1分，共30分）1.2025版《中国药典》生化药品附录中，对重组蛋白类药物宿主DNA残留量的限度要求为A.≤10ng/剂量B.≤100pg/剂量C.≤10pg/剂量D.≤1pg/剂量答案：C2.下列哪种检测方法被新版附录列为β-葡聚糖污染的首选定量手段A.鲎试剂显色法B.高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法C.荧光偏振免疫法D.重组因子C荧光法答案：B3.关于单抗制品的电荷异质性，附录规定强制表征的pH范围是A.4.0–7.0B.5.0–8.0C.6.0–9.0D.3.0–10.0答案：D4.病毒清除验证中，对“缩小模型”缩比比例的接受标准为A.≥1/10B.≥1/50C.≥1/100D.≥1/500答案：C5.2025版新增“连续制造”章节，要求对中间体取样频率不得低于A.每2小时一次B.每4小时一次C.每6小时一次D.每批一次答案：A6.对聚山梨酯80的氧化降解产物，附录首次规定需单独控制的醛类限度为A.甲醛≤15ppmB.乙醛≤10ppmC.丙醛≤5ppmD.壬醛≤3ppm答案：D7.采用LC-MS进行N-糖谱分析时，附录推荐的衍生化试剂为A.2-ABB.2-AAC.ProcainamideD.InstantPC答案：C8.对高浓度蛋白制剂（>100mg/mL），渗透压测定允许的最大偏差为A.±5mOsm/kgB.±10mOsm/kgC.±15mOsm/kgD.±20mOsm/kg答案：B9.2025版将“可见异物”检查光照强度统一调整为A.2000–3000lxB.3000–4000lxC.4000–5000lxD.5000–6000lx答案：B10.对重组凝血因子，附录要求强制检测的活化因子为A.FVIIaB.FIXaC.FXaD.FXIa答案：A11.关于生物类似药外推适应症，附录新增要求提供A.体外功能学比对数据B.真实世界证据C.免疫原性桥接研究D.临床药代动力学相似性报告答案：B12.对mRNA疫苗，模板DNA残留限度为A.≤1ng/剂量B.≤100pg/剂量C.≤10pg/剂量D.≤1pg/剂量答案：D13.2025版首次将哪种元素列为Class2B需批量监控的微量元素A.NiB.CoC.VD.As答案：C14.对腺相关病毒载体，空壳率测定推荐采用A.AEX-HPLCB.CEX-HPLCC.SEC-MALSD.AF4-MALS答案：A15.关于细胞库遗传稳定性，附录规定最高传代限度为A.30代B.40代C.50代D.60代答案：C16.对聚乙二醇化蛋白，游离PEG的限度为A.≤1.0%B.≤0.5%C.≤0.3%D.≤0.1%答案：D17.2025版新增“人工智能辅助放行”条款，要求模型验证集样本数不少于A.50B.100C.150D.200答案：B18.对双特异性抗体，附录要求强制检测的错配形式为A.½抗体B.¾抗体C.双抗-单抗杂合D.轻链错配答案：B19.关于无菌检查，2025版将培养基灵敏度试验菌株增至A.3株B.4株C.5株D.6株答案：C20.对冻干制剂，水分限度由3.0%收紧至A.2.5%B.2.0%C.1.5%D.1.0%答案：C21.2025版将哪种检测列为胰岛素类似物强制鉴别试验A.圆二色谱B.红外光谱C.拉曼光谱D.紫外二阶导数光谱答案：A22.对融合蛋白，附录要求每批检测的凝血酶原激活限度为A.≤1IU/mgB.≤0.5IU/mgC.≤0.1IU/mgD.≤0.05IU/mg答案：C23.2025版新增“碳足迹”章节，要求提供A.单位剂量CO₂当量B.单位批次能耗C.单位产值水耗D.单位产量废液量答案：A24.对寡核苷酸药物，附录将n-1杂质限度设定为A.≤1.0%B.≤0.5%C.≤0.3%D.≤0.2%答案：D25.关于稳定性研究，2025版将“加速条件”相对湿度统一为A.60%±5%B.65%±5%C.70%±5%D.75%±5%答案：D26.对重组疫苗，宿主细胞蛋白残留检测首选A.ELISAB.LC-MS/MSC.WesternblotD.2D-DIGE答案：B27.2025版将哪种病毒列为昆虫细胞表达系统必检外源病毒A.家蚕核型多角体病毒B.果蝇C病毒C.蟋蟀麻痹病毒D.斜纹夜蛾核型多角体病毒答案：D28.对脂质体药物，包封率测定允许的最大相对标准偏差为A.±2%B.±3%C.±5%D.±10%答案：C29.2025版新增“数字水印”要求，用于A.防伪追溯B.温度记录C.湿度记录D.光照记录答案：A30.对血液制品，附录要求每批检测的prion蛋白为A.PrPᶜB.PrPˢᶜC.PrPʳᵉˢD.PrPᶠᵘᵗ答案：B二、配伍选择题（每题1分，共20分）A.荧光定量PCRB.数字PCRC.高通量测序D.分支DNA杂交E.环介导等温扩增31.检测mRNA疫苗加帽效率首选答案：C32.检测AAV载体基因组拷贝数首选答案：B33.检测慢病毒复制型病毒首选答案：A34.检测细胞库支原体污染首选答案：E35.检测寡核苷酸点突变首选答案：CA.反相UPLCB.亲水作用色谱C.阴离子交换色谱D.尺寸排阻色谱E.毛细管电泳36.测定胰岛素脱酰胺杂质答案：A37.测定单抗聚集体答案：D38.测定寡核苷酸电荷异构体答案：E39.测定ADC药物DAR值答案：C40.测定PEG化蛋白游离PEG答案：B三、判断题（每题1分，共10分，正确打“√”，错误打“×”）41.2025版允许使用一次性反应袋进行病毒清除验证缩小模型。答案：√42.对生物类似药，免疫原性比对研究可完全用体外试验替代。答案：×43.附录规定所有基因治疗载体必须采用无菌工艺。答案：√44.2025版将“可见异物”检查由人工灯检改为全检。答案：×45.对高浓度制剂，允许用近红外法替代卡尔费休法测水分。答案：√46.2025版取消了对小牛血清的病毒检测要求。答案：×47.对mRNA疫苗，5′-UTR序列变更需重新进行毒理学评价。答案：√48.2025版允许用AI模型替代传统稳定性预测。答案：√49.对融合蛋白，糖基化位点突变可豁免临床比对。答案：×50.2025版将“连续制造”定义为≥72小时不间断生产。答案：√四、填空题（每空1分，共20分）51.2025版规定，重组蛋白制品中宿主细胞DNA残留量以__________为参比标准，换算系数为__________。答案：人类基因组，3.3pg/基因组52.对AAV载体，空壳率测定采用AEX-HPLC时，流动相A为__________，B为__________。答案：20mmol/LTris-HClpH9.0，含1mol/LNaCl的20mmol/LTris-HClpH9.053.2025版新增“__________”术语，指在连续制造中实时调整关键工艺参数以保持产品质量恒定。答案：实时放行测试（RTRT）54.对双特异性抗体，错配形式检测采用__________还原条件，以区分__________与__________。答案：轻度，½抗体，¾抗体55.2025版将“__________”列为mRNA疫苗关键质量属性，要求采用__________法测定。答案：加帽效率，LC-MS56.对聚山梨酯80，氧化降解产物壬醛采用__________法测定，检测波长为__________nm。答案：SPME-GC-MS，15757.2025版规定，细胞库遗传稳定性需检测__________、__________、__________三项指标。答案：核型，STR，全基因组测序58.对高浓度蛋白制剂，黏度测定采用__________法，剪切速率设定为__________s⁻¹。答案：锥板流变仪，100059.2025版将“__________”列为ADC药物强制检测元素，限度为__________ppm。答案：铜，560.对寡核苷酸，n-x杂质总量不得超过__________%，其中n-1不得超过__________%。答案：1.0，0.2五、简答题（每题6分，共30分）61.简述2025版附录对“连续制造”中间体取样策略的具体要求。答案：1.取样点覆盖所有关键单元操作，包括上游灌流、收获、层析、病毒灭活、超滤等；2.频率不低于每2小时一次，若工艺参数波动超过±1σ，则提升至每30分钟一次；3.每取样点至少取3个平行样，用于含量、纯度、活性、微生物负荷检测；4.建立在线PAT与离线检测的关联模型，R²≥0.95；5.所有样品须保存至产品放行后至少3个月，以便追溯；6.若连续运行超过7天，需每24小时增加一次全检，确保无漂移。62.阐述2025版对mRNA疫苗模板DNA残留控制的新策略。答案：1.限度收紧至≤1pg/剂量，比2020版降低100倍；2.采用数字PCR法，引物探针覆盖整个质粒骨架，避免漏检断裂片段；3.每批次需进行加标回收试验，回收率80–120%；4.引入“酶切+磁珠”两步纯化，使残留降低至检测限以下；5.建立工艺能力指数Cpk≥1.33，持续监控3σ水平；6.若超出限度，启动偏差调查，包括RNase处理、层析柱寿命、超滤膜完整性等。63.说明2025版对单抗电荷异质性表征的技术细节。答案：1.强制采用icIEF全柱成像，pH3–10，分辨率≥0.05pH单位；2.需同步提供CEX-HPLC数据作为正交方法，两者峰面积RSD≤5%；3.对主峰、酸性峰、碱性峰分别收集，进行LC-MS肽图确认；4.建立批间一致性标准：主峰比例±3%，酸/碱峰各自±1.5%；5.若出现新峰，需用高分辨质谱鉴定是否为脱酰胺、氧化、环化；6.所有图谱需电子签名并上传至国家药监云平台，保存≥15年。64.概述2025版对ADC药物DAR值测定的方法学验证要求。答案：1.采用UV/Vis法与LC-MS法双平台，结果差异≤5%；2.UV法需验证摩尔消光系数准确性，相对误差≤2%；3.LC-MS法需覆盖0–8DAR全范围，线性R²≥0.995；4.精密度：重复6次，RSD≤3%；中间精密度：3人3天，RSD≤5%；5.准确度：加标回收率90–110%；6.稳定性：样品室温放置24h、冻融3次、−80℃30天，偏差≤5%。65.描述2025版对基因治疗载体空壳率测定的方法细节。答案：1.AEX-HPLC为首选，柱温25℃，流速0.5mL/min，梯度0–1MNaCl，20min；2.检测波长260nm，进样量≥2×10¹¹vg；3.空壳峰与实心峰分离度≥2.0，拖尾因子≤1.5；4.采用空壳与实心标准品建立校正曲线，R²≥0.998；5.每批次需穿插QC样本，偏差≤3%；6.若结果>15%，需用冷冻电镜复核，相差≤5%。六、计算题（每题10分，共30分）66.某mRNA疫苗剂量为50μg，模板DNA残留测定值为0.8pg，问是否符合2025版限度？若一批次产量为1×10⁶剂，求总DNA残留量。答案：限度≤1pg/剂量，0.8pg＜1pg，符合；总DNA=0.8pg×1×10⁶=0.8mg。