广西南宁市马山县金伦中学“4+ N”高中联合体2026届高三生物第一学期期末统考试题含解析

广西南宁市马山县金伦中学“4+N”高中联合体2026届高三生物第一学期期末统考试题注意事项：1．答题前，考生先将自己的姓名、准考证号填写清楚，将条形码准确粘贴在考生信息条形码粘贴区。2．选择题必须使用2B铅笔填涂；非选择题必须使用0．5毫米黑色字迹的签字笔书写，字体工整、笔迹清楚。3．请按照题号顺序在各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试题卷上答题无效。4．保持卡面清洁，不要折叠，不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．一些名贵花卉常常用植物组织培养来繁殖，下列有关叙述正确的是（）A．新植株的形成过程是细胞分裂和分化的结果B．损伤的组织块不能发育成植株是细胞凋亡的结果C．在培育成新植株的过程中没有细胞的衰老D．由于细胞分化，根尖分生区细胞中已经不存在叶绿体基因2．下图表示某森林生态系统一年内CO2消耗量与释放量的情况，其中甲表示该生态系统消费者呼吸作用CO2释放量，乙表示分解者呼吸作用CO2释放量，丙表示生产者呼吸作用CO2释放量，丁表示生产者光合作用及化能合成作用CO2消耗量，下列叙述不正确的是A．碳循环在甲、乙、丙构成的生物群落内部是以含碳有机物的形式双向传递B．流经该生态系统的总能量可用丁来表示C．人工生态系统中CO2的消耗量与释放量关系往往不符合上图D．根据图示关系可推测该森林生态系统的抵抗力稳定性正在上升3．下列有关遗传与育种的叙述，正确的是（）A．基因工程的原理是基因重组，通过转基因技术可以培育出新物种B．常规育种都需要通过杂交、选择、纯合化等过程C．花药离体培养法需要用适宜的激素处理才能获得单倍体幼苗D．秋水仙素处理萌发的种子或幼苗能使染色体组加倍，一定能得到纯合子4．下列关于生物实验的叙述，不正确的是（）A．在苹果的组织样液中加入斐林试剂，水浴加热后的颜色变化为由蓝变棕再变砖红B．鉴定DNA时，应将丝状物直接加入到二苯胺试剂中进行沸水浴，溶液变蓝C．分离叶绿体中的色素时，不同色素随层析液在滤纸上的扩散速度不同D．溴麝香草酚蓝与CO2反应，颜色变化为由蓝变绿再变黄5．绿叶海天牛（简称甲）吸食滨海无隔藻（简称乙）后，身体就逐渐变绿，这些“夺来”的叶绿体能够在甲体内长期稳定存在，有科学家推测其原因是在甲的染色体DNA上可能存在乙编码叶绿体部分蛋白的核基因。为证实上述推测，以这种变绿的甲为材料进行实验，方法和结果最能支持上述推测的是（）A．通过PCR技术能从甲消化道内获得的DNA中克隆出属于乙的编码叶绿体蛋白的核基因B．通过核酸分子杂交技术，在甲体内检测到乙的编码叶绿体蛋白的核基因转录出的RNAC．给甲提供14CO2，一段时间后检测到其体内的部分有机物出现放射性D．用乙编码叶绿体蛋白的核基因做探针与甲的染色体DNA杂交，结果显示出杂交带6．流式细胞仪可根据细胞中DNA含量的不同对细胞分别计数。研究者用某抗癌物处理体外培养的癌细胞。24小时后用流式细胞仪检测，结果如图。对检测结果的分析不正确的是（）A．b峰中细胞的DNA含量是a峰中的2倍B．a峰和b峰之间的细胞正进行DNA复制C．处于分裂期的细胞均被计数在a峰中D．此抗癌药物抑制了癌细胞DNA的复制7．哺乳动物受精卵的前几次分裂异常可能导致子细胞出现多核现象。经研究发现，受精卵分裂时，首先形成两个相对独立的纺锤体，之后二者夹角逐渐减小，形成一个统一的纺锤体。科研人员用药物N处理部分小鼠（2n=40）受精卵，观察受精卵第一次分裂，结果如图所示。以下有关实验的分析中，合理的是A．两个纺锤体可能分别牵引来自双亲的两组染色体，最终合二为一B．细胞A最终可能将分裂成为1个双核细胞，1个单核细胞C．细胞B最终形成的子细胞中每个核的染色体条数为40D．药物N抑制两个纺锤体的相互作用，可能和马达蛋白的作用有关8．（10分）生命活动离不开细胞，下列关于细胞的说法中，正确的有几项（）①将细胞膜破坏后的细胞匀浆经密度梯度离心，可得到各种细胞器②溶酶体能合成多种水解酶，分解衰老、损伤的细胞器③被称为“软黄金”的黑枸杞，其果实呈深黑色，是因为液泡中色素的种类和含量导致的④生物膜是对生物体内所有膜结构的统称⑤转录发生在紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞的细胞核、线粒体和叶绿体中⑥功能不同的生物膜中，其蛋白质的种类和数量也是不同的⑦没有核糖体的生物都不能独立合成蛋白质A．二项 B．三项 C．四项 D．五项二、非选择题9．（10分）小麦旗叶是小麦植株中最顶端的一片叶子，旗叶的寿命虽然只有40天左右，但对小麦籽粒的形成非常重要，小麦籽粒成熟过程中积累的糖类约50%来自旗叶。（1）研究人员对小麦旗叶发育过程中的光合作用效率进行研究，测定其不同发育阶段净光合速率及相关指标的变化，结果如下表（注：“…”表示未测数据）。发育时期叶面积（最大面积的1%）总叶绿素含量（mg/g·fw）气孔相对开放度（%）净光合速率（μmolCO2/m2·s）A新叶展开前20……-2.7B新叶展开中861.25.61.8C新叶已成熟10012.71005.9B时期的净光合速率较低，原因可能是吸收___________和_____________影响光合作用过程。（2）去掉一部分正在发育的籽粒，旗叶中有机物含量增加，一段时间后旗叶的光合速率会____________（上升/下降），推测其原因是由于去掉一部分正在发育的籽粒后，旗叶光合产物的____________降低，进而在叶片中积累。（3）小麦旗叶因叶面积大、细胞中叶绿体数目较多，叶绿体中基粒数量多，对小麦籽粒的产量有着决定性的作用。科研人员认为，在小麦的灌浆过程中，小麦胚乳中的淀粉主要由旗叶提供。请补充完成以下科研实验设计思路并加以验证。①在小麦的灌浆期，将旗叶和其它叶片分别包在密闭的透明袋中，分别通入充足的___________和_____________并始终保持25℃及给予合适的光照的条件。②将小麦培养至籽粒成熟时期收获籽粒。③检测、测定籽粒胚乳中含14C的淀粉及所有淀粉的含量并计算比例。预测结果：如果__________________________，则证明科研人员的认识是正确的。10．（14分）下图表示宜昌百里荒高山草甸生态系统的部分生物成分间的关系图，其中字母代表生物，序号代表生理过程。据图回答下列问题：（1）若该图表示生态系统的能量流动，则图中所示的能量形式有_______________；若该图表示生态系统的物质循环，则图中缺少的过程是_______________(用字母和箭头表示)。（2）由于生态系统中的组分少，该生态系统的稳定性较低，生态系统的稳定性是指生态系统所具有的保持或恢复自身_______________相对稳定的能力。（3）在繁殖季节，该生态系统中的某种动物通过叫声这种_______________信息求偶，体现的信息传递的作用是_____________________________________________。11．（14分）斑马鱼的HuC基因在早期胚胎神经细胞中选择性表达，研究人员构建了HuC基因的表达载体，并导入到斑马鱼细胞中研究其作用，请回答：（1）为获取HuC基因，研究人员从早期胚胎神经细胞中提取HuC基因的mRNA，通过_________获得大量的DNA，进而构建出HuC基因的______________。（2）DraⅢ，SnaBⅠ等是质粒上不同限制酶的切割位点。为获得HuC基因——绿色荧光蛋白基因的表达载体，需要对HuC基因和质粒选用图中的____________酶进行切割，这样做的原因是_________。不选择NotⅠ酶切割的原因是_____________。（3）用Ca2+处理大肠杆菌，大肠杆菌细胞即能够______________。实验过程中可以采用在荧光显微镜下观察________________________或者在培养基中添加______________，筛选出导入表达载体的大肠杆菌。12．自然界里有多种微生物，将其进行合理的筛选、培养和应用，能给医药和化工等生产领域带来巨大经济效益。回答下列问题。（1）对培养基进行灭菌时，多采取____________法，而对接种环或涂布器灭菌时则用____________法，若要将微生物采用平板划线法进行分离操作，在固体培养基表面连续进行了5次划线，则需要对接种环灼烧____________次。平板划线在做第二次及其后的划线操作时，要从上次划线的____________开始划线，最后一次划的线不能与第一次划的线____________。（2）将接种后的固体培养基和一个未接种的固体培养基放入恒温箱中____________培养，以减少培养基中的水分挥发。其中，培养未接种的固体培养基是为了____________。长期保存菌种时，应将培养的菌液与____________充分混匀后，放在-20℃的冷冻箱中保存。（3）甲、乙两组同学用稀释涂布平板法测定某种微生物的数量，在同一稀释倍数下每隔一段时间记录数据（统计时间内微生物总数小于环境容纳量），得到以下结果：培养时间(小时)24487296甲组菌落均值(个)18253632乙组菌落均值(个)20283832计数时最好取培养____________小时记录的菌落数作为实验结果，一方面是由于培养时间较短，会遗漏菌落数目，另一方面是由于____________。

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、A【解析】

根据题意分析，题干材料中的实例属于植物组织培养，原理是细胞的全能性；细胞的全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能；植物细胞具有全能性的原因：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部。【详解】A、新植株的形成是细胞分裂（脱分化恢复分裂能力）和分化的结果，A正确；B、损伤的组织块不能发育成植株是细胞坏死的结果，B错误；C、在培育成新植株的过程中，既有细胞的分裂和分化，也有细胞的衰老和凋亡，C错误；D、细胞分化不改变细胞中的基因，即根尖分生区细胞中仍然存在叶绿体基因，只是没有选择性表达，D错误。故选A。2、A【解析】

A、碳循环在甲、乙、丙构成的生物群落内部是以含碳有机物的形式单向传递的，A项错误；B、流经该生态系统的总能量是生产者固定的总能量，而丁表示生产者光合作用及化能合成作用CO2消耗量，所以流经该生态系统的总能量可用丁来表示，B项正确；C、人工生态系统由于人工调节，物质和能量多流向对人类有益的部分，故C项正确；D、流经该生态系统的总能量大于各个营养级的呼吸消耗，有积累，故适宜物种生存，物种丰富度会逐渐增加，抵抗力稳定性增强，D项正确。故选A。考点：本题考查生态系统能量流动、物质循环的相关知识，意在考查考生运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力。3、C【解析】

几种常考的育种方法：杂交育种诱变育种单倍体育种多倍体育种方法

（1）杂交→自交→选优（2）杂交

辐射诱变、激光诱变、化学药剂处理花药离体培养、秋水仙素诱导加倍

秋水仙素处理萌发的种子或幼苗原

理

基因重组基因突变

染色体变异（染色体组先成倍减少，再加倍，得到纯种）

染色体变异（染色体组成倍增加）优

点不同个体的优良性状可集中于同一个体上提高变异频率，出现新性状，大幅度改良某些性状，加速育种进程明显缩短育种年限营养器官增大、提高产量与营养成分缺

点

时间长，需要及时发现优良性状

有利变异少，需要处理大量实验材料，具有不确定性

技术复杂，成本高

技术复杂，且需要与杂交育种配合；在动物中难以实现举例高杆抗病与矮杆抗病小麦杂产生矮杆抗病品种高产量青霉素菌株的育成抗病植株的育成三倍体西瓜、八倍体小黑麦【详解】A、基因工程的原理是基因重组，通过转基因技术可以培育出具有优良性状的作物新品种，但仍属于同一物种，A错误；B、杂交育种不都要通过杂交、选择、纯合化等手段培养出新品种，如所需优良品种为隐性性状，一旦该性状出现后选出即可，B错误；C、花药离体培养过程中，需要用适宜的植物激素处理才能诱导花药脱分化、再分化过程，进而获得单倍体幼苗，C正确；D、秋水仙素处理萌发的种子或幼苗能使染色体组加倍，不一定能得到纯合子，如处理材料为Aa，则AAaa仍为杂合子，D错误。故选C。4、B【解析】

1、斐林试剂可用于鉴定还原糖，在水浴加热的条件下，溶液的颜色变化为砖红色（沉淀）。斐林试剂只能检验生物组织中还原糖（如葡萄糖、麦芽糖、果糖）存在与否，而不能鉴定非还原性糖（如淀粉）。2、CO2可使澄清石灰水变浑浊，或使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。【详解】A、苹果中含有还原性糖，在苹果的组织样液中加入斐林试剂，水浴加热后的颜色变化为由蓝变棕再变砖红，A正确；B、鉴定DNA时，不能将丝状物直接加入到二苯胺试剂中进行沸水浴，应将丝状物先在2mol/L的NaCl溶液中溶解再放入二苯胺试剂检测，B错误；C、分离叶绿体中的色素时，不同色素在层析液中的溶解度不同，随层析液在滤纸上的扩散速度不同，C正确；D、二氧化碳可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄，D正确。故选B。5、D【解析】

目的基因的检测与鉴定:

1、分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因---DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。2、个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】A、通过PCR技术从甲体内的DNA中克隆出属于乙的编码叶绿体蛋白的核基因,这只能说明甲体内含有乙的编码叶绿体蛋白的核基因，但不能说明甲的染色体DNA上存在乙编码叶绿体部分蛋白的核基因，A错误；B、通过核酸分子杂交技术，在甲体内检测到乙的编码叶绿体蛋白的核基因转录出的RNA，这只能说明甲体内含有乙的编码叶绿体蛋白的核基因，但不能说明甲的染色体DNA上存在乙编码叶绿体部分蛋白的核基因，B错误；C、给甲提供14CO2，一段时间后检测到其体内的部分有机物出现放射性,这说明甲中含有叶绿体，但不能说明甲的染色体DNA上存在乙编码叶绿体部分蛋白的核基因，C错误;

D、用乙编码叶绿体蛋白的核基因做探针与甲的染色体DNA杂交，结果显示出杂交带，这说明甲的染色体DNA上存在乙编码叶绿体部分蛋白的核基因，D正确。故选D。6、C【解析】由图可知，在b峰中细胞的DNA含量为80，而a峰中细胞的DNA含量为40，故A项正确；在a峰与b峰之间细胞内的DNA相对含量在逐渐增加，所以正进行着DNA分子的复制，B项正确；在细胞分裂期中，前、中、后三个时期的细胞应位于b峰，而末期的细胞应位于a峰处，所以C错误；通过实验组和对照组中b峰细胞的数量可以看出，实验组中进行DNA复制的癌细胞数量明显减少，则说明该药物对癌细胞DNA复制有抑制作用，D项正确。【考点定位】细胞的有丝分裂7、B【解析】

通过图示来看，正常情况下，受精卵第一次分裂过程，开始形成两个相对独立的纺锤体，最后形成“双纺锤体”，这样形成的子细胞为单核细胞，而每个细胞核中含有40条染色体。而图示A图中纺锤体一端形成双纺锤体，一端没有形成双纺锤体，这样形成的两个子细胞一个为单核，另一个为双核，B图中两端纺锤体都没有形成双纺锤体，这样形成的两个子细胞均双核。【详解】A、受精卵进行的是有丝分裂，所以两个纺锤体牵引的是相同的染色体，都含有来自双亲的染色体，A错误；B、图示A图中纺锤体一端形成双纺锤体，一端没有形成双纺锤体，这样形成的两个子细胞一个为单核，另一个为双核，B正确；C、图示B图中两端纺锤体都没有形成双纺锤体，这样形成的两个子细胞均双核，双核子细胞的每个核内染色体数为20条，C错误；D、马达蛋白是利用ATP水解所释放的能量驱动自身沿微管或微丝定向运动的蛋白，影响微管蛋白牵引染色体的运动，而药物N是影响了纺锤体的形成和结构，所以与马达蛋白无关，D错误。故选B。【点睛】本题最重要的的是要从图中看出药物N发挥了什么作用，影响了纺锤体的形成进而影响染色体在细胞中的数量。8、B【解析】

1、分离各种细胞器常用差速离心法。2、生物膜系统是细胞内膜结构的统称，由细胞膜、细胞器膜和核膜组成。3、各种细胞器的结构、功能细胞器分布形态结构功

能线粒体动植物细胞双层膜结构有氧呼吸的主要场所

细胞的“动力车间”叶绿体植物叶肉细胞

双层膜结构植物细胞进行光合作用的场所；植物细胞的“养料制造车间”和“能量转换站”。内质网动植物细胞

单层膜形成的网状结构细胞内蛋白质的合成和加工，以及脂质合成的“车间”高尔

基体动植物细胞

单层膜构成的囊状结构对来自内质网的蛋白质进行加工、分类和包装的“车间”及“发送站”（动物细胞高尔基体与分泌有关；植物则参与细胞壁形成）核糖体动植物细胞无膜结构，有的附着在内质网上，有的游离在细胞质中合成蛋白质的场所

“生产蛋白质的机器”溶酶体动植物细胞

单层膜形成的泡状结构“消化车间”，内含多种水解酶，能分解衰老、损伤的细胞器，吞噬并且杀死侵入细胞的病毒和细菌。液泡成熟植物细胞单层膜形成的泡状结构；内含细胞液（有机酸、糖类、无机盐、色素和蛋白质等）调节植物细胞内的环境，充盈的液泡使植物细胞保持坚挺中心体动物或某些低等植物细胞无膜结构；由两个互相垂直的中心粒及其周围物质组成与细胞的有丝分裂有关【详解】①将细胞膜破坏后的细胞匀浆经差速离心，可得到各种细胞器，①错误；②溶酶体不能合成多种水解酶，水解酶是由核糖体合成的，②错误；③被称为“软黄金”的黑枸杞，其果实呈深黑色，是因为液泡中色素的种类和含量导致的，③正确；④生物膜是对细胞内所有膜结构的统称，④错误；⑤紫色洋葱鳞片叶表皮细胞中没有叶绿体，⑤错误；⑥功能不同的生物膜中，其蛋白质的种类和数量也是不同的，⑥正确；⑦核糖体是蛋白质的合成场所，因此没有核糖体的生物都不能独立合成蛋白质，⑦正确。综上正确的选项有③⑥⑦，共三项，故选B。【点睛】本题考查细胞结构和功能，要求考生识记细胞中各种细胞器的结构、分布和功能；识记细胞核的结构组成，掌握各组成结构的功能；识记细胞膜的组成成分及功能，能结合所学的知识准确答题。二、非选择题9、光能CO2下降输出量14CO2CO2含14C的淀粉所占比例大【解析】试题分析：熟记并理解光合作用的过程及其影响因素、实验设计的原则等相关知识，据此围绕表中信息和题意，对各问题情境进行分析解答。(1)叶绿素具有吸收、传递、转化光能的作用，大气中的CO2是通过气孔进入植物体的。表中信息显示：B时期总叶绿素含量和气孔相对开放度都明显低于C，据此可推知：B时期的净光合速率较低的原因可能是吸收的光能和CO2都较少而影响了光合作用过程。(2)去掉一部分正在发育的籽粒，旗叶合成的有机物输出量减少，导致旗叶中有机物含量增加，抑制了光合反应的进行，因此一段时间后旗叶的光合速率会下降。(3)本实验的目的是验证小麦胚乳中的淀粉主要由旗叶提供。依据给出的不完整的实验步骤可推知：自变量是不同类型的叶片以及通入的14CO2中的C是否用放射性同位素标记，因变量是检测籽粒胚乳中含14C的淀粉及所有淀粉的含量并计算比例。在实验过程中需满足光合作用发生的条件。所以实验设计思路为：①在小麦的灌浆期，将旗叶和其他叶片分别包在密闭的透明袋中，分别通入充足的14CO2、CO2，并始终保持25℃及给予合适的光照等条件（前者为实验组，后者为对照组）。②将小麦培养至籽粒成熟时期收获籽粒。③检测、测定籽粒胚乳中含14C的淀粉及所有淀粉的含量并计算比例。因本实验是验证性实验，实验结论是唯一的，即小麦胚乳中的淀粉主要由旗叶提供，因此测定的结果应是含14C的淀粉所占比例大。【点睛】本题的难点在于对（3）小题的解答：解答此类完善实验步骤类型的实验题，应由题意准确把握实验目的，据此结合实验步骤找出实验变量（自变量、因变量、无关变量），围绕实验设计应遵循的原则，补充并完善实验步骤。10、光能、有机物中的化学能、热能A→D结构和功能物理维持生物种群的繁衍【解析】

据图分析，图中A表示生产者，B表示初级消费者，C表示次级消费者，D表示分解者；①一般表示光合作用，②③表示捕食关系，⑥⑦表示消费者被分解者利用，④⑤⑧⑨表示各种生物的呼吸作用。【详解】（1）图中涉及到的生理过程有光合作用、细胞呼吸等，因此图中所示的能量形式有光能、有机物中的化学能、热能；若该图表示生态系统的物质循环，则图中缺少生产者到分解者的箭头，即A→D。（2）生态系统的稳定性是指生态系统所具有的保持或恢复自身结构和功能相对稳定的能力。（3）声音属于物理信息，在繁殖季节，该生态系统中的某种动物通过叫声求偶，说明了信息传递维持了生物种群的繁衍。【点睛】解答本题的关键是掌握生态系统的组成成分以及关系的相关知识点，能够根据图示箭头关系判断各个字母代表的成分的名称以及各个数字代表的过程的名称，明确生产者也会被分解者利用，进而补充图中箭头。11、逆转录和PCR技术扩增cDNA文库EcoRⅠ酶和BamHⅠ可以防止目的基因和质粒自身环化以及目的基因与质粒反向连接破坏标记基因无法筛选（且没有启动子）吸收周围环境中的DNA分子表达的绿色荧光蛋白菌落卡那霉素【解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因—DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA—分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质—抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（1）从早期胚胎神经细胞中提取HuC基因的mRNA，通过逆转录过程合成目的基因，并通过PCR技术在体外扩增可获得大量的目的基因，进而构建出HuC基因的cDNA文库。（2）构建基因表达载体时，不能破坏运载体上的启动子、复制原点，以及运载体上需要保留标记基因，为了防止目的基因和质粒自身环化以及目的基因与质粒反向连接，常用不同的限制酶切割质粒和目的基因，结合图示中各种限制酶的酶切位点可知，为获得HuC基因——绿色荧光蛋白基因的表达载体，需要对HuC基因和质粒选用图中的EcoRⅠ酶和BamHⅠ酶进行切割。卡那霉素抗性基因为标记基因，若用NotⅠ酶切割，将会导致卡那霉素抗性基因被破坏，且切割后的质粒会失去启动子，使基因表达载体中缺少标记基因无法选择，且没有启动子无法转录，所以不选择NotⅠ酶切割质粒。（3）用Ca2+处理大肠杆菌使之成为感受态细胞，易于吸收周围环境中的DNA分子。由于绿色荧光蛋白表达后会发绿光，所以实验过程中可以采用在荧光显微镜下观察表达的绿色荧光蛋白菌落或者在培养基中添加卡那霉素，筛选出导入表达载体的大肠杆菌。【点睛】本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤，掌握各操作步骤中需要