微生物、洁净区基础知识及无菌保证知识培训试卷与答案

微生物、洁净区基础知识及无菌保证知识培训试卷与答案一、单选题（每题1分，共30分。每题只有一个正确答案，请将正确选项字母填入括号内）1.洁净区A级静态环境下，≥0.5μm悬浮粒子最大允许数为（）A.3520个/m³B.352000个/m³C.35200个/m³D.3520000个/m³答案：A2.下列哪种微生物属于革兰氏阳性、可形成芽孢、对湿热抵抗力最强的指示菌（）A.铜绿假单胞菌B.枯草芽孢杆菌C.金黄色葡萄球菌D.白色念珠菌答案：B3.欧盟GMP附录1规定，B级区动态监测时，≥0.5μm粒子警戒限为（）A.标准限值的50%B.标准限值的70%C.标准限值的80%D.标准限值的90%答案：B4.洁净室压差梯度设计时，相邻不同洁净级别之间最小压差应为（）A.5PaB.10PaC.12.5PaD.15Pa答案：C5.过氧化氢蒸汽（VHP）灭菌工艺中，最关键的验证参数是（）A.相对湿度B.温度C.过氧化氢浓度D.气流速度答案：C6.无菌药品灌装线开机前，对A级区表面进行微生物监测，接触碟培养时间应为（）A.30～35℃培养48hB.30～35℃培养72hC.20～25℃培养48hD.20～25℃培养5d答案：B7.下列哪项不是洁净区人员进入B级区必须佩戴的防护装备（）A.无菌口罩B.无菌眼罩C.无菌手套D.棉质鞋套答案：D8.采用湿热灭菌程序F0≥12min时，其灭菌标准对应的微生物残存概率为（）A.10⁻³B.10⁻⁴C.10⁻⁵D.10⁻⁶答案：D9.洁净室高效过滤器（H13级）对0.3μm粒子的最低过滤效率为（）A.95%B.99%C.99.97%D.99.999%答案：C10.下列哪种消毒剂对细菌芽孢杀灭效果最差（）A.0.2%过氧乙酸B.2%戊二醛C.70%异丙醇D.5%过氧化氢答案：C11.洁净区环境监测发现B级区浮游菌结果>警戒限但<纠偏限，首先应（）A.立即停产B.启动OOS调查C.增加监测频率并趋势分析D.更换消毒剂答案：C12.无菌工艺模拟试验（APS）中，培养基灌装最少样本量为（）A.5000瓶B.10000瓶C.5000瓶或全部批次中的最大批量，取较大者D.全部批次的0.1%答案：C13.洁净室回风口设计风速一般控制在（）A.0.1～0.2m/sB.0.2～0.4m/sC.0.4～0.6m/sD.0.6～0.8m/s答案：B14.采用激光粒子计数器进行悬浮粒子监测时，采样管长度不应超过（）A.0.5mB.1.0mC.1.5mD.2.0m答案：B15.下列哪项不是无菌保证水平（SAL）的定义要素（）A.灭菌后微生物残存概率B.以10为底的对数单位C.与产品初始污染菌无关D.通常表示为10⁻⁶答案：C16.洁净区C级区静态≥5.0μm粒子最大允许数为（）A.20个/m³B.29个/m³C.290个/m³D.2900个/m³答案：B17.采用环氧乙烷灭菌时，最关键的工艺参数是（）A.温度B.相对湿度C.气体浓度D.真空度答案：C18.洁净室人员更衣确认中，表面微生物监测合格标准为（）A.≤1CFU/皿B.≤3CFU/皿C.≤5CFU/皿D.≤10CFU/皿答案：C19.下列哪种情况必须重新进行培养基模拟试验（）A.更换高效过滤器B.新增同型号灌装机C.每班人员变动超过30%D.连续一年未发生微生物污染答案：C20.洁净区温湿度监测点应距离墙面（）A.0.1mB.0.5mC.1.0mD.1.5m答案：B21.采用干热灭菌250℃、30min程序，其FH值为（）A.30B.60C.120D.300答案：A22.洁净室自净时间测试合格标准为粒子浓度下降至目标值（）A.1/10B.1/100C.1/1000D.1/10000答案：B23.下列哪项不是无菌操作“双人原则”的核心目的（）A.降低人为差错B.实时相互监督C.减少监测频次D.提高无菌保证答案：C24.洁净区地漏液封高度应不低于（）A.25mmB.50mmC.75mmD.100mm答案：B25.采用汽化过氧化氢对隔离器灭菌，生物指示剂常用（）A.嗜热脂肪芽孢杆菌10⁶B.枯草芽孢杆菌10⁶C.金黄色葡萄球菌10⁶D.铜绿假单胞菌10⁶答案：B26.洁净室高效过滤器完整性测试（DOP/PAO）上游浓度应达到（）A.10～20μg/LB.20～40μg/LC.50～80μg/LD.80～120μg/L答案：D27.无菌药品最终灭菌产品F0≥8min时，其SAL应达到（）A.10⁻³B.10⁻⁴C.10⁻⁵D.10⁻⁶答案：D28.洁净区表面微生物监测，接触碟培养基常用（）A.TSAB.SDAC.MACD.XLD答案：A29.采用过氧化氢灭菌时，最难杀灭的微生物为（）A.细菌繁殖体B.真菌孢子C.病毒D.芽孢答案：D30.洁净室风速测试时，测点距高效过滤器出口平面（）A.50mmB.100mmC.150mmD.300mm答案：C二、配伍题（每题1分，共10分。每题先给出五个选项，后跟五个题干，请将正确选项字母填入题干后括号内，每个选项可重复使用）选项：A.30～35℃培养72hB.20～25℃培养5dC.55～60℃培养24hD.30～35℃培养48hE.20～25℃培养72h31.TSA接触碟监测B级区表面微生物（）答案：A32.SDA沉降碟监测霉菌和酵母菌（）答案：B33.嗜热脂肪芽孢杆菌生物指示剂培养（）答案：C34.培养基模拟试验样品培养（）答案：A35.纯化水微生物限度检查（）答案：D36.浮游菌采样TSA培养（）答案：A37.隔离器表面过氧化氢灭菌后监测（）答案：A38.培养基灵敏度试验（）答案：D39.成品无菌检查硫乙醇酸盐流体培养基（）答案：A40.成品无菌检查改良马丁培养基（）答案：B三、判断题（每题1分，共20分。正确打“√”，错误打“×”）41.洁净区A级区可设置水池和地漏。（）答案：×42.高效过滤器完整性测试仅在新装后进行一次即可。（）答案：×43.无菌操作期间，人员可快速穿越A级区以减少暴露时间。（）答案：×44.灭菌柜热穿透试验探头应放置于最大包装单位冷点。（）答案：√45.洁净室压差低于设定值时，可临时关闭回风阀提高压差。（）答案：×46.培养基模拟试验允许使用0.1%聚山梨酯80中和过氧化氢残留。（）答案：√47.同一高效过滤器，若边框泄漏率>0.01%视为不合格。（）答案：√48.无菌药品内包材可在C级区完成最终清洗后进入A级区。（）答案：×49.洁净区监测出现连续3点超警戒限即构成趋势偏差。（）答案：√50.采用干热灭菌去热原，FH≥30min即可保证内毒素下降3个对数单位。（）答案：√51.人员更衣确认可接受标准中，手套表面微生物≤5CFU/皿。（）答案：√52.汽化过氧化氢灭菌时，相对湿度越高杀灭效果越好。（）答案：×53.洁净室自净时间测试仅需在空态下进行。（）答案：×54.无菌工艺模拟试验中，任何阳性样品必须调查并扩大采样。（）答案：√55.洁净区温湿度探头应每年至少校准一次。（）答案：√56.采用环氧乙烷灭菌，产品解析阶段可省略温度监控。（）答案：×57.洁净区墙面与地面夹角应呈圆弧R≥50mm设计。（）答案：√58.无菌操作期间，设备维修人员可临时进入A级区进行紧急维修。（）答案：×59.纯化水系统消毒采用巴氏消毒法，常用80℃、60min。（）答案：√60.洁净区环境监测数据应保存至产品有效期后至少1年。（）答案：√四、填空题（每空1分，共20分）61.洁净区A级区动态≥0.5μm粒子最大允许数为________个/m³。答案：352062.湿热灭菌标准菌株嗜热脂肪芽孢杆菌的D121值为________min。答案：1.5～3.063.欧盟GMP规定，B级区浮游菌动态警戒限为________CFU/m³。答案：5064.高效过滤器边框扫描泄漏测试，采样头移动速度为________cm/s。答案：2～365.无菌操作隔离器内部应维持相对于背景环境________Pa的负压或正压。答案：+20～+6066.培养基模拟试验最差条件应包括最大________人数和最长________时间。答案：操作；暴露67.洁净室自净时间测试粒子衰减曲线应达到________%的下降。答案：9968.汽化过氧化氢灭菌常用浓度范围为________mg/L。答案：6～1269.无菌药品最终灭菌工艺F0≥________min视为过度杀灭法。答案：1270.洁净区表面微生物监测，接触碟直径为________mm。答案：5571.干热灭菌去热原常用温度/时间为________℃/________min。答案：250；3072.纯化水系统反渗透装置回收率一般控制在________%。答案：7573.洁净区地漏液封应使用________%消毒剂溶液。答案：0.2～0.574.无菌操作手套每________分钟应消毒一次。答案：3075.洁净室高效过滤器效率等级H14对0.3μm粒子效率≥________%。答案：99.99576.培养基灵敏度试验中，金黄色葡萄球菌接种量应≤________CFU。答案：10077.无菌工艺模拟试验样品应在________℃倒置培养。答案：20～2578.洁净区监测出现纠偏限超标时，应在________小时内完成初步调查。答案：2479.环氧乙烷灭菌生物指示剂芽孢量通常为________CFU/片。答案：10⁶80.洁净区风速测试测点间距一般为________m。答案：0.3五、简答题（每题6分，共30分）81.简述洁净区A级区与B级区在动态监测频次上的差异及科学依据。答案：A级区需对悬浮粒子与浮游菌进行连续监测，每点每秒采样并实时报警；B级区粒子每班一次、浮游菌每班一次，因A级区为最核心无菌暴露区域，任何瞬时污染均可能影响产品，故需连续监测以即时发现偏差；B级区为背景环境，风险相对较低，频次降低可兼顾可行性与代表性，符合欧盟GMP附录1风险分级原则。82.阐述培养基模拟试验（APS）设计中最差条件的三大要素及其相互关系。答案：最差条件包括最大操作人数、最长暴露时间、最复杂干预操作。三者相互叠加可放大污染风险：人数增加提高发菌量；暴露时间延长增加污染概率；复杂干预（如拆机、调整针头）破坏无菌状态。设计时需同时满足，确保验证结果覆盖日常最差情况，且不得相互抵消，如延长暴露时间不得减少人数，以保证验证的科学性与保守性。83.说明汽化过氧化氢（VHP）灭菌过程中“冷凝点”概念及其控制策略。答案：冷凝点指过氧化氢气体浓度达到饱和开始液化的温度/浓度临界点。一旦冷凝，微滴覆盖芽孢形成屏障，反而降低杀灭效率。控制策略：1）维持舱室温度高于露点2～4℃；2）分阶段注入，先除湿至相对湿度<40%，再缓慢提升H₂O₂浓度；3）实时监测腔体温度与H₂O₂ppm，采用PID算法调节注入速率；4）使用短循环风机保证均匀分布，避免局部过饱和。84.无菌操作期间，人员突发低血糖需紧急离开A级区，应如何执行应急退出与再进入程序？答案：1）立即通知值班主管与QA，启动应急退出；2）按SOP在A级区内脱下外层无菌手套，喷0.2%过氧乙酸消毒内层手套；3）通过缓冲间一步退出，不得接触任何产品；4）B级区脱下全部无菌衣，按一般人员退出；5）医疗处理后，重新完成更衣确认（含表面微生物≤5CFU/皿）；6