苦茶的降血糖活性研究

华北理工大学信息学院 苦茶的降血糖活性研究摘要苦茶是山茶科山茶属普洱茶的变种。分布于云南和中国大陆其他地区，海拔1370米。在山地森林中生长，它已被记录为上一代草药，具有长期临床应用，并已用于治疗心脏病，降低血脂和降低血糖。在论文中，苦茶被用作研究工具，根据低血糖和低脂血症的药理活性来调节葡萄糖和脂质代谢紊乱。它遵循引导模式和后续模式来检测和确定传统皮肤茶的植物化学损失的血液和脂肪损失的活性成分。本论文完全遵照中医用药的基本原则，遵照传统植物化学消融模型的苦茶降糖原则，为苦茶的临床应用提供新的理论依据，并为苦茶的开发和利用奠定基础。关键词苦茶；降血糖；活性AbstractAbstractBitterteaisavariantoftheCamelliaCamelliagenusPu'ertea.DistributedinYunnanandotherpartsofmainlandChina,atanaltitudeof1,370meters.Growinginmountainforests,ithasbeendocumentedasapreviousgenerationofherbalmedicines,haslong-termclinicalapplications,andhasbeenusedtotreatheartdisease,lowerbloodfatandlowerbloodsugar.Inthepaper,bitterteaisusedasaresearchtooltoregulateglucoseandlipidmetabolismdisordersbasedonthepharmacologicalactivitiesofhypoglycemiaandhypolipidemia.Itfollowsaguidedmodeandasubsequentmodetodetectanddeterminethephytochemicallossofbloodandfatlossoftheactiveskintea.ThispapercompletelycomplieswiththebasicprinciplesoftraditionalChinesemedicine,andfollowstheprincipleofbitterteahypoglycemicintraditionalphytochemicalablationmodel,whichprovidesanewtheoreticalbasisfortheclinicalapplicationofbitterteaandlaysafoundationforthedevelopmentandutilizationofbittertea.KeywordsBittertea;bloodsugarlowering;activity 目录 目录 目录15697Abstract II27620第1章绪论 529211.1苦茶的研究现状 5263821.1.1苦茶资源的研究与利用 5127201.1.2苦茶的药理活性研究 6216411.2中医药治疗糖尿病的研究现状 6208491.2.1糖尿病的研究背景 685341.2.2降血糖的中药的研究进展 614592第2章苦茶水煎液对二型糖尿病小鼠降血糖活性的初步研究 826632.1实验材料 84332.1.1药材 8315542.1.2实验动物 8190542.1.3试剂及药品 8232352.1.4仪器设备 8235342.2实验方法 8324772.2.1苦茶水煎液的制备 8112442.2.2小鼠二型糖尿病造模方法的选择与优化 819402.2.3动物实验与给药 978862.2.4小鼠血清GLU、TC、TG、SOD、MDA及游离脂肪酸的测定 988302.2.5数据分析处理 990952.3实验结果 109072.3.1糖尿病小鼠的两种不同造模方式比较 10255562.3.2苦茶水煎液对二型糖尿病小鼠体重和血糖的影响 1012612.3.3苦茶水煎液对二型糖尿病小鼠TC、TG和NEFA的影响 10212372.3.4苦茶水煎液对二型糖尿病小鼠SOD和MDA的影响 11121132.4实验结论与讨论 1130609第3章苦茶不同部位对高血糖小鼠降血糖活性的实验比较研究 13135113.1实验材料 13290383.1.1药材 13317603.1.2实验动物 135373.1.3试剂及药品 1318283.1.4仪器设备 13224623.2实验方法 1359403.2.1苦茶不同部位提取物的制备 1350453.2.2动物实验与给药 14167583.2.3小鼠血清GLU、TC、TG、SOD、MDA及NEFA的测定 1447593.2.4数据分析处理 148833.3实验结果 14270953.3.1苦茶部位A、B、C对高血糖模型小鼠进食量、进水量的影响 1468373.3.2苦茶部位A、B、C对高血糖模型小鼠体重及各脏器重量的影响 15284593.3.3苦茶部位A、B、C对高血糖模型小鼠血糖、血脂的影响 15171623.3.4苦茶部位A、B、C对高血糖模型小鼠抗氧化指标的影响 16833.4实验结论与讨论 1622457结论 1713818参考文献 18华北理工大学XXXX学院第4章考试系统中题库和组卷子系统的实现第1章绪论1.1苦茶的研究现状1.1.1苦茶资源的研究与利用苦茶（学名：Camelliaassamicavar.kucha）山茶花是PuerredeCamellia属的茶。生长于云南和中国大陆其他地区，它生长在1,370米米的高度的森林。它是中国传统的纯天然健康饮料，以及使用顺势疗法药物和食品的传统中草药。江华苦茶种也被称为高脚茶，是茶树的一种。江华苦茶是在建国桃镇“牛牯岭”和其他地方生产的，是一种绿色健康饮品，“茶多酚”的含量非常有名，因为它是该州最富有的。它具有消除口渴，清凉发热，清爽和降低血压的作用。它味道苦，甜，充满气味，回味无穷。最近开发了一系列书面茶产品，已出口到西欧，北美，东南亚等地，如袋，颗粒，口服片，软饮料等，并赢得了“绿色金”的美誉。与此同时，苦茶在中国广泛分布，苦茶的年产量估计约为5吨。花，芽，小窍门，老叶，山羊，根，外皮和苦茶籽可用作草药或加工各种茶饮料。它可以进一步加工和开发成新产品，如药品，食品和保健品。随着韩国生活水平的不断提高，对优质健康饮品的需求不断增加。由于其良好的药物活性和饮用价值，苦茶已被开发并用作茶和药物的两用植物，这为苦茶产品的开发和仅在中国使用苦茶提供了主要推动力。中国是茶树和茶叶的起源已经种植了三千多年，茶树的遗传来源非常丰富。野生茶植物是宝贵的资源野生茶植物含有在长期发育后抵抗各种困难所必需的基因。最后，杭州茶叶研究所，云南省农业科学研究所，巴南茶研究所的国家生殖系统被用作保护的基础，保护茶源2665种。该藏品保存了云南金平库车，四川黄山库车，贵州兴义库车（祁社大茶），湖南江华库车，广东乳源库车，江西安源家，重庆库车等。《本草木部》记载：“苦茶。甜而苦，微寒，无毒。主要是痔疮，小便，去口渴加热。主要气体是消化。”除了普通茶的保健功能外，苦茶还具有茶，清热，防火，预防中暑，消毒，消炎，抗衰老，抗衰老，降血压，降血糖，防动脉硬化，防腐，频繁自我生产当地村民经常以苦茶为原料制作“蜂蜜茶”（纯冬蜜浸泡苦茶超过三年），“糯米茶”（即“柚子茶”）茶“，并将苦茶烘入掏空的瓜。烤），中暑，腹痛，痢疾等疾病都有特殊的治疗效果，其中大部分都是由中国人服用，被称为”神茶“产品。1.1.2苦茶的药理活性研究1.改善血液循环：在中国南方，特别是在巴马，江西和西浙江，心脏病死亡率最低，是最长的城市。芬兰和美国最高的心血管疾病。主要区别在于居民吃不同类型的脂肪。像西乡一样，喜马拉雅居民使用苦茶作为该省的主要来源。医学证明，苦茶可预防动脉粥样硬化，高血压和脑出血等发病症状。2.对人体消化系统有所帮助：对人体脾胃肝肠有所改善，能够预防胆囊方面的疾病，在诊治胃病和胃溃疡方面有着显著效果。苦茶还有润滑大肠，通便的功效。研究证明，苦茶能够有效的减少胆固醇含量。3.能够调节内分泌系统：苦茶能够有效改进人体的新陈代谢，新的研究结果证明，健康人可以在吃苦茶后将葡萄糖水平降低5％。因此，苦茶已成为预防和控制糖尿病的最佳食用油。4.加强骨骺系统的功能：促进苦茶骨的发育，促进矿物质的形成和钙的吸收。它还在骨生长和预防骨质疏松症中起重要作用。1.2中医药治疗糖尿病的研究现状1.2.1糖尿病的研究背景糖尿病是降低胰岛素分泌，降低身体抵御力的一种大脑和其他单一或多种病毒。代谢紊乱和其他症状表明高血糖症和“三多一少”症状。糖尿病是一种多发性代谢疾病，全世界约有1.46亿人被诊断患有糖尿病。预计将增加到三亿。中国约有一百万糖尿病患者，成人患病率为3.3％。急性和长期并发症是有害的，被称为“无声杀手”。最近糖尿病发病率的增加包括人类健康，心血管和脑血管疾病，以及癌症，中风，心脏病，失明，肾衰竭和解剖学。随着我国城市化的快速递进，人们的生活质量越来越好，生活方式的改变导致高糖量的摄入，再加上很多人对饮食的不注重，引发了一系列的糖尿病并发症。另一项研究发现，18岁的糖尿病患病率约为7.45％。到3010年，患病率增加了3.27个百分点，预防和治疗糖尿病至关重要。1.2.2降血糖的中药的研究进展许多研究人员这些年研究糖尿病时，已经确定并开发了具有明显降血糖活性的草药的味道。这些中药有清热解毒，补气养血，活血化痰的功效。1.有几项关于如何去除卡路里和解毒草药的研究，包括小檗碱，黄疸，大黄等。通过研究黄连单一生物碱及其复合生物碱对人体肝细胞和小白鼠血糖水平的作用，发现其对降低血糖活性和毒性具有协同作用。实验表明，黄芪茎叶的茎和叶上的黄酮类化合物可以降低胰岛素抵抗，以及葡萄糖和脂质。也有其它的研究成果能够证明大黄的多糖部分有着良好的降血糖活性。2.人参，黄芪，生地黄和中药等中草药能够益气养阴，有着良好的降血糖功效。将实验应用在小白鼠身上，最后结果证实降血糖作用的机制可以控制血液中糖和血清甘油三酯的相互作用。据李楠等人说。糖尿病模型大鼠黄芪总皂苷含量，黄芪总黄酮和黄芪总多糖含量可影响血糖含量。等级吴金环等。结果表明，地黄可降低糖尿病大鼠链脲佐菌素的高血糖和高脂血症水，已经使用临时肺叶对降低糖尿病模型茶中的低血糖和血脂有显着作用。3.丹参，川芎，红花等活血化痰中药也具有良好的治疗作用。灯盏花素和丹参能够引导患糖尿病的白鼠增加身体分泌的总多酚酸，空腹服用丹参总多酚酸可有效的减少血糖和三环素的含量，提升胰岛素在体内的敏感指数。从川芎中提取的糖尿病大鼠对2％乙醇，3％乙醇和川芎，8％乙醇的降血糖作用最小。根据Takahashi等人的研究，从藏红花种子中分离5-羟色胺NP和5-羟色胺N-铁。中药复方已被用作中药的主要方法。各种中药具有互补和互利的作用，不仅可以增强效果，还可以充分发挥各种药物和毒素的功效。你可以制造越来越少的药水来保护。目前，中国有5种中成药，有100多种支持疗法。中华人民共和国中药版包括治疗糖尿病的中草药，如降糖加片，参芪消渴胶囊，参芪止咳丸，养阴降糖片，消渴丸，消渴灵片，消克平平等大量研究包括片剂和口服片在内，已经证明草药化合物可以更好地反映中药的整体治疗特性，对糖尿病患者更有效。

第2章苦茶水煎液对二型糖尿病小鼠降血糖活性的初步研究2.1实验材料2.1.1药材苦茶品种又名高脚茶，茶树有性群体品种之一。苦茶产于江华涛圩镇“牛牯岭”等地，除了可可和咖啡外不含酒精，是一种健康的饮料它具有消除口渴，清凉发热，清爽和降低血压的作用。2.1.2实验动物重19至23g的雌性昆明小鼠。2.1.3试剂及药品TG，GLU试剂;TC试剂盒;SOD，MDA，NEFA试剂盒;alloxan;盐酸二甲双胍片。2.1.4仪器设备EL-600HA动物电子秤;FY-8700半自动生化分析仪;BFU-16B高速离心机;756P紫外可见分光光度计;冷冻干燥机。2.2实验方法2.2.1苦茶水煎液的制备用2斤的苦茶叶加适度的双氧水，用蒸馏水煮4次，时间为2小时，加水煮沸，过滤，真空浓缩成冻干粉，在-30℃温度种保护，冻干的苦茶汤粉末提取物在相同的置换温度下率为37.4%。2.2.2小鼠二型糖尿病造模方法的选择与优化高剂量，单剂量型四氧嘧啶二型糖尿病：30只雌性昆明小鼠，1周个性化饮食，大剂量腹腔内腹腔注射生理盐水（300mg·kg-1），注射完成。一周后，血液被抽吸到小鼠尾，血清通过离心分离和血清中的血糖值是使用生化试剂盒进行测定。二型糖尿病的组合具有高脂肪的饮食和低剂量四氧嘧啶30只雌性昆明小鼠选择一个合适的饮食1周后喂养1个月高脂肪饮食（参考饮食8.9％，蛋黄10％，猪油10％，胆固醇1％，胆盐0.2％），然后低剂量腹膜内注射，盐水溶液四氧嘧啶（90mg·kg-1），1周后注射微血处于Mausschwanzvene，离心血糖水平，通过血清和生化济慈测量Erama。2.2.3动物实验与给药将低剂量四氧嘧啶注入高脂肪饮食大鼠：雌性55个昆明小鼠，每只小鼠（18-22g）喂食7天，并选择47只大鼠。对于脂肪供应，另八个是正常食物喂养一个月。然后选择45只高脂小鼠，随机抽取36只小鼠保持禁食12小时，腔注射低剂量四氧嘧啶盐水注射液（90mg·kg-1），剩下8只高脂血症小鼠（高亲脂性组）和13只小鼠喂食正常饮食（空白对照组）给予相同剂量的生理盐水。一周后，输注尾静脉以测量同种异体小鼠的葡萄糖水平。将成功小鼠随机分为1型糖尿病组，阳性对照组和犬煎剂组，每组5只大鼠。对照组接受正常饮食，其他组接受较高脂肪饮食。二甲双胍阳性对照药和苦荞汤提取物被用于悬浮灌胃均匀地在双蒸水，和阳性对照组的剂量为（0.02ml·g-1）。阳性对照组给予二甲双胍每千克50mg·kg-1·d-1。苦茶汤组给予苦茶汤冻干粉，相当于苦茶原料药10g·kg-1·d-1;空白对照组中高脂血症模型组和二型糖尿病模型组是相同的，方法依旧是用双氧水水煮。为保证药物的稳定性，所有试验白鼠在连续摄药的30天的下午开始进食12h，之后进行称重并保留称重和血样数据。在葡萄糖耐量试验结束后，将小鼠麻醉并选择一定数量将眼球放血，通过离心分离血清并储存在-80℃直至使用。2.2.4小鼠血清GLU、TC、TG、SOD、MDA及游离脂肪酸的测定采用GLU试剂盒，TC试剂盒，TG试剂盒，SOD试剂盒和MDA试剂盒来进行测验，使用半自动生化分析仪测量血清GLU，CT，TG，SOD和MDA水平。测量方法使用紫外分光光度计测量无血清脂肪酸水平。2.2.5数据分析处理在使用SPSS22.0版本对全部数据进行统计分析后发现实验之前和之后进行t检验，p<0.05，差别太大的数据均为x±s表示。2.3实验结果2.3.1糖尿病小鼠的两种不同造模方式比较通过一星期的高剂量四氧嘧啶注射后，大鼠的死亡率估计很严重，约为61％。同时，存活小鼠血液中的糖含量超过30mmol·L-1，小鼠的成功率为41％，死亡率较高，因此没有使用。单剂量的四氧嘧啶与高脂肪饮食对比，30％的小鼠在30周后死亡或死于血糖并且模型成功率高，约81％的成功率，该二型糖尿病小鼠11mmol·L-1或更高的模型中建模。2.3.2苦茶水煎液对二型糖尿病小鼠体重和血糖的影响经过和高脂血症对照组数据相比发现，服用苦茶的对照组的白鼠体重明显的减少并且这种差异是显着的，数据反映了苦茶在降轻体重方面有着药理学影响。另外，高脂血症对照组的重量明显高于二型糖尿病小鼠的体重，表明有着糖尿病症状的高脂小鼠在经过注射四氧嘧啶的治疗后体重得到了明显的控制，重量逐渐减少。高脂血症对照组的血糖水平高于空对照组，表明脂质代谢紊乱影响体内的葡萄糖代谢。该Kuchao组中的血糖水平是与苦咳汤片治疗后比在糖尿病对照组模型2的低血糖的量显著下基本上是相同的苦茶汤，在降血糖方面有着显著的疗效。结果见下表2-1：表2-1苦茶水煎液对二型糖尿病小鼠体重和血糖的影响对比与二型糖尿病模型组，**p＜0.01；对比与高脂血症对照组ap＜0.052.3.3苦茶水煎液对二型糖尿病小鼠TC、TG和NEFA的影响跟二型糖尿病小鼠对比，苦茶水煎液能够有效的减少患糖尿病白鼠的血清，其反映出来TC，TG和NEFA水平不同，证明了苦茶水煎液能够有效的改良二型糖尿病白鼠的非正常新陈代谢。结果见下表2-2：表2-2苦茶水煎液对二型糖尿病小鼠TC、TG和NEFA的影响和二型糖尿病模型组对比，*p＜0.05，**p＜0.012.3.4苦茶水煎液对二型糖尿病小鼠SOD和MDA的影响苦茶蒸煮可以显着增加二型糖尿病小鼠的抗氧化能力，增加血清SOD活性，并减少二型糖尿病大鼠的血清MDA含量。结果见下表2-3：表2-3苦茶水煎液对二型糖尿病小鼠SOD和MDA的影响和二型糖尿病模型组对比，*p＜0.052.4实验结论与讨论四氧嘧啶在国内外是比较常用的方法，专门用来控制二星糖尿病患者，其本身具有的毒性低，常用于组织和动物的存活。四氧嘧啶在该岛上引起β-细胞毒性，损害细胞内DNA和mRNA功能，导致小鼠胰岛素缺乏和糖尿病。这个实验的模型是经过长期高脂饮食诱导先通过一个独特的脂质代谢的胰岛素抵抗，然后通过注射四氧嘧啶少量治疗伤病和胰腺功能继续胰腺Belohnungssekretion。胰岛素功能障碍（不直接破坏胰腺的所有功能），可以恢复二型糖尿病模型，反映各种降糖药物的作用，调节血脂药物，往往适合科学研究。中医法是以不同于西药的煎剂为基础的，在长期煎剂中，中药的状态会影响中药的结构，这对药物质量的研究尤为重要。因此，不可能在草药等研究模式下对草药的药理活性进行深入研究，特别是用生物溶剂提取药用组分。因此，这一经验是基于中药的原理，用传统的苦药提取药用物质，优化中药的有效性，为进行基础研究和研究奠定了坚实的基础，药物的作用机制。在二型糖尿病白鼠的实验中，证实了苦茶水煎液能够减少血糖和血脂含量，增加抗氧活性，表明苦茶水煎液有着良好的治疗功效。苦茶水煎液还可以有效的改善葡萄糖平衡，调节脂质新陈代谢异常。

第3章苦茶不同部位对高血糖小鼠降血糖活性的实验比较研究3.1实验材料3.1.1药材苦茶品种又名高脚茶，茶树有性群体品种之一。苦茶产于江华涛圩镇“牛牯岭”等地，除了可可和咖啡外不含酒精，是一种健康的饮料它具有消除口渴，清凉发热，清爽和降低血压的作用。3.1.2实验动物重19至23g的雌性昆明小鼠。3.1.3试剂及药品TG、GLU试剂盒；TC试剂盒；SOD、MDA、NEFA试剂盒；四氧嘧啶；盐酸二甲双胍片。3.1.4仪器设备EL-600HA动物电子秤;FY-8700半自动生化分析仪;BFU-16B高速离心机;756P紫外可见分光光度计;冷冻干燥机。3.2实验方法3.2.1苦茶不同部位提取物的制备将3kg苦茶叶在5倍双蒸水中浸泡24小时，然后将苦茶叶在10倍双蒸水中煮沸3小时，通过滤纸过滤并反复萃取。将所有滤液浓缩物合并，真空并冻干。冰箱干粉中的苦茶茶汤。将冻干粉末加热并用10倍100％甲醇回流3小时，通过滤纸过滤，回流数次，收集所有滤液，空白，并冻干成粉末。冻干。在50％甲醇（部位A）中提供回流组分数;以与上述相同的方式用甲醇萃取剩余的固体％1％甲醇，得到回流组分（位点B）;残余物是残余组分（位点C）。将所有冻干粉末真空包装并在30℃的冰箱中储存并在使用后取出。3.2.2动物实验与给药在实验前一周，将健康的昆明小鼠在实验室中预孵育。随机选择5只大鼠作为空对照。其他小鼠腹膜内注射生理活性高剂量盐水（300mg.kg-1）。一星期后，从白鼠尾静脉针扎取出微量血液样本进行测验血糖和血脂含量度高低。凡是在实验中含量度大于16.7mmol·L-1的白鼠皆能够认定药效良好。把实验效果良好的高血糖模型小鼠随机分成每组8组：进行高血糖的模式对照，阳性对照，苦味部分A，B，C三个剂量组。成功应用后，将模型应用于胃中4周。对照和高血糖模型从探针对照和二甲双胍（50mg·kg-1）接受正常盐。用草药当量15克·kg-1处理三组不同的搅拌器。灌胃给药剂量，记录每餐的水消耗量和每组水用于日常使用。最后一次给药后，大鼠禁食十二小时。在葡萄糖耐量试验结束时，麻醉小鼠，取出眼睛用于出血，分离血清，分离肝脏，肾脏和胰腺，称重并取实验数据。3.2.3小鼠血清GLU、TC、TG、SOD、MDA及NEFA的测定在对GLU试剂盒，TC试剂盒，TG试剂盒，SOD试剂盒和MDA试剂盒中使用规定的测定方法，用半自动生化分析仪测定血清GLU，TC，TG，SOD，MDA水平;使用游离脂肪酸试剂盒规定的测量方法进行紫外分光光度计测量血清游离脂肪酸水平测试。3.2.4数据分析处理对参与实验的全部数据进行划分，采用SPSS20.0版本软件测试靶向ANOVA的同质性。使用LSD方法比较各组之间的统计数据分析，p<0.05表示显着差异，所有数据表示为x±s。3.3实验结果3.3.1苦茶部位A、B、C对高血糖模型小鼠进食量、进水量的影响实验进行当中所有对照组实验生物的食物饮食和水量摄取都保持稳定。在成功建模高血糖模型后，其他小鼠的水摄入量和摄食量以及空对照组的例外情况同时增加，并且存在显着差异。早在给药后的第二周，就有吃食物和减少苦茶部分A和B的水消耗的倾向。在实验结束时，苦味部分A和B小鼠保险充分减少消费和水。在高血糖模型组中，C点的食物摄入和小鼠消耗与高血糖模型对照组的食物摄取和水摄入没有显着差异。3.3.2苦茶部位A、B、C对高血糖模型小鼠体重及各脏器重量的影响在成功构建数据后，高血糖大鼠显示出体重减轻的特定迹象。在实验结束时，高血糖模型组的重量明显显着低于空对照组，阳性对照组和苦茶组A与高血糖模式组对比，体重显着更高，这表明苦茶点A可以减少由于糖尿病引起的体重减轻。而且还发现，苦茶成分降低了高血糖小鼠的肝脏重量，显着增加了高血糖小鼠的胰腺重量，并且对肾脏重量没有显着影响。而且与高血糖模式组对比，苦茶B和C没有其他的阻碍。结果见表3-1：表3-1苦茶部位A、B、C对高血糖模型小鼠体重及各脏器重量的影响和高血糖模型组对比，*p＜0.053.3.3苦茶部位A、B、C对高血糖模型小鼠血糖、血脂的影响高血糖模型组的血糖含量明显大于空对照组，证明该模型的实验是可行的。每4周治疗后，阳性对照组和苦味组A中的血糖水平显着低于高血糖模式组，表明苦味A可以减轻大鼠的高血糖症状，而苦味B和C则没有影响很大。同时，药物组中所有小鼠的血脂水平没有显着差异，这可能造成血糖含量突然上升，体内的血脂代谢异常变化，结果详见表3-2：表3-2苦茶部位A、B、C对高血糖模型小鼠血糖、血脂的影响和高血糖模型小鼠对比，*p＜0.0