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2026年卫生专业技术资格考试(微生物检验技术专业实践能力初级师)题库练习试题及答案解析一、单项选择题(共30题,每题1分,每题的备选项中只有1个最符合题意)1.关于血培养标本采集的最佳时机,正确的是A.发热初期或寒战高峰前B.发热后2小时C.抗生素使用后30分钟D.体温降至正常后答案:A解析:血培养应在患者发热初期或寒战高峰前采集,此时菌血症浓度最高。抗生素使用前采集可提高阳性率,使用后需避开药物浓度高峰。发热后2小时或体温正常时细菌可能已被清除,故B、D错误;抗生素使用后30分钟药物浓度高,会抑制细菌生长,C错误。2.进行革兰染色时,95%乙醇脱色时间过长会导致A.革兰阳性菌被染成红色B.革兰阴性菌被染成紫色C.所有细菌均被染成紫色D.背景颜色过深答案:A解析:革兰染色中,95%乙醇是脱色剂。革兰阳性菌细胞壁肽聚糖层厚,脱色时不易被乙醇脱去结晶紫-碘复合物,保持紫色;若脱色时间过长,阳性菌的细胞壁被过度破坏,复合物被洗脱,会被沙黄复染成红色(A正确)。革兰阴性菌细胞壁肽聚糖层薄,脱色时易被脱去紫色,保留红色,故B错误;C、D与脱色时间无关。3.鉴定肠杆菌科细菌时,用于区分志贺菌和大肠埃希菌的关键生化试验是A.乳糖发酵试验B.氧化酶试验C.吲哚试验D.动力试验答案:D解析:志贺菌无鞭毛,无动力;大肠埃希菌有鞭毛,有动力(D正确)。两者均不发酵乳糖(部分大肠埃希菌可发酵),氧化酶均阴性,吲哚试验大肠埃希菌多阳性、志贺菌多阴性,但动力试验是最关键鉴别点(志贺菌动力阴性为典型特征)。4.以下哪种标本需在采集后30分钟内送检,否则需4℃保存?A.痰标本B.脑脊液C.尿液D.粪便答案:B解析:脑脊液标本含菌量少且细菌(如脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌)对温度敏感,需立即送检(30分钟内),否则4℃保存可抑制杂菌生长但需避免冻存(B正确)。痰标本可室温2小时内送检,尿液需1小时内或4℃保存,粪便常规检查可室温1小时内送检。5.进行药敏试验时,MH琼脂的pH值应控制在A.6.0-6.5B.7.0-7.2C.7.2-7.4D.7.6-7.8答案:C解析:MH琼脂(Mueller-Hinton琼脂)的pH值需严格控制在7.2-7.4,此范围内抗菌药物活性稳定,细菌生长良好,结果准确(C正确)。pH过低会增强大环内酯类活性,过高会增强氨基糖苷类活性,均影响结果判读。6.怀疑新型隐球菌感染时,首选的染色方法是A.革兰染色B.墨汁负染色C.抗酸染色D.吉姆萨染色答案:B解析:新型隐球菌有宽厚荚膜,墨汁负染色可使荚膜在黑色背景中呈现透明空晕,是快速诊断的首选方法(B正确)。革兰染色中隐球菌呈阳性,但荚膜不易显示;抗酸染色用于分枝杆菌,吉姆萨染色用于原虫或立克次体。7.以下哪种细菌在血平板上可形成“卫星现象”?A.金黄色葡萄球菌B.流感嗜血杆菌C.肺炎链球菌D.铜绿假单胞菌答案:B解析:流感嗜血杆菌生长需要V因子(NAD)和X因子(血红素)。金黄色葡萄球菌在血平板上可释放V因子,使周围流感嗜血杆菌菌落生长旺盛,形成“卫星现象”(B正确)。其他细菌无此特性。8.检测结核分枝杆菌时,萋-尼抗酸染色的脱色剂是A.95%乙醇B.3%盐酸乙醇C.丙酮D.乙醚答案:B解析:萋-尼染色中,石碳酸品红加热染色后,用3%盐酸乙醇脱色(B正确)。结核分枝杆菌含大量分枝菌酸,可抵抗盐酸乙醇脱色,保留红色;其他细菌被脱色后被亚甲蓝复染成蓝色。9.尿培养中,判定为尿路感染病原菌的菌落计数阈值通常是A.≥10³CFU/mlB.≥10⁴CFU/mlC.≥10⁵CFU/mlD.≥10⁶CFU/ml答案:C解析:清洁中段尿培养中,革兰阴性杆菌≥10⁵CFU/ml、革兰阳性球菌≥10⁴CFU/ml可视为病原菌(C正确)。但需结合临床,如症状明显时10³CFU/ml也可能有意义。10.进行厌氧菌培养时,常用的厌氧指示剂是A.美蓝B.酚酞C.溴甲酚紫D.甲基红答案:A解析:美蓝在有氧环境中呈蓝色,无氧环境中被还原为无色,是常用的厌氧指示剂(A正确)。其他指示剂用于pH或其他反应监测。二、多项选择题(共10题,每题2分,每题的备选项中有2个或2个以上符合题意,错选、少选均不得分)1.关于标本采集的无菌操作,正确的是A.皮肤消毒用2%碘酊→75%乙醇脱碘B.采集脑脊液时需严格消毒穿刺部位C.痰液标本需指导患者深部咳嗽D.尿液标本采集前无需清洁外阴答案:ABC解析:皮肤消毒需碘酊+乙醇脱碘(A正确);脑脊液为无菌标本,穿刺部位需严格消毒(B正确);痰液应留取深部咳出的标本,避免口咽部污染(C正确);尿液标本需清洁外阴(女性)或尿道口(男性)后留取中段尿(D错误)。2.可用于鉴定金黄色葡萄球菌的试验有A.血浆凝固酶试验B.触酶试验C.耐热核酸酶试验D.氧化酶试验答案:AC解析:血浆凝固酶试验是金葡菌的典型特征(A正确);耐热核酸酶试验阳性可区分金葡菌与表皮葡萄球菌(C正确)。触酶试验所有葡萄球菌均阳性(B错误);氧化酶试验阴性(D错误)。3.关于病毒分离培养的描述,正确的是A.细胞培养是最常用方法B.鸡胚培养适用于流感病毒C.动物接种用于狂犬病毒D.所有病毒均可在人工培养基中生长答案:ABC解析:病毒需活细胞培养,细胞培养(如猴肾细胞)是常用方法(A正确);鸡胚羊膜腔接种可培养流感病毒(B正确);小鼠脑内接种用于狂犬病毒分离(C正确);病毒不能在无生命培养基中生长(D错误)。4.痰标本涂片镜检时,合格标本的标准包括A.鳞状上皮细胞<10个/低倍镜视野B.中性粒细胞>25个/低倍镜视野C.鳞状上皮细胞>25个/低倍镜视野D.中性粒细胞<10个/低倍镜视野答案:AB解析:合格痰标本需减少口咽部污染,要求鳞状上皮细胞(来自口腔)<10个/低倍视野,中性粒细胞(来自下呼吸道)>25个/低倍视野(AB正确)。5.关于药敏试验结果判读,正确的是A.敏感(S)表示常规剂量药物有效B.中介(I)表示需增加剂量C.耐药(R)表示药物无效D.所有抗菌药物均需做药敏试验答案:ABC解析:敏感(S)指常规剂量下药物在感染部位浓度高于MIC(A正确);中介(I)提示可能需增加剂量或药物在局部浓度高时有效(B正确);耐药(R)指药物无法抑制细菌(C正确);部分药物(如利福平对肠杆菌科)无需常规做药敏(D错误)。三、案例分析题(共2题,每题15分,根据题干信息回答问题)案例1:患者男,35岁,发热伴寒战3天,体温39.5℃,血常规示白细胞18×10⁹/L,中性粒细胞85%。临床怀疑败血症,医嘱采集血培养。问题1:简述血培养标本的采集步骤及注意事项。问题2:若培养出革兰阳性球菌,呈葡萄串状排列,触酶阳性,血浆凝固酶阳性,最可能的病原菌是什么?需进一步做哪些鉴定?答案及解析:问题1:采集步骤:①核对患者信息,选择肘静脉;②皮肤消毒:75%乙醇擦拭30秒→2%碘酊或碘伏擦拭60秒→75%乙醇脱碘(待干);③成人采集2套(需氧+厌氧),每套10-20ml(儿童1-5ml);④注入血培养瓶时避免消毒剂污染;⑤记录采集时间、抗生素使用情况;⑥30分钟内送检,若延迟需室温保存(不可冷藏)。注意事项:避免在输液侧手臂采血;抗生素使用前采集,若已用需在药物浓度低谷期采集;标注患者体温和寒战时间。问题2:最可能为金黄色葡萄球菌(革兰阳性葡萄串状,触酶+,血浆凝固酶+为典型特征)。需进一步做:①耐热核酸酶试验(金葡菌阳性);②药敏试验(重点检测β-内酰胺酶、耐甲氧西林(MRSA));③若为MRSA需报告苯唑西林/头孢西丁耐药。案例2:患者女,65岁,咳嗽、咳痰1周,痰为黄绿色脓痰,胸部X线示右下肺浸润影。痰标本涂片镜检见大量中性粒细胞,革兰阴性杆菌,短杆状,有荚膜;培养见菌落呈黏液型,血平板不溶血,麦康凯平板呈红色菌落(乳糖发酵)。问题1:推测可能的病原菌是什么?依据是什么?问题2:需进一步做哪些生化试验确认?答案及解析:问题1:可能为肺炎克雷伯菌。依据:①革兰阴性短杆菌,有荚膜(克雷伯菌荚膜厚);②痰标本中大量中性粒细胞(提示下呼吸道感染);③麦康凯平板红色菌落(乳糖发酵,肠杆菌科特征);④菌落黏液型(荚膜丰富)。问题2:需做:①靛基质试验(克雷伯菌阴性);②鸟氨酸脱羧酶试验(阴性);③V-P试验(阳性);④动力试验(无动力);⑤血清学分型(K抗原);⑥药敏试验(重点检测超广谱β-内酰胺酶(ESBL))。四、操作题(共1题,20分,描述操作步骤及关键注意事项)题目:简述革兰染色的操作步骤及质量控制要点。答案及解析:操作步骤:1.涂片:取清洁载玻片,加1滴生理盐水,用接种环取少量细菌(临床标本需涂片薄而均匀),涂成直径1cm的薄膜,自然干燥。2.固定:将涂片通过火焰2-3次(手背感觉微烫),使细菌黏附于玻片,避免染色时脱落。3.初染:滴加结晶紫染液覆盖涂片,染色1分钟,水洗(水流冲洗玻片背面,避免冲掉菌膜)。4.媒染:滴加卢戈碘液覆盖涂片,作用1分钟,水洗。5.脱色:滴加95%乙醇,轻轻晃动玻片至无紫色脱落(约20-30秒),立即水洗(脱色时间是关键,过长易误判阳性菌为阴性)。6.复染:滴
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