黑金刚的组培生产技术

PAGE\*Arabic1目录关键词 21.材料处理 21.1外植体的选择 32.试验材料和方法 32.1试验材料 32.2外植体的消毒 32.3培养条件 32.4培养基的选择 32.4.1诱导培养 32.4.2增殖培养 32.4.3生根培养 33.结果与分析 33.1试管苗诱导 33.2茎尖诱导试验 43.3侧芽增殖试验 43.4不同培养温度对试管苗繁殖的影响 53.5壮苗培 53.6生根试验 54.试管苗的移栽试验 65.管理技术 66.结论. 77.参考文献 88.致谢 9黑金刚的组培生产技术摘要：以黑金刚的茎尖为外植体，研究不同浓度的培养基愈伤组织诱导，从生芽诱导，增殖和生根的影响，进行组织培养实验，结果表明，黑金刚的茎尖诱导培养基以MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.01mg/L,茎尖诱导率为：98％，增殖培养基以MS+6-BA3.0mg/L+NAAO.01mg/L,增殖系数为：3.64，生根培养基以：MS+LBA1.5mg/L,生根率为:98％，培养室温度25℃±2℃，光照10-12h/d，光强2000IX。关键词：黑金刚组织培养外植体引言黑金刚又称印度橡胶树（ficnselasticaBoxb）是桑科（Moraceae）榕（ficus.l）的植物。常绿乔木，含乳液，叶大，厚，革质，长椭圆形，有光泽，中脉显著，侧脉细密平行，托叶包叶芽，淡红色，原产印度，我国广东，广西，云南等地有露地栽培，长江流域及以北各地多盆栽做为观叶植物供庭园欣赏.1.材料处理1.1外植体的选择选取生长健壮，无病虫害的盆栽黑金刚植物，剪取比较幼嫩，生长能力较强的茎段，选用茎段有以下优点：污染程度较老龄部位轻，又比较耐表面灭菌剂的处理，接种后生长能力强，反应较明显。2.试验材和方法料2.1试验材料选择生长健壮，无病虫害的黑金刚茎尖为外植体，培养备用。2.2外植体消毒将外植体用中性洗洁精溶液浸泡10-20min，自来水冲洗20-30min，剥掉茎尖外层红色的皮，在清水中用小刷子洗掉切口处的分泌物，用清水冲洗2-3遍。2.3培养条件培养室温度25℃土2℃、光照10一12h／d、光强2OO01x。所用的基本培养基为MS培养基，添加蔗糖或白糖30g/L，琼脂5g/L,pH值为5.6。2.4培养基的选择2.4.1诱导培养将灭过菌的茎尖接种在MS+6BA0.5-2.0mg/L+NAA0.01mg/L诱导培养基上。诱导培养30一45天后，形成小芽，然后分化出丛生芽。2.4.2增殖培养将丛生芽切成带3-5棵小苗的块状接入MS+6BA1.0-3.0mg/L+NAAO.01mg/L增殖培养基中进行增殖培养，增殖培养30一45天后，分化出丛生芽，增殖率可达3倍以上，且长势好，叶片特性能保持原性状。2.4.3生根培养把茎高为3一5cm的小苗，从茎的基部切断，转到MS+LBAO.5-1.0mg/L生根培养基进行生根培养。培养8-10天后陆续有根产生，根系粗壮、整齐，组培苗长势好，叶片浓绿有光泽。3.分析与结果3.1试管苗诱导试验接种全能ms,附加6-BA0.5-2.0mg/L，NAA0.01mg/L,糖3％，琼脂0.45％，PH5.8培养基上的外植体，外植体表现不同的生长形态，如表1。表1.不同激素水平外植体生长形态对比材料外植体激素mg/L茎尖形态茎尖6-BA0.5NAA0.01茎尖略增大，基部无愈伤，芽明显增大无芽丛。茎尖6-BA1.0NAA0.01茎尖增大，变粗，基部产生黄白色愈伤，芽萌动形成少量丛生芽。茎尖6-BA2.0NAA0.01茎尖明显增大，变成一团绿色的愈伤块，无芽产生。由表1看出培养基中加入激素：6-BA0.5NAA0.01时，茎尖略有增大，高生长很明显，没有芽丛;当加入6-BA1.0mg/L，NAA0.01mg/L时，茎尖增大，无芽产生。如表2。3.2茎尖诱导试验表2.不同激素水平出芽率对比培养基激素mg/L培养基激素mg/L接种数出芽数出芽率1-16-BA0.5NAA0.01503060％1-26-BA1.0NAA0.01504998％1-36-BA2.0NAA0.01504284％由表2可以看出培养基1-2为最适培养基，出芽数为98％。当6BA为0.5时出芽率为60％，而6BA为2.0时出芽率为84％，所以当激素水平在一定的范围内，出芽率最高。3.3侧芽增殖试验由外植体诱导丛生芽需经好几代不同激素水平的生理调节，才能形成比较好的丛生芽.如表3。表3.不同激素水平生长形态及增殖倍数对比培养基培养基激素mg/L接种丛数繁殖丛数繁殖倍数生长形态对比2-16-BA1.0NAA0.0150581.16丛生芽少，芽高，呈红色，茎粗，较老，叶大，节间距大。2-26-BA2.0NAA0.01501082.16丛生芽多，芽高矮不一，呈绿色，茎粗嫩，节间距小。2-36-BA3.0NAA0.01501823.64丛生芽很多，芽矮嫩，看不到茎，叶很小绿色。由表3可以看出培养基2-3为最适培养基，增值系数为3.64，且丛生芽很多，芽矮嫩，看不到茎，叶很小绿色。3.4不同培养温度对试管苗繁殖的影响黑金刚试管苗的培养需要较高的温度，经试验观察认为室温25-32℃为较佳的生长温度范围，试管苗培养25天后的增殖效果，如表4。表4.不同培养温度对试管苗的影响温度℃温度℃接种瓶数繁殖瓶数繁殖倍数20141412514302.13014453.23214533.7由表4看出当培养温度20-25℃时繁殖倍数1-2.1倍，培养温度30-32℃时，繁殖倍数3.2-3.7提高试管苗繁殖系数。3.5壮苗培养增芽苗生长在细胞分裂素浓度较高的培养基中，芽小，芽体内又积累了一定的细胞分裂素，此时剪下作为生根苗，腋芽萌发减少，高生长迅速，芽粗，节间距加长，叶片变大，这时可剪下用于生根。3.6生根试验壮苗后的试管苗丛生芽生至1.5-2cm时，剪下插入培养诱导生根，试管苗经5-10天的培养就能生根，如表5。表5.不同激素水平生根率对比激素mg/L接种株数生根株数生根率（％）LBA0.51700168098LBA1.015001500100由表5看出激素浓度LBA0.5mg/L时，生根率98％，LBA1.0mg/L时，生根率100％.4.试管苗的移栽试验把准备移栽的试管苗转入自然光下炼苗3-4天，炼苗时应注意以问题，黑金刚试管苗喜高温.表6.试管苗的移栽成活率移栽时间统计时间移栽株数成活株数成活率（%）4/524/515001428951/625/61752161091由表6看出移栽成活率达91%-95%，因此试管苗只要有根，移栽成活率都较高。移栽季节为春季为好。5.移栽后管理技术黑金刚试管苗从具有适宜温度，湿度,管理技术都和土壤、水、温度、湿度、光照等条件有关，同样试管苗移栽后的管理技术也要从几个方面着手。移栽土壤试管苗移栽土壤即要求膨松，又要具有良好的保水、通气等性能，根据这种情况，我们制作了双层苗床，上层3-3.5cm的河沙或蛭石.水，湿度试管苗移栽后20天左右成活，在这期间重要的是保证试管苗水分的供需平衡，因为试管苗生长在湿度相对100%的三角瓶中，毛孔张开，防止水分蒸发的角质层很不发达，生长环境的改变使水分散失较大.温度，光照移栽温度要求前期偏低适宜（22-28℃），若温度过高会加强苗木水份蒸腾，造成试管苗失水大于供水而死亡。自然气温一般是早晚低，一定量的叶面肥，常松土除草，50天左右即能上盆。结论组织培养技术为大量繁殖各种各样的观赏植物创造了有利条件，因此对黑金刚的组织培养技术也进行了研究，黑金刚是一种优良观叶植物，用传统方法繁殖需要大量的扦插材料，而黑金刚侧枝少，无法大量提供插穗，我采用组织培养方法以较少的原材料短期内获得了大量的试管丛生芽，丛生芽在高浓度的激素中培养繁殖倍数高，不产生玻璃苗，壮苗后生根率及移栽成活率都较高。通过对比试验发现，从外植体诱导试管苗细胞分裂素浓度要低一点，以促进芽的伸长，然后逐渐提高，细胞分裂素具有保险效果，在较高的6-BA中培养试管苗很幼嫩，壮苗时可通过培养物减去有机成分，加强光照等途径，提高试管苗自养能力增强自身的抗逆性。参考文献[1]张馨月,刘小菊,屈敏.橡皮树组织培养及试管苗的温室移栽期刊论文-北方园艺2013(18)[2]李康，林木试管苗形态模型及其应用.新疆农业出版社[M]，2007[3]谭文登,戴策刚,观赏植物组织培养技术[M].北京：中国林业出版社，1997.[4]姜凤英,张惠华,刘莉,王茹;花叶橡皮树的组织培养研究[J];辽宁农业科学;2003年05期.[5]张明丽,李青;木本观赏植物组织培养及植株再生的研究进展[J];河北林业科技;2004年02期.[6]陈韬,李平英,独军,韩云花;橡皮树的组织培养和快速繁殖[J];甘肃农业科技;2005年01期.[7]王富兰,周晓龙,谢新民;橡皮树的快速繁殖及试管苗温室移栽管理[J];新疆农业科学;2004年04期.[8]万方数据优先出版（)