CN106831353B 一种从大麻中提取大麻二酚的方法 （云南汉素生物科技有限公司）

(12)发明专利(65)同一申请的已公布的文献号(66)本国优先权数据(73)专利权人云南汉素生物科技有限公司地址650114云南省昆明市西山区海口镇(72)发明人张可谭昕高伟博常坦然(74)专利代理机构北京领科知识产权代理事务所(特殊普通合伙)11690代理人张丹US6403126B1,2002WO2004026802A1,2004.04.01审查员李成伟一种从大麻中提取大麻二酚的方法本发明公开一种从大麻中提取大麻二酚的方法。该方法包括以下步骤：将大麻的提取部位粉碎、烘干得到药材粉末；将药材粉末采用30-100%(V/V)的乙醇提取得到提取液；将提取液浓缩得到浸膏；将浸膏进行水沉，去除杂质得到水沉液；将水沉液离心并向获得的沉淀中加入10-100%(V/V)乙醇，溶解得到沉淀物的醇溶液；将沉淀物的醇溶液进行柱层析；浓缩柱层析后洗脱获得的洗脱液，加入乙醇过饱和溶解，获得结晶物；将结晶物加入纯化水或乙醇洗涤，得到初品；高度安全的乙醇作为溶剂，既提高了成品中大麻21.一种从大麻中提取大麻二酚的方法，其特征在于，包括以下步骤：2)将所述药材粉末采用体积百分比为30-100%的乙醇提取，得到提取液；5)将所述水沉液离心，在离心获得的沉淀中加入体积百分比为10-100%乙醇溶解，得到沉淀物的醇溶液；6)将所述沉淀物的醇溶液进行柱层析；7)浓缩步骤6)得到的洗脱液，加入乙醇过饱和溶解，获得结晶物；8)将所述结晶物加入纯化水或乙醇洗涤，得到初品；其中，所述的步骤1)中提取部位为大麻花和大麻叶，所述大麻为工业大麻。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1)中大麻提取部位粉碎后烘干，包括在60-200℃温度条件下，烘干0.5-3h,至水分5%以下。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1)中大麻提取部位粉碎至10-804.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2)的提取方式包括回流提取、超所述的回流提取包括：采用2-8倍药材量的所述乙醇进行回流提取1-3次，每次0.5-3h;所述的超声提取包括：采用2-8倍药材量的所述乙醇进行超声提取1-3次，每次0.1-1h;所述的浸泡提取包括：采用2-8倍药材量的所述乙醇进行浸泡提取1-3次，每次0.5-5h。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤4)具体包括：采用1-10倍药材量6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤6)中，将所述沉淀物的醇溶液进行柱层析的步骤包括：采用洗脱溶剂对层析柱进行梯度洗脱，所述梯度洗脱的步骤包括：先用体积百分比为0-30%的乙醇除杂，再用体积百分比为40-80%的乙醇洗脱。7.根据权利要求1或6所述的方法，其特征在于，所述柱层析的步骤中，所用的层析柱的填料包括大孔树脂、MCI树脂、十八烷基硅烷键合硅胶中的一种或多种。8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤7),包括在10-80℃温度条件下，用体积百分比为60-100%的乙醇过饱和溶解，获得所述结晶物。9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤8),包括在0-24℃温度条件下，加纯化水或体积百分比为5-40%的乙醇洗涤，得到所述初品。10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤9)中，干燥的方式包括喷雾干3一种从大麻中提取大麻二酚的方法技术领域[0001]本发明涉及一种从大麻中提取大麻二酚的方法，特别涉及一种从工业大麻花叶中提取大麻二酚的方法。背景技术苗、黄麻，具有重要的农用及药用价值。大麻中含有一种毒性成分THC(四氢大麻酚)可使人[0003]由于大麻的经济、药用价生长期大麻花叶中的四氢大麻酚(THC)含量小于千分之三，不具备提取毒性成分四氢大麻酚的价值或直接作为毒品吸食，可以合法进行规模化种植与工业化开发利用。[0004]目前，人们已从大麻植株中分离出了500余种物质，其中大麻酚类化合物至少有86种。大麻酚类化合物是大麻植株中特有的一类物质，是大麻植物中主要的活性成分，有关它的研究一直是大麻研究的热点。大麻植株中主要的大麻酚类化合物有四氢大麻酚(THC)、大化合物的90%以上。[0005]近年来，通过对大麻活性成分的研究发现，大麻二酚(cannabidiol)不具有神经毒性，药用价值明显。相关的药理研究表明，其能阻碍四氢大麻酚对人体神经系统的影响，并[0006]目前，公开信息中有一些关于从工业大麻中提取大麻二酚或提取含大麻二酚的工业大麻油的方法的报道。例如，CN104277917A公开了一种富含大麻二酚的工业大麻精油器、旋转蒸发仪、成品罐和溶剂回收罐等设备对工业大麻逐步进行筛选、烘烤、浸提、再处工业大麻精油。CN105505565A公开了一种萃取富含大麻二酚的工业大麻油的方法，是采用超临界二氧化碳流体从工业大麻中提取工业大麻油，萃取时将冷却后的工业大麻粉放入萃取釜的物料桶中，将CO₂气体注入萃取釜，保持萃取釜内温度和压力在CO₂气体的超临界状态与原料接触，使工业大麻粉中的工业大麻油等成分溶解于超临界流体之中，使含大麻二酚等成分的流体从萃取釜节流膨胀进入分离釜解析，得到工业大麻油并收集。CN105535111A公开了一种从工业火麻的花叶中提取富含大麻二酚的火麻浸膏及其制备方法，该制备方法首先对火麻花叶进行干热处理，再通过亚临界丁烷萃取技术，乙醇为夹带剂获得富含大麻二酚的粗浸膏；粗浸膏溶于一定比例的乙醇溶液并进行低温冬化处理；利用离心机离心或过滤机过滤去除蜡质；上清液加入活性炭进行脱色过滤处理；最后将上述所得滤液旋转蒸发除去乙醇，可获得富含CBD的火麻浸膏。其中与本发明最为接近的现有技术为CN103739585A,其公开了一种从工业大麻中提取二氢大麻酚(CBD)的工艺，包括采摘花4叶、烘干、粉碎、浸泡萃取以及浓缩分离过程，通过对比研究，现有技术中所提及的从工业大麻中提取大麻二酚的方法，主要存在以下问题：[0007]1)因原植物中大麻酚类成分复杂，极性相似成分较多，采用传统方法提取、精制后，最终产品中大麻二酚纯度不高。[0008]2)提取纯化后，仍可检出精神毒性成分四氢大麻酚，产品安全性不能得到保证，产品流通受限，影响工业化生产和应用。[0009]3)因大麻二酚在有机溶剂中的溶解度高于在乙醇中，故，为了提高大麻二酚的产率，行业中通常在提取、萃取、纯化等工艺步骤中采用石油醚、正己烷、二氯甲烷等有毒有机溶剂。但此类有机溶剂的使用会对环境产生危害，而且终产品中溶剂残留不能除尽，对产品安全性也有影响。[0010]因此，目前亟需提供一种制备高纯度且无四氢大麻酚的大麻二酚的方法，并且无不良有机溶剂残留，该制备方法还应满足节能环保，经济适用的产业化发展需求。发明内容[0011]本发明旨在提供一种从大麻提取大麻二酚的方法，以解决现有技术中提取大麻二酚纯度不高、精神毒性成分四氢大麻酚残留等问题。[0012]为了实现上述目的，本发明提供了一种从大麻中提取大麻二酚的方法，该方法包括以下步骤：[0013]1)将大麻的提取部位粉碎、烘干，得到药材粉末；[0014]2)将药材粉末采用30-100%(V/V)的乙醇提取，得到提取液；[0015]3)将提取液浓缩，得到浸膏；[0016]4)将浸膏进行水沉，去除杂质，得到水沉液；[0017]5)将水沉液离心，在离心获得的沉淀中加入10-100%(V/V)乙醇溶解，得到沉淀物的醇溶液；[0018]6)将沉淀物的醇溶液进行柱层析；[0019]7)浓缩步骤6)得到的洗脱液，加入乙醇过饱和溶解，获得结晶物；[0020]8)将结晶物，加入纯化水或乙醇洗涤，得到初品；[0021]9)将步骤8)所得初品用纯化水混匀，干燥，即得大麻二酚。[0022]优选的，本发明所述的大麻选自工业大麻、中间型大麻或药用大麻中的一种或两种以上的组合。[0023]优选的，本发明所述的步骤1)中提取部位选自大麻花、大麻叶、大麻根、大麻秆芯和大麻籽粕中的一种或两种以上的组合。优选的，本发明所述的步骤1)中提取部位为大麻[0024]优选的，本发明所述的步骤1)中所述大麻提取部位粉碎至10-80目，例如可以是10进一步优选为20-60目；更优选为25-50目；最优选为40目。在本发明的一个典型实施方式中，所述的步骤1)中将大麻花、叶粉碎至前述目数范围内，可以使得大麻二酚在后续的乙醇提取步骤中充分提取出来。[0025]优选的，本发明所述的步骤1)中所述大麻提取部位粉碎后烘干的温度为60-2005[0026]优选的，本发明所述的步骤1)中所述大麻提取部位粉碎后烘干的时间为0.5-3h,2.5h;更优选为1.5-2h。[0027]进一步地，本发明所述的步骤1)中所述大麻提取部位粉碎后烘干，优选为烘干至水分5%以下。在本发明的一个典型实施方式中，所述的步骤1)中在上述烘干条件下，大麻花叶的烘干效率高，干燥好，并且其中的有效成分不会被破坏。[0028]在本发明的一个典型实施方式中，所述步骤1)为：大麻花、叶粉碎至10-80目，在60-200℃的温度下烘干0.5-3h,至水分5%以下，得到药材粉末。[0029]优选的，本发明所述的步骤2)中所述乙醇的用量为2-8倍药材量，例如可以是2倍、[0030]优选的，本发明所述的步骤2)中所述乙醇提取的次数为1-3次。[0031]优选的，本发明所述的步骤2)中所述乙醇提取的提取方式为回流提取、超声提取和/或浸泡提取。[0032]进一步优选的，所述回流提取的时间为每次提取0.5-3h;所述超声提取的时间为每次提取0.1-1h;所述浸泡提取的时间为每次提取0.5-5h。[0033]在本发明的一个典型实施方式中，所述步骤2)为：将药材粉末采用2-8倍药材量的30-100%(V/V)的乙醇提取1-3次，得到提取液。[0034]优选的，本发明所述的步骤3)中所述将提取液浓缩为浓缩至50℃时测量的相对密度为1.05-1.35。[0035]优选的，本发明所述的步骤4)中所述水沉的用水量为1-10倍药材量，例如可以是1[0036]优选的，本发明所述的步骤4)中所述水沉的温度为0-20℃,例如可以是0℃、0.1[0037]优选的，本发明所述的步骤4)中所述水沉的时间为1-48h,例如可以是1h、1.1h、6[0038]在本发明的一个典型实施方式中，所述步骤4)为：将浸膏用其1-10倍药材量的纯化水在0-20℃的温度下进行水沉1-48h,去除杂质，得到水沉液。[0039]优选的，本发明所述的步骤6)中所述柱层析所用的层析柱的填料包括但不限于大孔树脂、MCI树脂、十八烷基硅烷键合硅胶中的一种或多种；进一步优选为大孔树脂和/或的基础上设计的新型树脂，粒径仅75-150微米。所述大孔树脂包括但不限于AB-8、D-101、[0040]优选的，本发明所述的步骤6)中所述柱层析为采用洗脱溶剂对层析柱进行梯度洗脱；所述洗脱溶剂优选为乙醇和/或水；进一步优选的，所述梯度洗脱的步骤包括：先用0-30%(V/V)的乙醇洗脱除杂，再用40-80%(V/V)的乙醇洗脱获得目标产物部分。更优选的，所述梯度洗脱的步骤包括先用0-30%(V/V)的乙醇洗脱除杂，再用40-80%(V/V)的乙醇洗脱获得目标产物部分，最后用90-95%(V/V)的乙醇洗脱以使层析柱再生。上述梯度洗脱的步骤不仅使得目标产物部分纯度高，而且使层析柱不断再生，可循环使用。[0041]优选的，本发明所述的步骤7)中所述浓缩步骤6)得到的洗脱液为将洗脱液浓缩至50℃时测量的相对密度为1.05-1.35。[0042]优选的，本发明所述的步骤7)中所述加入乙醇过饱和溶解的温度为10-80℃,例如为20-60℃;更优选为30-50℃。[0043]优选的，本发明所述的步骤7)中所述乙醇的浓度为60-100%(V/V)。[0044]进一步优选的，本发明所述的步骤7)中还包括对洗脱液中乙醇的回收步骤。[0045]在本发明的一个典型实施方式中，所述步骤7)为：浓缩步骤6)得到的洗脱液至50℃时测量的相对密度为1.05-1.35,10-80℃的温度下加入60-100%(V/V)的乙醇过饱和溶[0046]在本发明的一个优选实施方式中，所述步骤7)为：浓缩步骤6)得到的洗脱液至50℃时测量的相对密度为1.05-1.35,对洗脱液中的乙醇进行回收，10-80℃的温度下加入60-[0047]优选的，本发明所述的步骤8)中所述洗涤的温度为0-24℃,例如可以是0℃、0.1[0048]优选的，本发明所述的步骤8)中所述乙醇的浓度为5-40%(V/V)。[0049]在本发明的一个典型实施方式中，所述步骤8)为：将结晶物，在0-24℃的温度下，加入纯化水或5-40%(V/V)的乙醇洗涤，得到初品。[0050]优选的，本发明所述的步骤9)中所述干燥的方式包括但不限于喷雾干燥、真空干[0051]优选的，本发明所述的步骤9)中所述干燥的温度为不超过65℃。[0052]进一步优选的，本发明所述的步骤9)中还包括将获得的大麻二酚粉碎成粉的步骤；所述粉碎的方式包括汽流粉碎、和/或冷冻粉碎；所述粉碎的物料温度不超过65℃。7[0053]在本发明的一个优选实施方式中，提供了一种从大麻中提取大麻二酚的方法，包括以下步骤：[0054]1)将大麻的提取部位粉碎至10-80目，在60-200℃的温度下烘干0.5-3h,至水分5%以下，得到药材粉末；[0055]2)将药材粉末采用2-8倍药材量的30-100%(V/V)的乙醇提取1-3次，得到提取液；[0056]3)将提取液浓缩至50℃时测量的相对密度为1.05-1.35,得到浸膏；[0057]4)将浸膏用其1-10倍药材量的纯化水，在0-20℃的温度下进行水沉1-48h,去除杂[0058]5)将水沉液离心，在离心获得的沉淀中加入10-100%(V/V)乙醇溶解，得到沉淀物的醇溶液；[0059]6)将沉淀物的醇溶液进行柱层析，所述柱层析所用的层析柱的填料为大孔树脂、MCI树脂、十八烷基硅烷键合硅胶中的一种或多种，具体步骤包括：先用0-30%(V/V)的乙醇洗脱除杂，再用40-80%(V/V)的乙醇洗脱获得目标产物部分，最后用90-95%(V/V)的乙醇洗脱以使层析柱再生；[0060]7)浓缩步骤6)得到的洗脱液至50℃时测量的相对密度为1.05-1.35,10-80℃的温度下加入60-100%(V/V)的乙醇过饱和溶解，获得结晶物；[0061]8)将结晶物，在0-24℃的温度下，加入纯化水或5-40%(V/V)的乙醇洗涤，得到初[0062]9)将步骤8)初品用纯化水混匀，在不超过65℃的温度下干燥，即得大麻二酚。[0063]在本发明的另一个优选实施方式中，提供了一种从大麻花叶中提取大麻二酚的方[0064]1)将大麻的花叶粉碎至10-80目，在60-200℃的温度下烘干0.5-3h,至水分5%以[0065]2)将药材粉末采用2-8倍药材量的30-100%(V/V)的乙醇提取1-3次，得到提取液；[0066]3)将提取液浓缩至50℃时测量的相对密度为1.05-1.35,得到浸膏；[0067]4)将浸膏用其1-10倍药材量的纯化水，在0-20℃的温度下进行水沉1-48h,去除杂[0068]5)将水沉液离心，在离心获得的沉淀中加入10-100%(V/V)乙醇溶解，得到沉淀物的醇溶液；[0069]6)将沉淀物的醇溶液进行柱层析，所述柱层析所用的层析柱的填料为大孔树脂、MCI树脂、十八烷基硅烷键合硅胶中的一种或多种，具体步骤包括：先用0-30%(V/V)的乙醇洗脱除杂，再用40-80%(V/V)的乙醇洗脱获得目标产物部分，最后用90-95%(V/V)的乙醇洗脱以使层析柱再生；[0070]7)浓缩步骤6)得到的洗脱液至50℃时测量的相对密度为1.05-1.35,10-80℃的温度下加入60-100%(V/V)的乙醇过饱和溶解，获得结晶物；[0071]8)将结晶物，在0-24℃的温度下，加入纯化水或5-40%(V/V)的乙醇洗涤，得到初[0072]9)将步骤8)初品用纯化水混匀，在不超过65℃的温度下干燥后粉碎，即得大麻二8[0073]需要说明的是，本申请中的“2-8倍药材量”或“1-10倍药材量”等描述，是指采用的溶剂如乙醇或水的体积是药材质量的2-8倍或1-10倍，比如，药材粉末为1g,提取溶剂乙醇的用量为2ml-8ml。[0074]本发明从大麻中提取大麻二酚(CBD),采用打破本领域常规认识的技术方案，在工艺中摈弃了现有技术中对大麻二酚(CBD)溶解度较高的石油醚、正己烷、二氯甲烷等溶剂，而在工艺全程采用溶解度相对低的乙醇作为提取溶剂，并结合改进的提取工艺，出乎意料地发现大麻二酚(CBD)的得率、纯度均有明显提高，克服了本领域关于提取溶剂的选择与产品得率间的技术偏见，同时成品中未检出精神毒性成分四氢大麻酚，使产品的安全性得到了保障；并且，使用的试剂为乙醇和水，减少了对环境、操作人员、产品溶剂残留的影响；层析柱的填料可重复利用，使总体生产成本降低，也减少了填料废弃物对环境造成的污染，利于工业化生产。附图说明[0075]构成本申请的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。在附图中：[0076]图1示出了产物1的色谱图；[0077]图2示出了产物2的色谱图；[0078]图3示出了产物3的色谱图；[0079]图4示出了产物4的色谱图；[0080]图5示出了产物5的色谱图；[0081]图6示出了产物6的色谱图；[0082]图7示出了产物7的色谱图；[0083]图8示出了对比产物1的色谱图；以及[0084]图9示出了对比产物2的色谱图。具体实施方式[0085]需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。下面将参考附图并结合实施例来详细说明本发明。[0086]实施例1:按照如下方法制备大麻二酚[0087]实施例部分提供了采用本发明所述方法，在不同技术参数条件下，制备大麻二酚，各实施例中采用的原料工业大麻花、叶、根、秆芯和/或籽粕的量均为10千克，以下不再另做说明。[0088]1)将工业大麻的花叶粉碎，过80目筛，在60℃的温度下烘干3h,得到药材粉末，测得其水分含量为4%;[0089]2)将上述药材粉末采用其2倍量、30%(V/V)的乙醇回流提取3次，每次0.5h,得到提取液；[0090]3)将上述提取液浓缩至50℃时测量的相对密度为1.05,得到浸膏；[0091]4)将上述浸膏采用其1倍量的纯化水，在20℃的温度下水沉1h,去除杂质，得到水沉液；9[0092]5)将上述水沉液离心，转速5000转，在离心获得的沉淀中加入100%(V/V)乙醇溶[0093]6)将沉淀物的醇溶液进行柱层析，其层析柱的填料为AB-8,脱溶剂为乙醇和水，洗脱的步骤包括：先用30%(V/V)的乙醇洗脱除杂，再用80%(V/V)的乙醇洗脱获得目标产物部分，最后用95%(V/V)的乙醇洗脱以使层析柱再生；[0094]7)浓缩步骤6)得到的洗脱液至50℃时的相对密度为1.15,在10℃的温度下，用[0098]实施例2:按照如下方法制备大麻二酚[0099]1)将工业大麻的花叶粉碎，过10目筛，得到药材粉末。在200℃的温度下烘干0.5h,得到药材粉末，测得其水分含量为2.7%;[0100]2)将上述药材粉末采用其2倍量、100%(V/V)的乙醇超声提取1次，每次1h,得到提[0101]3)将上述提取液浓缩至50℃时测量的相对密度为1.35,得到浸膏；[0102]4)将上述浸膏用其10倍量的纯化水，在0℃的温度下水沉48h,去除杂质，得到水沉[0103]5)将上述水沉液离心，转速10000转，在离心获得的沉淀中加入10%(V/V)乙醇溶[0104]6)将沉淀物的醇溶液进行柱层析，其层析柱的填料为MCI树脂，脱溶剂为乙醇和水，洗脱的步骤包括：先用10%(V/V)的乙醇洗脱除杂，再用40%(V/V)的乙醇洗脱获得目标产物部分，最后用90%(V/V)的乙醇洗脱以使层析柱再生；[0105]7)浓缩步骤6)得到的洗脱液至50℃时的相对密度为1.25,在80℃的温度下，用[0106]8)将步骤7)所述结晶物，在24℃的温度下，加入5%(V/V)乙醇洗涤，得到初品；[0109]实施例3:按照如下方法制备大麻二酚[0110]1)将工业大麻的花叶粉碎，过40目筛，在130℃的温度下烘干1.7h,得到药材粉末，测得其水分含量为3.1%。[0111]2)将上述药材粉末采用其5倍量、60%(V/V)的乙醇浸泡提取2次，每次2.5h,得到提取液；[0112]3)将上述提取液浓缩至50℃时测量的相对密度为1.2,得到浸膏；[0113]4)将上述浸膏用其5倍量的纯化水，在10℃的温度下水沉24h,去除杂质，得到水沉[0114]5)将上述水沉液离心，转速7500转，在离心获得的沉淀中加入60%(V/V)乙醇溶[0115]6)将沉淀物的醇溶液进行柱层析，其层析柱的填料为ODS,脱溶剂为乙醇和水，洗脱的步骤包括：先用25%(V/V)的乙醇洗脱除杂，再用60%(V/V)的乙醇洗脱获得目标产物部分，最后用93%(V/V)的乙醇洗脱以使层析柱再生；[0116]7)浓缩步骤6)得到的洗脱液至50℃时测量的相对密度为1.2,在45℃的温度下，用[0117]8)将步骤7)所述结晶物，在12℃的温度下，加入40%(V/V)乙醇洗涤，得到初品；[0120]实施例4:按照如下方法制备大麻二酚[0121]1)将工业大麻的花叶粉碎，过40目筛，在120℃的温度下烘干1h,得到药材粉末，测得其水分含量为2.6%。[0122]2)将上述药材粉末采用其3倍量、70%(V/V)的乙醇在60赫兹的频率下超声提取3[0123]3)将上述提取液浓缩至50℃时的相对密度为1.1,得到浸膏；[0124]4)将上述浸膏用其5倍量的纯化水，在4℃的温度下水沉12h,去除杂质，得到水沉[0125]5)将上述水沉液离心，转速5000转，在离心获得的沉淀中加入80%(V/V)乙醇溶[0126]6)将沉淀物的醇溶液进行柱层析，其层析柱的填料为MCI树脂，脱溶剂为乙醇和水，洗脱的步骤包括：先用15%(V/V)的乙醇洗脱除杂，再用75%(V/V)的乙醇洗脱获得目标产物部分，最后用95%(V/V)的乙醇洗脱以使层析柱再生；[0127]7)浓缩步骤6)得到的洗脱液至50℃时的相对密度为1.1,在70℃的温度下，用80%[0128]8)将步骤7)所述结晶物，在10℃的温度下，加入10%(V/V)乙醇洗脱，得到初品；[0131]实施例5:按照如下方法制备大麻二酚[0132]1)将工业大麻的花叶粉碎，过40目筛，在120℃的温度下烘干1h,得到药材粉末，测得其水分含量为2.6%;[0133]2)将上述药材粉末采用其5倍量、80%(V/V)的乙醇在70赫兹的频率下超声提取2[0134]3)将上述提取液浓缩至50℃时的相对密度为1.1,得到浸膏；[0135]4)将上述浸膏用其5倍量的纯化水，在4℃的温度下水沉12h,得到水沉液；[0136]5)将上述水沉液离心，转速5000转，在离心获得的沉淀中加入80%(V/V)乙醇溶[0137]6)将沉淀物的醇溶液进行柱层析，其层析柱的填料为MCI树脂，脱溶剂为乙醇和水，洗脱的步骤包括：先用30%(V/V)的乙醇洗脱除杂，再用75%(V/V)的乙醇洗脱获得目标产物部分，最后用95%(V/V)的乙醇洗脱以使层析柱再生；[0138]7)浓缩步骤6)得到的洗脱液至50℃时的相对至密度为1.1,在70℃的温度下，用11[0139]8)将步骤7)所述结晶物，在10℃的温度下，加入10%(V/V)乙醇洗涤，得到初品；[0142]实施例6:按照如下方法制备大麻二酚[0143]1)将工业大麻的花叶粉碎，过40目筛，在120℃的温度下烘干1h,得到药材粉末，测得其水分含量为2.6%。[0144]2)将上述药材粉末采用其5倍量、80%(V/V)的乙醇回流提取2次，每次1.5h,得到提取液；[0145]3)将上述提取液浓缩至50℃时的相对密度为1.1,得到浸膏；[0146]4)将上述浸膏用其5倍量的纯化水，在4℃的温度下水沉12h,得到水沉液；[0147]5)将上述水沉液离心，转速5000转，在离心获得的沉淀中加入80%(V/V)乙醇溶[0148]6)将沉淀物的醇溶液进行柱层析，其层析柱的填料为MCI树脂，脱溶剂为乙醇和水，洗脱的步骤包括：先用30%(V/V)的乙醇洗脱除杂，再用75%(V/V)的乙醇洗脱获得目标产物部分，最后用95%(V/V)的乙醇洗脱以使层析柱再生；[0149]7)浓缩步骤6)得到的洗脱液至50℃时的相对密度为1.1,在70℃的温度下，用80%[0150]8)将步骤7)所述结晶物，在10℃的温度下，加入10%(V/V)乙醇洗涤，得到初品；[0152]10)汽流粉碎步骤9)所得大麻二酚，即得产物6。[0153]实施例7:按照如下方法制备大麻二酚[0154]1)将工业大麻的花叶粉碎，过40目筛，在120℃的温度下烘干1h,得到药材粉末，测得其水分含量为2.6%。[0155]2)将上述药材粉末采用其5倍量、80%(V/V)的乙醇浸泡提取2次，每次2.5h,得到提取液；[0156]3)将上述提取液浓缩至50℃时的相对密度为1.1,得到浸膏；[0157]4)将上述浸膏用其5倍量的纯化水，在4℃的温度下水沉12h,得到水沉液；[0158]5)将上述水沉液离心，转速5000转，在离心获得的沉淀中加入80%(V/V)乙醇溶[0159]6)将沉淀物的醇溶液进行柱层析，其层析柱的填料为MCI树脂，脱溶剂为乙醇和水，洗脱的步骤包括：先用30%(V/V)的乙醇洗脱除杂，再用75%(V/V)的乙醇洗脱获得目标产物部分，最后用95%(V/V)的乙醇洗脱以使层析柱再生；[0160]7)浓缩步骤6)得到的洗脱液至50℃时的相对密度为1.1,在70℃的温度下，用80%[0161]8)将步骤7)所述结晶物，在10℃的温度下，加入10%(V/V)乙醇洗脱，得到初品；[0164]实施例8:按照如下方法制备大麻二酚[0165]1)将工业大麻的根粉碎，过10目筛，在120℃的温度下烘干1h,得到药材粉末，测得其水分含量为1.2%。[0166]2)将上述药材粉末采用其8倍量、80%(V/V)的乙醇浸泡提取2次，每次3h,得到提取液；[0167]3)将上述提取液浓缩至50℃时的相对密度为1.1,得到浸膏；[0168]4)将上述浸膏用其10倍量的纯化水，在4℃的温度下水沉24h,得到水沉液；[0169]5)将上述水沉液离心，转速5000转，在离心获得的沉淀中加入80%(V/V)乙醇溶[0170]6)将沉淀物的醇溶液进行柱层析，其层析柱的填料为MCI树脂，脱溶剂为乙醇和水，洗脱的步骤包括：先用30%(V/V)的乙醇洗脱除杂，再用75%(V/V)的乙醇洗脱获得目标产物部分，最后用95%(V/V)的乙醇洗脱以使层析柱再生；[0171]7)浓缩步骤6)得到的洗脱液至50℃时的相对密度为1.1,在70℃的温度下，用80%[0172]8)将步骤7)所述结晶物，在10℃的温度下，加入10%(V/V)乙醇洗脱，得到初品；[0173]9)将步骤8)所述初品真空干燥，即得大麻二酚；[0175]实施例9:按照如下方法制备大麻二酚[0176]1)将工业大麻的秆芯粉碎，过40目筛，在120℃的温度下烘干1h,得到药材粉末，测得其水分含量为1.8%。[0177]2)将上述药材粉末采用其5倍量、80%(V/V)的乙醇回流提取2次，每次1.5h,得到提取液；[0178]3)将上述提取液浓缩至50℃时的相对密度为1.1,得到浸膏；[0179]4)将上述浸膏用其5倍量的纯化水，在4℃的温度下水沉12h,得到水沉液；[0180]5)将上述水沉液离心，转速5000转，在离心获得的沉淀中加入80%(V/V)乙醇溶[0181]6)将沉淀物的醇溶液进行柱层析，其层析柱的填料为MCI树脂，脱溶剂为乙醇和水，洗脱的步骤包括：先用30%(V/V)的乙醇洗脱除杂，再用75%(V/V)的乙醇洗脱获得目标产物部分，最后用95%(V/V)的乙醇洗脱以使层析柱再生；[0182]7)浓缩步骤6)得到的洗脱液至50℃时的相对密度为1.1,在70℃的温度下，用80%[0183]8)将步骤7)所述结晶物，在10℃的温度下，加入10%(V/V)乙醇洗涤，得到初品；[0184]9)将步骤8)所述初品真空干燥，即得大麻二酚；[0186]实施例10:按照如下方法制备大麻二酚[0187]1)将工业大麻的花、叶、籽粕粉碎，过10目筛，在200℃的温度下烘干0.5h,得到药材粉末，测得其水分含量为2.4%;[0188]2)将上述药材粉末采用其2倍量、100%(V/V)的乙醇超声提取1次，每次1h,得到提[0189]3)将上述提取液浓缩至50℃时测量的相对密度为1.35,得到浸膏；[0190]4)将上述浸膏用其10倍量的纯化水，在0℃的温度下水沉48h,去除杂质，得到水沉[0191]5)将上述水沉液离心，转速10000转，在离心获得的沉淀中加入10%(V/V)乙醇溶解，得到沉淀物的醇溶液；[0192]6)将沉淀物的醇溶液进行柱层析，其层析柱的填料为MCI树脂，脱溶剂为乙醇和水，洗脱的步骤包括：先用10%(V/V)的乙醇洗脱除杂，再用40%(V/V)的乙醇洗脱获得目标产物部分，最后用90%(V/V)的乙醇洗脱以使层析柱再生；[0193]7)浓缩步骤6)得到的洗脱液至50℃时的相对密度为1.25,在80℃的温度下，用60%(V/V)乙醇过饱和溶解，获得结晶物；[0194]8)将步骤7)所述结晶物，在24℃的温度下，加入5%(V/V)乙醇洗涤，得到初品；[0195]9)将步骤8)所述初品用纯化水混匀，冷冻干燥，即得大麻二酚；[0196]10)冷冻粉碎步骤9)所得大麻二酚，即得产物10。[0197]对比实施例1:按照如下方法制备大麻二酚[0198]1)采用盛花期的花叶，将其投入烘烤设备内，130℃烘干35min;[0199]2)把烘干的花叶进行磨碎，粒径达到5-10目之间；[0200]3)把磨好的花叶装入浸泡器内进行浸泡，浸泡溶剂采用石油醚，浸泡温度48℃,浸泡时间1h;[0201]4)浸泡后，将花叶滤出，滤液在90℃下加热，得到浸膏；[0202]5)层析分离：把吸附齐称量后装入层析分离器内；将浸膏均匀地放在吸附剂表面吸附CBD,吸附剂与浸膏按重量比25:1;采用石油醚进行洗脱，干燥即得对比产物1。[0203]对比实施例2:按照如下方法制备大麻二酚[0204]1)采用盛花期的大麻花叶，将其投入烘烤设备内，160℃烘干15min;[0205]2)把烘干的花叶进行磨碎，粒径达到5-10目之间；[0206]3)把磨好的花叶装入浸泡器内进行浸泡，浸泡溶剂采用正己烷，浸泡温度20℃,浸泡时间2h;[0207]4)浸泡后，将花叶滤出，滤液在120℃下加热，得到浸膏；[0208]5)层析分离：把吸附剂大孔树脂称量后装入层析分离器内；吸附剂与浸膏以1:1比例混匀吸附CBD;采用正己烷进行洗脱，干燥即得对比产物2。[0209]实验实施例1:不同制法所得产物中CBD含量及四氢大麻酚的检出情况对比[0210]检测方法：[0211]色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A,以水为流动相B,按A(%):B(%)=80:20进行等度洗脱；检测波长为210nm。理论板数按CBD峰计算应不低于2500。[0212]对照品溶液的制备精密称取CBD对照品，加甲醇(1:1)制成每1ml各含0.1mg的对照品溶液，即得；精密称取四氢大麻酚对照品，加甲醇(1:1)制成每1ml各含0.01mg的对照品溶[0213]供试品溶液的制备取本品约25mg,精密称定，置25ml量瓶中，加乙腈-水(1:1)20ml,超声处理15分钟，加乙腈-水(1:1)稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续[0214]测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1,注入液相色谱仪，测定，即[0215]按照实施例1-7和对比实施例1-2制备得到的产物的CBD含量及四氢大麻酚含量检测结果参见表1及附图1至附图9。[0216]表1.不同制法所得产物其CBD含量及THC检出情况对比色谱图CBD含量(wt%)四氢大麻酚含量产物1未检出产物2图2未检出产物3图3未检出图4未检出产物5图5未检出图6未检出产物7图7未检出对比产物1图8对比产物2图9(大麻二酚)的含量明显高于现有技术制备所得CBD(对比产物1和对比产物2)的含量；采用本发明所述的技术其产物中无THC(四氢大麻酚)检出，而采用现有技术制备所得的产物中规对产品的相关要求。[0219]实验实施例2:不同提取方法对CBD提取率影响的比较[0220](1)原花叶药材含量检测方法[0221]色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A,以水为流动相B,按A(%):B(%)=80:20进行等度洗脱；检测波长为210nm。理论板数按CBD峰计算应不低于2500。[0222]对照品溶液的制备精密称取CBD对照品，加甲醇(1:1)制成每1ml各含0.1mg的对照品溶液，即得；精密称取四氢大麻酚对照品，加甲醇(1:1)制成每1ml各含0.01mg的对照品溶[0223]供试品溶液的制备取本品约1g,精密称定，加甲醇25ml,超声处理15分钟，过滤，再[0224]测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ[0226]色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A,以水为流动相B,按A(%):B(%)=80:20进行等度洗脱；检测波长为210nm。理论板数按CBD峰计算应不低于2500。[0227]对照品溶液的制备精密称取CBD对照品，加甲醇(1:1)制成每1ml各含0.1mg的对照品溶液，即得；精密称取四氢大麻酚对照品，加甲醇(1:1)制成每1ml各含0.01mg的对照品溶[0228]供试品溶液的制备提取液1ml,定容至25ml,用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得。[0229]测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1,注入液相色谱仪，测定，即[0230]采用实施例5-7中的三种方法，即超声提取、回流提取和浸泡提取，得到步骤2)中所述的提取液作为供试品溶液。具体提取率的实验结果见下表2。[0231]表2.三种提取方法提取率试验(以CBD含量为指标)超声提取回流提取浸泡提取(实施例5)(实施例6)(实施例7)[0232]重量或体积由上表2可知，三种提取方法提取效率相当，提取方法的改变对提取率没有影响。在其它技术参数相同的条件下，利用浸泡提取所得产物7中CBD(大麻二酚)的含量与利用超声提取所得产物5中CBD(大麻二酚)的含量无明显差别。进一步说明，本发明的有益效果并非是由于仅是引入了超声提取这一工艺技术导致的。[0235]实验实施例3:不同提取部位所得产物中CBD含量及四氢大麻酚的检出情况对比[0236]检测方法同实验实施例1,对实施例8-10制备得到的产物的CBD含量及四氢大麻酚含量检测结果参见表3。[0237]表3.不同提取部位所得产物其CBD含量及THC检出情况对比产物名称CBD含量(wt%)四氢大麻酚含量(wt%)产物8未检出产物9未检出产物10未检出[0239]由表3可知，本发明的方法同样适用于大麻根、秆芯以及花、叶、籽粕提取得到CBD,并且产物中均无THC(四氢大麻酚)检出。[0240]实验实施例4:采用稳定性试验方法检测不同制法所得产物的稳定性[0241]主要仪器：[0242]药品稳定性试验箱(长期):SHH-250SD,重庆永生实验仪器厂；[0243]药品稳定性试验箱(加速):SHH-250SD,重庆永生实验仪器厂；[0244]高效液相色谱仪：Agilen14/19页14/19页[0245]分析天平：MS-105DU,瑞士梅特勒-托利多；[0246]紫外可见分光光度计：UV-2550,日本岛津；[0247]薄层色谱成像仪：TLCVisualizer,瑞士卡玛；[0248]试验样品：[0249]将按照上述各实施例和对比例的方法制备的样品分别进行加速稳定性试验，检测结果如表4至表12所示。[0250]表4.产物1稳定性试验时间点：第1月第2月第3月第6月取样日期：检测接受标准：方法：结晶符合规定符合规定符合规定符合规定符合规定鉴别供试品色谱与对照品色谱相应的位置符合规定符合规定符合规定符合规定符合规定THC含量≤0.1%未检出未检出未检出未检出未检出微生物中国药典微生物检测法未检出未检出未检出未检出未检出未检出出未检出未检出未检出未检出未检出[0253]表5.产物2稳定性试验时间点：第1月第2月第3月第6月取样日期：检测方法：接受标准：结晶符合规定符合规定符合规定符合规定符合规定鉴别供试品色谱与对照品色谱相应的位置符合规定符合规定符合规定符合规定符合规定THC含量≤0.1%未检出未检出未检出未检出未检出微生物中国药物检测法未检出未检出未检出未检出未检出未检出出未检出未检出未检出未检出未检出表6.产物3稳定性试验时间点：第2月第3月第6月取样日期：检测项目：接受标准：白色、淡黄色粉末或结晶符合规定符合规定符合规定符合规定符合规定鉴别供试品色谱与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。符合规定符合规定符合规定符合规定符合规定THC含量≤0.1%未检出未检出未检出未检出未检出微生物中国药物检测法未检出未检出未检出未检出未检出未检出出未检出未检出未检出未检出未检出表7.产物4稳定性试验CN106831353B说明书16/19页时间点：第1月第2月第3月第6月取样日期：检测项方法：接受标准：白色、淡黄色粉末或结晶符合规定符合规定符合规定符合规定符合规定鉴别供试品色谱与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。符合规定符合规定符合规定符合规定符合规定THC含量≤0.1%未检出未检出未检出未检出未检出微生物中国药物检测法未检出未检出未检出未检出未检出未检出出未检出未检出未检出未检出未检出表8.产物5稳定性试验时间点：第1月第2月第3月第6月取样日期：项目：方法：接受标准：白色、淡黄色粉末或结晶符合规定符合规定符合规定符合规定符合规定鉴别供试品色谱与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。符合规定符合规定符合规定符合规定符合规定THC含量≤0.1%未检出未检出未检出未检出未检出法未检出未检出未检出未检出未检出未检出出未检出未检出未检出未检出未检出表9.产物6稳定性试验时间点：第1月第2月第3月第6月取样日期：方法：接受标准：白色、淡黄色粉末或结晶符合规定符合规定符合规定符合规定定鉴别供试品色谱与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧