2025年中职第一学年（生物技术应用）细胞培养技能试题及答案

2025年中职第一学年（生物技术应用）细胞培养技能试题及答案

（考试时间：90分钟满分100分）班级______姓名______第I卷（选择题，共40分）答题要求：本卷共20小题，每小题2分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。请将正确答案的序号填在括号内。1.细胞培养中常用的培养基是（）A.生理盐水B.血清C.葡萄糖溶液D.磷酸盐缓冲液答案：B2.细胞培养时，对培养环境的pH要求一般在（）A.5.0-6.0B.6.5-7.0C.7.2-7.4D.8.0-9.0答案：C3.细胞培养的无菌操作中，常用的消毒剂是（）A.酒精B.碘伏C.新洁尔灭D.以上都是答案：D4.细胞培养过程中，防止微生物污染的关键是（）A.培养箱的清洁B.培养基的质量C.严格的无菌操作D.细胞的密度答案：C5.用于细胞培养的血清通常来自（）A.人B.牛C.羊D.猪答案：B6.细胞培养时，血清的作用不包括（）A.提供营养物质B.调节pH值C.促进细胞贴壁D.抑制细胞生长答案：D7.细胞培养的温度一般为（）A.20℃B.25℃C.30℃D.37℃答案：D8.细胞培养中，传代培养的目的是（）A.增加细胞数量B.保持细胞活性C.防止细胞老化D.以上都是答案：D9.细胞传代时，胰蛋白酶的作用是（）A.消化细胞间的连接B.分解培养基中的蛋白质C.促进细胞生长D.调节细胞代谢答案：A10.细胞培养过程中，观察细胞形态常用的显微镜是（）A.普通光学显微镜B.电子显微镜C.荧光显微镜D.倒置显微镜答案：D11.细胞培养时，细胞密度过高会导致（）A.细胞生长加快B.细胞代谢增强C.细胞死亡D.细胞分化答案：C12.细胞培养的气体环境主要包括（）A.氧气和二氧化碳B.氮气和氢气C.氧气和氮气D.二氧化碳和氢气答案：A13.细胞培养中，二氧化碳的作用是（）A.调节pH值B.促进细胞呼吸C.提供营养D.抑制微生物生长答案：A14.细胞培养的器皿在使用前需要进行的处理是（）A.清洗B.消毒C.灭菌D.以上都是答案：D15.细胞培养过程中，发现培养基变色，可能的原因是（）A.细胞代谢产物积累B.微生物污染C.培养基过期D.以上都是答案：D16.细胞培养时，常用的细胞冻存液中含有（）A.甘油B.二甲基亚砜C.血清D.以上都是答案：D17.细胞冻存的温度一般为（）A.-20℃B.-80℃C.-196℃D.4℃答案：C18.细胞复苏时，需要将冻存管迅速放入（）A.37℃水浴B.4℃冰箱C.-20℃冰箱D.-80℃冰箱答案：A19.细胞培养中，支原体污染的检测方法不包括（）A.荧光定量PCRB.电子显微镜观察C.细胞形态观察D.酶联免疫吸附试验答案：C20.细胞培养过程中，如何判断细胞是否处于对数生长期（）A.细胞数量快速增加B.细胞形态正常C.培养基pH值稳定D.以上都是答案：D第II卷（非选择题，共60分）（一）填空题（每题2分，共10分）1.细胞培养的基本条件包括合适的培养基、适宜的温度、______、______等。答案：气体环境、无菌环境2.细胞培养中常用的消化液有______和______。答案：胰蛋白酶、胶原酶3.细胞传代的步骤一般包括______、______、______等。答案：消化细胞、离心收集、接种培养4.细胞培养时，常见的污染类型有______污染、______污染和______污染。答案：细菌、真菌、支原体5.细胞冻存的原则是______、______、______。答案：慢冻、快融、适量保护剂（二）简答题（每题5分，共20分）1.简述细胞培养的基本流程。答案：首先准备合适的培养基和培养器皿，进行灭菌处理。然后选取合适的细胞，进行复苏或传代操作，接种到培养器皿中，置于适宜的温度、气体环境等条件下培养，期间要注意观察细胞生长状态，适时进行传代等操作，同时防止污染。2.细胞培养过程中如何防止微生物污染？答案：严格进行无菌操作，包括实验环境的清洁消毒、培养器皿和培养基的灭菌处理、操作人员的规范操作等。在操作过程中，避免交叉污染，定期对培养环境和细胞进行检测，一旦发现污染及时处理。3.简述血清在细胞培养中的作用。答案：血清能提供细胞生长所需的多种营养物质，如氨基酸、维生素、矿物质等；含有多种生长因子，可促进细胞的生长、增殖和分化；还能调节培养基的pH值，并且对细胞有一定的保护作用，有助于维持细胞的正常生理功能。4.细胞传代时需要注意哪些事项？答案：传代时机要合适，当细胞生长达到一定密度时进行传代。消化时间要恰当，避免过度消化或消化不足。传代比例要合理，根据细胞类型和生长状态确定合适的接种密度。操作过程要严格无菌，防止污染。传代后要密切观察细胞的生长情况，及时调整培养条件。（三）实验设计题（10分）设计一个实验，探究不同浓度的生长因子对某种细胞生长的影响。答案：准备若干个培养瓶，分别加入等量且含有不同浓度生长因子的培养基。将同种细胞接种到各个培养瓶中，接种密度相同。置于相同的适宜培养条件下培养，定期观察细胞的生长状态，如细胞数量、细胞形态等。记录不同时间点的数据，分析不同浓度生长因子对细胞生长的影响，如生长速度、增殖能力等，得出相应结论。（四）材料分析题（10分）材料：在细胞培养过程中，某同学发现培养的细胞生长缓慢，培养基颜色变黄，显微镜下观察细胞形态异常。问题：请分析可能导致这些现象的原因，并提出相应的解决措施。答案：细胞生长缓慢可能是培养基营养不足、血清质量不佳、培养条件不合适等原因。培养基颜色变黄可能是细胞代谢产物积累、微生物污染等。细胞形态异常可能是受到污染、培养条件改变、传代不当等。解决措施：更换优质培养基和血清，检查培养条件并调整，检测是否有污染，如有污染及时处理，规范传代操作等。（五）综合应用题（10分）某生物技术公司要进行某种细胞的大规模培养用于生产生物制品，你作为技术人员，请阐述整个细胞培养过程中的关键环节及注意事项。答案：关键环节包括细胞的复苏、培