生物制药层析介质研发工程师岗位招聘考试试卷及答案

生物制药层析介质研发工程师岗位招聘考试试卷及答案生物制药层析介质研发工程师岗位招聘考试试卷及答案一、填空题（共10题，每题1分，共10分）1.用于单抗纯化的核心亲和介质是______。2.阴离子交换介质DEAE的全称为______。3.琼脂糖层析介质的常用交联剂是______。4.疏水相互作用层析的洗脱原理是______。5.单位体积介质结合目标蛋白的量称为______。6.生物制药层析需遵循的核心法规是______。7.金属螯合层析常用的螯合金属离子是______（举1例）。8.硅胶介质适合分离______（小分子/大分子蛋白）。9.层析柱装填的核心要求是______。10.层析介质保存需避免______（导致结构破坏）。答案1.ProteinA亲和介质2.二乙氨基乙基3.环氧氯丙烷4.降低缓冲液盐浓度5.动态载量6.GMP（药品生产质量管理规范）7.Ni²⁺（或Co²⁺等）8.小分子9.介质分布均匀（无气泡、断层）10.冻融二、单项选择题（共10题，每题2分，共20分）1.特异性结合单抗Fc段的介质是？A.DEAE纤维素B.ProteinA琼脂糖C.硅胶D.疏水介质2.DEAE属于哪类离子交换介质？A.强阴离子B.弱阴离子C.强阳离子D.弱阳离子3.琼脂糖介质的缺点是？A.亲水性差B.耐强酸强碱C.孔径固定D.生物相容性低4.疏水层析上样时缓冲液盐浓度应？A.高B.低C.无要求D.与洗脱液相同5.亲和层析的特异性取决于？A.载体材料B.配基类型C.缓冲液pHD.流速6.耐碱性能较好的介质是？A.交联琼脂糖B.硅胶C.葡聚糖D.纤维素7.柱压过高的常见原因不包括？A.粒径过小B.流速过快C.柱床塌陷D.盐浓度低8.重组蛋白精纯常用的层析技术是？A.离子交换B.亲和C.疏水D.以上都有9.GMP要求层析介质需具备？A.可追溯性B.一次性使用C.无动物源成分D.高价格10.组氨酸标签蛋白与哪种金属结合最强？A.Ni²⁺B.Co²⁺C.Cu²⁺D.Zn²⁺答案1-5:BBCAB；6-10:ADDAA三、多项选择题（共10题，每题2分，共20分）1.层析载体材料包括？A.琼脂糖B.葡聚糖C.纤维素D.硅胶2.离子交换介质类型有？A.阴离子（DEAE、Q）B.阳离子（CM、SP）C.混合模式D.疏水3.亲和配基类型包括？A.ProteinAB.染料配基C.金属螯合D.离子交换基团4.层析介质关键指标包括？A.动态载量B.粒径分布C.孔径D.耐化学性5.生物制药层析步骤有？A.捕获B.中间纯化C.精纯D.脱盐6.硅胶介质的缺点是？A.不耐碱B.孔径固定C.亲水性差D.载量低7.琼脂糖介质的优点是？A.亲水性好B.生物相容性高C.孔径可调D.耐多种试剂8.层析需控制的参数有？A.pHB.盐浓度C.流速D.温度9.ProteinA可结合的蛋白有？A.人源单抗B.鼠源IgGC.Fc融合蛋白D.白蛋白10.层析介质修饰方法包括？A.交联B.配基偶联C.表面改性D.灭菌处理答案1.ABCD；2.AB；3.ABC；4.ABCD；5.ABCD；6.ABC；7.ABCD；8.ABCD；9.ABC；10.ABC四、判断题（共10题，每题2分，共20分）1.高盐浓度促进离子交换蛋白结合（）2.ProteinA只结合人源单抗（）3.琼脂糖孔径与交联度无关（）4.疏水层析需低盐上样（）5.硅胶适合分离大分子蛋白（）6.GMP要求介质可追溯（）7.亲和洗脱只能用特异性试剂（）8.层析柱装填常用匀浆法（）9.DEAE是阳离子交换介质（）10.层析介质保存需避免冻融（）答案1.×；2.×；3.×；4.×；5.×；6.√；7.×；8.√；9.×；10.√五、简答题（共4题，每题5分，共20分）1.简述离子交换介质的选择原则。答案：①电荷类型：缓冲液pH＞蛋白pI（带负电）选阴离子交换（DEAE、Q），pH＜pI（带正电）选阳离子交换（CM、SP）；②介质特性：考虑动态载量、粒径（小粒径载量高但柱压低）、耐化学性（交联琼脂糖耐碱）；③法规与兼容性：符合GMP（无菌、无热原），与下游工艺兼容。2.比较琼脂糖与硅胶载体的差异。答案：①亲水性：琼脂糖好（适合蛋白），硅胶差（适合小分子）；②耐化学性：琼脂糖耐弱酸碱，硅胶不耐碱（pH＞8溶解）；③孔径：琼脂糖可调（匹配蛋白大小），硅胶固定；④应用：琼脂糖用于生物大分子，硅胶用于小分子杂质分离。3.简述ProteinA亲和层析的原理及应用。答案：原理：ProteinA特异性结合IgG的Fc段（不结合Fab），通过“结合-洗脱”纯化。应用：单抗、Fc融合蛋白的捕获步骤，高特异性、高载量，可从粗品中富集目标蛋白，纯度达90%以上，是单抗纯化核心技术。4.层析介质研发的关键性能指标有哪些？答案：①动态载量（影响生产效率）；②粒径分布（均一性减少柱压波动）；③孔径（匹配蛋白大小）；④耐化学性（耐受清洗/灭菌）；⑤生物相容性（无蛋白吸附、无毒）；⑥法规符合性（GMP可追溯、无热原）。六、讨论题（共2题，每题5分，共20分）1.如何优化层析介质动态载量以提高生产效率？答案：①介质设计：调整配基密度（避免空间位阻）、优化载体孔径（匹配蛋白）、提高均一性；②工艺参数：控制上样流速（低于穿透流速）、调整pH/盐浓度（增强结合）；③设备匹配：选用合适柱径/柱高比（1:5-1:10），减少壁效应。通过小试验证载量与流速的平衡，实现单位时间产量最大化。2.层析介质无菌/