生物制药纯化工艺优化工程师岗位招聘考试试卷及答案

生物制药纯化工艺优化工程师岗位招聘考试试卷及答案生物制药纯化工艺优化工程师岗位招聘考试试卷第一部分填空题（10题，1分/题）1.蛋白A亲和层析常用于______类药物的纯化。2.离子交换层析中，目标蛋白带负电时应选择______型树脂。3.切向流过滤（TFF）的截留分子量（MWCO）单位是______。4.病毒灭活低pH孵育法的pH范围通常为______。5.尺寸排阻层析（SEC）基于分子的______差异分离。6.缓冲液常用盐成分除NaCl外，还常用______（合理即可）。7.纯化收率=（______）×100%。8.除菌过滤常用滤膜孔径是______μm。9.去除内毒素的常用层析方法是______（合理即可）。10.亲和层析中目标蛋白与配基为______结合。第二部分单项选择题（10题，2分/题）1.分离分子量差异大的蛋白首选______。A.离子交换层析B.尺寸排阻层析C.亲和层析D.疏水层析2.TFF截留率计算公式为______。A.(C渗透/C保留)×100%B.(1-C渗透/C进料)×100%C.(C保留/C渗透)×100%3.病毒灭活低pH孵育时间通常为______。A.1-2hB.<30minC.4-6hD.>12h4.不属于纯化关键质量属性（CQA）的是______。A.纯度B.收率C.内毒素D.HCP残留5.SEC中分子量越大，保留时间______。A.越长B.越短C.不变D.无规律6.蛋白A层析常用洗脱试剂是______。A.高盐B.低pH甘氨酸缓冲液C.高pH缓冲液D.乙醇7.超滤膜不常用材质是______。A.PESB.CAC.PTFED.RC8.目标蛋白pI=5.5，阳离子交换平衡pH选______。A.3.0B.4.5C.6.5D.7.59.中性条件下内毒素带______。A.正电B.负电C.中性D.无电荷10.TFF透析过滤（Diafiltration）主要目的是______。A.浓缩B.除小分子C.浓缩+除杂D.换缓冲液第三部分多项选择题（10题，2分/题）1.纯化工艺优化需考虑______。A.收率B.纯度C.成本D.法规2.常见层析类型包括______。A.亲和B.离子交换C.SECD.疏水层析3.TFF操作关键参数有______。A.跨膜压（TMP）B.通量C.MWCOD.流速4.病毒灭活验证需满足______。A.灭活因子选择B.条件验证C.病毒指示物D.残留检测5.纯化CQA包括______。A.纯度B.活性C.内毒素D.HCP残留6.离子交换洗脱方法有______。A.变pHB.变盐浓度C.变速D.变温7.SEC应用场景包括______。A.分子量测定B.聚集体去除C.换缓冲液D.杂质分离8.亲和层析配基类型有______。A.蛋白A/GB.抗体C.金属螯合物D.染料9.影响超滤截留率的因素有______。A.蛋白浓度B.TMPC.pHD.膜材质10.内毒素去除方法有______。A.阴离子交换B.疏水层析C.超滤D.活性炭吸附第四部分判断题（10题，2分/题）1.蛋白A仅用于单抗纯化。（）2.SEC基于电荷差异分离。（）3.TFF截留率越高越好。（）4.病毒灭活需放在纯化最后一步。（）5.缓冲液pH不影响蛋白稳定性。（）6.离子交换高盐洗脱是盐离子竞争结合。（）7.TFF通量比死端过滤高。（）8.内毒素可通过0.22μm滤膜。（）9.亲和洗脱后需立即中和pH。（）10.纯化收率越高无需考虑纯度。（）第五部分简答题（4题，5分/题）1.简述蛋白A层析在单抗纯化中的优势及挑战。2.影响TFF截留率的主要因素有哪些？3.如何确定纯化工艺的关键工艺参数（CPP）？4.内毒素去除的常用方法及适用场景。第六部分讨论题（2题，5分/题）1.单抗蛋白A层析收率突然下降30%，分析可能原因及排查步骤。2.结合ICHQ2，谈谈对纯化工艺验证的理解，重点说明PPQ关键关注点。---答案第一部分填空题答案1.单抗/单克隆抗体2.阴离子3.kDa4.3.0-4.05.分子量/大小6.Na₂HPO₄/柠檬酸三钠（合理即可）7.（终产物浓度×终体积）/（初始浓度×初始体积）8.0.229.阴离子交换层析（合理即可）10.特异性第二部分单项选择题答案1.B2.B3.A4.B5.B6.B7.C8.B9.B10.C第三部分多项选择题答案1.ABCD2.ABCD3.ABCD4.ABCD5.ABCD6.AB7.ABCD8.ABCD9.ABCD10.ABCD第四部分判断题答案1.×2.×3.×4.×5.×6.√7.√8.√9.√10.×第五部分简答题答案1.优势：①特异性强，直接捕获单抗Fc段；②初始纯度高，去除大部分HCP/DNA；③步骤简化。挑战：①树脂昂贵；②配基易脱落；③低pH洗脱可能影响活性；④再生次数有限。2.①MWCO（越小截留率越高）；②蛋白浓度（浓度升高截留率上升）；③TMP（过高易污染）；④缓冲液pH/盐浓度（影响蛋白构象）；⑤膜材质（吸附性差异）。3.①风险评估（识别影响CQA的参数）；②DoE实验（筛选潜在CPP，优化范围）；③工艺验证（PPQ确认可靠性）；④法规遵循（ICHQ8要求）。4.①阴离子交换（目标蛋白带正电时）；②疏水层析（利用疏水结合差异）；③超滤（目标蛋白分子量远大于内毒素）；④活性炭吸附（粗品初步除杂）。第六部分讨论题答案1.可能原因：①树脂污染（HCP/DNA堵塞）；②洗脱条件偏离（pH/浓度不足）；③上样量过载；④再生不完全；⑤目标蛋白降解。排查步骤：①检测上样液浓度/活性；②验证洗脱缓冲液参数；③评估树脂再生记录；④检测树脂结合容量