基因载体构建设备运维技师（初级）考试试卷及答案

基因载体构建设备运维技师（初级）考试试卷及答案一、填空题（每题1分，共10分）1.基因载体构建中，限制性内切酶识别的序列是______2.移液器校准常用的标准物质是______3.离心机转子使用后需______存放4.PCR仪的核心温度控制部件是______5.凝胶成像仪常用的激发光源是______6.电泳仪的主要输出参数包括电压和______7.超净工作台使用前需开启______灭菌8.基因载体连接常用的酶是______9.设备运维记录必须包含的基础信息是______10.恒温摇床的关键运行参数是温度和______二、单项选择题（每题2分，共20分）1.移液器吸液时，枪头应浸入液面下（）A.1-2mmB.5mm以上C.接触容器底部D.悬空2.离心机使用前需确认样品管（）A.空载B.对称放置C.装满样品D.无固定3.PCR仪热盖温度通常设置为（）A.95℃B.105℃C.120℃D.80℃4.凝胶成像仪拍摄时需关闭（）A.紫外光B.白光C.背景灯D.所有光源5.电泳槽使用后应（）A.立即浸泡B.晾干存放C.装满水D.高温灭菌6.超净工作台紫外灭菌时间一般为（）A.5分钟B.15-30分钟C.1小时D.2小时7.DNA连接反应的适宜温度是（）A.4℃B.16℃C.37℃D.65℃8.设备故障报修时需先记录（）A.故障现象B.维修人员C.耗材型号D.环境温度9.恒温摇床转速的单位是（）A.rpmB.km/hC.gD.L/min10.限制性内切酶的长期保存温度是（）A.-20℃B.-80℃C.4℃D.室温三、多项选择题（每题2分，共20分）1.基因载体构建常用设备包括（）A.移液器B.离心机C.PCR仪D.显微镜2.移液器校准的注意事项有（）A.环境温度稳定B.用超纯水C.贴校准标签D.每年1次3.离心机使用禁忌包括（）A.转子不平衡B.超最大转速C.样品溢出D.空载运行4.PCR仪维护要点包括（）A.清洁热盖B.校准温度C.更换灯管D.检查模块5.超净工作台维护内容有（）A.换HEPA滤网B.清洁台面C.检查风速D.换紫外灯6.凝胶电泳相关设备有（）A.电泳仪B.电泳槽C.凝胶成像仪D.恒温箱7.基因载体构建常用耗材有（）A.枪头B.离心管C.琼脂糖D.培养皿8.设备运维记录需包含（）A.设备编号B.运维内容C.操作人员D.下次运维时间9.恒温摇床故障排查方向包括（）A.温度异常B.转速异常C.噪音过大D.电源问题10.限制性内切酶使用注意事项（）A.冰上操作B.避免反复冻融C.核对酶切位点D.计算酶量四、判断题（每题2分，共20分）1.移液器吸液后可长时间悬空等待（）2.不同型号离心机转子可通用（）3.PCR仪热盖可防止样品蒸发（）4.凝胶成像仪紫外灯可直接照皮肤（）5.电泳电压越高分离效果越好（）6.超净工作台开启后可立即操作（）7.T4连接酶可连接平末端和粘性末端（）8.初级技师可自行拆解故障设备（）9.恒温摇床转速越高振荡效果越好（）10.限制性内切酶保存需加甘油（）五、简答题（每题5分，共20分）1.简述移液器日常维护的3个要点2.离心机使用前需检查哪些内容？3.PCR仪热盖的作用及维护方法？4.超净工作台使用前的准备步骤？六、讨论题（每题5分，共10分）1.分析凝胶成像仪拍摄效果差的常见原因及解决方法2.讨论基因载体构建中设备运维的重要性及日常注意事项---答案部分一、填空题答案1.回文序列2.超纯水3.清洁干燥4.温度控制模块5.紫外灯（或LED灯）6.电流7.紫外灯8.T4DNA连接酶9.设备编号（或运维日期）10.转速二、单项选择题答案1-5:ABBCB6-10:BBAAB三、多项选择题答案1.ABC2.ABC3.ABC4.ABD5.ABCD6.ABC7.ABC8.ABCD9.ABCD10.ABCD四、判断题答案1.×2.×3.√4.×5.×6.×7.√8.×9.×10.√五、简答题答案1.①每次用后卸枪头，避免液体残留腐蚀活塞；②用75%酒精擦外部，忌有机溶剂；③长期不用调至最大量程垂直存放；④每年校准1次（答3点即可）。2.①转子型号匹配、无裂纹；②样品管对称，重量差合规；③转子盖拧紧；④电源正常；⑤转速不超转子限值；⑥离心室无杂物。3.作用：防止样品蒸发、管盖凝结。维护：①用后擦热盖残留；②检查密封圈，老化更换；③定期校准温度；④无样品不长期加热。4.①提前30分钟开风机+紫外灭菌；②关紫外开照明，待气流稳定5-10分钟；③75%酒精擦台面；④检查风速（0.3-0.5m/s）；⑤备耗材放中央；⑥穿无菌服戴手套。六、讨论题答案1.原因：①紫外灯老化；②上样量不当；③凝胶浓度不符；④镜头/滤光片污染；⑤曝光时间错。解决：①1000小时换紫外灯；②调整上样量1-5μL；③按片段选凝胶浓度（1kb用1%）；④酒精擦镜头滤光片；⑤