2026年大学本科大四（生物技术）基因工程综合测试题及答案

2025年大学本科大四（生物技术）基因工程综合测试题及答案

（考试时间：90分钟满分100分）班级______姓名______第I卷（选择题，共40分）每题只有一个正确答案，请将正确答案填在括号内。(总共20题，每题2分，每题给出的选项中，只有一项符合题目要求)1.基因工程中常用的载体不包括以下哪种？（）A.质粒B.噬菌体C.动植物病毒D.染色体答案：D2.限制性核酸内切酶切割DNA后产生的末端类型不包括（）A.黏性末端B.平末端C.钝性末端D.发卡末端答案：D3.以下关于DNA连接酶的作用，正确的是（）A.连接DNA单链B.连接DNA双链C.连接RNA单链D.连接RNA双链答案：B4.基因工程中获取目的基因的方法不包括（）A.从基因组文库中获取B.从cDNA文库中获取C.人工合成D.从蛋白质中提取答案：D5.以下哪种技术可用于基因的体外扩增？（）A.PCRB.核酸分子杂交C.蛋白质电泳D.细胞培养答案：A6.用于将目的基因导入植物细胞的常用方法是（）A.显微注射法B.电穿孔法C.农杆菌转化法D.脂质体介导法答案：C7.基因工程中筛选重组体的方法不包括（）A.抗生素抗性筛选B.蓝白斑筛选C.核酸分子杂交筛选D.细胞形态筛选答案：D8.以下关于基因表达载体的构建，说法错误的是（）A.要有启动子B.要有终止子C.要有标记基因D.不需要复制原点答案：D9.基因工程中常用的工具酶不包括（）A.限制性核酸内切酶B.DNA连接酶C.DNA聚合酶D.淀粉酶答案：D10.以下哪种生物不是基因工程常用的受体细胞？（）A.大肠杆菌B.酵母菌C.植物细胞D.病毒答案：D11.核酸分子杂交技术不包括（）A.Southern杂交B.Northern杂交C.Western杂交D.原位杂交答案：C12.基因工程中用于检测目的基因是否转录的方法是（）A.Southern杂交B.Northern杂交C.Western杂交D.免疫荧光检测答案：B13.以下关于蛋白质工程的说法，正确的是（）A.直接改造蛋白质B.改造基因C.与基因工程无关D.只改造蛋白质的空间结构答案：B14.基因工程中常用的载体应具备的条件不包括（）A.有多个限制酶切割位点B.有标记基因C.能在受体细胞中自主复制D.能表达目的基因答案：D15.以下哪种技术可用于检测目的基因是否表达出蛋白质？（）A.Southern杂交B.Northern杂交C.Western杂交D.荧光定量PCR答案：C16.基因工程中用于将目的基因导入动物细胞的常用方法是（）A.显微注射法B.电穿孔法C.磷酸钙转染法D.脂质体介导法答案：A17.以下关于基因文库的说法，错误的是（）A.基因组文库包含了某种生物的全部基因B.cDNA文库只包含某种生物的部分基因C.构建基因文库有利于目的基因的筛选D.基因文库中的基因都能表达答案：D18.基因工程中用于切割目的基因的工具是（）A.限制性核酸内切酶B.DNA连接酶C.DNA聚合酶D.解旋酶答案：A19.以下哪种技术可用于基因的定点突变？（）A.PCR技术B.核酸分子杂交技术C.蛋白质工程技术D.基因编辑技术答案：D20.基因工程中用于将目的基因导入微生物细胞的常用方法是（）A.显微注射法B.电穿孔法C.氯化钙转化法D.脂质体介导法答案：C第II卷（非选择题，共60分）二、填空题（每题2分，共10分）1.基因工程的核心步骤是________________。答案：基因表达载体的构建2.限制性核酸内切酶识别的DNA序列具有________________特点。答案：特异性3.PCR技术的原理是________________。答案：DNA双链复制4.基因工程中常用的标记基因有________________等。（写出一种即可）答案：抗生素抗性基因5.蛋白质工程的基本途径是从预期的蛋白质功能出发→________________→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。答案：设计预期的蛋白质结构三、简答题（每题10分，共30分）1.简述基因工程的基本操作流程。答案：基因工程的基本操作流程包括：获取目的基因，可从基因组文库、cDNA文库中获取或人工合成；构建基因表达载体，将目的基因与启动子、终止子、标记基因等连接；将目的基因导入受体细胞，根据受体细胞类型选择合适方法，如导入植物细胞用农杆菌转化法，导入动物细胞用显微注射法，导入微生物细胞用氯化钙转化法等；筛选含有目的基因的受体细胞，利用抗生素抗性筛选、蓝白斑筛选等方法；目的基因的表达与检测，检测目的基因是否转录用Northern杂交，检测是否表达出蛋白质用Western杂交等。2.说明限制性核酸内切酶在基因工程中的作用及特点。答案：限制性核酸内切酶在基因工程中用于切割DNA分子。它能识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列，并在特定位置切割DNA，产生黏性末端或平末端。其特点包括：具有特异性，每种酶识别特定的核苷酸序列；切割位点具有专一性；切割后的DNA末端可用于后续的连接等操作，是基因工程中重要的工具酶，为获取目的基因、构建基因表达载体等提供了关键手段。3.简述核酸分子杂交技术的原理及应用。答案：核酸分子杂交技术的原理是利用核酸分子的变性和复性特点，使来源不同的DNA或RNA单链在一定条件下按照碱基互补配对原则形成杂交双链。其应用广泛，如Southern杂交用于检测DNA，可分析基因组结构、基因定位等；Northern杂交用于检测RNA，可研究基因转录情况；原位杂交用于在细胞或组织水平定位特定核酸序列，还可用于基因诊断、疾病研究等领域，帮助了解基因的表达和分布情况。四、分析题（每题10分，共20分）材料：在基因工程实验中，科研人员将某目的基因导入大肠杆菌细胞后，通过抗生素抗性筛选得到了一些可能含有重组质粒的菌落。然后对这些菌落进行进一步检测。1.请分析如何利用核酸分子杂交技术检测目的基因是否成功导入大肠杆菌细胞并转录？答案：首先提取大肠杆菌细胞中的总RNA，通过Northern杂交进行检测。将提取的RNA转移到固相支持物上，与标记的目的基因探针进行杂交。如果能形成杂交双链，说明目的基因成功转录产生了相应的RNA。因为Northern杂交的原理是利用核酸分子杂交，只有当目的基因转录出的RNA与探针碱基互补配对时，才会出现杂交信号，从而判断目的基因是否转录。2.若检测发现部分菌落中目的基因未成功表达出蛋白质，可能的原因有哪些？答案：可能原因有多种。一是基因表达载体构建有误，比如启动子功能异常，无法有效启动目的基因转录；或者终止子位置不当，导致转录提前终止。二是导入的目的基因发生了突变，使其编码的蛋白质失去功能或无法正常表达。三是大肠杆菌细胞内的翻译系统存在问题，如缺乏必要的翻译因子，影响了蛋白质的合成过程。四是可能存在基因沉默现象，使得目的基因不能正常表达。五、设计题（10分）设计一个利用基因工程技术提高植物抗虫能力的方案。答案：首先从抗虫生物中获取抗虫基因，比如从某种抗虫的细菌中分离出抗虫蛋白基因。然后构建基因表达载