2025年大学生物技术（细胞培养技术）试题及答案

2025年大学生物技术（细胞培养技术）试题及答案

（考试时间：90分钟满分100分）班级______姓名______第I卷（选择题，共40分）答题要求：本卷共20小题，每小题2分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。请将正确答案的序号填在括号内。1.细胞培养技术中，最常用的基础培养基是（）A.DMEM培养基B.RPMI-1640培养基C.MEM培养基D.F-12培养基2.细胞培养时，血清的主要作用不包括（）A.提供营养物质B.促进细胞贴壁C.调节细胞代谢D.抑制细胞生长3.细胞培养过程中，防止微生物污染的关键措施是（）A.严格的无菌操作B.使用抗生素C.定期更换培养基D.控制培养温度4.细胞传代培养时，一般选择细胞处于（）时进行传代。A.潜伏期B.对数生长期C.平台期D.衰退期5.以下哪种细胞系常用于肿瘤研究（）A.NIH/3T3细胞B.HEK293细胞C.Hela细胞D.CHO细胞6.细胞培养箱中，二氧化碳的作用是（）A.调节pH值B.提供营养C.促进细胞呼吸D.抑制微生物生长7.细胞冻存时，常用的保护剂是（）A.DMSOB.甘油C.乙醇D.甲醛8.细胞复苏时，正确的操作顺序是（）A.37℃水浴快速解冻，离心弃上清，加入新鲜培养基培养B.4℃冰箱解冻，离心弃上清，加入新鲜培养基培养C.室温解冻，离心弃上清，加入新鲜培养基培养D.直接将冻存管放入培养箱中解冻培养9.细胞培养过程中，检测细胞活力常用的方法是（）A.台盼蓝染色法B.结晶紫染色法C.苏木精染色法D.伊红染色法10.用于细胞培养的水，一般要求是（）A.蒸馏水B.去离子水C.双蒸水D.超纯水11.细胞培养瓶使用前通常需要进行的处理是（）A．高压灭菌B.紫外线照射C.酒精擦拭D.烘干12.细胞培养过程中，发现培养基颜色变黄，可能的原因是（）A.细胞代谢产物积累B.培养基变质C.培养箱温度过高D.二氧化碳浓度过高13.以下哪种细胞培养技术可用于大规模生产生物制品（）A.悬浮培养B.贴壁培养C.微载体培养D.以上均可14.细胞培养时，支原体污染的检测方法不包括（）A.荧光定量PCR检测B.相差显微镜观察C.革兰氏染色D.支原体培养检测15.细胞培养所用的血清，通常需要经过（）处理。A.过滤除菌B.高温灭菌C.紫外线照射D.化学消毒16.细胞培养过程中，胰蛋白酶的作用是（）A.消化细胞间的连接B.分解培养基中的蛋白质C.促进细胞生长D.抑制细胞凋亡17.对于原代细胞培养，以下说法正确的是（）A.原代细胞培养比传代细胞培养更容易B.原代细胞培养能保持细胞的原始特性C.原代细胞培养不需要特殊条件D.原代细胞培养只能传代一次18.细胞培养过程中，如何判断细胞是否处于对数生长期（）A.细胞形态饱满，生长迅速B.细胞数量不再增加C.细胞开始出现死亡D.培养基颜色变深19.细胞培养时，常用的抗生素不包括（）A.青霉素B.链霉素C.庆大霉素D.胰岛素20.细胞培养技术中，细胞冻存的温度一般是（）A.-20℃B.-80℃C.-196℃D.-70℃第II卷（非选择题，共60分）（一）填空题（共15分）答题要求：请在横线上填写正确答案。1.细胞培养的基本条件包括合适的培养基、适宜的温度、______、______等。2.细胞培养过程中，常见的污染类型有细菌污染、______污染、______污染。3.细胞传代培养的步骤一般包括______、______、接种细胞等。4.细胞培养所用的器皿，如培养瓶、吸管等，在使用前需要进行______处理，以去除可能存在的杂质和微生物。5.细胞培养时，血清的质量对细胞生长至关重要，优质血清应具备______、______等特点。（二）简答题（共20分）答题要求：简要回答问题，条理清晰。1.简述细胞培养过程中防止微生物污染的主要措施。2.细胞冻存和复苏的基本原则是什么？3.如何选择合适的细胞培养基？4.细胞培养过程中，如何进行细胞计数？（三）实验设计题（共15分）答题要求：根据题目要求，设计合理的实验方案。请设计一个实验，比较两种不同品牌血清对细胞生长的影响。（四）材料分析题（共10分）材料：在细胞培养过程中，研究人员发现某细胞系在培养一段时间后，细胞生长速度明显减慢，细胞形态也发生了改变。通过检测发现培养基的pH值下降，乳酸含量升高。问题：请分析可能导致这些现象的原因，并提出相应的解决措施。（五）论述题（共20分）答题要求：论述全面，观点明确，论据充分。论述细胞培养技术在生物技术领域的重要性及应用前景。答案：1.A2.D3.A4.B5.C6.A7.A8.A9.A10.C11.A12.A13.D14.C15.A16.A17.B18.A19.D20.B填空题答案：1.合适的气体环境、无菌条件2.真菌污染、支原体污染3.消化细胞、离心收集细胞4.清洗和消毒5.无病毒、无支原体简答题答案：1.主要措施包括严格的无菌操作，如在超净工作台内进行操作，操作人员穿戴无菌工作服、口罩、手套等；对培养基、血清等进行过滤除菌处理；定期对培养环境、培养器皿等进行消毒；避免交叉污染，不同细胞系的操作工具分开使用等。2.细胞冻存的基本原则是慢冻，采用梯度降温的方式，使细胞内的水分逐渐渗出，减少冰晶形成对细胞的损伤。细胞复苏的基本原则是快融，将冻存细胞迅速放入37℃水浴中快速解冻，减少冰晶在细胞内的停留时间。3.选择合适的细胞培养基需要考虑细胞类型，不同细胞对营养成分的需求不同；培养基的成分，如氨基酸、维生素、无机盐等的种类和含量；血清的质量和添加量；培养基的pH值、渗透压等是否适合细胞生长；还要考虑成本和来源的稳定性等因素。4.细胞计数可采用血细胞计数板法。将细胞悬液稀释到合适浓度，取一定体积的稀释液加入血细胞计数板的计数室，在显微镜下计数四角和中央大方格内的细胞数，按照公式计算细胞浓度。公式为：细胞浓度（个/mL）=（N/5）×10000×稀释倍数，其中N为计数的细胞总数。实验设计题答案：实验方案如下：1.准备两种不同品牌的血清，分别标记为血清A和血清B。2.选择同一细胞系，将细胞接种到多个培养瓶中，分为三组，每组若干个培养瓶。3.第一组培养瓶中加入血清A，第二组培养瓶中加入血清B，第三组培养瓶中加入不含血清的基础培养基作为对照。4.在相同的培养条件下，如温度、气体环境等，培养细胞一段时间。5.定期观察细胞的生长情况，如细胞形态、生长速度等，并记录。6.培养结束后，通过细胞计数等方法比较三组细胞的生长情况，分析两种血清对细胞生长的影响。材料分析题答案：可能原因：细胞代谢产生的酸性物质导致培养基pH值下降，乳酸含量升高，进而影响细胞生长环境，导致细胞生长速度减慢和形态改变。解决措施：更换新鲜的培养基，去除代谢产物；适当增加换液频率；检查培养条件是否合适，如温度、气体环境等；检测细胞是否受到污染，如有污染及时采取相应措施。论述题答案：细胞培养技术在生物技术领域具有极其重要的地位。它是生物技术研究的基础，为基因工程、细胞工程、蛋白质工程等提供了关键的技术支持。通过细胞培养