CAR-T 细胞制备设备无菌操作技师（初级）考试试卷及答案

CAR-T细胞制备设备无菌操作技师（初级）考试试卷及答案一、填空题（每题1分，共10分）1.无菌操作的核心原则是______。答案：防止微生物污染2.CAR-T细胞制备中分离T细胞的常用设备是______。答案：磁珠分选仪3.无菌操作区域空气洁净度等级一般要求______级。答案：百4.培养基非高温灭菌方法是______。答案：过滤除菌5.哺乳动物细胞培养适宜温度是______℃。答案：376.无菌操作用生物安全柜级别是______级。答案：II7.手部消毒需持续______分钟。答案：2-38.细胞计数常用仪器是______。答案：血细胞计数板9.CAR-T靶点多为______相关抗原。答案：肿瘤10.皮肤消毒常用试剂是______。答案：75%酒精二、单项选择题（每题2分，共20分）1.手套污染后应______。A.继续用B.立即换C.酒精擦D.晾干用答案：B2.生物安全柜气流方向是______。A.内→外B.外→内C.上下循环D.左右循环答案：A3.培养基过滤滤膜孔径______μm。A.0.1B.0.22C.0.45D.0.8答案：B4.细胞培养箱CO₂浓度______%。A.5B.10C.15D.20答案：A5.无菌物品应放生物安全柜______。A.风口B.中央区C.边缘D.角落答案：B6.磁珠分离目的是______。A.富集T细胞B.杀肿瘤细胞C.激活T细胞D.冻存细胞答案：A7.无菌区入口应设______。A.洗手池B.鞋柜C.风淋室D.灭火器答案：C8.完全培养基储存温度______。A.4℃B.-20℃C.37℃D.室温答案：A9.细胞冻存关键是控制______。A.降温速度B.冻存液体积C.细胞浓度D.冻存时间答案：A10.生物安全柜使用前检查______。A.气流速度B.紫外线强度C.培养基温度D.细胞活力答案：A三、多项选择题（每题2分，共20分）1.无菌操作前个人准备包括______。A.换无菌服B.戴无菌手套C.戴口罩帽子D.剪指甲答案：ABCD2.CAR-T无菌操作关键步骤______。A.细胞分离B.转染C.培养D.冻存答案：ABCD3.生物安全柜注意事项______。A.不挡风口B.不放无关物C.慢动作D.定期检测答案：ABCD4.培养基质量控制______。A.无菌性B.pH值C.渗透压D.细胞毒性答案：ABCD5.细胞培养无菌要求______。A.设备无菌B.试剂无菌C.操作无菌D.环境无菌答案：ABCD6.CAR-T设备日常维护______。A.清洁消毒B.性能校准C.耗材更换D.记录维护答案：ABCD7.污染防控措施______。A.定期灭菌B.规范操作C.环境监测D.个人防护答案：ABCD8.细胞冻存液成分______。A.培养基B.血清C.DMSOD.抗生素答案：ABC9.生物安全柜类型______。A.I级B.II级C.III级D.IV级答案：ABC10.CAR-T关键试剂______。A.磁珠B.病毒载体C.细胞因子D.冻存液答案：ABCD四、判断题（每题2分，共20分）1.无菌操作可触碰无菌物品表面。答案：×2.生物安全柜可放个人水杯。答案：×3.培养基灭菌后需冷却至37℃使用。答案：√4.培养箱温度波动±0.5℃不影响细胞。答案：×5.无菌操作前需换无菌实验服。答案：√6.磁珠分离后需去磁珠才能回输。答案：√7.洁净度越高操作成本越低。答案：×8.高浓度细胞计数需稀释。答案：√9.紫外线消毒后需通风30分钟。答案：√10.过滤除菌培养基无需测无菌性。答案：×五、简答题（每题5分，共20分）1.简述CAR-T无菌操作核心要求。答案：①环境：操作区达百级，定期监测洁净度；②物品：试剂/耗材灭菌，使用前查无菌；③操作：避免触碰无菌区，动作轻柔防气溶胶；④防护：戴无菌手套/口罩，不随意离区；⑤设备：生物安全柜/培养箱定期消毒，使用前验证性能。2.生物安全柜使用前准备步骤。答案：①检查：柜门关闭，风口无遮挡；②预热：提前30分钟开机，调气流正常；③消毒：紫外线30分钟，通风10分钟；④备物：无菌耗材/试剂入柜，不挡风口；⑤防护：换无菌服，戴口罩手套；⑥验证：烟雾测试气流，无泄漏。3.细胞培养常见污染及防控。答案：污染类型：细菌（浑浊、pH变）、真菌（霉菌丝）、支原体（生长慢）、交叉污染（形态异常）。防控：①无菌操作；②试剂灭菌；③环境监测；④个人防护；⑤污染细胞立即高压灭菌。4.CAR-T培养基质量控制要点。答案：①无菌性：过滤后无菌试验；②理化：pH7.2-7.4，渗透压280-320mOsm/kg；③毒性：L929细胞检测无毒性；④细胞因子：符合IL-2等浓度要求；⑤稳定：定期检测，不过期；⑥批次一致：预实验验证不同批次。六、讨论题（每题5分，共10分）1.无菌操作失误后果及改进措施。答案：后果：细胞污染报废，延误治疗；交叉污染引发伦理风险；感染患者致不良反应。改进：①强化培训，考核上岗；②严格执行SOP；③实时监测洁净度；④建立污染预警；⑤强制规范防护。2.提升无菌操