2025年大学医学实验技术（实验操作方法）试题及答案

2025年大学医学实验技术（实验操作方法）试题及答案

（考试时间：90分钟满分100分）班级______姓名______第I卷（选择题，共40分）本大题共20小题，每小题2分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。1.在进行细胞培养时，对培养液的pH值要求较为严格，一般最适宜的pH范围是（）A.6.0-6.4B.6.4-6.8C.7.2-7.4D.7.6-8.02.以下哪种灭菌方法常用于玻璃器皿的灭菌（）A.高压蒸汽灭菌B.干热灭菌C.紫外线灭菌D.化学药剂灭菌3.进行蛋白质定量分析时，常用的方法是（）A.双缩脲法B.斐林试剂法C.碘量法D.酸碱滴定法4.在核酸提取过程中，用于沉淀核酸的常用试剂是（）A.乙醇B.丙酮C.氯仿D.乙醚5.细胞计数时，常用的计数板是（）A.血细胞计数板B.细菌计数板C.真菌计数板D.病毒计数板6.下列哪种显微镜常用于观察细胞的内部结构（）A.光学显微镜B.电子显微镜C.体视显微镜D.荧光显微镜7.酶活性测定中，反应体系的温度一般控制在（）A.20℃B.30℃C.37℃D.45℃8.制备抗体时，常用的动物是（）A.小鼠B.大鼠C.兔子D.以上都是9.在PCR反应中，需要的酶是（）A.DNA聚合酶B.RNA聚合酶C.逆转录酶D.限制性内切酶10.蛋白质电泳分离中，常用的缓冲液是（）A.Tris-HCl缓冲液B.磷酸缓冲液C.硼酸缓冲液D.柠檬酸缓冲液11.细胞培养箱中，维持细胞生长的气体环境主要是（）A.氧气和二氧化碳B.氮气和二氧化碳C.氢气和二氧化碳D.氧气和氮气12.用于固定组织的常用固定液是（）A.甲醛B.乙醇C.丙酮D.冰醋酸13.以下哪种技术可用于基因的克隆（）A.PCR技术B.基因芯片技术C.蛋白质印迹技术D.免疫组化技术14.在微生物培养中，接种环常用的灭菌方法是（）A.灼烧灭菌B.高压蒸汽灭菌C.干热灭菌D.化学药剂灭菌15.测定血清中谷丙转氨酶活性时，底物是（）A.丙酮酸和谷氨酸B.丙氨酸和α-酮戊二酸C.天门冬氨酸和α-酮戊二酸D.乳酸和丙酮酸16.进行细胞转染时，常用的转染试剂是（）A.LipofectamineB.胰蛋白酶C.胶原酶D.链霉蛋白酶17.蛋白质的二级结构不包括（）A.α-螺旋B.β-折叠C.无规卷曲D.结构域18.核酸分子杂交技术中，常用的探针标记物是（）A.放射性同位素B.荧光素C.生物素D.以上都是19.在细胞凋亡检测中，常用的方法是（）A.台盼蓝染色B.碘化丙啶染色C.AnnexinV-FITC/PI双染法D.吉姆萨染色20.以下哪种仪器可用于细胞的分选（）A.流式细胞仪B.离心机C.移液器D.天平第II卷（非选择题，共60分）21.（10分）简述细胞培养的基本步骤。22.（）分）请说明蛋白质分离纯化的常用方法及其原理。23.（15分）在核酸提取实验中，如何保证提取的核酸质量？24.（15分）阅读以下材料：在医学研究中，常常需要对某种疾病的发病机制进行深入探究。研究人员选取了一定数量的患有该疾病的患者和健康对照，对他们进行了基因表达谱分析。发现某些基因在患者中呈现异常高表达，而在健康对照中表达水平较低。请分析这些异常高表达的基因可能与疾病的关系，并阐述如何进一步验证这些基因在疾病发生发展中的作用。25.（15分）材料：某研究小组想要研究一种新的药物对肿瘤细胞增殖的影响。他们将培养的肿瘤细胞分为两组，一组加入该药物，另一组作为对照不添加药物。经过一段时间培养后，检测两组细胞的增殖情况。请设计实验方案，包括实验分组、检测指标及预期结果，并分析该药物对肿瘤细胞增殖的影响机制。答案：1.C2.B3.A4.A5.A6.B7.C8.D9.A10.A11.A12.A13.A14.A15.B16.A17.D18.D19.C20.A21.细胞培养基本步骤：首先准备合适的细胞培养基，添加血清、抗生素等成分。然后选取合适的细胞系，用胰蛋白酶等消化液将细胞从培养瓶壁上消化下来制成细胞悬液。将细胞悬液接种到培养瓶或培养板中，置于细胞培养箱中，控制合适的温度、湿度、气体环境等条件进行培养。培养过程中要定期观察细胞形态、生长状态，适时进行传代培养。22.常用方法及原理：盐析法，利用不同蛋白质在不同盐浓度下溶解度不同进行分离；透析法，通过半透膜除去小分子杂质；离子交换层析，根据蛋白质所带电荷与离子交换树脂结合能力不同分离；凝胶过滤层析，依据蛋白质分子大小不同在凝胶柱中移动速度不同分离；亲和层析，利用蛋白质与配体特异性结合特性分离。23.保证核酸提取质量：选择合适的样本类型和处理方法，避免核酸降解。采用合适的核酸提取试剂盒，严格按照操作步骤进行。提取过程中注意控制温度、pH值等条件。提取后通过电泳、分光光度计等方法检测核酸的完整性和纯度，确保A260/A280在1.8-2.0之间，A260/A230大于2.0。24.这些异常高表达的基因可能是该疾病的致病基因或参与了疾病发生发展的关键过程。进一步验证可采用RNA干扰技术抑制这些基因表达，观察疾病相关表型是否改善；构建基因过表达载体，导入细胞或动物模型，观察是否出现类似疾病的症状；进行基因敲除实验，在动物模型中验证基因功能。25.实验