2025年实验室生物样本试题及答案

2025年实验室生物样本试题及答案一、单项选择题（每题2分，共30分）1.关于血液样本采集时间的选择，以下说法正确的是：A.激素类检测样本应在随机时间采集B.空腹血糖样本需至少禁食6小时C.炎症因子检测建议早晨7-9点采集D.肿瘤标志物样本采集时间对结果无影响答案：C（解析：多数激素类物质存在昼夜节律，如皮质醇早晨浓度最高；空腹血糖需禁食8-12小时；肿瘤标志物虽稳定性较好，但仍建议固定时间采集以减少波动）2.用于凝血功能检测的血样应选择的抗凝剂是：A.EDTA-K2B.枸橼酸钠（1:9）C.肝素钠D.草酸钾答案：B（解析：EDTA会螯合钙离子影响凝血检测；肝素干扰凝血酶原时间；草酸钾可使红细胞皱缩，均不适用于凝血项目；枸橼酸钠与血液比例1:9时能有效抑制凝血因子激活）3.关于生物样本低温保存的描述，错误的是：A.血浆样本短期保存（<72小时）可置于-20℃B.组织样本长期保存建议使用-80℃超低温冰箱C.全血样本不可直接冻存（-20℃），否则会溶血D.RNA样本可在-80℃保存5年以上，无需分装答案：D（解析：RNA易降解，即使-80℃保存也需分装以避免反复冻融；全血冻存会导致红细胞破裂；-20℃适合血浆短期保存，长期需-80℃或液氮）4.运输感染性生物样本时，符合《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》的包装要求是：A.主容器为普通离心管，无防漏设计B.辅助包装填充普通棉花，未使用吸水材料C.外包装标注“生物危害”标识及UN3373编号D.运输文件仅包含样本数量，无接收方信息答案：C（解析：主容器需防漏，辅助包装需吸水材料，运输文件应包含发送/接收方信息、样本特性等；UN3373是诊断用生物物质的运输编号，需在外包装标注）5.评估血清样本质量时，若肉眼观察呈明显乳糜状，主要反映的问题是：A.采集时发生溶血B.患者采集前未禁食C.离心速度不足D.保存温度波动答案：B（解析：乳糜血主要因高脂血症或采集前未禁食导致血脂过高；溶血表现为红色浑浊，离心不足可能有细胞残留，温度波动影响成分稳定性但不直接导致乳糜）二、填空题（每空1分，共20分）1.生物样本标签的核心信息应包括：样本唯一标识、___、___、___、采集者签名（至少填写3项）。答案：受检者姓名/ID、样本类型、采集时间2.进行血清分离时，离心参数通常为___转/分钟，离心时间___分钟（室温）。答案：3000-3500、10-153.按照《病原微生物实验室生物安全管理条例》，新冠病毒（SARS-CoV-2）样本处理应在___级生物安全实验室（BSL）进行，操作人员需穿戴___（防护装备）。答案：三、正压防护服/全封闭防护装备4.RNA样本采集后应在___分钟内完成预处理（如加入保存液），长期保存建议使用___（具体试剂）或___（保存条件）。答案：30、RNAlater、-80℃超低温冰箱/液氮5.生物样本库的“双人双锁”管理指___和___需由两人分别保管钥匙。答案：样本存储区门禁、关键样本柜锁具6.评估组织样本质量的主要指标包括：___（形态学指标）、___（分子指标）、___（功能指标）。答案：组织完整性（无自溶/坏死）、DNA/RNA完整性（如RIN值）、细胞活性（如台盼蓝染色存活率）三、简答题（每题8分，共40分）1.简述生物样本前处理的关键步骤及其质量控制要点。答案：前处理关键步骤包括：（1）采集：选择正确的采集部位、时间、容器（如抗凝剂类型），确保采集量符合要求（如血样需达到采血管刻度线的90%以上）；（2）运输：使用符合生物安全的包装（三层包装系统），控制运输温度（如冷链运输箱温度±2℃），记录运输时间（需≤规定时限，如血培养样本≤2小时）；（3）离心：严格控制转速（3000-3500rpm）、时间（10-15分钟）、温度（4℃或室温），避免离心不足（细胞残留）或过度（成分破坏）；（4）分装：按使用需求分装为100-500μL/管（避免反复冻融），使用无酶无核酸污染的冻存管；（5）标记：标签信息需包含唯一ID、样本类型、采集时间、操作者，采用防水耐低温材质；质量控制要点：每一步骤需进行双人核对，记录环境温湿度（如实验室温度20-25℃，湿度40-60%），关键步骤（如离心）需留存设备运行记录（如离心机校准证书、温度曲线）。2.解释“冻融循环”对生物样本的影响及实验室应采取的预防措施。答案：冻融循环指样本从冷冻状态（如-80℃）解冻后未完全使用，再次冷冻的过程。其影响包括：（1）物理损伤：冰晶形成导致细胞/组织破裂（如红细胞溶血、组织切片结构破坏）；（2）生化改变：酶类（如蛋白酶）在解冻时被激活，导致蛋白降解（如细胞因子浓度降低）；（3）核酸断裂：DNA/RNA在反复冻融中因机械应力和核酸酶激活发生断裂（如长片段PCR扩增失败）；预防措施：（1）分装保存：将样本分装为单次使用量（如50-200μL），避免反复取用同一管；（2）快速解冻：采用37℃水浴快速解冻（≤10分钟），减少解冻时间；（3）建立冻融记录：对每管样本标注冻融次数（建议≤3次），超过限制的样本标记为“质量可疑”；（4）优化保存条件：重要样本可采用液氮（-196℃）保存，降低分子活动速率。3.列举生物样本库质量控制的三级体系，并说明各级的具体内容。答案：三级质量控制体系包括：（1）一级质控（采集端）：由样本采集人员负责，内容包括采集前核对（受检者信息、采集容器）、采集过程规范（如静脉血采集时止血带使用≤1分钟）、采集后初步检查（如血样无溶血、凝块）；（2）二级质控（入库端）：由样本库技术人员负责，内容包括外观检查（如血清无乳糜、溶血）、关键指标检测（如DNA样本的OD260/280比值1.8-2.0）、存储条件验证（如-80℃冰箱温度波动≤±5℃）；（3）三级质控（使用端）：由样本使用方（如科研人员）负责，内容包括使用前复核（样本ID与实验需求匹配）、功能验证（如细胞样本的台盼蓝存活率≥85%）、结果反馈（如检测异常时追溯样本处理流程）。4.说明运输生物样本时温度监控的具体要求（以-80℃保存的组织样本为例）。答案：（1）运输容器：使用符合EN1251-2标准的超低温运输箱（如干冰运输箱，有效保冷时间≥72小时）；（2）温度监测设备：需内置电子温度记录仪（精度±0.5℃），具备实时数据存储和超限报警功能（如温度＞-60℃时声光报警）；（3）监测频率：运输过程中每15分钟自动记录一次温度，交接时需提供完整的温度曲线；（4）应急处理：若运输途中温度超标（如干冰不足导致温度上升），需立即联系接收方，评估样本质量（如通过RIN值检测RNA完整性），必要时启动备用运输方案（如更换干冰）；（5）记录保存：温度记录需至少保存3年（或与样本保存期一致），作为质量追溯的依据。四、案例分析题（共10分）某三甲医院检验科收到外送的20份肿瘤组织样本（要求-80℃保存），但接收时发现运输箱内干冰已完全升华，箱内温度显示为-15℃（运输时间为48小时）。实验室对其中5份样本进行RNA提取，测得RIN值（RNA完整性指数）均＜5（正常应≥7）。问题：（1）分析导致RNA降解的可能原因；（2）提出后续应采取的处理措施。答案：（1）可能原因：①运输时间过长：干冰的有效保冷时间通常为24-36小时（取决于运输箱容量），48小时超出保冷能力，导致样本长时间处于-15℃（高于RNA稳定保存的-20℃临界温度）；②包装不符合要求：可能未使用专业超低温运输箱（如普通泡沫箱保冷效果差），或干冰填充量不足（标准填充量应为样本体积的3-5倍）；③温度监控缺失：未在运输箱内放置有效的温度记录仪，或记录仪未及时报警，导致未能及时补充干冰；④样本前处理不当：采集后未及时冷冻（如超过30分钟未放入-80℃冰箱），导致RNA酶提前激活。（2）处理措施：①样本评估：对所有20份样本进行RNA完整性检测（RIN值）和DNA片段分析（如琼脂糖凝胶电泳），标记RIN≥5的样本为“可用但需谨慎”，RIN＜5的标记为“不可用”；②原因追溯：调取运输记录（如物流单、温度曲线），核查运输公司是否按合同要求使用超低温运输箱，干冰填充量是否符合标准；③责任认定：若因运输方操作失误（如未及时补充干冰），按合同要求索赔；若因医院包装不当（如干冰量不足），需优化内部运输流程；④流程改进：-缩短运输时间：选择航空运输（缩短至2