2024-2025学年滨城高中联盟高二下学期5月期中考试生物试题（解析版）

高级中学名校试卷PAGEPAGE1滨城高中联盟2024-2025学年高二下学期5月期中考试一、选择题（本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。）1.制作泡菜需要的菌种是（）A.酵母菌 B.醋酸菌 C.乳酸菌 D.毛霉【答案】C〖祥解〗（1）泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。（2）泡菜的制作过程：【详析】A、酵母菌用于制作果酒，A错误；B、醋酸菌用于制作果醋，B错误；C、乳酸菌用于制作泡菜，C正确；D、毛霉用于制作腐乳，D错误。故选C。2.下列有关变异与育种的叙述中，正确的是（）A.某植物经X射线处理后未出现新的性状，则没有新基因产生B.利用生长素处理得到无子备茄的过程中发生的变异是不可遗传的C.二倍体植株的花粉经离体培养便可得到稳定遗传的植株D.通过基因工程获得的抗虫棉，其原理是基因突变【答案】B〖祥解〗四种育种方法的比较如下：

杂交育种诱变育种单倍体育种多倍体育种方法

杂交→自交→选优

辐射诱变、激光诱变、化学药剂处理花药离体培养、秋水仙素诱导加倍

秋水仙素处理萌发的种子或幼苗原理

基因重组基因突变

染色体变异（染色体组先成倍减少，再加倍，得到纯种）

染色体变异（染色体组成倍增加）【详析】A、某植物经X射线处理如果发生了隐性突变，则性状不会改变，但有新基因的产生，A错误；B、利用生长素得到无子番茄的原理是生长素可以促进子房壁发育成果实，遗传物质没有改变，属于不可遗传变异，B正确；C、二倍体植株的花粉经离体培养可得到单倍体植株，需要经过秋水仙素加倍处理才能获得稳定遗传的植株，C错误；D、基因工程育种的原理是基因重组，D错误。故选B。3.关于动物细胞培养和植物组织培养叙述错误的是（）A.植物组织培养和动物细胞培养的理论基础相同，都利用了细胞的全能性B.植物克隆和动物克隆的技术基础分别是植物组织培养技术、动物细胞培养技术C.动物细胞培养过程中传代培养时均需要离心法收集细胞D.植物组织培养技术最终会形成完整植株【答案】A〖祥解〗细胞工程分为植物细胞工程和动物细胞工程，植物细胞过程包括植物组织培养、植物体细胞杂交，动物细胞工程包括动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体的制备、核移植技术等。【详析】A、植物组织培养的理论基础是细胞的全能性，而动物细胞培养的理论基础是细胞增殖（分裂），并未体现全能性，A错误；B、植物克隆依赖植物组织培养技术，动物克隆以细胞培养为基础，B正确；C、在动物细胞培养过程中的传代培养时，需要采用离心法收集细胞，以便更换培养液等操作，C正确；D、植物组织培养技术是将离体的植物器官、组织或细胞，经过脱分化形成愈伤组织，再经过再分化形成根、芽等器官，最终形成完整植株，D正确。故选A。4.下列有关哺乳动物受精作用的叙述，错误的是（）A.刚刚排出的精子要在雌性动物生殖道内发生相应生理变化才能获得受精的能力B.精子需要释放多种酶才能溶解、穿越卵细胞膜外透明带等结构C.精子触及卵细胞膜的瞬间发生卵细胞膜反应阻止后来精子进入D.卵子在输卵管内发育到MⅡ期时才具备受精的能力【答案】C〖祥解〗受精作用：概念：受精作用是指卵细胞和精子相互识别、融合成为受精卵的过程。基本过程：精子的头部进入卵细胞；精子的细胞核与卵细胞的细胞核融合；实质：精子的细胞核与卵细胞的细胞核相互融合。【详析】A、精子需在雌性生殖道内经历获能过程才能获得受精能力，该过程涉及生理变化，A正确；B、精子通过顶体反应释放酶类溶解卵丘细胞间物质和透明带，以穿越这些结构，B正确；C、卵细胞膜反应（卵子细胞膜阻止多精受精）发生在精子进入卵子之后，而非“触及瞬间”。触及卵细胞膜时触发的是透明带反应（阻止其他精子进入透明带），C错误；D、卵子需在输卵管中发育至减数第二次分裂中期（MⅡ期）才具备受精能力，D正确。故选C。5.PCR扩增目基因是一项根据DNA半保留复制的原理，在体外对目的基因进行大量复制的过程。与DNA在细胞内的复制相比，下列选项中两者间相同的是（）A.参与反应的酶 B.反应的模板C.反应的温度 D.反应的过程【答案】B〖祥解〗PCR技术是聚合酶链式反应的缩写，其原理与DNA半保留复制的原理相同，在体外提供参与复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。【详析】A、PCR技术用到耐高温的DNA聚合酶，DNA分子的体内复制需要DNA聚合酶和解旋酶，A不符合题意；B、PCR技术和体内DNA复制都是以DNA的每一条链为模板，模板是相同的，B符合题意；C、PCR技术是在较高温度条件下进行的，DNA分子的体内复制的温度低，C不符合题意；D、PCR技术是在较高温度条件下打开双链后进行扩增的，不是边解旋边复制的，DNA分子的体内边解旋边复制，D不符合题意。故选B。6.下列关于限制酶和DNA连接酶的描述，正确的是A.DNA连接酶可以恢复DNA分子中的氢键B.在基因工程中可以用DNA聚合酶代替DNA连接酶C.它们的化学本质都是蛋白质D.它们不能被反复利用【答案】C〖祥解〗【详析】A、DNA连接酶在两个DNA分子间形成磷酸二酯键，不可以恢复DNA分子中的氢键，A错误；B、DNA聚合酶将游离的脱氧核苷酸连接到DNA单链上，DNA连接酶连接DNA片段，不能代替，B错误；C、这两种酶的化学本质都是蛋白质，C正确；D、在酶的结构没有被破坏的情况下，可以被反复利用，D错误。故选C【『点石成金』】7.下列有关蛋白质工程说法正确的是（）A.蛋白质工程无需构建基因表达载体B.通过蛋白质工程改造后的蛋白质有的仍是天然的蛋白质C.蛋白质工程需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶D.蛋白质工程是在蛋白质分子水平上改造蛋白质的【答案】C〖祥解〗蛋白质工程就是通过对蛋白质化学、蛋白质晶体学和蛋白质动力学的研究，获得有关蛋白质理化特性和分子特性的信息，在此基础上对编码蛋白质的基因进行有目的的设计和改造，通过基因工程技术获得可以表达蛋白质的转基因生物系统，这个生物系统可以是转基因微生物、转基因植物、转基因动物，甚至可以是细胞系统。【详析】A.据分析可知，蛋白质工程需对编码蛋白质的基因进行有目的的设计和改造，A错误；B.蛋白质工程通过基因的修饰或基因的合成，对现有的基因进行改造或制造一种新的蛋白质，改造后的蛋白质有的不再是天然的蛋白质，B错误；C.蛋白质工程需对编码蛋白质的基因进行有目的的设计和改造，需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶，C正确；D.蛋白质工程是通过基因的修饰或基因的合成，对现有的基因进行改造或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。D错误；答案选C.8.为研究多种血糖调节因子的作用，我国科学家开发出胰岛素抵抗模型鼠。为扩增模型鼠数量，科学家通过诱导优良模型鼠体细胞转化获得诱导胚胎干细胞（iPS细胞），继而利用iPS细胞培育出与模型鼠遗传特性相同的克隆鼠，具体步骤如图所示。下列叙述错误的是（）A.诱导优良模型鼠体细胞转化为iPS细胞的过程类似于植物组织培养的脱分化B.胚胎移植前要检查胚胎质量并在囊胚或原肠胚阶段移植C.胚胎移植后，重构胚进一步扩大导透明带破裂的过程称为孵化D.为确定克隆鼠培育是否成功，须对黑色鼠3进行胰岛素抵抗的相关检测【答案】B〖祥解〗哺乳动物胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞；胚胎干细胞的细胞核一般较大，核仁明显，而细胞质相对较少；在功能上具有发育的全能性。植物组织培养的脱分化：让已经分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程。【详析】A、优良模型鼠体细胞在诱导因子的作用下转化为iPS细胞的过程与植物组织培养中的脱分化过程类似，是组织细胞恢复分裂能力的过程，A正确；B、胚胎移植前要检查胚胎质量并在桑葚胚或囊胚阶段移植，B错误；C、囊胚进一步扩大，会导致透明带的破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫做孵化，C正确；D、据图示，最终得到了黑色鼠3个体，实验最终目的为“开发出胰岛素抵抗模型鼠”，故为确定克隆鼠培育是否成功，须对黑色鼠3进行胰岛素抵抗的相关检测，D正确。故选B。9.下列关于目的基因导入受体细胞的描述，正确的是（）A.可以通过农杆菌转化法将目的基因导入动物的体细胞中B.通过基因工程大量获得胰高血糖素时，受体细胞选择大肠杆菌比酵母菌更有优势C.可以用PEG处理大肠杆菌将目的基因导入其细胞内D.该过程不发生碱基互补配对【答案】D〖祥解〗将目的基因导入受体细胞的方法：（1）将目的基因导入植物细胞：农杆菌转化法（约80%的转基因植物都是用这种方法获得的）；基因枪法：是单子叶植物中常用的一种基因转化方法，但是成本较高；花粉管通道法：这是我国科学家独创的一种方法，是一种十分简便经济的方法。（2）将目的基因导入动物细胞方法：显微注射技术。（最有效一种方法）（3）将目的基因导入微生物细胞原核生物特点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等（也是常用原核生物作为受体的原因）；方法：Ca2+处理法（感受态细胞法）。【详析】A、农杆菌转化法主要用于植物细胞，因其Ti质粒的T-DNA可转移至植物细胞，而动物细胞通常采用显微注射法或病毒载体法，A错误；B、胰高血糖素为多肽类激素，虽结构简单，但其前体需加工修饰，大肠杆菌（原核）缺乏内质网和高尔基体，无法完成真核蛋白的正确加工，而酵母菌（真核）更合适，B错误；C、大肠杆菌的转化常用Ca²⁺处理（感受态细胞法），PEG多用于植物原生质体或动物细胞融合，C错误；D、目的基因导入受体细胞的过程（如质粒进入细胞）仅为物理转移，未涉及DNA复制或重组，故无碱基互补配对，D正确。故选D。10.红茶菌液是一种以糖茶水为原料的微生物发酵饮料，能帮助消化，治疗多种胃病。红茶菌种是酵母菌、醋酸菌和乳酸菌的共生体，其制备流程为：红茶糖液→接种红茶菌种→发酵→红茶菌液。下列叙述错误的是（）A.为防止杂菌污染，接种前要将红茶糖液煮沸杀菌B.可通过加入陈红茶菌液的方法进行接种C.温度高低既会影响发酵速度，也会影响菌液口味D.发酵过程需要在严格的无氧条件下进行【答案】D〖祥解〗根据题目信息可知，红茶菌是由含酵母菌、醋酸菌和乳酸菌三种菌的混合菌液共同发酵完成，酵母菌为兼性厌氧菌，醋酸菌为好氧菌，乳酸菌为厌氧菌。【详析】A、接种前要将红茶糖液煮沸杀菌，目的是防止杂菌污染，A正确；B、可通过加入陈红茶菌液的方法进行接种，目的是增加菌种的数量，B正确；C、温度会影响细胞呼吸酶的活性，所以温度高低既会影响发酵速度，进而影响菌液口味，C正确；D、酵母菌属于兼性厌氧菌，醋酸菌属于严格的好氧细菌，乳酸菌属于厌氧细菌，活菌饮料由3种菌共同发酵产生，因此发酵的整个过程不需要在严格的无氧条件下进行，D错误。故选D。11.关于采用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物的实验，下列叙述不正确的是（）A.琼脂糖凝胶浓度的选择需考虑待分离DNA片段的大小B.凝胶载样缓冲液中指示剂作用是指示DNA分子的具体位置C.在同一电场作用下，DNA片段越长，迁移速率越慢D.琼脂糖凝胶中的DNA分子可在紫外光灯下被检测出来【答案】B〖祥解〗不同大小的DNA片段在不同浓度的琼脂糖凝胶中迁移率不同，一般来说，DNA片段越大，需要的琼脂糖凝胶浓度越低。将PCR产物与LoadingBuffer（含染色剂和甘油）混合后加入凝胶孔中，在电场作用下，不同长度的DNA片段按分子量大小分离，形成不同的条带。【详析】A、琼脂糖凝胶浓度影响凝胶孔径大小，浓度高适合分离小片段DNA，浓度低适合大片段，因此需根据待分离DNA片段大小选择浓度，A正确；B、凝胶载样缓冲液中的指示剂（如溴酚蓝）用于指示电泳进程，而非直接显示DNA位置，DNA需通过染色（如溴化乙锭）后在紫外线下观察，B错误；C、DNA片段越长，在凝胶中迁移阻力越大，迁移速率越慢，C正确；D、琼脂糖凝胶中的DNA经荧光染料（如溴化乙锭）染色后，可在紫外光灯下被检测，D正确；故选B。12.若下图中甲、乙、丙所代表的结构或物质如表中所示，则相应的叙述与图示不符的（）选项甲乙丙相应的叙述A植物体一部分愈伤组织植物体若甲离体培养，则①过程表示脱分化，②过程包括再分化B二倍体花粉单倍体经①和②过程形成的丙一般含有一个染色体组，③表示用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗C下丘脑垂体甲状腺①为促甲状腺激素激素释放激素，③表示的激素对甲和乙都能起到反馈调节作用D基因mRNA蛋白质①不同于②的碱基配对方式为T－A；在原核细胞中，①②过程可在细胞同一区域同时发生A.A B.B C.C D.D【答案】B〖祥解〗植物组织培养包括了脱分化和再分化；二倍体的单倍体含有一个染色体组，单倍体高度不育，只能用秋水仙素处理幼苗；甲状腺激素分泌的分级调节中，甲状腺分泌的甲状腺激素对下丘脑和垂体都有反馈调节的作用；转录不同于翻译的碱基配对方式是T－A，在原核细胞中，转录和翻译可以同时在细胞质中完成。【详析】A、由图可知甲到乙，乙可以到丙，而丙又可以到乙，甲离体培养，经过脱分化可以形成乙，即愈伤组织，愈伤组织经过再分化可以形成完整植株丙，A正确；B、如果甲是二倍体经过减数分裂形成乙花粉，花粉含1个染色体组，乙（花粉）经过离体培养形成单倍体植株丙，丙经秋水仙素处理形成甲（二倍体植株），由于单倍体高度不育，只能用秋水仙素处理幼苗，B错误；C、如果甲是下丘脑，其分泌的促甲状腺激素释放激素可以作用于垂体，垂体分泌促甲状腺激素作用于甲状腺，甲状腺分泌的甲状腺激素，对下丘脑和垂体都有反馈调节作用，C正确；D、如果甲表示的是基因，经过转录形成RNA，RNA翻译形成蛋白质，转录和翻译过程中的碱基配对方式不完全相同，在转录过程中是T-A，在翻译过程中是U-A。在原核细胞中，转录和翻译同时发生在细胞质中，D正确。故选B。13.融合PCR技术采用具有互补末端的引物，形成具有重叠链的PCR产物，通过PCR产物重叠链的延伸，从而将不同来源的任意DNA片段连接起来。其原理如图所示，据图分析不正确的是（）A.上述过程中使用的引物P2和P3的碱基不需要完全互补配对B.可在同一个反应体系中进行甲基因和乙基因的扩增C.融合PCR的第一步两条链重叠部位可互为另一条链的引物，不需要另加入引物D.若融合PCR的第二步获得128个融合基因，理论上该过程消耗了127个P1引物【答案】B〖祥解〗PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着5'→3'的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制。【详析】A、上述过程中使用的引物P2和P3的碱基不需要完全互补配对，只需要部分碱基互补配对即可，A正确；B、在融合PCR技术里，甲基因扩增依赖引物P1、P2，乙基因扩增依赖引物P3、P4。不同基因扩增所需引物特异性结合各自模板链，且反应条件（如引物与模板的适配性等）有差异，若放同一反应体系，引物间易相互干扰，无法精准、高效完成甲、乙基因各自扩增，所以不能在同一反应体系进行，B错误；C、结合图示可知，融合PCR的第一步两条链重叠部位即互补配对，可互为另一条链的引物，不需要另加入引物，C正确；D、融合PCR第二步，以第一步得到的产物为模板，根据DNA半保留复制，新合成128个融合基因，需新合成127条单链（第一条单链为模板链，不需要引物合成），理论上消耗127个P1引物，D正确。故选B。14.青霉素别名盘尼西林，它是最早发现、最先提纯、临床上应用最广的一种抗生素，发酵工程中常利用产黄青霉来生产青霉素，产黄青霉生长最适温度和产生青霉素的适宜温度不同。下列相关叙述错误的是（）A.选育菌种可以借助诱变育种B.发酵过程中使用的培养基可以利用高压蒸汽灭菌C.为了提高青霉素产量，发酵时不同阶段要控制不同温度D.根据青霉素的化学性质采用过滤、沉淀等方法从发酵液中提取青霉素【答案】D【详析】发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵、产品的分离、提纯等方面。〖祥解〗A、诱变育种通过物理或化学因素提高突变率，是选育高产青霉素菌种的常用方法，A正确；B、高压蒸汽灭菌法适用于对培养基和发酵设备等进行灭菌，能够有效地杀灭杂菌，保证发酵的顺利进行，B正确；C、由题干信息可知，发酵工程中常利用产黄青霉来生产青霉素，产黄青霉生长最适温度和产生青霉素的适宜温度不同，所以为了提高青霉素产量，发酵时不同阶段要控制不同温度，C正确；D、青霉素是一种小分子有机物，通常采用蒸馏、萃取、离子交换等方法从发酵液中提取，而过滤、沉淀等方法一般用于分离固体和液体，不适用于提取青霉素这种小分子有机物，D错误。故选D。15.基因工程常用土壤农杆菌Ti质粒作为载体，需把目的基因插入Ti质粒的T-DNA才能整合到植物染色体DNA上。下图表示抗虫棉培育中使用的三种限制酶A.B.C的识别序列以及Ti质粒上限制酶切割位点的分布，抗虫基因内部不含切割位点，两侧标明序列为切割区域。下列叙述错误的是A.应该使用酶B和酶C切取抗虫基因B.应该使用酶A和酶B切割Ti质粒C.成功建构的重组质粒含1个酶A的识别位点D.成功建构的重组质粒用酶C处理将得到2个DNA片段【答案】C〖祥解〗分析题图：在目的基因的左侧只有B酶的识别位点，右侧只有C酶的识别位点；质粒上含有三种酶的识别位点，其中T-DNA上含有酶A和酶B的识别位点，因此应选用酶B和酶C切取目的基因，选用酶A和酶B切割Ti质粒。【详析】A、在目的基因的左侧只有B酶的识别位点，右侧只有C酶的识别位点，因此应该使用酶B和酶C切取抗虫基因，A正确；B、应该将目的基因插入T-DNA，而T-DNA中含有A酶和B酶的切割位点，因此应该使用酶A和酶B切割Ti质粒，B正确；C、酶A和酶C切割形成的黏性末端相同，使用酶B和酶C切取抗虫基因，使用酶A和酶B切割Ti质粒，再用DNA连接酶连接两者形成重组质粒后，重组质粒不含酶A的识别位点，C错误；D、成功建构的重组质粒含有两个酶C的识别位点，因此用酶C处理重组质粒将得到2个DNA片段，D正确。故选C。二、选择题（共5小题，每小题3分，共15分。每小题给出的四个选项中，有一项或多项是符合题目要求的。全部选对得3分，选对但选不全得1分，有选错得0分。）16.拟采用“取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽”的方法繁殖一种名贵花卉，下列有关叙述正确的是（）A.在愈伤组织培养基中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞B.消毒的原则是既要杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害C.出芽是外植体经细胞脱分化后再分化的结果，受基因选择性表达的调控D.诱导生长物分化生根和生芽后，可将试管苗直接进行移栽以适应外界环境【答案】BC〖祥解〗植物组织培养的过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育形成植株，该过程受基因选择性表达的调控。【详析】A、愈伤组织细胞含有细胞壁，加入细胞融合诱导剂不会诱导细胞融合，因此不会得到染色体加倍的细胞，A错误；B、消毒指用比较温和的物理或化学方法清除或杀灭除芽孢外的所有病原微生物，使其数量减少达到无害化，同时减少消毒剂对细胞的伤害，B正确；C、外植体经细胞脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体后，一般先形成芽，再形成根，因此出芽是外植体经细胞脱分化后再分化的结果，受基因选择性表达的调控，C正确；D、诱导生长物分化生根和生芽后，可将试管苗先进行练苗后再进行移栽，以保证成活率，D错误。故选BC。17.如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图，有关叙述错误的是（）A.获得高效分解尿素细菌纯培养物的关键是防止杂菌污染，故应对红棕壤、培养基及用具进行灭菌B.步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素C.若要判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置未接种的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照D.步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，分解尿素能力高的会产生更多得NH3，溶液pH更高【答案】ABC〖祥解〗培养基的概念、种类及营养构成：（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。（2）种类：固体培养基和液体培养基。（3）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求；微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种、划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【详析】A、红棕壤中筛选微生物，不能对其灭菌，A错误；B、步骤③筛选分解尿素的细菌，培养基中应以尿素为唯一氮源，不能加入牛肉膏蛋白胨，B错误；C、若要判断选择培养基是否起到了选择作用，应该用接种了的全营养培养基作对照，即接种了的牛肉膏蛋白胨培养基来培养细菌，C错误；D、步骤④鉴定细菌分解尿素的能力时，挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力，分解尿素能力高的会产生更多得NH3，溶液pH更高，D正确。故答案为：ABC。18.在体细胞克隆猴培育过程中，为调节相关基因的表达，提高胚胎的发育率和妊娠率，研究人员将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重构胚，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂（TSA）处理，具体培育流程如下图所示。下列说法正确的是（）A.去核时使用的差速离心、紫外线长时间照射和化学物质处理等方法都没有穿透卵母细胞的透明带B.卵母细胞在去核环节实际操作中被去除的不是核膜包被的细胞核，而是纺锤体-染色体复合物C.组蛋白甲基化和乙酰化的表观遗传修饰都不利于重构胚的分裂和发育D.为得到遗传背景相同的克隆猴用于科研，可用机械方法将早期胚胎随机切割成2份或4份后再进行胚胎移植【答案】B〖祥解〗细胞核移植概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。目前核移植技术中普遍使用的去核方法是显微直接去除法还有人采用密度梯度离心，紫外光短时间照射、化学物质处理等方法。【详析】A、目前核移植技术中普遍使用的去核方法是密度梯度离心，紫外光短时间照射、化学物质处理，A错误；B、将卵母细胞培养到中期Ⅱ后进行去核操作，此时细胞核退化，出现的是纺锤体和染色体复合物，去核事实上是去除卵母细胞的纺锤体和染色体结构，B正确；C、科学家将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入重构胚，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂处理重构胚，这样可降低组蛋白的甲基化水平，提高组蛋白的乙酰化水平，从而改变组蛋白的表观遗传修饰来调控基因表达，C错误；D、为得到遗传背景相同的克隆猴用于科研，可用机械方法将早期胚胎均匀切割成2份或4份后再进行胚胎移植，D错误。故选B。19.干细胞是一类未参与分化或未完全分化的细胞，分裂能力强。按照其来源分为胚胎干细胞和成体干细胞（如造血干细胞、神经干细胞）。下列关于干细胞的说法正确的是（）A.胚胎干细胞可分化形成动物体的任何一种类型细胞B.胚胎干细胞的分化程度小于造血干细胞C.骨髓移植治疗白血病就是利用了造血干细胞能分化成各种血细胞的能力D.将带有遗传标记的胚胎干细胞植入早期胚胎，通过组织化学染色可追寻胚胎发育中细胞分化和器官形成的规律【答案】ABCD〖祥解〗（1）胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团）。（2）胚胎干细胞的特点：具有胚胎细胞的特性，体积较小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物任何一种组织细胞。另一方面，在体外培养条件下，ES细胞可不断增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可以进行某些遗传改造。（3）胚胎干细胞的主要用途是：①可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律；②是在体外条件下研究细胞分化的理想材料。ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中，能够维持不分化的状态。在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡机理提供了有效的手段；③可以用于治疗人类的某些顽疾，如帕金森综合征、糖尿病、老年痴呆症、肝衰竭、新衰竭、成骨不良；④培育各种组织器官，用于器官移植，解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。【详析】A、胚胎干细胞具有发育的全能性，可分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，A正确；B、胚胎干细胞的分化程度小于造血干细胞，因此其全能性高于造血干细胞，B正确；C、骨髓移植治疗白血病就是利用了造血干细胞能分化成各种血细胞的能力，C正确；D、将带有遗传标记的胚胎干细胞植入早期胚胎，通过组织化学染色可追寻胚胎发育中细胞分化和器官形成的规律，D正确。故选ABCD。20.利用PCR将某小段含目的基因的DNA分子扩增循环n次，则（）A.需要已知目的基因的全部序列以便设计引物B.共需2n＋1－2个引物参与子代DNA分子的合成C.应向反应体系中加入解旋酶、DNA聚合酶、缓冲液等D.理论上第4轮循环产物中含两种引物的DNA片段占15/16【答案】B〖祥解〗PCR技术：①概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；②原理：DNA复制；③条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；④方式：以指数的方式扩增，即约2n；⑤过程：高温变性、低温复性、中温延伸。【详析】A、PCR是一项在生物体外复制特定的DNA分子片段的技术，只要有模板基因就行，不需要知道其序列就可扩增，保证引物能与模板基因结合就可以开始复制，即部分序列就可以设计引物，A错误；B、PCR技术的原理是DNA复制，根据DNA分子半保留复制特点可知，共有2n-1对引物参与子代DNA分子的合成，每对引物包含2个，即共需2n+1−2个引物，B正确；C、PCR是利用高温进行解旋，不需要加入解旋酶，C错误；D、第4轮循环产物共得到24=16个DNA片段，其中亲本的2个模板链不含引物，故含两种引物的DNA片段占14/16=7/8，D错误。故选B。三、非选择题（本题共5小题，共55分）21.某研究人员设计了下列技术路线，以期获得甘蓝和萝卜体细胞杂交植株。请回答下列问题：（1）制备原生质体时，常用两种酶处理，分别是______。诱导原生质体融合常用的物理法是______。图中X是______。（2）为诱导融合体产生不定芽，通常应在培养基中加入两类植物激素，分别是______。（3）若想获得抗盐的体细胞杂交植株，一般选用X作为人工诱变的材料，原因是______，且需在含较高浓度的NaCl培养基中筛选。（4）利用X进行细胞产物工厂化生产所采用的技术是______，从物理性质角度分析应使用______培养基【答案】（1）①.纤维素酶和果胶酶②.离心、振动、电刺激等③.愈伤组织（2）细胞分裂素和生长素（3）具有分裂分化能力，突变频率高，愈伤组织包含了两个物种的全部遗传信息，且具有全能性（4）①.植物细胞培养技术②.液体〖祥解〗植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。【解析】（1）植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，所以制备原生质体，需要用纤维素酶和果胶酶将细胞壁去除，诱导原生质体融合常用的物理法有离心、振动、电刺激等。图中X经过离体培养，可以形成试管苗，所以X是愈伤组织。（2）植物组织培养中常加入植物激素，主要是细胞分裂素和生长素，当生长素和细胞分裂素的比值低时，有利于芽的形成，所以起主要作用的是细胞分裂素。（3）由于愈伤组织具有分裂分化能力，突变频率高，包含了两个物种的全部遗传信息，且具有全能性，所以可选用愈伤组织作为人工诱变的材料。（4）利用X愈伤组织进行细胞产物工厂化生产所采用的技术是植物细胞培养技术。这种技术可以在实验室条件下大量培养细胞，并使其产生所需的细胞产物。从物理性质角度分析，为了维持细胞的生长和分裂，应使用液体培养基，以提供充足的营养和生长环境。22.2024年3月Nature杂志发表：科学家研究发现负责免疫细胞更新的造血干细胞（HSC）会逐渐走上“歪路”，破坏不同免疫细胞的再生的平衡，使用特定单抗清除这些跑偏的造血干细胞，可重新平衡衰老的造血系统，让免疫系统再次年轻。下图是探索以造血干细胞表面标志物CD150蛋白为靶点，制备单克隆抗体的过程，请回答：（1）注射小鼠的物质是___。①过程可用___酶处理剪碎后的小鼠脾脏，从小鼠脾脏中提取具有免疫能力的B淋巴细胞。体外培养骨髓瘤细胞时，必须保证环境是无菌、无毒的，具体措施是___。（2）②过程先诱导细胞融合，后用特定的培养基进行培养以获得到杂交瘤细胞，此特定的培养基从功能上看属于___培养基（填“选择”或“鉴别”），杂交瘤细胞的特点是___。（3）培养杂交瘤细胞的培养瓶放在___中，培养的气体环境中CO₂的主要作用是___。③过程通过___方法获得产CD150抗体的杂交瘤细胞。在体外条件下大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（4）与传统的从血浆中提取的抗体相比，抗CD150单克隆抗体的优点是___。（5）为检测针对不同靶点的单抗清除“跑偏”造血干细胞（my-HSCs）的效果，科学家进行了实验（结果如下图），此实验的结果表明___。【答案】（1）①.CD150②.胰蛋白（或胶原蛋白）③.需要对培养液和所有培养用具进行灭菌处理、在无菌环境进行操作、定期更换培养液（2）①.选择②.既能迅速大量增殖，又能产生抗体（3）①.CO2培养箱②.维持培养液的pH③.克隆化培养和抗体检测（4）特异性强、灵敏度高、能大量制备（5）抗CD62p、抗NEO1和抗CD150单克隆抗体都具有清除“跑偏”造血干细胞（my-HSCs）的效果最好，其中抗CD150单克隆抗体的效果最好〖祥解〗由题图信息分析可知：过程①获得具有免疫能力的B细胞；过程②是将具有免疫能力的B细胞和骨髓瘤细胞融合；过程③是用抗体检测和克隆培养得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞；过程④是将产生特定抗体的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内或体外培养。【解析】（1）图中筛选出了能产生抗CD150抗体的杂交瘤细胞，所以注射小鼠的物质是CD150蛋白。①过程用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理剪碎后的小鼠脾脏，从小鼠脾脏中提取具有免疫能力的B淋巴细胞。体外培养动物细胞时，必须保证环境是无菌、无毒的，即需要对培养液和所有培养用具进行灭菌处理以及在无菌环境下进行操作。培养液还需要定期更换，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。（2）②过程要将杂交瘤细胞从促融处理后的多种细胞中筛选出来需要选择培养基，杂交瘤细胞既能迅速大量增殖，又能产生抗体。（3）实验过程中培养杂交瘤细胞的培养瓶放在了含5%CO2的培养箱中培养，CO2的主要作用是维持培养液的pH。③过程通过克隆化培养和抗体检测获得产CD150抗体的杂交瘤细胞。在体外条件下大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（4）与传统的从血浆中提取的抗体相比，单克隆抗体具有能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备的优点。（5）由图中的结果可知，抗CD62p、抗NEO1和抗CD150单克隆抗体都具有清除“跑偏”造血干细胞（my-HSCs）的效果最好，其中抗CD150单克隆抗体的效果最好。23.米醋是众多种类的醋中营养价值较高的一种，制作米醋的主要流程是：蒸熟拌曲→入坛发酵→加水醋化。回答下列问题：(1)“蒸熟拌曲”阶段中拌入的“酒曲”中含有酵母菌，从呼吸作用类型看，该微生物属于___________型生物。将大米蒸熟、冷却，经酶处理后得到葡萄糖的目的是更好地为微生物提供___________。(2)“入坛发酵”阶段产生的乙醇与重铬酸钾反应呈现___________色。该阶段在生产时总是先“来水”后“来酒”，原因是____________________________________________。该阶段虽未经灭菌，但在___________的发酵液中，酵母菌能大量生长繁殖，绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。(3)“加水醋化”阶段中醋酸发酵前，对米酒进行稀释的目的是_____________________。进入该阶段需要将发酵条件变为__________________。请写出该阶段相关的化学反应式：_________________________________。【答案】①.兼性厌氧②.碳源③.灰绿④.酵母菌在发酵前期进行有氧呼吸，产生水；在发酵后期进行无氧呼吸，产生酒精⑤.缺氧、呈酸性⑥.使发酵液中酒精浓度降低，以利于醋酸菌的生长繁殖⑦.通入无菌空气，温度设置为30〜35℃⑧.〖祥解〗（1）酒精发酵的最适温度为18-25℃，醋酸发酵的最适温度为30-35℃。（2）醋酸制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。【详析】（1）酵母菌既能进行有氧呼吸，又能进行无氧呼吸，属于兼性厌氧型微生物。将大米蒸熟、冷却，经酶处理后得到葡萄糖的目的是更好地为微生物提供碳源。（2）乙醇与酸性条件下的重铬酸钾反应为灰绿色。由于“蒸熟拌曲”阶段中拌入的“酒曲”中含有酵母菌，在发酵前期酵母菌进行有氧呼吸，产生水；而在发酵后期进行无氧呼吸，产生酒精，故发酵过程中总是先“来水”后“来酒”。在酒精发酵旺盛时，发酵液为缺氧、呈酸性的状态，在此环境中酵母菌能大量生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制，所以尽管“入坛发酵”阶段没有灭菌，但杂菌仍不会大量繁殖。（3）“加水醋化”阶段中醋酸发酵前，对米酒进行稀释的目的是使发酵液中酒精浓度降低，以利于醋酸菌的生长繁殖。由于酵母菌发酵时为无氧环境、且酒精发酵的最适温度为18〜25℃，而醋酸菌为好氧菌，且最适生长温度为30〜35℃，故进入该阶段需要将发酵条件改变为：通入无菌空气，温度设置为30〜35℃。该阶段醋酸菌将酒精变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，反应式为：。【『点石成金』】本题考查的是酒精发酵和醋酸发酵的原理和流程，熟练掌握酒精发酵和醋酸发酵的原理和流程是解题的关键。24.如图为利用胚胎工程技术培养纯种荷斯坦小奶牛的繁殖过程，请回答下列问题：（1）为让供体母牛进行超数排卵，需要给母牛注射______。从供体母牛采集的卵母细胞需要进行体外培养，其目的是______。从优秀种公牛采集的精子需______后才能进行受精作用。（2）胚胎在早期培养时，如需对初期胚胎进行性别鉴定，宜取囊胚期的______细胞进行鉴定。（3）荷斯坦奶牛胚胎在黄牛子宫中成活的生理学基础是______。（4）上述胚胎工程的理论基础为______。（5）如果培育转基因荷斯坦奶牛，可采用______技术将药用蛋白基因导入到______中。在检测受体细胞是否表达相应蛋白，常采用的方法是______技术。【答案】（1）①.促性腺激素②.使卵母细胞成熟③.获能（2）滋养层（3）受体对移入的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应（4）哺乳动物受精和早期胚胎发育的规律（5）①.显微注射②.受精卵③.抗原—抗体杂交〖祥解〗囊胚：桑椹胚进一步发育，细胞开始出现分化。聚集在胚胎一端，个体较大的细胞，称为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织，而沿透明带内壁扩展和排列的、个体较小的细胞，称为滋养层细胞，它们将来发有成胎膜和胎盘。【解析】（1）为使供体母牛超数排卵，需要给其注射促性腺激素。从供体母牛采集的卵母细胞，都需要培养至减数第二次分裂中期，其目的是使卵母细胞成熟。刚刚排出的精子不能立即与卵子受精，必须在雌性动物的生殖道发生相应的生理变化后，才能获得受精能力，这一生理现象称为“精子获能”，因此从优秀种公牛采集的精子需获能后才能进行受精作用。（2）囊胚由内细胞团和滋养层组成，如需对初期胚胎进行性别鉴定，宜取囊胚期的滋养层细胞（将来发育为胎儿的胎膜和胎盘）进行鉴定。（3）荷斯坦奶牛胚胎能在黄牛的子宫中成活，是因为受体对移入的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应。（4）胚胎工程的理论基础是哺乳动物受精和早期胚胎发育的规律。（5）将目的基因转入动物细胞，采用显微注射技术将药用蛋白基因导入受精卵（全能性最高）中。在检测受体细胞是否表达相应蛋白时，常采用的方法是抗原一抗体杂交技术。25.下图表示获得抗除草剂转基因玉米的培育过程，图中的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能使某种能被细胞吸收的无色物质K呈现蓝色。请回答以下问题：（1）构建重组质粒是基因工程核心，此过程中为防止酶切产物自身环化，构建重组质粒需用2种限制性内切核酸酶，选择的原则是______（填序号）。①Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点②G基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点③酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同④酶切后，G基因形成的两个黏性末端序列不相同（2）Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有一段包含报告基因的T-DNA序列，该片段能进入植物细胞并______，从而使其携带的目的基因的遗传遵循孟德尔遗传定律。（3）图中筛选1的目的是______。农杆菌转化愈伤组织的过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。因此，进行筛选2时，应在培养基中加______，并挑选______的愈伤组织细胞，用于植物组织培养。（4）下表是鉴定含G基因植株的4种方法。请预测同一后代群体中，4种方法检出的含G基因植株的比例，从小到大依次是______。方法检测对象检测目标检出的含G基因植株的比例PCR扩增基因组DNAG基因X1分子杂交总mRNAG基因转录产物X2抗原-抗体杂交总蛋白质G基因编码的蛋白质X3喷洒除草剂幼苗抗除草剂幼苗X4（5）为研究干旱胁迫基因LEA对玉米的影响机制，科研人员利用基因LEA与荧光素酶基因（Luc）构建成基因表达载体甲，相关序列及酶切位点如图所示。箭头表示转录方向。A：利用PCR扩增LEA基因时，需要在引物的______（填“3＇端”或“5＇端”）添加限制酶识别序列，添加序列对应的限制酶是______。B：为了构建基因表达载体甲，依据图中已知碱基序列，在PCR扩增仪中加入的引物的碱基序列为5＇-______-3＇和5＇-______-3＇。基因表达载体中启动子的作用是______。【答案】（1）①④（2）整合到染色体DNA上（3）①.获得含有重组质粒（或目的基因）的农杆菌②.除草剂和物质K③.细胞内呈现蓝色（4）X4、X3、X2、X1（5）①.5'端②.EcoRV和XbaⅠ③.5'-GATATCATGGGC-3'④.5'-TCTAGACTAGTG-3'⑤.提供RNA聚合酶特异性识别和结合的位点，驱动基因的转录〖祥解〗基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达。其中，基因表达载体的构建是基因工程的核心。【解析】（1）如果用一种限制酶来切割目的基因两端和质粒时，目的基因两端以及质粒会出现相同的黏性末端，可能会出现：目的基因—目的基因、目的基因—运载体、运载体—运载体，这样的自身环化现象，故构建重组质粒需用2种限制性核酸内切酶来切割目的基因和质粒。①Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点，①正确；②G基因编码蛋白质的序列中，不能有限制酶的切割位点，否则G基因将不完整，②错误；③酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列应该不同，否则Ti质粒会发生自我连接，③错误；④酶切后，G基因形成的两个黏性末端序列不相同，否则G基因会发生自我环化，④正确。故选①④。（2）Ti质粒上的T-DNA序列（可转移的DNA）能够携带的目的基因整合到植物细胞的染色体DNA上，从而使其携带的目的基因的遗传遵循孟德尔遗传定律。（3）据题图可知，图中筛选1的目的是筛选出含有重组质粒的农杆菌，即含有目的基因的农杆菌；该基因工程的目的是获得抗除草剂的转基因玉米，因此，进行筛选2时，应在培养基中加入除草剂和物质K；由于报告基因产物在真核细胞中能使无色物质K呈现蓝色，因此需要挑选细胞内呈现蓝色的愈伤组织细胞进行组织培养。（4）G基因导入受体细胞后（利用PCR扩增技术检测G基因），不一定转录形成mRNA（利用分子杂交技术检测G基因转录产物），转录形成的mRNA不一定翻译形成相应的蛋白质（用抗原—抗体杂交技术检测G基因编码的蛋白质），翻译形成相应的蛋白质不一定表现出抗除草剂性状（通过喷洒除草剂鉴别抗除草剂的幼苗），所以4种方法检出的含G基因植株的比例，从小到大依次是X4、X3、X2、X1。（5）A：耐高温的DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从引物的3'端延伸DNA链，因此PCR扩增需要引物。引物与目的基因所在DNA分子遵循碱基互补配对原则，所以扩增LEA基因时，需要在引物的5'端添加限制酶的识别序列；由于Luc中存在BamHⅠ识别序列，BamHⅠ会将Luc切断；一种酶切会导致载体、LEA自身环化及LEA反向连接，因此选择的限制酶是EcoRV和XbaⅠ。B：从图中看，LEA基因一端是GATATC(EcoRV识别序列)，对应引物为5'-GATATCATGGGC-3'；另一端是TCTAGA(Xbal识别序列)，对应引物为5'-TCTAGACTAGTG-3'。基因表达载体中启动子作用是提供RNA聚合酶特异性识别和结合的位点，驱动基因的转录。滨城高中联盟2024-2025学年高二下学期5月期中考试一、选择题（本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。）1.制作泡菜需要的菌种是（）A.酵母菌 B.醋酸菌 C.乳酸菌 D.毛霉【答案】C〖祥解〗（1）泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。（2）泡菜的制作过程：【详析】A、酵母菌用于制作果酒，A错误；B、醋酸菌用于制作果醋，B错误；C、乳酸菌用于制作泡菜，C正确；D、毛霉用于制作腐乳，D错误。故选C。2.下列有关变异与育种的叙述中，正确的是（）A.某植物经X射线处理后未出现新的性状，则没有新基因产生B.利用生长素处理得到无子备茄的过程中发生的变异是不可遗传的C.二倍体植株的花粉经离体培养便可得到稳定遗传的植株D.通过基因工程获得的抗虫棉，其原理是基因突变【答案】B〖祥解〗四种育种方法的比较如下：

杂交育种诱变育种单倍体育种多倍体育种方法

杂交→自交→选优

辐射诱变、激光诱变、化学药剂处理花药离体培养、秋水仙素诱导加倍

秋水仙素处理萌发的种子或幼苗原理

基因重组基因突变

染色体变异（染色体组先成倍减少，再加倍，得到纯种）

染色体变异（染色体组成倍增加）【详析】A、某植物经X射线处理如果发生了隐性突变，则性状不会改变，但有新基因的产生，A错误；B、利用生长素得到无子番茄的原理是生长素可以促进子房壁发育成果实，遗传物质没有改变，属于不可遗传变异，B正确；C、二倍体植株的花粉经离体培养可得到单倍体植株，需要经过秋水仙素加倍处理才能获得稳定遗传的植株，C错误；D、基因工程育种的原理是基因重组，D错误。故选B。3.关于动物细胞培养和植物组织培养叙述错误的是（）A.植物组织培养和动物细胞培养的理论基础相同，都利用了细胞的全能性B.植物克隆和动物克隆的技术基础分别是植物组织培养技术、动物细胞培养技术C.动物细胞培养过程中传代培养时均需要离心法收集细胞D.植物组织培养技术最终会形成完整植株【答案】A〖祥解〗细胞工程分为植物细胞工程和动物细胞工程，植物细胞过程包括植物组织培养、植物体细胞杂交，动物细胞工程包括动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体的制备、核移植技术等。【详析】A、植物组织培养的理论基础是细胞的全能性，而动物细胞培养的理论基础是细胞增殖（分裂），并未体现全能性，A错误；B、植物克隆依赖植物组织培养技术，动物克隆以细胞培养为基础，B正确；C、在动物细胞培养过程中的传代培养时，需要采用离心法收集细胞，以便更换培养液等操作，C正确；D、植物组织培养技术是将离体的植物器官、组织或细胞，经过脱分化形成愈伤组织，再经过再分化形成根、芽等器官，最终形成完整植株，D正确。故选A。4.下列有关哺乳动物受精作用的叙述，错误的是（）A.刚刚排出的精子要在雌性动物生殖道内发生相应生理变化才能获得受精的能力B.精子需要释放多种酶才能溶解、穿越卵细胞膜外透明带等结构C.精子触及卵细胞膜的瞬间发生卵细胞膜反应阻止后来精子进入D.卵子在输卵管内发育到MⅡ期时才具备受精的能力【答案】C〖祥解〗受精作用：概念：受精作用是指卵细胞和精子相互识别、融合成为受精卵的过程。基本过程：精子的头部进入卵细胞；精子的细胞核与卵细胞的细胞核融合；实质：精子的细胞核与卵细胞的细胞核相互融合。【详析】A、精子需在雌性生殖道内经历获能过程才能获得受精能力，该过程涉及生理变化，A正确；B、精子通过顶体反应释放酶类溶解卵丘细胞间物质和透明带，以穿越这些结构，B正确；C、卵细胞膜反应（卵子细胞膜阻止多精受精）发生在精子进入卵子之后，而非“触及瞬间”。触及卵细胞膜时触发的是透明带反应（阻止其他精子进入透明带），C错误；D、卵子需在输卵管中发育至减数第二次分裂中期（MⅡ期）才具备受精能力，D正确。故选C。5.PCR扩增目基因是一项根据DNA半保留复制的原理，在体外对目的基因进行大量复制的过程。与DNA在细胞内的复制相比，下列选项中两者间相同的是（）A.参与反应的酶 B.反应的模板C.反应的温度 D.反应的过程【答案】B〖祥解〗PCR技术是聚合酶链式反应的缩写，其原理与DNA半保留复制的原理相同，在体外提供参与复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。【详析】A、PCR技术用到耐高温的DNA聚合酶，DNA分子的体内复制需要DNA聚合酶和解旋酶，A不符合题意；B、PCR技术和体内DNA复制都是以DNA的每一条链为模板，模板是相同的，B符合题意；C、PCR技术是在较高温度条件下进行的，DNA分子的体内复制的温度低，C不符合题意；D、PCR技术是在较高温度条件下打开双链后进行扩增的，不是边解旋边复制的，DNA分子的体内边解旋边复制，D不符合题意。故选B。6.下列关于限制酶和DNA连接酶的描述，正确的是A.DNA连接酶可以恢复DNA分子中的氢键B.在基因工程中可以用DNA聚合酶代替DNA连接酶C.它们的化学本质都是蛋白质D.它们不能被反复利用【答案】C〖祥解〗【详析】A、DNA连接酶在两个DNA分子间形成磷酸二酯键，不可以恢复DNA分子中的氢键，A错误；B、DNA聚合酶将游离的脱氧核苷酸连接到DNA单链上，DNA连接酶连接DNA片段，不能代替，B错误；C、这两种酶的化学本质都是蛋白质，C正确；D、在酶的结构没有被破坏的情况下，可以被反复利用，D错误。故选C【『点石成金』】7.下列有关蛋白质工程说法正确的是（）A.蛋白质工程无需构建基因表达载体B.通过蛋白质工程改造后的蛋白质有的仍是天然的蛋白质C.蛋白质工程需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶D.蛋白质工程是在蛋白质分子水平上改造蛋白质的【答案】C〖祥解〗蛋白质工程就是通过对蛋白质化学、蛋白质晶体学和蛋白质动力学的研究，获得有关蛋白质理化特性和分子特性的信息，在此基础上对编码蛋白质的基因进行有目的的设计和改造，通过基因工程技术获得可以表达蛋白质的转基因生物系统，这个生物系统可以是转基因微生物、转基因植物、转基因动物，甚至可以是细胞系统。【详析】A.据分析可知，蛋白质工程需对编码蛋白质的基因进行有目的的设计和改造，A错误；B.蛋白质工程通过基因的修饰或基因的合成，对现有的基因进行改造或制造一种新的蛋白质，改造后的蛋白质有的不再是天然的蛋白质，B错误；C.蛋白质工程需对编码蛋白质的基因进行有目的的设计和改造，需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶，C正确；D.蛋白质工程是通过基因的修饰或基因的合成，对现有的基因进行改造或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。D错误；答案选C.8.为研究多种血糖调节因子的作用，我国科学家开发出胰岛素抵抗模型鼠。为扩增模型鼠数量，科学家通过诱导优良模型鼠体细胞转化获得诱导胚胎干细胞（iPS细胞），继而利用iPS细胞培育出与模型鼠遗传特性相同的克隆鼠，具体步骤如图所示。下列叙述错误的是（）A.诱导优良模型鼠体细胞转化为iPS细胞的过程类似于植物组织培养的脱分化B.胚胎移植前要检查胚胎质量并在囊胚或原肠胚阶段移植C.胚胎移植后，重构胚进一步扩大导透明带破裂的过程称为孵化D.为确定克隆鼠培育是否成功，须对黑色鼠3进行胰岛素抵抗的相关检测【答案】B〖祥解〗哺乳动物胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞；胚胎干细胞的细胞核一般较大，核仁明显，而细胞质相对较少；在功能上具有发育的全能性。植物组织培养的脱分化：让已经分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程。【详析】A、优良模型鼠体细胞在诱导因子的作用下转化为iPS细胞的过程与植物组织培养中的脱分化过程类似，是组织细胞恢复分裂能力的过程，A正确；B、胚胎移植前要检查胚胎质量并在桑葚胚或囊胚阶段移植，B错误；C、囊胚进一步扩大，会导致透明带的破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫做孵化，C正确；D、据图示，最终得到了黑色鼠3个体，实验最终目的为“开发出胰岛素抵抗模型鼠”，故为确定克隆鼠培育是否成功，须对黑色鼠3进行胰岛素抵抗的相关检测，D正确。故选B。9.下列关于目的基因导入受体细胞的描述，正确的是（）A.可以通过农杆菌转化法将目的基因导入动物的体细胞中B.通过基因工程大量获得胰高血糖素时，受体细胞选择大肠杆菌比酵母菌更有优势C.可以用PEG处理大肠杆菌将目的基因导入其细胞内D.该过程不发生碱基互补配对【答案】D〖祥解〗将目的基因导入受体细胞的方法：（1）将目的基因导入植物细胞：农杆菌转化法（约80%的转基因植物都是用这种方法获得的）；基因枪法：是单子叶植物中常用的一种基因转化方法，但是成本较高；花粉管通道法：这是我国科学家独创的一种方法，是一种十分简便经济的方法。（2）将目的基因导入动物细胞方法：显微注射技术。（最有效一种方法）（3）将目的基因导入微生物细胞原核生物特点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等（也是常用原核生物作为受体的原因）；方法：Ca2+处理法（感受态细胞法）。【详析】A、农杆菌转化法主要用于植物细胞，因其Ti质粒的T-DNA可转移至植物细胞，而动物细胞通常采用显微注射法或病毒载体法，A错误；B、胰高血糖素为多肽类激素，虽结构简单，但其前体需加工修饰，大肠杆菌（原核）缺乏内质网和高尔基体，无法完成真核蛋白的正确加工，而酵母菌（真核）更合适，B错误；C、大肠杆菌的转化常用Ca²⁺处理（感受态细胞法），PEG多用于植物原生质体或动物细胞融合，C错误；D、目的基因导入受体细胞的过程（如质粒进入细胞）仅为物理转移，未涉及DNA复制或重组，故无碱基互补配对，D正确。故选D。10.红茶菌液是一种以糖茶水为原料的微生物发酵饮料，能帮助消化，治疗多种胃病。红茶菌种是酵母菌、醋酸菌和乳酸菌的共生体，其制备流程为：红茶糖液→接种红茶菌种→发酵→红茶菌液。下列叙述错误的是（）A.为防止杂菌污染，接种前要将红茶糖液煮沸杀菌B.可通过加入陈红茶菌液的方法进行接种C.温度高低既会影响发酵速度，也会影响菌液口味D.发酵过程需要在严格的无氧条件下进行【答案】D〖祥解〗根据题目信息可知，红茶菌是由含酵母菌、醋酸菌和乳酸菌三种菌的混合菌液共同发酵完成，酵母菌为兼性厌氧菌，醋酸菌为好氧菌，乳酸菌为厌氧菌。【详析】A、接种前要将红茶糖液煮沸杀菌，目的是防止杂菌污染，A正确；B、可通过加入陈红茶菌液的方法进行接种，目的是增加菌种的数量，B正确；C、温度会影响细胞呼吸酶的活性，所以温度高低既会影响发酵速度，进而影响菌液口味，C正确；D、酵母菌属于兼性厌氧菌，醋酸菌属于严格的好氧细菌，乳酸菌属于厌氧细菌，活菌饮料由3种菌共同发酵产生，因此发酵的整个过程不需要在严格的无氧条件下进行，D错误。故选D。11.关于采用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物的实验，下列叙述不正确的是（）A.琼脂糖凝胶浓度的选择需考虑待分离DNA片段的大小B.凝胶载样缓冲液中指示剂作用是指示DNA分子的具体位置C.在同一电场作用下，DNA片段越长，迁移速率越慢D.琼脂糖凝胶中的DNA分子可在紫外光灯下被检测出来【答案】B〖祥解〗不同大小的DNA片段在不同浓度的琼脂糖凝胶中迁移率不同，一般来说，DNA片段越大，需要的琼脂糖凝胶浓度越低。将PCR产物与LoadingBuffer（含染色剂和甘油）混合后加入凝胶孔中，在电场作用下，不同长度的DNA片段按分子量大小分离，形成不同的条带。【详析】A、琼脂糖凝胶浓度影响凝胶孔径大小，浓度高适合分离小片段DNA，浓度低适合大片段，因此需根据待分离DNA片段大小选择浓度，A正确；B、凝胶载样缓冲液中的指示剂（如溴酚蓝）用于指示电泳进程，而非直接显示DNA位置，DNA需通过染色（如溴化乙锭）后在紫外线下观察，B错误；C、DNA片段越长，在凝胶中迁移阻力越大，迁移速率越慢，C正确；D、琼脂糖凝胶中的DNA经荧光染料（如溴化乙锭）染色后，可在紫外光灯下被检测，D正确；故选B。12.若下图中甲、乙、丙所代表的结构或物质如表中所示，则相应的叙述与图示不符的（）选项甲乙丙相应的叙述A植物体一部分愈伤组织植物体若甲离体培养，则①过程表示脱分化，②过程包括再分化B二倍体花粉单倍体经①和②过程形成的丙一般含有一个染色体组，③表示用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗C下丘脑垂体甲状腺①为促甲状腺激素激素释放激素，③表示的激素对甲和乙都能起到反馈调节作用D基因mRNA蛋白质①不同于②的碱基配对方式为T－A；在原核细胞中，①②过程可在细胞同一区域同时发生A.A B.B C.C D.D【答案】B〖祥解〗植物组织培养包括了脱分化和再分化；二倍体的单倍体含有一个染色体组，单倍体高度不育，只能用秋水仙素处理幼苗；甲状腺激素分泌的分级调节中，甲状腺分泌的甲状腺激素对下丘脑和垂体都有反馈调节的作用；转录不同于翻译的碱基配对方式是T－A，在原核细胞中，转录和翻译可以同时在细胞质中完成。【详析】A、由图可知甲到乙，乙可以到丙，而丙又可以到乙，甲离体培养，经过脱分化可以形成乙，即愈伤组织，愈伤组织经过再分化可以形成完整植株丙，A正确；B、如果甲是二倍体经过减数分裂形成乙花粉，花粉含1个染色体组，乙（花粉）经过离体培养形成单倍体植株丙，丙经秋水仙素处理形成甲（二倍体植株），由于单倍体高度不育，只能用秋水仙素处理幼苗，B错误；C、如果甲是下丘脑，其分泌的促甲状腺激素释放激素可以作用于垂体，垂体分泌促甲状腺激素作用于甲状腺，甲状腺分泌的甲状腺激素，对下丘脑和垂体都有反馈调节作用，C正确；D、如果甲表示的是基因，经过转录形成RNA，RNA翻译形成蛋白质，转录和翻译过程中的碱基配对方式不完全相同，在转录过程中是T-A，在翻译过程中是U-A。在原核细胞中，转录和翻译同时发生在细胞质中，D正确。故选B。13.融合PCR技术采用具有互补末端的引物，形成具有重叠链的PCR产物，通过PCR产物重叠链的延伸，从而将不同来源的任意DNA片段连接起来。其原理如图所示，据图分析不正确的是（）A.上述过程中使用的引物P2和P3的碱基不需要完全互补配对B.可在同一个反应体系中进行甲基因和乙基因的扩增C.融合PCR的第一步两条链重叠部位可互为另一条链的引物，不需要另加入引物D.若融合PCR的第二步获得128个融合基因，理论上该过程消耗了127个P1引物【答案】B〖祥解〗PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着5'→3'的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制。【详析】A、上述过程中使用的引物P2和P3的碱基不需要完全互补配对，只需要部分碱基互补配对即可，A正确；B、在融合PCR技术里，甲基因扩增依赖引物P1、P2，乙基因扩增依赖引物P3、P4。不同基因扩增所需引物特异性结合各自模板链，且反应条件（如引物与模板的适配性等）有差异，若放同一反应体系，引物间易相互干扰，无法精准、高效完成甲、乙基因各自扩增，所以不能在同一反应体系进行，B错误；C、结合图示可知，融合PCR的第一步两条链重叠部位即互补配对，可互为另一条链的引物，不需要另加入引物，C正确；D、融合PCR第二步，以第一步得到的产物为模板，根据DNA半保留复制，新合成128个融合基因，需新合成127条单链（第一条单链为模板链，不需要引物合成），理论上消耗127个P1引物，D正确。故选B。14.青霉素别名盘尼西林，它是最早发现、最先提纯、临床上应用最广的一种抗生素，发酵工程中常利用产黄青霉来生产青霉素，产黄青霉生长最适温度和产生青霉素的适宜温度不同。下列相关叙述错误的是（）A.选育菌种可以借助诱变育种B.发酵过程中使用的培养基可以利用高压蒸汽灭菌C.为了提高青霉素产量，发酵时不同阶段要控制不同温度D.根据青霉素的化学性质采用过滤、沉淀等方法从发酵液中提取青霉素【答案】D【详析】发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵、产品的分离、提纯等方面。〖祥解〗A、诱变育种通过物理或化学因素提高突变率，是选育高产青霉素菌种的常用方法，A正确；B、高压蒸汽灭菌法适用于对培养基和发酵设备等进行灭菌，能够有效地杀灭杂菌，保证发酵的顺利进行，B正确；C、由题干信息可知，发酵工程中常利用产黄青霉来生产青霉素，产黄青霉生长最适温度和产生青霉素的适宜温度不同，所以为了提高青霉素产量，发酵时不同阶段要控制不同温度，C正确；D、青霉素是一种小分子有机物，通常采用蒸馏、萃取、离子交换等方法从发酵液中提取，而过滤、沉淀等方法一般用于分离固体和液体，不适用于提取青霉素这种小分子有机物，D错误。故选D。15.基因工程常用土壤农杆菌Ti质粒作为载体，需把目的基因插入Ti质粒的T-DNA才能整合到植物染色体DNA上。下图表示抗虫棉培育中使用的三种限制酶A.B.C的识别序列以及Ti质粒上限制酶切割位点的分布，抗虫基因内部不含切割位点，两侧标明序列为切割区域。下列叙述错误的是A.应该使用酶B和酶C切取抗虫基因B.应该使用酶A和酶B切割Ti质粒C.成功建构的重组质粒含1个酶A的识别位点D.成功建构的重组质粒用酶C处理将得到2个DNA片段【答案】C〖祥解〗分析题图：在目的基因的左侧只有B酶的识别位点，右侧只有C酶的识别位点；质粒上含有三种酶的识别位点，其中T-DNA上含有酶A和酶B的识别位点，因此应选用酶B和酶C切取目的基因，选用酶A和酶B切割Ti质粒。【详析】A、在目的基因的左侧只有B酶的识别位点，右侧只有C酶的识别位点，因此应该使用酶B和酶C切取抗虫基因，A正确；B、应该将目的基因插入T-DNA，而T-DNA中含有A酶和B酶的切割位点，因此应该使用酶A和酶B切割Ti质粒，B正确；C、酶A和酶C切割形成的黏性末端相同，使用酶B和酶C切取抗虫基因，使用酶A和酶B切割Ti质粒，再用DNA连接酶连接两者形成重组质粒后，重组质粒不含酶A的识别位点，C错误；D、成功建构的重组质粒含有两个酶C的识别位点，因此用酶C处理重组质粒将得到2个DNA片段，D正确。故选C。二、选择题（共5小题，每小题3分，共15分。每小题给出的四个选项中，有一项或多项是符合题目要求的。全部选对得3分，选对但选不全得1分，有选错得0分。）16.拟采用“取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽”的方法繁殖一种名贵花卉，下列有关叙述正确的是（）A.在愈伤组织培养基中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞B.消毒的原则是既要杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害C.出芽是外植体经细胞脱分化后再分化的结果，受基因选择性表达的调控D.诱导生长物分化生根和生芽后，可将试管苗直接进行移栽以适应外界环境【答案】BC〖祥解〗植物组织培养的过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育形成植株，该过程受基因选择性表达的调控。【详析】A、愈伤组织细胞含有细胞壁，加入细胞融合诱导剂不会诱导细胞融合，因此不会得到染色体加倍的细胞，A错误；B、消毒指用比较温和的物理或化学方法清除或杀灭除芽孢外的所有病原微生物，使其数量减少达到无害化，同时减少消毒剂对细胞的伤害，B正确；C、外植体经细胞脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体后，一般先形成芽，再形成根，因此出芽是外植体经细胞脱分化后再分化的结果，受基因选择性表达的调控，C正确；D、诱导生长物分化生根和生芽后，可将试管苗先进行练苗后再进行移栽，以保证成活率，D错误。故选BC。17.如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图，有关叙述错误的是（）A.获得高效分解尿素细菌纯培养物的关键是防止杂菌污染，故应对红棕壤、培养基及用具进行灭菌B.步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素C.若要判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置未接种的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照D.步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，分解尿素能力高的会产生更多得NH3，溶液pH更高【答案】ABC〖祥解〗培养基的概念、种类及营养构成：（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。（2）种类：固体培养基和液体培养基。（3）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求；微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种、划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【详析】A、红棕壤中筛选微生物，不能对其灭菌，A错误；B、步骤③筛选分解尿素的细菌，培养基中应以尿素为唯一氮源，不能加入牛肉膏蛋白胨，B错误；C、若要判断选择培养基是否起到了选择作用，应该用接种了的全营养培养基作对照，即接种了的牛肉膏蛋白胨培养基来培养细菌，C错误；D、步骤④鉴定细菌分解尿素的能力时，挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力，分解尿素能力高的会产生更多得NH3，溶液pH更高，D正确。故答案为：ABC。18.在体细胞克隆猴培育过程中，为调节相关基因的表达，提高胚胎的发育率和妊娠率，研究人员将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重构胚，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂（TSA）处理，具体培育流程如下图所示。下列说法正确的是（）A.去核时使用的差速离心、紫外线长时间照射和化学物质处理等方法都没有穿透卵母细胞的透明带B.卵母细胞在去核环节实际操作中被去除的不是核膜包被的细胞核，而是纺锤体-染色体复合物C.组蛋白甲基化和乙酰化的表观遗传修饰都不利于重构胚的分裂和发育D.为得到遗传背景相同的克隆猴用于科研，可用机械方法将早期胚胎随机切割成2份或4份后再进行胚胎移植