病理科技术操作管理手册

病理科技术操作管理手册一、标本接收与登记1.标本接收每天由专人负责接收来自各临床科室的标本。接收时，需核对标本信息，包括患者姓名、性别、年龄、住院号、科室、标本名称、标本数量等，确保与申请单信息一致。对于信息不完整或有疑问的标本，及时与临床科室沟通补充或核实。检查标本的固定情况，固定液应足量（一般为标本体积的510倍），常用固定液为10%中性福尔马林。若标本未固定或固定不充分，应重新固定或延长固定时间。对于特殊标本，如需要特殊固定液（如Zenker固定液用于某些神经组织）的，应按照要求进行处理。2.标本登记将接收的标本信息准确录入计算机管理系统，同时在纸质登记本上进行登记。登记内容除上述基本信息外，还应包括标本接收时间、接收人等。对于批量标本，可采用条形码管理系统，提高工作效率和准确性。对标本进行编号，编号应具有唯一性，便于后续的查询和管理。编号规则可根据医院实际情况制定，一般采用年份+月份+流水号的形式。二、标本取材1.取材前准备取材人员应穿戴好防护用品，如工作服、口罩、手套等。检查取材所需的器械，如手术刀、剪刀、镊子等是否锋利、完好，确保取材操作顺利进行。根据标本类型和检查目的，准备合适的包埋盒和固定液。包埋盒应干净、无破损，规格根据标本大小选择。2.取材操作取材时，应严格按照解剖学部位和病变情况进行，确保所取组织具有代表性。对于手术切除标本，应全面观察标本的外观、大小、形状、颜色等，记录病变的位置、大小、数量等信息。对于肿瘤标本，除取病变组织外，还应取病变周围的正常组织、切缘组织等，以判断肿瘤的浸润范围和手术切缘是否阳性。取材厚度一般为23mm，大小根据包埋盒规格适当调整。取材过程中，应注意避免组织挤压、损伤，保持组织的完整性。对于微小标本，如穿刺活检标本，应小心操作，防止标本丢失。3.取材后处理将取材后的组织放入相应的包埋盒中，注明标本编号、取材部位等信息。包埋盒应及时放入固定液中，确保组织充分固定。清理取材台面和器械，将器械进行清洗、消毒，以备下次使用。三、脱水处理1.脱水剂选择常用的脱水剂为梯度酒精，一般从70%酒精开始，依次经过80%、90%、95%酒精，最后用无水酒精脱水。脱水剂的浓度和脱水时间应根据组织的大小、类型和固定情况进行调整。对于某些特殊组织，如脂肪组织、脑组织等，可采用特殊的脱水方法或添加其他脱水剂，如正丁醇、叔丁醇等，以提高脱水效果。2.脱水操作将固定好的组织从包埋盒中取出，放入脱水吊篮中。按照脱水程序，依次将组织放入不同浓度的脱水剂中进行脱水。脱水时间一般为：70%酒精24小时，80%酒精24小时，90%酒精24小时，95%酒精24小时，无水酒精Ⅰ24小时，无水酒精Ⅱ24小时。脱水过程中，应注意脱水剂的更换时间和顺序，确保脱水效果。同时，要保持脱水设备的正常运行，定期检查脱水剂的浓度和水位。四、透明处理1.透明剂选择常用的透明剂为二甲苯。透明剂应具有良好的透明效果，能使组织变得透明，便于石蜡浸入。2.透明操作将脱水后的组织从无水酒精中取出，放入透明剂中进行透明处理。透明时间一般为：二甲苯Ⅰ12小时，二甲苯Ⅱ12小时。透明时间不宜过长，以免组织变脆。透明过程中，应观察组织的透明程度，当组织变得透明、无白色混浊现象时，说明透明效果良好。五、浸蜡处理1.石蜡选择选择熔点适宜的石蜡，一般为5658℃。石蜡应纯净、无杂质，具有良好的韧性和硬度。2.浸蜡操作将透明后的组织从透明剂中取出，放入熔化的石蜡中进行浸蜡处理。浸蜡程序一般为：石蜡Ⅰ12小时，石蜡Ⅱ12小时，石蜡Ⅲ12小时。浸蜡过程中，应保持石蜡的温度恒定，避免石蜡凝固。浸蜡结束后，将组织放入包埋模具中，加入熔化的石蜡进行包埋。包埋时，应注意组织的摆放方向和位置，确保切片质量。六、切片制作1.切片前准备检查切片机的性能，确保切片机运转正常。安装合适的刀片，刀片应锋利、无缺口。将包埋好的组织块固定在切片机的标本夹上，调整组织块的位置和角度，使组织切面与刀片垂直。2.切片操作根据组织的类型和要求，调整切片厚度，一般为46μm。启动切片机，缓慢推进组织块，进行切片操作。切片过程中，应保持切片的连续性和完整性，避免切片破碎、折叠。对于较硬的组织，如骨组织、钙化组织等，可采用特殊的切片方法，如磨片法、脱钙后切片法等。3.切片后处理将切好的切片用毛笔轻轻挑起，放入温水中展平。然后将切片捞到载玻片上，用烤片机烘干，使切片牢固地附着在载玻片上。清理切片机和切片台面，将刀片取下进行清洗、消毒，妥善保存。七、染色处理1.苏木精伊红（HE）染色（1）脱蜡至水将烘干的切片放入二甲苯中脱蜡，一般为二甲苯Ⅰ510分钟，二甲苯Ⅱ510分钟。然后依次经过无水酒精Ⅰ、无水酒精Ⅱ、95%酒精、90%酒精、80%酒精、70%酒精，每个梯度酒精中浸泡23分钟，最后用蒸馏水冲洗。（2）苏木精染色将切片放入苏木精染液中染色510分钟，然后用自来水冲洗。用盐酸酒精分化液分化数秒，再用自来水冲洗，使细胞核呈蓝色。（3）伊红染色将切片放入伊红染液中染色13分钟，然后用蒸馏水冲洗。（4）脱水、透明、封片将染色后的切片依次经过95%酒精Ⅰ、95%酒精Ⅱ、无水酒精Ⅰ、无水酒精Ⅱ脱水，每个梯度酒精中浸泡23分钟。然后放入二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ中透明，每个二甲苯中浸泡510分钟。最后用中性树胶封片。2.特殊染色根据诊断需要，可进行特殊染色，如免疫组织化学染色、原位杂交染色等。特殊染色应严格按照操作规程进行，包括抗原修复、抗体孵育、显色等步骤。特殊染色过程中，应设置阳性对照和阴性对照，以确保染色结果的准确性。染色结束后，应及时观察和记录染色结果。八、封片1.封片剂选择常用的封片剂为中性树胶，具有良好的透明度和粘性。封片剂应无气泡、无杂质，对组织无损害。2.封片操作将染色后的切片从二甲苯中取出，用镊子轻轻夹起，在干净的滤纸上吸去多余的二甲苯。然后在切片上滴加适量的封片剂，盖上盖玻片，注意避免产生气泡。用滤纸擦去盖玻片周围多余的封片剂，将封好的切片放入切片盒中，妥善保存。九、质量控制1.标本质量控制定期检查标本的固定情况，确保固定液的浓度和用量符合要求。对固定不充分或固定过度的标本，应及时采取相应的处理措施。检查标本的取材部位和取材方法是否正确，确保所取组织具有代表性。对于取材不当的标本，应重新取材。2.切片质量控制定期检查切片的厚度、平整度、连续性等指标，确保切片质量符合要求。对于切片质量不佳的标本，应重新切片。检查切片的染色效果，包括细胞核和细胞质的染色情况、染色的均匀性等。对于染色不佳的切片，应重新染色。3.试剂质量控制定期检查试剂的质量，包括试剂的浓度、有效期、稳定性等。对过期或质量不合格的试剂，应及时更换。在使用新的试剂前，应进行质量验证，确保试剂的性能符合要求。十、档案管理1.切片档案管理将封好的切片按照编号顺序放入切片盒中，存放在切片柜中。切片柜应保持干燥、通风，避免切片受潮、发霉。建立切片档案数据库，记录切片的基本信息，如患者姓名、住院号、标本编号、切片日期、诊断结果等。方便查询和统计。2.病理报告档案管理将病理报告按照编号顺序进行装订，存放在档案柜中。档案柜应妥善保管，防止档案丢失、损坏。建立病理报告电子档案数据库，将病理报告扫描成电子文档，存储在计算机服务器中。方便远程查询和共享。十一、安全管理1.生物安全病理科工作人员应严格遵守生物安全操作规程，穿戴好防护用品，避免接触标本中的病原体。对废弃的标本、组织、试剂等应按照生物安全要求进行处理，如高压灭菌、化学消毒等。定期对工作环境进行消毒，保持工作环境的清洁卫生。2.化学安全病理科使用的试剂大多具有毒性和