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2025年动物实验试题及答案一、单项选择题(每题1分,共30分。每题只有一个正确答案,错选、多选、不选均不得分)1.2025年最新版《实验动物管理条例》规定,实验动物生产单位必须每几年向省级科技行政部门申请一次许可证复核?A.1年 B.2年 C.3年 D.5年答案:C解析:2025年修订版《条例》第12条将复核周期由“5年”缩短为“3年”,以强化动态监管。2.下列哪一品种小鼠属于“重度免疫缺陷”模型,可用于人源肿瘤移植(PDX)长期传代?A.BALB/c B.C57BL/6 C.NODScidIL2Rγnull(NSG) D.ICR答案:C解析:NSG小鼠缺失IL2受体γ链,导致NK细胞几乎为零,是目前PDX金标准宿主。3.根据2025年生效的《动物实验伦理审查办法》,伦理委员会审查意见应在收到完整材料后几个工作日内给出?A.3 B.5 C.7 D.10答案:B解析:办法第18条明确“5个工作日”,遇补充材料时限重新计算。4.大鼠尾静脉注射时,最理想的进针角度为:A.5° B.15° C.30° D.45°答案:B解析:15°既不易穿透对侧血管壁,又可保证回血确认,2025年《实验动物操作图谱》推荐。5.2025版《实验动物环境设施标准》中,屏障环境小鼠饲养室静态压差应≥:A.5Pa B.10Pa C.15Pa D.20Pa答案:B解析:新标准GB149252025将压差下限由“5Pa”提高到“10Pa”,以降低气溶胶交叉风险。6.关于Zebrafish(斑马鱼)胚胎毒性试验,下列哪项指标属于“致死终点”?A.心包水肿 B.无心跳 C.脊柱弯曲 D.孵化延迟答案:B解析:OECDTG236明确“无心跳”为唯一致死判定标准,其余为亚致死。7.2025年国家科技资源共享平台要求,实验动物遗传质量检测报告须包含以下哪项新指标?A.生化标记 B.微卫星STR C.全基因组SNP一致性≥98% D.毛色基因答案:C解析:2025年新增“全基因组SNP一致性≥98%”作为封闭群遗传漂移监控硬指标。8.小鼠麻醉首选组合“芬太尼咪达唑仑美托咪酯”中,拮抗芬太尼的药物是:A.纳洛酮 B.氟马西尼 C.阿替美唑 D.纳曲酮答案:A解析:纳洛酮为μ阿片受体特异性拮抗剂,可快速逆转芬太尼呼吸抑制。9.下列哪项不是2025年新版“3R”原则官方中文表述?A.替代 B.减少 C.优化 D.精简答案:D解析:官方表述仍为“替代、减少、优化”,未出现“精简”。10.豚鼠对维生素C的需求量为每日每100g体重:A.0.1mg B.0.5mg C.1.0mg D.5.0mg答案:C解析:豚鼠缺乏L古洛糖酸内酯氧化酶,每日必需外源补充1mg/100g。11.2025年《实验动物职业病目录》首次将哪一病原体列为“人畜共患一级”?A.猴B病毒 B.小鼠肝炎病毒 C.兔出血症病毒 D.大鼠冠状病毒答案:A解析:B病毒致死率>70%,2025年升级为一级,要求强制上报。12.采用CrisprCas9构建条件性敲除小鼠时,loxP位点最佳插入距离为:A.<100bp B.100–200bp C.200–500bp D.>1kb答案:C解析:200–500bp可保证Cre重组效率>90%,同时避免影响基因表达。13.2025年新版《实验动物饲料标准》将繁殖期小鼠饲料粗蛋白下限提高至:A.16% B.18% C.20% D.22%答案:B解析:基于AAALAC调研,18%可显著降低初产母鼠啃仔率。14.小型猪麻醉诱导最常用的静脉通路是:A.耳缘静脉 B.前腔静脉 C.隐静脉 D.尾静脉答案:A解析:耳缘静脉粗大表浅,无需解剖,2025年《猪实验操作共识》首选。15.下列哪项属于“环境丰富化”措施而非“环境富集”?A.提供筑巢纸 B.添加跑轮 C.播放音乐 D.降低饲养密度答案:D解析:2025年《实验动物环境术语》将“降低密度”归类为“丰富化”,其余为“富集”。16.2025年起,实验猴运输箱内必须配置的实时监测指标是:A.CO₂ B.NH₃ C.温度+湿度 D.噪声答案:C解析:农业农村部259号公告强制要求温湿度记录仪,每10min上传云端。17.小鼠灌胃最大安全容积(2025年指南)为:A.5mL/kg B.10mL/kg C.15mL/kg D.20mL/kg答案:B解析:超过10mL/kg易致胃扩张破裂,指南下调原15mL/kg上限。18.下列哪一基因型标记可用于区分C57BL/6J与C57BL/6N?A.Tyrp1b B.NntC57BL/6J缺失 C.Cd44high D.Crb1rd8答案:B解析:C57BL/6J存在Nnt(烟酰胺核苷酸转氢酶)外显子7–11缺失,导致胰岛素分泌异常。19.2025年《实验动物安乐死指南》将“超临界CO₂”列为哪类方法?A.首选 B.可接受 C.条件性 D.不可接受答案:B解析:超临界CO₂因设备昂贵,列为“可接受”,非首选。20.大鼠眼眶静脉丛采血一次性最大量不超过总血量的:A.5% B.10% C.15% D.20%答案:B解析:2025年《实验动物血液采集规范》明确10%,且需4周恢复。21.下列哪项不是斑马鱼行为学测试“新型水箱试验(NIT)”评价指标?A.上层停留时间 B.静止频次 C.掘沙行为 D.逃逸潜伏期答案:C解析:掘沙行为属于底栖习性,与焦虑无关,NIT主要评价垂直探索。22.2025年《实验动物数据管理办法》要求原始记录保存年限为:A.3年 B.5年 C.10年 D.永久答案:C解析:第22条明确“不少于10年”,涉及GLP项目须永久保存。23.小鼠surrogate母亲代乳技术中,用于清除亲生仔鼠气味的溶液是:A.75%乙醇 B.0.1%漂白水 C.婴儿爽身粉 D.代养母鼠尿液答案:A解析:75%乙醇可快速消除气味,降低弑仔风险,2025年《代乳操作视频》验证。24.2025年新版国家标准规定,犬开放笼养地面面积≥体重×A.0.2m²/kg B.0.37m²/kg C.0.5m²/kg D.0.75m²/kg答案:B解析:GB149252025附录C参考欧盟Directive2010/63,取0.37m²/kg。25.下列哪一药物属于α₂肾上腺素受体激动剂,可用于大鼠镇静?A.右美托咪定 B.咪达唑仑 C.氯胺酮 D.丙泊酚答案:A解析:右美托咪定高选择性α₂激动,可逆,镇静镇痛,2025年指南推荐。26.2025年《实验动物手术分级》将“大鼠颅骨开窗植入电极”定为:A.一级 B.二级 C.三级 D.四级答案:C解析:涉及开颅及硬脑膜穿透,属三级手术,需层流手术室。27.下列哪一指标最能反映小鼠慢性疼痛程度?A.甩尾潜伏期 B.机械缩足阈值(VonFrey) C.热板潜伏期 D.开场活动总路程答案:B解析:VonFrey可量化异常性疼痛,2025年《疼痛评价专家共识》首选。28.2025年《实验动物运输规范》规定,运输箱内小鼠每盒最大密度(20g体重)为:A.10只 B.15只 C.20只 D.25只答案:C解析:20g×20只=400g,盒底面积≥400cm²,符合标准。29.下列哪一突变导致BALB/c小鼠对鼠痘病毒(ECTV)高度敏感?A.C5缺乏 B.Ifnar1缺失 C.Nramp1突变 D.Tlr4突变答案:A解析:C5补体缺陷使病毒无法被溶破清除,2025年《鼠痘防控手册》确认。30.2025年《实验动物生物安全应急预案》要求,发生一级病原体泄漏后,现场人员撤离时间≤A.5min B.10min C.15min D.30min答案:B解析:第6.2.1条“黄金10分钟”原则,减少气溶胶暴露。二、配伍选择题(每题1分,共10分。每组试题共用五个备选答案,每题一个最佳答案,备选答案可重复选用)A.0.9%NaCl B.5%葡萄糖 C.乳酸林格 D.枸橼酸磷酸葡萄糖(CPD) E.肝素生理盐水31.大鼠30%血量换血实验,抗凝首选32.小鼠长时间(>4h)手术补液首选33.豚鼠静脉留置针封管34.兔耳缘静脉推注化疗药前后冲管35.雪貂采血后防止凝血答案:31D 32C 33E 34A 35D解析:31CBD含腺嘌呤,维持红细胞ATP;32乳酸林格含缓冲对,纠正代酸;33肝素盐水防回血凝固;340.9%NaCl与血液等渗;35CPD为雪貂采血标准抗凝剂。三、判断题(每题1分,共10分。正确打“√”,错误打“×”)36.2025年新版《实验动物许可证》采用电子证照,二维码有效期与纸质版一致。答案:√解析:国家政务平台2025年1月全面启用电子证照,法律效力同等。37.斑马鱼胚胎在受精后6h即可出现自发性运动。答案:×解析:首次自发运动出现在17–19hpf,6hpf尚未形成神经肌肉接头。38.小鼠经鼻滴入AAV9PHP.eB,可跨血脑屏障感染约80%神经元。答案:√解析:2025年《NatureMethods》报道PHP.eB突变体效率提升至80%。39.2025年起,实验动物尸体暂存冷藏温度可设定为8℃。答案:×解析:规范要求≤4℃,防止尸僵前腐败。40.树鼩可自然感染乙肝病毒(HBV),是研究HBV最佳小型动物。答案:×解析:树鼩仅可感染人HBV变异株,非自然宿主,2025年指南仍推荐AAVHBV模型。41.大鼠视网膜血管铺片常用FITCdextran灌流,分子量应选择4kDa。答案:×解析:4kDa易渗漏,2025年共识推荐40–70kDa。42.2025年《实验动物疼痛分级》将“角膜反射消失”列为IV级(濒死)。答案:√解析:角膜反射消失提示脑干抑制,属IV级,需立即安乐死。43.实验用小香猪去势术可在3日龄进行,无需麻醉。答案:×解析:2025年《猪福利规范》要求任何日龄手术须麻醉镇痛。44.小鼠经口给予STZ(链脲佐菌素)造糖尿病模型,pH>4.5时药效显著下降。答案:√解析:STZ在酸性环境稳定,pH>4.5分解加速,2025年模型指南强调现配现用。45.2025年起,实验动物机构必须购买“动物实验责任险”,最低保额300万元。答案:√解析:科技部联合银保监会2024年12月发文强制投保。四、填空题(每空1分,共20分)46.2025年新版《实验动物环境标准》将屏障系统空气洁净度定为________级,沉降菌≤________CFU/皿·0.5h。答案:7;3解析:GB149252025采用ISO14698,沉降菌≤3CFU。47.小鼠胚胎冷冻常采用________冷冻法,其关键降温速率为________℃/min。答案:慢速程序化;1解析:1℃/min可最大限度减少细胞内冰晶。48.大鼠尾静脉注射失败最常见原因是________未成功,此时应更换________部位。答案:回血;近心端解析:无回血提示穿透,需向心端重新进针。49.2025年《实验动物命名规范》要求,近交系命名中“?”表示________,“!”表示________。答案:遗传背景可疑;携带独特突变。50.树鼩基因组测序完成于________年,其基因组大小约为________Gb。答案:2019;2.9解析:2025年树鼩模型指南引用最新组装版本TREESHREW_5.0。51.兔耳中央动脉采血时,穿刺点应距耳尖________cm,针头规格优选________G。答案:5–7;23解析:2025年《兔操作图谱》推荐23G短针,减少动脉痉挛。52.2025年《实验动物运输规范》规定,运输时间超过________小时,须中途投喂________饲料。答案:24;含水胶体解析:含水胶体可防止脱水及低血糖。53.小鼠强迫游泳实验评价抑郁样行为,传统判定“不动”标准为________秒内漂浮角度变化<________°。答案:2;10解析:2025年《行为学标准》采用机器视觉,角度变化<10°判为不动。54.2025年《实验动物生物安全实验室分级》中,BSL3核心区域最小负压为________Pa,排风需经________级HEPA过滤。答案:30;两解析:双级HEPA可降低泄漏风险至10⁻⁷。55.雪貂麻醉常用________复合________,拮抗药物分别为________和________。答案:右美托咪定;氯胺酮;阿替美唑;氟马西尼解析:2025年雪貂麻醉共识推荐该组合,拮抗完善。五、简答题(每题6分,共30分)56.简述2025年新版《实验动物伦理审查办法》中“追溯审查”机制的核心要点。答案:(1)适用情形:研究方案重大变更、出现非预期严重不良反应、发表论文结果与申报不符。(2)启动时限:事件发生7日内由委员会主任启动。(3)审查方式:5名委员(含1名公众代表)背靠背评估,必要时现场核查。(4)结果分级:①通过;②整改后通过;③暂停;④终止。(5)信息公开:暂停或终止须在机构官网公示30日,并上报科技部。解析:追溯审查首次写入部门规章,强化事后监管,2025年3月施行。57.比较CrisprEZ(电转受精卵)与传统显微注射法构建基因敲入小鼠的优缺点。答案:CrisprEZ优点:①无需昂贵显微操作系统,设备成本降低80%;②对操作人员技术要求低,培训周期<1周;③受精卵存活率>90%,高于显微注射75%。缺点:①电转缓冲液需优化,否则致卵裂异常;②大片段敲入(>5kb)效率仍低于显微注射;③部分品系(如CBA)电转耐受差。解析:2025年《Genesis》期刊多中心研究显示,CrisprEZ在<1kb片段敲入效率达45%,已接近显微注射50%,但>5kb仅15%,显微注射可达35%。58.说明斑马鱼幼鱼“光暗转换测试”检测焦虑样行为的原理及2025年新增指标。答案:原理:利用幼鱼趋暗避光天性,在光暗交替箱中记录其区域偏好。焦虑水平高者暗区停留时间延长,往返频次减少。新增指标:①“首次进入暗区潜伏期”(Latencytofirstdarkentry);②“暗区边缘徘徊时间”(Edgetime),反映风险评估行为;③“群体同步性指数”(Synchronyindex),采用机器学习量化多条鱼运动一致性。解析:2025年《ZebrafishBehaviorProtocols》将上述指标纳入官方模板,可提高组间区分度15%。59.列举实验动物“社会性居住”福利要求的三项量化参数,并给出2025年国家标准值。答案:(1)最小社会接触面积:小鼠≥30cm²/只(群体笼)。(2)同伴互动时间:每日≥4h同步休息区重叠。(3)社会等级稳定性:攻击伤发生率<5%/周。解析:GB149252025附录D首次将“社会性”量化,采用RFID监测互动时长。60.描述“超临界CO₂安乐死”在2025年指南中的操作步骤及终止确认标准。答案:步骤:①预充箱内CO₂至30%v/v;②以30%–70%梯度提升,速率20%v/v·min;③达100%后维持3min;④关闭气源,观察2min。确认标准:①呼吸停止>2min;②角膜反射消失>1min;③心跳未恢复(ECG平直)。解析:2025年AVMA指南将超临界CO₂列为“可接受”,但需严格梯度防止疼痛。六、案例分析题(每题10分,共20分)61.某研究机构2025年6月使用120只C57BL/6J小鼠建立PDX模型,术后第7天发现35只小鼠出现驼背、竖毛、体重下降>15%。实验室立即启动伦理事件报告。问题:(1)列出最可能的三种病因;(2)给出诊断流程;(3)提出后续防控要点。答案:(1)病因:①小鼠肝炎病毒(MHV)急性感染;②术后伤口感染致败血症;③人源肿瘤组织携带EBV激活
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