2025年中国科学院广州生物医药与健康研究院潘光锦课题组面向院外招聘细胞治疗临床项目人员1人笔试历年典型考题（历年真题考点）解题思路附带答案详解

2025年中国科学院广州生物医药与健康研究院潘光锦课题组面向院外招聘细胞治疗临床项目人员1人笔试历年典型考题（历年真题考点）解题思路附带答案详解一、选择题从给出的选项中选择正确答案（共50题）1、在细胞治疗研究中，诱导多能干细胞（iPSC）技术具有重要应用价值。下列关于iPSC的叙述，正确的是：A.iPSC是通过体细胞核移植技术直接获得的B.iPSC具有发育为完整个体的全能性C.iPSC重编程过程中常使用Oct4、Sox2等转录因子D.iPSC只能分化为中胚层来源的细胞类型2、在生物医学研究中，流式细胞术常用于细胞表面标志物的检测。下列关于该技术的描述，正确的是：A.可同时分析细胞的大小、颗粒度和荧光信号B.仅适用于贴壁细胞的检测C.检测过程不需要单细胞悬液D.无法区分活细胞与死细胞3、在细胞治疗研究中，诱导多能干细胞（iPSC）的重编程过程通常不涉及以下哪种因子？A.Oct4B.Sox2C.Klf4D.p534、在干细胞向心肌细胞定向分化的实验流程中，以下哪一步骤最有助于提高分化的特异性与效率？A.添加表观遗传修饰抑制剂B.使用成纤维细胞滋养层C.阶段性调控Wnt信号通路D.增加血清浓度至20%5、某研究团队在开展细胞治疗临床项目时，需对患者进行免疫表型分析，以下哪种技术最适用于检测细胞表面特定蛋白的表达水平？A.聚合酶链式反应（PCR）B.流式细胞术（FlowCytometry）C.免疫印迹（WesternBlot）D.原位杂交（ISH）6、在细胞治疗产品制备过程中，为确保临床应用安全，必须严格控制外源性微生物污染，以下哪项是无菌检测中最常采用的标准方法？A.酶联免疫吸附试验（ELISA）B.电镜观察C.培养法检测（如细菌、真菌培养）D.核酸测序7、在细胞治疗研究中，诱导多能干细胞（iPSC）技术是一项关键突破。该技术通过导入特定转录因子使体细胞重编程为具有多向分化潜能的干细胞。下列哪组转录因子组合最初被证实可实现这一过程？A.Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4B.Nanog、Lin28、p53、c-MycC.Oct4、Sox2、Nanog、Lin28D.Klf4、p53、c-Myc、Sox28、在临床级细胞制备过程中，为确保细胞产品的安全性和有效性，必须严格控制外源性污染。下列哪项措施主要用于防止支原体污染？A.使用LAL试剂检测内毒素B.定期进行无菌试验和支原体PCR检测C.采用0.22微米滤膜过滤培养基D.在超净台中进行细胞操作9、在细胞重编程过程中，下列哪项技术最常用于将体细胞诱导为多能干细胞？A.基因敲除技术B.RNA干扰技术C.慢病毒载体介导的转录因子导入D.蛋白质直接注射法10、在细胞治疗产品的质量控制中，下列哪项检测最能反映细胞的致瘤性风险？A.细胞表面标志物检测B.核型分析C.细胞增殖能力测定D.端粒酶活性检测11、在细胞治疗领域，诱导多能干细胞（iPSC）技术的核心原理是通过导入特定转录因子使已分化的体细胞重编程为具有多向分化潜能的干细胞。下列哪组转录因子组合最初被证实可实现这一过程？A.Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4B.Nanog、Lin28、p53、c-MycC.Oct4、Sox2、Nanog、Lin28D.p53、Rb、c-Myc、Klf412、在临床级细胞制备过程中，为确保细胞产品的安全性，必须严格控制外源性微生物污染。以下哪种方法可用于检测细胞培养物中是否存在支原体污染？A.革兰氏染色法B.电镜扫描法C.PCR检测法D.台盼蓝染色法13、在细胞治疗的临床研究中，为确保治疗的安全性和有效性，研究人员需对患者进行长期随访。这一过程主要体现的医学伦理原则是：A.尊重自主性B.行善原则C.公正原则D.不伤害原则14、在干细胞向心肌细胞分化的过程中，以下哪种分子标志物的表达水平显著上升，可作为分化成功的生物学指标？A.Oct4B.NanogC.c-KitD.TroponinT15、在细胞治疗研究中，诱导多能干细胞（iPSC）技术具有重要应用价值。下列关于iPSC的叙述，正确的是：A.iPSC是通过体细胞核移植技术直接获得的B.iPSC具有发育为完整个体的全能性C.iPSC的制备通常需导入Oct4、Sox2等转录因子D.iPSC来源于胚胎内细胞团，具有多能性16、在开展细胞治疗临床项目过程中，对细胞产品的质量控制至关重要。以下哪项是评估细胞安全性最直接的关键检测指标？A.细胞表面标志物表达谱分析B.细胞增殖能力测定C.染色体核型分析D.目标基因表达水平检测17、在细胞治疗临床研究中，为确保治疗的安全性与有效性，研究人员需对干细胞来源的细胞进行严格的质量控制。下列哪项检测最能反映细胞的多能性特征？A.染色体核型分析B.端粒酶活性检测C.三胚层分化能力验证D.微生物污染检测18、在临床级细胞制备过程中，下列哪项操作最有助于降低免疫排斥反应的风险？A.使用小分子化合物诱导细胞增殖B.在开放环境中进行细胞传代C.采用自体来源的体细胞重编程获得iPSCD.增加血清在培养基中的比例19、在细胞治疗研究中，诱导多能干细胞（iPSC）技术的核心原理是通过导入特定转录因子使体细胞发生重编程。下列哪一组转录因子组合最初被证实可实现该过程？A.Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4B.Nanog、Lin28、p53、RbC.Sox2、Oct4、Wnt3a、BMP4D.c-Myc、Klf4、Notch、Hes120、在临床级细胞制备过程中，为确保生物安全性，必须对细胞终产品进行外源因子检测。下列哪种方法最适用于检测可能污染的支原体？A.革兰氏染色法B.电镜扫描法C.PCR扩增法D.蛋白质印迹法21、在细胞重编程过程中，下列哪项技术最常用于将体细胞诱导为多能干细胞？A.基因敲除技术B.RNA干扰技术C.慢病毒载体导入转录因子D.蛋白质直接注射22、在细胞治疗产品的质量控制中，下列哪项检测最能反映细胞的成瘤性风险？A.流式细胞术检测表面标志物B.核型分析C.体外分化潜能实验D.细胞增殖曲线测定23、在细胞重编程技术中，通过导入特定转录因子将体细胞转化为诱导多能干细胞（iPSCs），这一技术的突破性贡献主要归功于哪位科学家？A.詹姆斯·艾利森B.山中伸弥C.克雷格·梅洛D.约翰·格登24、在干细胞向心肌细胞分化的体外诱导过程中，以下哪一类信号通路起关键调控作用？A.Wnt/β-catenin通路B.NF-κB通路C.JAK-STAT通路D.PI3K-Akt通路25、在细胞治疗研究中，诱导多能干细胞（iPSC）技术的核心原理是通过导入特定转录因子使体细胞发生重编程。下列哪组转录因子组合最初被证实可实现这一过程？A.Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4B.Nanog、Lin28、p53、c-MycC.Oct4、Sox2、Nanog、Lin28D.Klf4、c-Myc、p53、Sox226、在干细胞向心肌细胞定向分化过程中，哪一信号通路的阶段性调控对其高效分化至关重要？A.Wnt/β-catenin通路B.JAK-STAT通路C.NF-κB通路D.PI3K-Akt通路27、在细胞治疗研究中，诱导多能干细胞（iPSC）技术的关键突破在于通过导入特定转录因子使体细胞重编程为具有多向分化潜能的细胞。下列哪组转录因子组合最初被证实可实现该过程？A.Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4B.Nanog、Lin28、p53、RbC.Oct4、Sox2、Nanog、Lin28D.c-Myc、Klf4、p53、Rb28、在干细胞向心肌细胞定向分化的实验中，下列哪种信号通路的阶段性调控最为关键？A.Wnt/β-catenin通路B.NF-κB通路C.JAK-STAT通路D.PI3K-Akt通路29、在细胞治疗产品的研发过程中，为确保其安全性和有效性，必须严格控制生产过程中的微生物污染。下列哪项技术最适用于检测细胞治疗产品中是否存在支原体污染？A.革兰氏染色法B.琼脂扩散试验C.PCR扩增检测法D.ELISA法30、在干细胞向心肌细胞定向分化的实验中，下列哪项分子标志物的表达最能特异性反映已成功分化为功能性心肌细胞？A.Oct-4B.NanogC.cTnT（心肌肌钙蛋白T）D.Sox231、某研究团队在开展细胞治疗技术路径优化时，需对多种影响因子进行系统性评估。若采用控制变量法设计实验，下列哪项操作最符合该方法的科学原则？A.同时改变培养温度、细胞密度和培养基成分以加快实验进度B.仅改变培养温度，保持细胞密度和培养基成分等其他条件一致C.根据经验优先调整最可能影响结果的变量，忽略其余因素D.在不同实验室条件下重复实验以验证结果普适性32、在细胞治疗产品的质量控制中，以下哪项指标最能反映其生物学功能的一致性与稳定性？A.细胞表面标志物的表达比例B.细胞培养所用血清的产地批次C.实验室操作人员的轮班安排D.细胞冻存管的外观颜色33、在细胞重编程技术中，通过导入特定转录因子将体细胞转化为诱导多能干细胞（iPSCs），这一技术的核心原理主要涉及下列哪一项生物学过程？A.细胞凋亡B.基因突变C.表观遗传重编程D.蛋白质翻译增强34、在细胞治疗产品的质量控制中，检测外源性病毒污染常用的方法是？A.流式细胞术B.逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）C.高效液相色谱D.细胞传代培养与显微镜观察35、在细胞重编程过程中，下列哪项技术最常用于将体细胞转化为诱导多能干细胞（iPSC）？A.基因敲除技术B.病毒载体介导的转录因子导入C.单克隆抗体筛选D.蛋白质电泳分离36、在细胞治疗临床前研究中，评估干细胞分化潜能的“金标准”实验方法是？A.体外拟胚体形成实验B.端粒酶活性检测C.动物体内畸胎瘤形成实验D.细胞周期流式分析37、在细胞重编程技术中，诱导多能干细胞（iPSCs）的生成通常依赖于特定转录因子的导入。下列哪组核心转录因子组合被广泛认为是实现体细胞重编程为多能干细胞的关键？A.Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4B.Nanog、Lin28、p53、RbC.Gata3、T-bet、Foxp3、RORγtD.Brachyury、Sox17、FoxA2、GATA438、在干细胞向心肌细胞定向分化的实验流程中，以下哪一信号通路的阶段性调控最为关键？A.Wnt/β-catenin通路B.JAK-STAT通路C.NF-κB通路D.Notch通路39、在细胞重编程过程中，下列哪项技术最常用于将体细胞诱导为多能干细胞？A.基因敲除技术B.病毒载体介导的转录因子导入C.CRISPR-Cas9基因编辑D.RNA干扰技术40、在干细胞向心肌细胞定向分化的实验中，下列哪个信号通路的调控最为关键？A.Wnt/β-catenin通路B.NF-κB通路C.JAK-STAT通路D.PI3K-Akt通路41、在细胞治疗研究中，诱导多能干细胞（iPSC）技术的核心原理是通过导入特定转录因子使体细胞重编程为具有多向分化潜能的干细胞。这一技术的突破性意义主要体现在哪个方面？A.实现了胚胎干细胞的无创获取B.避免了免疫排斥反应的发生C.克服了胚胎干细胞使用中的伦理争议D.提高了细胞分化的速度与效率42、在生物医学研究中，为确保细胞治疗产品的安全性和有效性，临床前研究阶段必须进行的关键评估包括以下哪项？A.基因序列的全外显子测序B.细胞的致瘤性与遗传稳定性检测C.患者知情同意书的标准化设计D.实验室仪器设备的采购审计43、在细胞重编程过程中，下列哪种因子不属于经典的Yamanaka因子？A.Oct4B.Sox2C.Klf4D.p5344、在干细胞向心肌细胞分化的过程中，下列哪个标志物最能特异性反映心肌细胞的成熟状态？A.NanogB.CD34C.TroponinI（cTnI）D.Nestin45、在细胞重编程过程中，诱导多能干细胞（iPSCs）的生成通常依赖于特定转录因子的导入。以下哪一组核心转录因子被广泛认为是诱导体细胞重编程为多能状态的关键组合？A.Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4B.Nanog、Lin28、p53、RbC.Gata3、T-bet、Foxp3、Runx1D.Brachyury、Sox17、FoxA2、GATA446、在细胞治疗产品的质量控制中，以下哪项检测最能反映细胞的成瘤性风险？A.流式细胞术检测表面标志物表达B.核型分析与拷贝数变异检测C.体外多向分化潜能实验D.端粒酶活性测定47、在细胞重编程过程中，下列哪种因子通常被用于诱导成体细胞转化为诱导性多能干细胞（iPSCs）？A.Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4B.p53、Rb、c-Myc、Lin28C.Nanog、Oct4、p21、Sox2D.c-Myc、Klf4、p53、Nanog48、在细胞治疗产品的质量控制中，下列哪项检测最能反映其潜在致瘤风险？A.细胞表面标志物流式分析B.染色体核型分析C.细胞增殖能力检测D.基因表达谱芯片分析49、在细胞重编程技术中，诱导多能干细胞（iPSCs）的产生通常需要导入特定的转录因子。下列哪一组因子被称为“山中因子”，是最早被证实可实现体细胞重编程的核心组合？A.Oct4、Sox2、Klf4、c-MycB.Nanog、Lin28、p53、c-MycC.Oct4、Sox2、Myc、p53D.Klf4、c-Myc、Nanog、Lin2850、在细胞治疗产品的质量控制中，以下哪项检测主要用于评估细胞是否存在外源性微生物污染，是保障临床应用安全的关键环节？A.核型分析B.支原体检测C.流式细胞术分析表面标志物D.定向分化能力检测

参考答案及解析1.【参考答案】C【解析】iPSC是通过导入特定转录因子（如Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc）将体细胞重编程为多能干细胞，而非核移植技术，A错误；iPSC具有多能性，能分化为三胚层细胞，但不能发育为完整个体，故不具全能性，B错误；其分化潜能广泛，可生成外、中、内三胚层细胞，D错误；C项正确，重编程关键因子包括Oct4、Sox2等，已被广泛验证。2.【参考答案】A【解析】流式细胞术可对悬浮单细胞进行快速分析，检测前向散射光（反映细胞大小）、侧向散射光（反映细胞颗粒度）及多种荧光标记信号，A正确；该技术要求样品为单细胞悬液，C错误；适用于悬浮和消化后的贴壁细胞，B错误；通过加入活细胞染料（如PI）可区分活死细胞，D错误。3.【参考答案】D【解析】诱导多能干细胞（iPSC）重编程核心技术由山中伸弥团队发现，经典四因子为Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc。这些转录因子可逆转体细胞至多能状态。p53是肿瘤抑制蛋白，虽在细胞重编程效率中起调控作用（抑制重编程），但并非重编程因子本身，且其抑制有助于提高iPSC生成效率。故不参与重编程核心因子的是p53。4.【参考答案】C【解析】心肌细胞分化依赖精确的发育信号模拟。研究表明，阶段性调控Wnt信号通路（早期激活、后期抑制）可高效引导干细胞向中胚层及心肌谱系分化。该策略已广泛应用于体外心肌细胞诱导体系。高血清浓度易导致非特异性分化，而表观抑制剂和滋养层虽有一定辅助作用，但特异性调控信号通路更为关键。5.【参考答案】B【解析】流式细胞术可快速、定量分析单个细胞表面或内部特定蛋白的表达，适用于免疫表型分型。PCR用于检测基因序列，不直接反映蛋白表达；WesternBlot虽可检测蛋白，但无法区分单细胞水平差异；原位杂交用于核酸定位，不适用于表面蛋白定量。因此，B选项最符合要求。6.【参考答案】C【解析】无菌检测的金标准是培养法，依据《中国药典》规定，通过硫乙醇酸盐培养基和胰酪大豆胨液体培养基培养，检测样本中是否存在细菌或真菌。ELISA用于抗原抗体检测，电镜用于形态观察，核酸测序虽可识别微生物，但易受污染干扰且未被列为常规无菌检测方法。故C正确。7.【参考答案】A【解析】2006年，日本科学家山中伸弥团队首次利用病毒载体将Oct4、Sox2、c-Myc和Klf4四种转录因子导入小鼠成纤维细胞，成功诱导出iPSC。该组合是iPSC技术的奠基性发现，后续研究在此基础上优化。选项A为原始核心因子组合，其余选项中的Nanog、Lin28、p53等虽与干细胞调控相关，但非初始重编程因子。8.【参考答案】B【解析】支原体污染难以通过常规无菌操作或过滤彻底清除，因其体积小、无细胞壁。LAL检测针对内毒素，滤膜虽可阻隔多数细菌但无法完全拦截支原体。超净台操作可减少污染风险，但无法特异性防控支原体。定期开展支原体PCR检测和培养法检测是国际通行的监测手段，能早期发现并控制污染，保障细胞治疗产品质量。9.【参考答案】C【解析】诱导多能干细胞（iPSC）技术由山中伸弥团队首创，其核心是通过病毒载体（如慢病毒）将Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc四个关键转录因子导入体细胞，重编程为多能状态。慢病毒载体能稳定整合基因并持续表达，是早期iPSC研究中最常用的方法。尽管后续发展出非整合型载体等更安全的技术，但慢病毒介导仍是经典且广泛应用的手段。其他选项中，基因敲除用于失活特定基因，RNA干扰用于抑制表达，蛋白质直接注射效率低且不稳定，均非主流重编程方法。10.【参考答案】B【解析】核型分析用于检测细胞染色体数目和结构是否异常，是评估细胞遗传稳定性的重要手段。在细胞治疗中，若细胞出现染色体非整倍体或易位等异常，提示存在恶性转化风险，直接关联致瘤性。细胞表面标志物用于鉴定细胞类型，增殖能力反映生长活性但不等同于癌变，端粒酶活性虽在癌细胞中升高，但单独检测特异性不足。因此，核型分析是监控细胞遗传安全性、评估致瘤风险的关键指标。11.【参考答案】A【解析】2006年，日本科学家山中伸弥团队首次通过导入Oct4、Sox2、c-Myc和Klf4四个转录因子，成功将小鼠成纤维细胞重编程为诱导多能干细胞。该组合被称为“山中因子”，是iPSC技术的奠基性发现。选项A正确。其他选项中的Nanog、Lin28等虽与多能性相关，但非最初核心组合，p53、Rb为抑癌基因，不主导重编程。12.【参考答案】C【解析】支原体无细胞壁，革兰氏染色法无效；其体积小，常规显微镜难以检出。PCR检测法具有高灵敏度和特异性，可扩增支原体特异性基因序列，是细胞治疗中支原体检测的常用方法。台盼蓝用于检测细胞活性，电镜成本高且不适用于常规筛查。故正确答案为C。13.【参考答案】B【解析】行善原则要求医务人员采取行动以促进患者健康、预防伤害、恢复健康和增进福祉。细胞治疗临床项目中长期随访的目的是监测疗效与潜在远期风险，及时干预可能的不良反应，从而最大化患者获益。这体现了主动为患者谋求最大利益，符合行善原则。虽然不伤害原则也涉及安全性，但其重点在于避免或减少伤害，而随访的核心目标是积极保障疗效与安全，因此更契合行善原则。14.【参考答案】D【解析】TroponinT是心肌细胞特异性结构蛋白，仅在功能性心肌细胞中高表达，是心肌分化的关键标志物。Oct4和Nanog为多能干细胞自我更新的核心转录因子，其表达应随分化而下降。c-Kit虽为某些干细胞表面标记，但并非心肌细胞特异。因此，检测到TroponinT表达升高，表明干细胞已成功向心肌细胞谱系分化，具有明确的生物学意义。15.【参考答案】C【解析】诱导多能干细胞（iPSC）是通过将特定转录因子（如Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc）导入体细胞，使其重编程为具有多能性的干细胞，C项正确。A项错误，核移植是克隆技术路径，非iPSC制备方法；B项错误，iPSC为多能性而非全能性，不能发育为完整个体；D项错误，来源于胚胎内细胞团的是胚胎干细胞（ESC），非iPSC。16.【参考答案】C【解析】染色体核型分析可检测细胞在体外培养过程中是否出现染色体畸变或基因组不稳定性，是评估细胞安全性最直接的指标，C项正确。A项用于鉴定细胞类型，B项反映功能活性，D项反映分化状态，三者均不直接反映遗传安全性。17.【参考答案】C【解析】细胞的多能性是指其可分化为三个胚层（内胚层、中胚层、外胚层）各类细胞的能力。验证多能性的“金标准”是通过体外拟胚体形成或体内畸胎瘤实验，观察是否能分化出三胚层细胞。染色体核型分析用于检测遗传稳定性，端粒酶活性反映细胞增殖潜能，微生物检测确保无污染，均不能直接证明多能性。故正确答案为C。18.【参考答案】C【解析】自体来源的诱导多能干细胞（iPSC）由患者自身体细胞重编程获得，其遗传背景与受者一致，分化后的细胞移植后免疫原性极低，可显著降低免疫排斥风险。小分子化合物促进增殖不直接影响免疫相容性；开放环境增加污染风险；高血清含量可能引入异种抗原，增加排斥可能。因此，C项是最有效降低排斥反应的策略。19.【参考答案】A【解析】2006年山中伸弥团队首次发现，导入Oct4、Sox2、c-Myc和Klf4四种转录因子可将小鼠成纤维细胞重编程为iPSC。后续研究证实该组合在人类细胞中同样有效，成为iPSC技术奠基性成果。其他选项中的因子虽参与干细胞调控，但非最初定义的核心组合。20.【参考答案】C【解析】支原体无细胞壁，革兰氏染色无效；电镜法成本高且灵敏度不足；蛋白质印迹主要用于特定蛋白检测。PCR扩增法具有高灵敏度、特异性强、检测周期短等优势，是现行《中国药典》推荐的支原体检测金标准方法之一，广泛应用于细胞治疗产品的质量控制。21.【参考答案】C【解析】诱导多能干细胞（iPSC）技术由山中伸弥团队首创，其核心是通过病毒载体（如慢病毒）将Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc四个关键转录因子导入体细胞，重编程为多能状态。慢病毒载体能稳定整合到宿主基因组并持续表达外源基因，因此被广泛应用。基因敲除和RNA干扰主要用于基因功能研究，蛋白质直接注射虽可行但效率低且不稳定。故C正确。22.【参考答案】B【解析】核型分析用于检测细胞是否存在染色体异常，如非整倍体或结构畸变，这些异常与成瘤性密切相关。在细胞治疗中，长期培养的细胞若出现基因组不稳定，可能增加肿瘤形成风险。流式细胞术用于表型鉴定，分化实验评估多能性，增殖曲线反映生长能力，均不直接反映遗传稳定性。因此，核型分析是评估成瘤风险的关键指标。故B正确。23.【参考答案】B【解析】2006年，日本科学家山中伸弥团队首次利用Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc四个转录因子，成功将小鼠成纤维细胞重编程为诱导多能干细胞（iPSCs），该成果开创了再生医学新领域，并因此获得2012年诺贝尔生理学或医学奖。选项D约翰·格登在早期核移植方面有贡献，但非iPSC技术直接创立者。其他选项与RNA干扰或免疫治疗相关，与题干无关。24.【参考答案】A【解析】Wnt/β-catenin信号通路在胚胎发育和干细胞定向分化中具有核心作用，尤其在心肌细胞分化早期激活、中期抑制的动态调控中至关重要。研究表明，适时激活Wnt信号可显著提升干细胞向心肌谱系分化效率。NF-κB主要参与炎症反应，JAK-STAT多介导细胞因子信号，PI3K-Akt通路则与细胞存活和代谢相关，虽在干细胞维持中有作用，但非心肌定向分化的主导通路。25.【参考答案】A【解析】2006年山中伸弥团队首次通过逆转录病毒导入Oct4、Sox2、c-Myc和Klf4四个转录因子，成功将小鼠成纤维细胞重编程为诱导多能干细胞（iPSC），该成果为细胞治疗奠定重要基础。后续研究证实该组合在人类细胞中同样有效。选项A为最初发现的关键因子组合，其他选项中的Nanog、Lin28、p53虽与多能性相关，但非原始重编程因子。26.【参考答案】A【解析】Wnt/β-catenin信号通路在心肌分化中呈现“先激活后抑制”的双相调控特征：早期激活促进中胚层形成，中期抑制则推动心肌前体细胞分化。大量研究证实，通过小分子调控Wnt通路（如CHIR99021激活、IWR抑制）可显著提高干细胞向心肌细胞的转化效率。其他通路主要参与免疫调节或细胞存活，非心肌定向分化核心调控机制。27.【参考答案】A【解析】2006年，日本科学家山中伸弥团队首次发现，通过导入Oct4、Sox2、c-Myc和Klf4四个转录因子，可将小鼠成纤维细胞重编程为诱导多能干细胞（iPSC）。该组合被称为“山中因子”，是iPSC技术的奠基性成果。后续研究虽优化了组合（如用Nanog或Lin28替代部分因子），但原始核心仍为这四个因子。选项A为原始有效组合，B、C、D中部分因子虽与多能性相关，但非初始重编程必需组合。28.【参考答案】A【解析】Wnt/β-catenin通路在心肌分化中具有“双相调控”作用：早期激活促进中胚层形成，随后抑制该通路则推动中胚层前体向心肌细胞分化。这一阶段性调控机制已被广泛应用于体外定向诱导方案中。NF-κB主要参与炎症反应，JAK-STAT多介导细胞因子信号，PI3K-Akt调控存活与代谢，虽在干细胞中有作用，但非心肌分化的主导通路。因此，A为最准确答案。29.【参考答案】C【解析】支原体无细胞壁，革兰氏染色法无法有效检出，且其生长缓慢，传统培养法耗时长。PCR扩增检测法具有高灵敏度、高特异性，能快速检测出低浓度的支原体核酸，是细胞治疗领域公认的支原体检测金标准之一。ELISA法主要用于蛋白质检测，对支原体检测适用性较低。琼脂扩散试验常用于抗生素敏感性测试，不适用于支原体检测。因此，C项正确。30.【参考答案】C【解析】Oct-4、Nanog和Sox2均为多能干细胞的核心转录因子，其表达代表未分化状态，若在分化后仍表达，提示分化不完全或存在畸变风险。cTnT是心肌细胞特异性的结构蛋白，仅在心肌细胞中表达，是公认的成熟心肌细胞标志物。检测cTnT的表达可明确细胞已向心肌谱系分化并具备功能特征。因此，C项为正确答案。31.【参考答案】B【解析】控制变量法的核心是每次实验只改变一个自变量，保持其他条件不变，以准确判断该变量对结果的影响。选项B仅改变培养温度，其余条件恒定，符合科学实验设计原则。A项同时改变多个变量，无法确定具体影响因素；C项缺乏系统性；D项涉及外部验证，不属于控制变量法的直接应用。故选B。32.【参考答案】A【解析】细胞表面标志物的表达比例是评估细胞表型和功能特性的重要指标，直接关联细胞的分化状态和治疗潜力，是质量控制中的关键参数。B、C、D均为非直接影响因素或无关变量。尽管血清批次可能间接影响细胞状态，但其本身不能反映细胞功能。只有A项具备生物学功能表征意义，符合质量一致性评价要求。33.【参考答案】C【解析】诱导多能干细胞技术依赖于外源导入Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc等转录因子，激活多能性基因网络，同时重置细胞的表观遗传状态，如DNA甲基化和组蛋白修饰模式，实现细胞命运的逆转。这一过程不依赖基因序列改变，而是通过表观遗传重编程完成细胞身份转换，因此正确答案为C。34.【参考答案】B【解析】RT-PCR可高灵敏度检测病毒核酸，适用于识别细胞制剂中的外源病毒污染，如支原体、逆转录病毒等。流式细胞术用于表面标志物分析，高效液相色谱多用于小分子检测，显微镜观察灵敏度不足。因此，RT-PCR是病毒检测的核心手段，答案为B。35.【参考答案】B【解析】诱导多能干细胞（iPSC）技术由山中伸弥团队首创，核心是通过病毒载体（如逆转录病毒或慢病毒）将Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc四个关键转录因子导入体细胞，重编程其表观遗传状态，使其回归多能性。该技术已被广泛应用。基因敲除用于失活特定基因，单克隆抗体用于免疫识别，蛋白质电泳用于分离蛋白，均不直接实现细胞重编程。故选B。36.【参考答案】C【解析】畸胎瘤形成实验是评估干细胞多能性的金标准。将干细胞注入免疫缺陷小鼠体内，若能形成包含三个胚层组织（如神经组织、软骨、上皮等）的畸胎瘤，则证明其具有全面分化潜能。体外拟胚体实验仅为初步验证；端粒酶活性反映细胞增殖能力；细胞周期分析用于研究增殖状态，均不能全面证明多能性。故选C。37.【参考答案】A【解析】诱导多能干细胞技术由山中伸弥团队于2006年首次建立，其核心是通过病毒载体导入四种转录因子：Oct4、Sox2、c-Myc和Klf4。这四种因子能重编程体细胞，使其恢复多能性，具备类似胚胎干细胞的分化潜能。该组合在后续研究中被广泛验证和应用，是细胞治疗与再生医学的重要基础。其他选项中的因子分别参与T细胞分化、内胚层或中胚层发育等过程，不构成经典重编程因子组合。38.【参考答案】A【解析】在干细胞分化为心肌细胞的过程中，Wnt/β-catenin信号通路具有阶段性调控作用：早期激活该通路可促进中胚层形成，而随后的抑制则有利于心肌前体细胞的特化与成熟。这一“先激活后抑制”的模式被广泛应用于体外心肌分化体系中，显著提升分化效率。JAK-STAT主要参与免疫调节，NF-κB与炎症反应相关，Notch通路虽参与细胞命运决定，但在心肌定向分化中的作用次于Wnt通路。39.【参考答案】B【解析】诱导多能干细胞（iPSC）技术由山中伸弥团队首次建立，其核心是通过病毒载体（如逆转录病毒或慢病毒）将Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc四个关键转录因子导入体细胞，实现细胞重编程。该方法是目前最经典的iPSC诱导手段。基因敲除、CRISPR-Cas9和RNA干扰主要用于基因功能调控或编辑，并非重编程的主流导入方式。因此，B选项正确。40.【参考答案】A【解析】Wnt/β-catenin信号通路在胚胎发育和干细胞分化中起核心作用，尤其在心肌细胞分化过程中具有阶段性调控功能：早期激活可促进中胚层形成，随后抑制该通路有助于心肌前体细胞的特化。大量研究表明，精确调控Wnt通路可显著提高心肌细胞分化效率。NF-κB主要参与炎症反应，JAK-STAT与细胞因子信号相关，PI3K-Akt则更多调控细胞存活与代谢，均非心肌定向分化的核心通路。故A为正确答案。41.【参考答案】C【解析】诱导多能干细胞技术通过将成年体细胞重编程为类似胚胎干细胞的状态，无需破坏胚胎，从而有效规避了传统胚胎干细胞研究中的伦理争议。虽然iPSC仍可能存在免疫原性问题，且分化效率有待提升，但其最核心的科学与伦理意义在于替代胚胎来源干细胞。因此，C项正确。42.【参考答案】B【解析】临床前研究重点在于评估治疗产品的安全性，其中细胞治疗产品需特别关注其长期移植后是否可能形成肿瘤（致瘤性）以及基因组是否稳定。遗传不稳定性可能引发癌变风险，因此必须通过体内外实验进行系统评估。A、C、D项虽相关，但非该阶段核心科学评估内容，故正确答案为B。43.【参考答案】D【解析】Yamanaka因子是诱导多