生物技术生物科技公司研究员实习报告

生物技术生物科技公司研究员实习报告一、摘要

2023年6月5日至8月22日，我在一家生物技术生物科技公司担任研究员实习生，负责基因编辑实验平台的搭建与优化。通过8周实践，独立完成CRISPR-Cas9系统验证实验，验证效率达到92.3%，较文献报道提升8.7%；参与构建了3种细胞系的基因敲除模型，其中2种模型成功率达到85%，显著缩短了后续实验周期。期间应用了分子克隆、PCR、流式细胞术等技术，熟练掌握T7E1胶电泳筛选阳性克隆的方法，并标准化了Ampicillin抗性筛选流程，将单克隆获取时间从7天缩短至4天。通过实验数据对比，验证了优化后引物设计策略对提高基因编辑效率的可行性，积累了可复用的实验优化方法论。

二、实习内容及过程

2023年6月5日入职时，目标是熟悉基因编辑项目的实验室操作规范。公司主要是做细胞治疗相关的研发，我在其中一个小组负责CRISPR-Cas9工具的验证和优化。初期跟着导师跑基础的分子克隆实验，7月10日独立完成第一批质粒构建，用了3天提取质粒，酶切验证时发现T7E1胶电泳只挑到68%的克隆，比预期低不少。导师说可能是引物设计问题，我重新做了优化，调整了退火温度和引物浓度，第二次实验阳性率提升到82%，但效率还是不够理想。

7月15日参与一个CAR-T细胞系的构建项目，遇到挑战是靶点基因大片段敲除效率低，传统PCR验证耗时太长。和同事讨论后决定用NGS测序来直接检测基因型，花了5天跑测序流程，7月20日拿到数据，比对发现原设计外显子跨度过大，导致PAM位点稀疏。重新设计了更精确的sgRNA，9月1日做验证实验，流式细胞术检测CD19表达阳性的细胞比例从45%提高到78%，CD19阴性细胞纯度也达标了。这个过程中学会了如何用生物信息学工具分析测序数据，还改进了sgRNA设计软件的筛选参数。

实验室管理上感觉培训有点赶，8月初刚开始接触细胞培养时，没系统学过细胞冻存复苏的标准曲线，导致我冻坏过3支细胞系，损失了上个月构建的工程细胞。后来我就自己建了电子表格记录培养基配比和细胞状态，每次传代都拍照留档。建议公司可以搞个新员工实操手册，把SOP都做成视频教程，这样上手更快。岗位匹配度上，我挺喜欢做实验，但有时候觉得数据分析的需求没被充分满足，希望以后能接触更多生物信息学相关的任务。这次实习让我意识到，做科研光会动手不行，还得懂怎么设计实验，怎么从数据里发现问题，这对我以后规划职业挺有启发，想往基因治疗转化医学方向发展，还得补不少课。

三、总结与体会

8周实习像是在真实世界里演练了一次科研全流程，从6月5日第一次接触细胞培养箱到8月22日提交最后一份实验记录，手里的数据是唯一的证明。验证CRISPR-Cas9效率时，我花了整整两周优化质粒构建和转染条件，最终把阳性克隆率从文献报道的78%提到92.3%，这个过程中体会到实验设计的重要性，一个微小的改动可能带来意想不到的效果。7月15日参与CAR-T细胞系构建项目时，面对靶点基因敲除效率低的问题，尝试了三种不同的sgRNA设计和三种转染试剂，最后用PEI试剂搭配优化后的gRNA组合，效率提升到78%，这个结果让我明白怎么把理论知识和实际问题结合起来解决。

实习最大的收获是学会了怎么处理实验中的不确定性。8月3日冻存细胞时手滑，冻坏了3支工程细胞系，当时压力挺大的，但导师教我分析问题要从失败中找原因，最后通过调整冻存培养基成分和速率，重新建系成功。这件事让我对科研的韧性有了直观认识，也意识到责任心有多重要。现在回头看，实习就像把书上的知识翻译成实际操作语言，以前觉得抽象的分子克隆、细胞分选，现在都能跟实际数据挂钩，比如流式细胞术检测到的CD19表达阳性细胞比例从45%提升到78%，这种量化的改变很直观。

对我来说，这次经历是从学生到准职场人的过渡。以前做实验靠感觉多，现在知道每一步都要有数据支撑，比如基因编辑效率要结合测序和流式双重验证。接下来打算把学到的方法论用在后续的毕业设计中，特别是优化了sgRNA设计流程，会尝试用机器学习工具辅助筛选，这学期就去考个实验动物上岗证，为以后想去的基因治疗公司做准备。行业里基因编辑越来越往精准化、自动化发展，这次实习让我看到，未来能掌握生物信息学和自动化实验技能的人会更有优势，所以打算下学期多选修一些计算生物学和机器人技术方向的课程。

四、致谢

8周实习经历，离不开公司提供的机会。导师在基因编辑实验上给了我很多实际指导，比如sgRNA设计和T7E1验证那段时间，他耐心解释文献，帮我分析数据偏差。同事也帮了不少忙，特别是细胞培养方面，他们分享的冻存复苏技巧救了我好几次细胞系，后来我独立做