肠道菌群丁酸代谢物与放疗增敏作用

肠道菌群丁酸代谢物与放疗增敏作用演讲人01肠道菌群丁酸代谢物与放疗增敏作用02引言：放疗在肿瘤治疗中的挑战与肠道菌群调控的新视角03肠道菌群丁酸代谢物的来源、代谢与生理功能04放疗抵抗的机制与丁酸代谢物的潜在调控靶点05丁酸代谢物调控放疗增敏的多维度作用机制06丁酸代谢物放疗增敏的临床转化前景与挑战07总结与展望目录01肠道菌群丁酸代谢物与放疗增敏作用02引言：放疗在肿瘤治疗中的挑战与肠道菌群调控的新视角引言：放疗在肿瘤治疗中的挑战与肠道菌群调控的新视角放射治疗（简称“放疗”）作为肿瘤综合治疗的三大支柱之一，通过电离辐射诱导肿瘤细胞DNA损伤、抑制增殖、促进凋亡，在鼻咽癌、宫颈癌、肺癌、头颈部鳞癌等多种恶性肿瘤的治疗中发挥着不可替代的作用。然而，临床实践中放疗疗效常面临“放疗抵抗”的严峻挑战——部分肿瘤细胞因内在或外在因素表现出对辐射的耐受性，导致局部复发率升高、远期生存率不理想。放疗抵抗的机制复杂，涉及肿瘤细胞DNA损伤修复增强、抗氧化系统激活、细胞周期紊乱、肿瘤微环境（TME）免疫抑制等多个维度，传统放疗增敏策略（如化疗增敏剂、靶向药物）在提高疗效的同时，常伴随显著毒性反应，限制了临床应用。近年来，肠道菌群作为“第二基因组”，其与宿主的相互作用在肿瘤发生、发展及治疗响应中的调控作用日益受到关注。肠道菌群通过代谢产物（如短链脂肪酸SCFAs、次级胆汁酸、色氨酸代谢物等）介导宿主-微生物群对话，引言：放疗在肿瘤治疗中的挑战与肠道菌群调控的新视角参与免疫调节、能量代谢、屏障功能维护等关键生理过程。其中，丁酸作为短链脂肪酸的核心成员，由肠道菌群（如柔嫩梭菌、普拉梭菌、直肠真杆菌等）通过膳食纤维厌氧发酵产生，不仅是结肠上皮细胞的主要能量来源，更在抗炎、免疫调节、维持肠道屏障完整性等方面发挥重要作用。近年来，多项基础与临床研究提示，肠道菌群丁酸代谢物可能通过调控肿瘤细胞放射敏感性、重塑肿瘤免疫微环境、保护肠道免受放疗损伤等多重机制，成为放疗增敏的新靶点。本文将系统阐述丁酸的来源与代谢特征、放疗抵抗的关键机制、丁酸代谢物调控放疗增敏的多维度作用及其临床转化前景，以期为优化放疗策略、改善肿瘤患者预后提供新思路。03肠道菌群丁酸代谢物的来源、代谢与生理功能丁酸的来源与肠道菌群合成机制丁酸（Butyricacid，C4H8O2）是一种短链脂肪酸，分子量为88.11，在常温下为无油状液体，具有特殊的奶酪气味。在人体肠道中，约95%的丁酸由肠道菌群利用膳食碳水化合物（主要是膳食纤维）通过厌氧发酵合成，仅5%来自饮食直接摄入（如黄油、奶酪等动物性食品）。参与丁酸合成的核心菌群包括厚壁菌门（Firmicutes）的梭菌纲（Clostridia）IV、XIVa簇（如柔嫩梭菌Faecalibacteriumprausnitzii、普拉梭菌Clostridiumleptum）、部分拟杆菌门（Bacteroidetes）成员，以及部分真杆菌属（Eubacterium）、罗斯氏菌属（Roseburia）等。这些菌群通过复杂的酶级联反应将膳食纤维分解为丁酸，具体代谢途径包括：丁酸的来源与肠道菌群合成机制1.经典途径（乙酰辅酶A途径）：菌群将膳食纤维（如抗性淀粉、果胶、菊粉等）分解为单糖、寡糖，经糖酵解产生丙酮酸，丙酮酸在铁氧还蛋白氧化还原酶作用下转化为乙酰辅酶A，乙酰辅酶A经乙酰辅酶A乙酰转移酶（Thlase）、3-羟基丁酰辅酶A脱氢酶（Hbd）、巴豆酸辅酶A水合酶（Crt）、丁酰辅酶A脱氢酶（Bcd）、丁酸激酶（Buk）和磷酸转丁酸酶（Ptb）的作用，最终生成丁酸。该途径是梭菌纲IV、XIVa簇的主要合成路径，贡献了肠道中约60%-70%的丁酸产量。2.替代途径（谷氨酸途径）：部分菌群（如部分真杆菌属）通过谷氨酸代谢途径合成丁酸，以谷氨酸为前体，经谷氨酸脱羧酶生成γ-氨基丁酸（GABA），再通过转氨、脱羧等步骤转化为丁酸。该途径在特定菌群丰度较高时（如肠道炎症状态下）可能发挥补偿作用。丁酸的来源与肠道菌群合成机制3.交叉代谢途径：部分菌群可利用乳酸、乙醇等中间产物经“乳酸-丁酸途径”或“乙醇-丁酸途径”合成丁酸，例如部分罗斯氏菌属菌株可利用乳酸经乳酸脱氢酶、丙酮酸-铁氧还蛋白氧化还原酶等酶转化为丁酸，这一途径在膳食纤维摄入不足、肠道菌群结构紊乱时可能被激活，以维持丁酸产量。丁酸的吸收、代谢与生理功能丁酸在结肠上皮细胞（尤其是结肠隐窝细胞）中被快速吸收，通过单羧酸转运体（MCT1、SMCT1）进入细胞，在细胞质中经丁酸辅酶A合成酶（Butyryl-CoAsynthetase，BCS）催化转化为丁酰辅酶A，随后进入线粒体参与三羧酸循环（TCA），最终氧化生成ATP，为结肠上皮细胞提供约70%的能量需求。此外，部分丁酸可经β-氧化生成酮体，或作为组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACi）进入细胞核，调控基因表达。丁酸的生理功能广泛且复杂，可概括为以下三个方面：1.维持肠道屏障完整性：丁酸通过促进紧密连接蛋白（如occludin、claudin-1、ZO-1）的表达与组装，增强肠道上皮细胞间的紧密连接，抑制肠黏膜通透性升高；同时刺激黏液素（MUC2）分泌，维持黏液层厚度，抵御病原菌入侵。此外，丁酸还可通过激活AMPK信号通路，抑制NF-κB炎症通路，减轻肠道炎症损伤，是“肠-轴”稳态的关键维护因子。丁酸的吸收、代谢与生理功能2.免疫调节作用：丁酸可通过多种机制调控宿主免疫系统：①作为HDACi，抑制组蛋白去乙酰化酶活性，促进调节性T细胞（Treg）分化，抑制过度炎症反应；②促进树突状细胞（DC）成熟，增强其抗原呈递能力，引导Th1型免疫应答；③抑制NLRP3炎症小体活化，减少IL-1β、IL-18等促炎因子释放；④增强肠道相关淋巴组织（GALT）中IgA分泌，强化黏膜免疫防御。3.抗肿瘤与代谢调节作用：在肿瘤层面，丁酸可通过诱导肿瘤细胞周期阻滞（如G1期阻滞）、促进凋亡（激活Caspase通路、抑制Bcl-2表达）、抑制转移（抑制EMT过程、减少MMPs表达）发挥直接抗肿瘤作用；同时，其HDACi活性可激活p53抑癌基因，抑制癌基因（如c-Myc、β-catenin）表达，抑制肿瘤细胞增殖。在代谢层面，丁酸可改善胰岛素敏感性、调节脂质代谢、减轻代谢性炎症，与肥胖、糖尿病等代谢性疾病密切相关。04放疗抵抗的机制与丁酸代谢物的潜在调控靶点放疗抵抗的核心机制放疗通过诱导DNA双链断裂（DSBs）、氧化应激、细胞周期紊乱等机制杀伤肿瘤细胞，而放疗抵抗的本质是肿瘤细胞通过多种机制“逃避”辐射损伤，具体包括：1.DNA损伤修复增强：肿瘤细胞可通过同源重组修复（HRR）、非同源末端连接（NHEJ）等通路修复辐射诱导的DNA双链断裂，其中关键蛋白（如ATM、ATR、DNA-PKcs、BRCA1/2、Rad51）的高表达或活化与放疗抵抗密切相关。例如，DNA-PKcs是NHEJ通路的核心激酶，其过表达可显著提高肿瘤细胞对辐射的耐受性。2.抗氧化系统激活：辐射诱导的活性氧（ROS）是杀伤肿瘤细胞的关键效应分子，而肿瘤细胞通过上调超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）等抗氧化酶，或激活Nrf2/ARE抗氧化通路，清除过量ROS，减轻氧化损伤，从而抵抗放疗。放疗抵抗的核心机制3.肿瘤微环境免疫抑制：放疗可促进肿瘤细胞释放免疫抑制性细胞因子（如TGF-β、IL-10）、招募调节性T细胞（Treg）、髓源性抑制细胞（MDSCs）等免疫抑制细胞，抑制细胞毒性T淋巴细胞（CTL）活性，形成“冷肿瘤”微环境，削弱放疗的“远端效应”（abscopaleffect）。014.细胞周期与凋亡紊乱：肿瘤细胞可通过阻滞细胞周期于辐射抵抗期（如S期、G2/M期），为DNA修复提供时间；或通过上调抗凋亡蛋白（如Bcl-2、Survivin）、抑制促凋亡蛋白（如Bax、Caspase-3），逃避辐射诱导的凋亡。025.肿瘤干细胞（CSCs）富集：肿瘤干细胞具有自我更新、多向分化及强DNA修复能力，是放疗抵抗和复发的重要根源。放疗可诱导肿瘤细胞“去分化”为干细胞样表型，或通过Notch、Hedgehog、Wnt等干细胞信号通路维持CSCs干性，导致残余病灶存活。03丁酸代谢物调控放疗增敏的潜在靶点基于放疗抵抗的机制，丁酸代谢物可通过多维度、多靶点调控肿瘤细胞放射敏感性，具体潜在靶点包括：1.DNA损伤修复通路：丁酸作为HDACi，可抑制组蛋白去乙酰化酶活性，改变染色质结构，使DNA损伤位点“不可及”，抑制DNA-PKcs、ATM等修复蛋白的表达与活化，阻碍NHEJ和HRR通路修复DNA双链断裂。例如，研究显示，丁酸处理可降低肺癌A549细胞中DNA-PKcs蛋白表达，增强辐射诱导的γ-H2AX（DSBs标志物）聚集，提示DNA损伤修复抑制是其放疗增敏的重要机制。2.氧化应激与抗氧化通路：丁酸可通过适度增加ROS水平（低于细胞毒性剂量），打破肿瘤细胞内氧化还原平衡，诱导氧化损伤；同时抑制Nrf2核转位，下调抗氧化酶（如SOD2、HO-1）表达，削弱肿瘤细胞清除ROS的能力，增强辐射对肿瘤细胞的杀伤效应。例如，结直肠癌细胞中，丁酸可抑制Nrf2/ARE通路，降低辐射后细胞内GSH水平，增加ROS积累，促进细胞凋亡。丁酸代谢物调控放疗增敏的潜在靶点3.肿瘤微环境免疫重塑：丁酸可通过促进Treg分化、增强DC抗原呈递、抑制MDSCs功能等，调节肿瘤微环境免疫平衡。更重要的是，丁酸可增强肿瘤细胞表面MHC-I类分子表达，促进肿瘤抗原呈递，激活CTL活性，将“免疫冷肿瘤”转化为“免疫热肿瘤”，增强放疗的免疫原性细胞死亡（ICD）效应。例如，头颈鳞癌细胞中，丁酸联合放疗可增加肿瘤浸润CD8+T细胞比例，抑制Treg扩增，改善免疫抑制微环境。4.细胞周期与凋亡调控：丁酸可通过上调p21Cip1/Waf1、p27Kip1等细胞周期抑制蛋白，诱导G1期阻滞，使肿瘤细胞同步化于辐射敏感期（如G1/S期）；同时下调Bcl-2、Survivin，激活Bax/Caspase-3通路，促进辐射诱导的凋亡。例如，食管癌细胞中，丁酸可诱导G1期阻滞，增强辐射对肿瘤细胞的杀伤作用，其机制与p21表达上调及CyclinD1/CDK4通路抑制相关。丁酸代谢物调控放疗增敏的潜在靶点5.肿瘤干细胞干性调控：丁酸可抑制Notch、Hedgehog等干细胞信号通路，降低CD133、CD44等干细胞标志物表达，诱导肿瘤干细胞分化，削弱其自我更新能力。例如，乳腺癌干细胞中，丁酸可抑制Hedgehog通路关键蛋白Gli1表达，降低干细胞比例，增强辐射对干细胞的杀伤作用。05丁酸代谢物调控放疗增敏的多维度作用机制直接调控肿瘤细胞放射敏感性：从分子到细胞抑制DNA损伤修复，增强辐射诱导的DNA损伤丁酸通过HDACi活性改变染色质构象，使DNA损伤位点难以被修复因子识别；同时抑制DNA修复关键蛋白的表达与活化，阻碍修复通路激活。例如：-抑制NHEJ通路：丁酸可降低DNA-PKcs、Ku70/80等NHEJ核心蛋白的表达，抑制其磷酸化活化，使辐射诱导的DSBs无法有效修复。研究显示，结直肠癌细胞HCT116经丁酸处理后，DNA-PKcs蛋白表达下降40%，辐射后γ-H2AX焦点持续时间延长，细胞存活率降低30%。-抑制HRR通路：丁酸可下调BRCA1、Rad51等HRR蛋白表达，阻碍同源重组修复。在卵巢癌细胞SKOV3中，丁酸处理可抑制BRCA1核转位，辐射后Rad51焦点形成减少，细胞对辐射敏感性显著提高。直接调控肿瘤细胞放射敏感性：从分子到细胞调控细胞周期与凋亡，增强辐射杀伤效应丁酸可通过细胞周期同步化和凋亡通路调控，使肿瘤细胞对辐射更敏感：-细胞周期同步化：丁酸通过上调p21、p27，抑制CyclinD1/CDK4、CyclinB1/CDK1等细胞周期蛋白复合物，诱导G1期或G2/M期阻滞。例如，肺癌A549细胞经丁酸处理后，G1期细胞比例从35%增至58%，而S期细胞比例从42%降至25%，此时辐射可使更多细胞滞留于辐射敏感的G1期，增强杀伤效果。-促进凋亡：丁酸可下调抗凋亡蛋白Bcl-2、Survivin，激活促凋亡蛋白Bax，促进线粒体细胞色素C释放，激活Caspase-9/-3级联反应。在肝癌HepG2细胞中，丁酸联合放疗可诱导Caspase-3活化率提高2.5倍，细胞凋亡率从单纯放疗的18%升至45%。直接调控肿瘤细胞放射敏感性：从分子到细胞打破氧化还原平衡，增强氧化应激损伤丁酸可适度增加肿瘤细胞内ROS水平，同时抑制抗氧化系统，使氧化应激超过细胞耐受阈值，诱导死亡。例如：-增加ROS积累：丁酸通过抑制线粒体电子传递链复合物I活性，增加电子漏出，诱导ROS生成。在胰腺癌细胞Panc-1中，丁酸处理可使细胞内ROS水平升高1.8倍，联合放疗后ROS进一步升至3.2倍，细胞存活率降至单纯放疗的60%。-抑制Nrf2通路：丁酸可促进Nrf2泛素化降解，抑制其核转位，下调抗氧化酶（如SOD2、HO-1）表达。在前列腺癌细胞PC-3中，丁酸处理可降低Nrf2核表达水平60%，辐射后细胞内GSH含量下降50%，氧化损伤标志物MDA水平升高2倍。重塑肿瘤微环境：从免疫到代谢调节免疫微环境，增强放疗的免疫原性丁酸可通过多重机制激活抗肿瘤免疫，将放疗的“局部杀伤”转化为“系统性免疫应答”：-促进DC成熟与T细胞活化：丁酸可刺激DC表面MHC-II、CD80、CD86等共刺激分子表达，增强其抗原呈递能力，促进naïveT细胞向Th1分化，增强CTL活性。在黑色素瘤B16F10小鼠模型中，丁酸联合放疗可增加肿瘤浸润DC成熟率（从25%升至55%）、CD8+T细胞比例（从12%升至28%），抑制肿瘤生长。-抑制免疫抑制细胞：丁酸可促进Treg分化（通过HDACi活性Foxp3去抑制），但同时抑制Treg抑制功能（减少IL-10、TGF-β分泌）；抑制MDSCs增殖与分化（通过抑制STAT3通路），减少其ARG1、iNOS表达，削弱其对T细胞的抑制。在结直肠癌CT26小鼠模型中，丁酸处理可降低肿瘤浸润MDSCs比例（从30%降至15%），提高CD8+/Treg比值（从2.5升至5.0）。重塑肿瘤微环境：从免疫到代谢调节免疫微环境，增强放疗的免疫原性-增强免疫原性细胞死亡（ICD）：放疗可诱导肿瘤细胞释放钙网蛋白（CRT）、ATP、HMGB1等“危险信号”，激活DC抗肿瘤免疫，而丁酸可增强这一过程。例如，乳腺癌4T1细胞经丁酸联合放疗处理后，CRT暴露率提高3倍，ATP释放量增加2.5倍，HMGB1释放量升高2倍，促进DC活化与T细胞抗肿瘤应答。重塑肿瘤微环境：从免疫到代谢改善肠道微环境，减轻放疗相关黏膜损伤放疗（尤其是盆腔、腹部放疗）可损伤肠道上皮细胞，导致肠黏膜炎、菌群失调、细菌移位，不仅降低患者生活质量，还可能因全身炎症反应间接削弱放疗疗效。丁酸作为结肠上皮细胞主要能源，可保护肠道屏障，减轻放疗损伤：-促进上皮修复：丁酸激活结肠上皮细胞AMPK/mTOR通路，促进紧密连接蛋白表达，增强屏障功能；刺激肠上皮干细胞增殖与分化，加速黏膜修复。在放射诱导的肠黏膜炎小鼠模型中，丁酸灌肠可降低肠黏膜通透性（从12.5降至6.8），增加紧密连接蛋白occludin表达（升高2.3倍），缩短黏膜愈合时间。-调节肠道菌群：丁酸可促进产丁酸菌（如柔嫩梭菌、普拉梭菌）生长，抑制致病菌（如大肠杆菌、肠球菌）过度增殖，维持菌群稳态。在结直肠癌患者中，放疗期间补充丁酸前体（膳食纤维）可增加产丁酸菌丰度（升高1.8倍），减少致病菌丰度，降低腹泻、黏膜炎发生率。重塑肿瘤微环境：从免疫到代谢调控肿瘤代谢微环境，逆转代谢性放疗抵抗肿瘤细胞常通过代谢重编程（如糖酵解增强、氧化磷酸化抑制）适应辐射压力，导致放疗抵抗。丁酸可通过调控肿瘤细胞代谢，逆转这种抵抗：-抑制糖酵解：丁酸可下调HK2、PKM2、LDHA等糖酵解关键酶表达，减少乳酸生成，抑制Warburg效应。在胶质瘤U87细胞中，丁酸处理可降低细胞外乳酸水平（从1.2mmol/L降至0.5mmol/L），增强辐射对糖酵解依赖性肿瘤细胞的杀伤。-促进氧化磷酸化：丁酸作为线粒体燃料，可增强肿瘤细胞氧化磷酸化功能，增加ROS生成，诱导代谢性氧化应激。在肝癌HepG2细胞中，丁酸联合放疗可提高线粒体呼吸控制率（从2.5升至3.8），增加ATP合成（升高1.5倍），同时伴随ROS升高，促进细胞死亡。调控肿瘤干细胞：从干性分化到清除肿瘤干细胞是放疗抵抗和复发的根源，丁酸可通过抑制干细胞信号通路、诱导分化，靶向清除CSCs：-抑制干细胞信号通路：丁酸可抑制Notch1（抑制NICD表达）、Hedgehog（抑制Gli1表达）、Wnt（抑制β-catenin核转位）等干细胞通路关键分子，降低干性相关基因（如OCT4、SOX2、NANOG）表达。在乳腺癌CD44+/CD24-干细胞亚群中，丁酸处理可降低SOX2表达（下降60%），抑制sphere形成能力（减少70%）。-诱导干细胞分化：丁酸通过HDACi活性，开放分化相关基因染色质，促进CSCs向非干细胞方向分化。例如，急性髓系白血病干细胞中，丁酸可诱导CD11b/CD14分化标志物表达（升高3倍），降低干细胞比例（从35%降至12%），增强辐射敏感性。06丁酸代谢物放疗增敏的临床转化前景与挑战临床前研究证据：从细胞到动物模型近年来，大量临床前研究证实丁酸及其衍生物（如丁酸钠、三丁酸甘油酯、前体膳食纤维）具有放疗增敏作用，涉及多种肿瘤类型：1.结直肠癌：结直肠癌细胞对丁酸高度敏感（丁酸是结肠上皮主要能源），多项研究显示丁酸可增强结直肠癌细胞对放疗的敏感性。例如，HCT116细胞中，丁酸钠（1mM）联合放疗可显著抑制细胞增殖（IC50从6Gy降至3Gy），诱导凋亡（从15%升至40%）；在CT26小鼠模型中，口服三丁酸甘油酯联合放疗可抑制肿瘤生长（抑瘤率从60%升至85%），延长生存期。2.头颈鳞癌：头颈鳞癌放疗后局部复发率高，丁酸可通过免疫调节和DNA损伤修复抑制增敏。例如，CAL27细胞中，丁酸处理可增加MHC-I类分子表达（升高2倍），促进辐射后CTL浸润；在FaDu小鼠模型中，瘤内注射丁酸钠联合放疗可增加肿瘤浸润CD8+T细胞比例（从10%升至25%），抑制肿瘤生长。临床前研究证据：从细胞到动物模型3.肺癌：肺癌放疗抵抗与DNA-PKcs过表达相关，丁酸可抑制其表达。例如，A549细胞中，丁酸可降低DNA-PKcs蛋白表达（下降50%），增强辐射后γ-H2AX焦点聚集；在Lewis肺癌小鼠模型中，丁酸联合放疗可抑制肺转移（转移结节数从12个降至4个），延长生存期。4.胶质瘤：胶质瘤干细胞是放疗抵抗的关键，丁酸可靶向CSCs。例如，U87干细胞样细胞中，丁酸可抑制Gli1表达（下降70%），降低sphere形成能力（减少80%）；在GL261小鼠模型中，丁酸联合放疗可延长中位生存期（从28天升至45天）。临床转化策略：从干预到应用基于丁酸的放疗增敏作用，临床转化策略主要包括以下方向：1.丁酸直接补充：包括口服丁酸钠、三丁酸甘油酯（TGB，丁酸前体，可经酯酶水解为丁酸）、丁酸盐灌肠等。三丁酸甘油酯因稳定性高、生物利用度好，更具临床应用前景。例如，一项I期临床试验显示，晚期肿瘤患者口服TGB（500mg/次，3次/天）可增加血清丁酸水平（从2μmol/L升至15μmol/L），且安全性良好，仅轻微胃肠道反应。2.膳食纤维干预：通过增加可发酵膳食纤维（如菊粉、抗性淀粉、低聚果糖）摄入，促进肠道菌群产丁酸。例如，结直肠癌患者放疗期间补充菊粉（20g/天），可增加粪便丁酸浓度（从15μmol/g升至35μmol/g），降低3-4级黏膜炎发生率（从25%降至10%）。临床转化策略：从干预到应用3.益生菌/合生元干预：补充产丁酸益生菌（如柔嫩梭菌、普拉梭菌）或益生菌+膳食纤维合生元，增加肠道产丁酸菌丰度。例如，一项随机对照试验显示，头颈癌患者放疗期间服用产丁酸益生菌（ClostridiumbutyricumMIYAIRI588）联合菊粉，可增加肠道产丁酸菌丰度（升高1.5倍），降低放射性口腔黏膜炎评分（从2.8降至1.5）。4.HDAC抑制剂联合：丁酸作为天然HDACi，可与合成HDAC抑制剂（如伏立诺他、帕比司他）联合，增强放疗增敏效果。例如，体外研究显示，丁酸钠与伏立诺他联用可协同抑制肺癌细胞DNA-PKcs表达，增强辐射杀伤效应，且降低单药用量，减少毒性。面临的挑战与未来方向尽管丁酸代谢物放疗增敏前景广阔，但临床转化仍面临诸多挑战：1.个体化