生物药物概论课件

生物药物概论

1.生物药物的定义生物药物：利用生物体、生物组织或其成分，综合应用生物学、生物化学、微生物学、免疫学、物理化学和药学的原理与方法进行加工、制造而成的一大类预防、诊断、治疗疾病的制品。2.生物药物的分类生物药物天然生化药物生物制品生物技术药物天然生化药物：天然存在于生物体（动物、植物、微生物和海洋生物），通过提取、分离、纯化获得的药理有效成分。按化学本质和药理作用分为氨基酸类、多肽和蛋白质类、酶与辅酶类、核酸类、多糖类、脂类、细胞因子与组织制剂。生物制品1.预防用制品——各类疫苗（卡介苗、流感疫苗…）2.诊断用制品——免疫诊断用品（结核菌素、单克隆抗体…）3.治疗用制品——特异与非特异性（狂犬病免疫球蛋白、白蛋白…）生物技术药物1.基因重组药物——通过基因重组方法获得的有生物活性的蛋白质、多肽及其修饰物、抗体、疫苗、连接蛋白、嵌合蛋白、显性阴性蛋白、可溶性受体等(如,人生长激素，人促红细胞生成素（EPO），乙肝疫苗)。

2.基因药物——治疗基因、反义药物、核酶等。3.生物制药产业发展情况美国:产业化早,投资大,产品数量多。主要用来治疗疑难疾病,如癌症、艾滋病、早老性痴呆、遗传病、哮喘、牛皮癣等。

欧洲：英国：在欧洲居于首位,拥有公司数量约为欧洲的3/4,其中有世界知名的生物制药企业,如葛兰素史克(GlaxoSmithKline,GSK)

、阿斯利康(Astrazeneca)等17家大公司。德国：生物技术专利占世界专利总数的20%,仅次于美国。但目前进入了调整期。法国：中小企业活跃,但政府参于力度不够,故居第3位。法国议会于2003年通过“2003生物技术计划”,投入了3亿欧元,希望能在2007年居于领先地位。亚洲：日本：居亚洲首位,提出了“生物技术立国”的口号,政府投入大。现已有近100个生物技术药物上市,并先于美国批准了人心钠素、重组人血白蛋白、抗TNF抗体等创新制品。日本中外制药、协和发酵、麒麟制药等大公司生产的生物技术药物已远销到世界各地。新加坡、印度等国紧随其后。

我国：以仿制为主,1997年是我国第一个产业化的高潮。本世纪转入创新阶段,已批准了20多个生物技术药物。2003年批准的“重组人p53腺病毒注射液”(商品名“今又生”,Gendicine，深圳市赛百诺基因技术有限公司),为一类创新药，拥有自主的知识产权。第一章

糖类化学及糖类生物药物第一节糖的重要性及其分类第二节多糖的分类和性质第三节自然界存在的主要多糖第四节糖类的生物活性及药理作用熟悉糖的分类及其性质了解自然界存在的主要多糖熟悉糖类的生物活性及药理作用目的要求第一节糖的重要性及其分类一糖的概念糖是多羟基醛或多羟基酮及其聚合物和衍生物的总称糖由碳、氢、氧三种元素组成，其分子式为(CH2O)n，由于其氢原子和氧原子之间的比例是2:1，所以过去一直误认为糖是碳和水的复合物（碳水化合物），实际上有些糖如鼠李糖（C6H12O5）和脱氧核糖（C5H10O4）其氢、氧比并非2:1。二、糖在机体的重要性糖在自然界是能量储存的一种重要形式二、糖在机体的重要性糖类也具有结构作用糖是机体重要组成成分之一糖类寡糖多糖同多糖杂多糖复合糖单糖三、糖的分类1、单糖

单糖是构成各种糖分子的基本单位，不能再水解成更简单的糖，也可以说单糖是具有两个或多个羟基的醛或酮。概念醛糖和酮糖单糖含有一个羰基和多个羟基。根据羰基在碳链上的位置可分为，醛糖(Aldoses)和酮糖(Ketoses)。含有不同碳原子数的单糖都有其醛糖和酮糖形式。最简单的醛糖是甘油醛(Glyceraldehyde)最简单的酮糖是二羟丙酮(Dihydroxyacetone)单糖的种类丙糖丁糖戊糖己糖甘油醛二羟丙酮D-赤藓糖D-赤藓酮糖戊醛糖

戊酮糖己醛糖己酮糖D-核糖D-木糖D-2-脱氧核糖D-核酮糖D-木酮糖D-葡萄糖D-半乳糖D-甘露糖D-果糖庚糖葡萄糖(glucose)——已醛糖果糖(fructose)——已酮糖重要的单糖半乳糖(galactose)——已醛糖

核糖(ribose)——戊醛糖

重要的单糖2、寡糖（oligosaccharide）

由2～10个单糖分子脱水、缩合而成的短链结构，水解后可得原来的单糖，其中二糖是寡糖中最普通的一类，重要的二糖有蔗糖和乳糖、麦芽糖（食物中这三种二糖最常见）。葡萄糖α-(14)葡萄糖麦芽糖乳糖葡萄糖-

（14）半乳糖苷葡萄糖-

，（12）果糖苷蔗糖3.多糖

能水解生成多个分子单糖的糖。常见的多糖淀粉(starch)糖原(glycogen)纤维素(cellulose)

由于近年来对多糖的研究最为热烈，如各种糖类药物：香菇多糖、卡介苗多糖等。专家们认为多糖在21世纪将是与蛋白质、酶、核酸并驾齐驱的第四个生物大分子，由于蛋白质、酶、核酸在20世纪已被人们研究得很透彻了，而多糖的很多研究领域对于人类还是很陌生的，如结构、组成的单糖究竟有哪些，结构与功能有什么关系等。第二节多糖的分类

一、按其来源分类二、按其组成分类三、按其在生物体内的功能分类一、按其来源分类植物多糖：淀粉、纤维素、茶叶多糖、大黄多糖动物多糖：肝素、硫酸软骨素、透明质酸微生物多糖：香菇多糖、银耳多糖、芸芝多糖海洋生物多糖：甲壳素、螺旋藻多糖二、按其组成分类Ι同聚多糖：由若干个相同的单糖分子缩合而成。如淀粉：由D-葡萄糖缩合而成，其它如糖原、纤维素。Ⅱ杂聚多糖：由若干个不同类型的单糖缩合而成。绝大多数的植物多糖（淀粉、纤维素除外），中草药多糖都是杂聚多糖。如波叶大黄。Ⅲ粘多糖：是一类含氮的不均一多糖，其化学组成通常为糖醛酸及氨基己糖或其衍生物，又称为糖胺聚糖。如透明质酸、肝素、硫酸软骨素等。同聚多糖杂聚多糖Ⅳ复合糖（结合糖）也称糖复合物,是指糖和蛋白质、脂质等非糖物质结合的复合分子。糖脂

复合糖糖类+脂类糖类+蛋白质脂多糖糖蛋白蛋白聚糖（结合糖）指糖以共价键与蛋白质相连，同时其糖类部分往往含有氨基己糖的一类多糖。其中糖类的含量一般小于蛋白质的含量。例如：从中药大黄中分离得到的两个多糖均为糖蛋白，细菌细胞壁也含有糖蛋白。糖蛋白：

糖苷键相连:（1）O-糖苷键 （2）N-糖苷键糖蛋白中糖链与肽链的连接方式是一类糖与蛋白质结合形成的非常复杂的大分子糖复合物，其中蛋白含量一般少于多糖。如软骨蛋白聚糖、动脉蛋白聚糖、角膜蛋白聚糖等。蛋白聚糖细胞膜表面的糖链蛋白聚糖蛋白聚糖，由糖胺聚糖链共价连接于核心蛋白所组成。蛋白聚糖糖脂：是糖和脂类以共价键结合形成的复合物，组成和总体性质以脂为主体，如鞘糖脂、甘油糖脂等。脂多糖：糖与脂类结合的一类多糖。与糖脂不同的是在脂多糖中以糖为主体。例如：猪胎盘脂多糖、人胎盘脂多糖。甘油糖脂鞘糖脂鞘糖脂在膜上成簇分布三、按其在生物体内的功能分类水不溶性多糖：主要是指构成动、植物的支撑组织。如：甲壳素、纤维素。储能多糖：在体内作为储能形式存在。如淀粉和糖原，在需要时，可通过生物体内酶系统的作用，分解释放出单糖以供应能量。

第三节自然界存在的主要多糖一、淀粉（starch）二、糖原（glycogen）三、纤维素（cellulose）四、几丁质（chitin）五、肽聚糖（peptidoglycan）六、粘多糖（mucopolysaccharide）

植物体内储藏的众多的多糖中，最主要且储存量最多的是淀粉（小麦、稻子、山芋等都是淀粉）。如前所述，淀粉是由D-葡萄糖缩合而成的同聚多糖，有直链和支链两种结构形式。一、淀粉（starch）1、直链淀粉

占天然淀粉量的20%～30%。药物辅料中加的可溶性淀粉（冲剂中一般用）。

Mw在50000左右。

结构：D-葡萄糖残基，通过α-1.4糖苷键连接。每一圈空心螺旋由6个葡萄糖单位组成。直链淀粉的空间结构2、支链淀粉

占天然淀粉量的70%～80%。

Mw=100万左右（比直链淀粉大得多）。

结构：主链与直链淀粉一样，以α-1.4糖苷键连接，形成支链的分枝点：以α-1.6糖苷键连接。通常由24-30个葡萄糖单位组成直链结构。支链淀粉结果示意图结构式支链淀粉（amylopectin）淀粉是植物中养分的储存形式淀粉颗粒1,6-糖苷键1,4-糖苷键3、淀粉的性质

与碘作用而呈现颜色反应

直链淀粉与碘作用呈兰色

支链淀粉与碘作用呈紫红色

直链淀粉溶于70～80℃热水，而支链不溶于热水，由此可将两者分开。

直链淀粉可与极性溶剂如正丁醇作用形成复合物而沉淀析出，而与支链淀粉分开。

淀粉水解过程中产生的一系列分子大小不等的多糖称为糊精（dextrins）5、淀粉的功能

重要营养素：人类活动所需的能量，大部分由食物淀粉提供。

淀粉也是制药工业（发酵产抗生素）、酿酒等原料

二、糖原

糖原（glycogen）是动物体内储存的主要多糖，主要存在于肝及肌肉中，也称为动物淀粉。人和动物食入植物淀粉后，一般都把它们水解成葡萄糖，然后再以糖原的形式储存在体内。1、糖原的结构与性质

糖原的结构与支链淀粉是十分相似的即由D-葡萄糖组成。主链是α-1.4糖苷键连接，支链由α-1.6糖苷键连接。与支链淀粉不同的是，侧链较短，分支较多。

糖原的性质也与支链淀粉相似，如与碘作用呈红色，可在水中弥散而成乳浊溶液。

糖原的结构图

结构:

结构与支链淀粉相似，由D-Glc以α-1,4和α-1，6糖苷键相连。糖原（glycogen）糖原是动物体内葡萄糖的储存形式

食入的淀粉被水解成了葡萄糖，供应过剩时，合成糖原储存起来。当机体需要时，肌肉中的糖原就分解成G，然后G氧化分解成CO2，H2O和ATP（能量），而其他组织器官需要能量时，可由肝脏的肝糖元分解成G，通过血液运输各组织去利用。

2、糖原的生理功能三、纤维素

纤维素（cellulose）是自然界分布最广、含量最多的一种多糖。它是由许多β-D-葡萄糖苷通过1，4-糖苷键连接而成的直链同聚多糖。1、纤维素的结构

与淀粉及糖原相同，也是由D-葡萄糖组成，但不同的是：

不含支链

D-葡萄糖残基之间是以β-1.4-糖苷键连接，而不是以α-1.4糖苷键连接。纤维素纤维素：食物中含有，人体因无

-糖苷酶而不能利用。有刺激肠蠕动等作用。β-1,4-糖苷键目录2、纤维素的性质

极不溶于水，对酸水解有较强的抵抗力，但能溶于发烟盐酸、浓硫酸、浓磷酸。

反刍动物象牛、羊，还有一些食草动物如马、兔等，及某些微生物和昆虫等能利用纤维素作为能源，因为它们体内存在有水解β-1，4糖苷键的纤维素酶，而人们由于只有水解α-1，4糖苷键的酶，所以不能食用纤维素。

我们体内都含有纤维素酶3、纤维素的生物学功能

作为植物、动物或细菌细胞的外壁支撑和保护的物质，促使细胞保持足够的扩张韧性和刚性。

作为生物圈中维持自然界能量和营养物质稳恒的储存物质。纤维素是衣料、纸张等工业产品的原料。药用：如中药渣经水解后，再投入使用，使药效增加4～5倍，纤维素对人体起吸附脂肪、毒物等共同排泄作用。

四、几丁质

几丁质（chitin）又称甲壳素、壳聚糖，是甲壳类动物及昆虫外壳的主要成分；此外，低等植物、菌类和藻类的细胞膜，高等植物的细胞壁也含有几丁质。在自然界中的储存量仅次于纤维素，它是由N-乙酰氨基葡萄糖通过β-1,4-糖苷键连接起来的同聚多糖。昆虫和节肢动物的体表含有几丁质几丁质是由N-乙酰葡萄糖胺残基通过β1-4糖苷键连接而成的同多糖。

用途

药物辅料、人造皮肤、手术缝合线（不用拆线）

络合回收金属离子（贵重金属离子）降血脂、消炎、杀菌剂（伤口愈合剂）食品添加剂（保鲜）具有保湿作用，也大量用于化妆品中。

五、细菌多糖肽聚糖（peptidoglycan）又称胞壁质，是构成细菌细胞壁基本骨架的主要成分。它是多糖和肽相连而成的多糖复合物。溶菌酶能水解肽聚糖结构中的β-1,4糖苷键，因此可溶解G+细菌；青霉素的抗菌作用也在于抑制肽聚糖的生物合成，从而使细菌细胞壁不完整，导致死亡。肽聚糖示意图六、粘多糖

是广泛存在于动植物组织中，作为组织细胞间的天然粘合剂的一类多糖。在维持细胞环境的相对稳定性和正常生理功能上起重要作用。人和动物的生长、创伤愈合、抗菌、抗炎、抗过敏、成骨、组织老化、动脉硬化和胶原病等都与粘多糖有密切关系。

（一）、透明质酸

广泛分布于结缔组织、皮肤、眼球的玻璃体、角膜、细胞间质、关节液、恶性肿瘤组织和某些细菌细胞壁中，因其具有很强的吸水性，在水溶液中能形成粘度很大的胶状液，故有粘合和保护细胞的作用。化妆品中添加HA的目的就是保湿，防止皮肤因干燥缺水而出现皱纹、干裂等。透明质酸作为眼科治疗药物在目前已上市几年了，对角膜炎、青光眼有较好的疗效。透明质酸（hyaluronicacid）葡萄糖醛酸和N-乙酰氨基葡萄糖交替组成（二）、硫酸软骨素

从猪喉（鼻）软骨中提取得到的。硫酸软骨素的结构与透明质酸相似，但组成的单糖不同，分为A、B、C三种。硫酸软骨素A和C是细胞外膜、软骨、骨、角膜和脊椎动物的其他结缔组织的重要构成组成。硫酸软骨素B又名硫酸皮肤素，是皮肤结构的粘多糖。临床上主要用硫酸软骨素来治疗偏头痛、关节炎、降血脂和预防冠心病。

硫酸软骨素组成糖苷键硫酸酯键软骨素-4-硫酸（A）葡萄糖醛酸N-乙酰半乳糖胺β-1，3C4

软骨素-6-硫酸（C）葡萄糖醛酸N-乙酰半乳糖胺β-1，3C6

硫酸软骨素（chondroitinsalfate）软骨素-4-硫酸软骨素-6-硫酸L-艾杜糖醛酸N-乙酰半乳糖胺α-1,3苷键(4-硫酸酯键)硫酸皮肤素（硫酸软骨素B）（三）、肝素

肝素是动物体内的一种天然抗凝血物质，由于最早在肝脏中发现，故称为肝素，也存在于肺、肌肉、血管壁、肠粘膜等组织中，正常血液中几乎没有。肝素（heparin）主要功能：抗凝，降血脂肝素分子结构中组成的单糖是硫酸氨基葡萄糖，艾杜糖醛酸和葡萄糖醛酸的硫酸酯。

临床上肝素用作为血液体外循环时的抗凝血剂，也用于防止血管中血栓的形成。70年代开始研究低分子肝素（小分子肝素），它具有肝素同样的抗凝血作用和抗血栓作用，但肝素的主要副作用如出血和引起血小板减少等大大降低。从80年代中期开始，国外进口我国的肝素几乎都是去制造小分子肝素再供临床使用。

第四节糖类的生物活性及药理作用

与蛋白质和核酸相比，多糖的研究还相当滞后。长期以来，糖类只被看作是能量和结构物质，然而随着对糖在生物体内的功能的不断研究和认识，以及多糖药物的临床应用，多糖的研究成为热门研究课题多糖类物质的生物活性和药理作用是近十多年来才被充分认识，特别是许多中药多糖。

一、目前已发现的糖类药物

单糖类

葡萄糖：制备大输液

氨基葡萄糖：治疗关节炎甘露醇、山梨醇：降低颅内压、抗脑水肿低聚糖蔗糖、麦芽糖、乳糖、果糖、右旋糖苷、甘露聚糖糖的衍生物

6-磷酸葡萄糖

1.6-二磷酸果糖：治疗急性心肌缺血休克，心肌梗塞

磷酸肌醇：治疗肝硬化

葡萄糖酸内酯：治疗肝炎、肝中毒

葡萄糖酸钙：钙补充剂

多糖类来源于植物的具有一定生物活性和药理作用的多糖

黄芪多糖、人参多糖、刺五加多糖、黄精多糖、昆布（海带）多糖、褐藻多糖、波叶大黄多糖、茶叶多糖、葡萄皮脂多糖、麦秸半纤维素B、针裂蹄多糖、当归多糖、地衣多糖等。来源于微生物的多糖

猪苓多糖、银耳多糖、香菇多糖、灵芝多糖、黑木耳多糖、云芝多糖、茯苓多糖、毛木耳多糖、大肠杆菌酯多糖、变形杆菌热源多糖、产氨短杆菌外多糖等。来源于动物的多糖

肝素、硫酸乙酰肝素、硫酸软骨素、硫酸皮肤素、硫酸角质素、透明质酸、壳多糖、胎盘脂多糖等。

二、多糖的功能

多糖一个重要的功能是稳定蛋白质的构象，当缺少某种多糖后蛋白质的构象会发生改变，相应的功能也会随之改变，这时基因虽然处于正常状态，相应的蛋白质也在细胞中存在，但是正常的功能已不复存在，在有些情况下还会起到完全相反的作用。多糖的另一个重要功是防止蛋白质的水解，当缺少某种多糖后，与它结合的蛋白质很快被蛋白酶水解，这时蛋白质的功能也不能表现。更多的情况是一种多糖缺少后游离出的蛋白质便与另一种结构相近的多糖结合，对外则表现出多糖链发生改变。已经知道多糖链有严格的种属特异性和组织特异性，不同血型的存在，就是多糖链的微小变化所引起的。因此多糖链的改变将会导致蛋白质的功能发生深刻的变化。多数情况下，细胞缺少某种多糖会丧失某种功能，但在个别情况下，缺少某种多糖后反而会有新的蛋白质出现。我们知道所有的蛋白酶都属于糖蛋白，当蛋白酶所结合的多糖缺失后，蛋白酶就会丧失它应有的作用，原来生成与降解的动态平衡被打破，它所要降解的蛋白质会立刻在细胞中出现。肝癌病人血液中可检测到甲胎蛋白。许多癌瘤组织中可检测到别的组织的特异蛋白，都属于这种情况。三、多糖的生物活性和药理作用

对免疫功能的调节作用

几乎所有的多糖对免疫功能均有较强的调节作用，主要表现为：影响补体活性，促进淋巴细胞增殖，增加抗体的量，提高或激活吞噬细胞的功能。个别多糖具有免疫抑制作用。

抗肿瘤作用

目前发现具有较强抗肿瘤作用并能用于临床的主要是真菌类多糖，如香菇多糖、灵芝多糖、猪苓多糖、银耳多糖等及某些海洋生物多糖如刺参多糖等。

抗癌活性多糖通过增强机体的免疫功能、改变细胞膜生化活性、诱生肿瘤坏死因子、抗自由基作用而达到抗癌活性，并非直接杀伤瘤细胞，所以对正常细胞无杀伤作用，优于细胞毒抗癌药。如香菇多糖、云芝多糖、茯苓多糖、银耳多糖等。它可与一些抗癌药物(如5-FU、环磷酰胺等)作用，恢复由化疗所导致的免疫功能低下，增强抗肿瘤活性。目前除香菇多糖外，已有不少糖类化合物作为抗癌免疫药物通过了卫生部门的批准，正式应用于临床。代表的有裂褶多糖、云芝多糖、猪苓多糖等。降血糖活性具降血糖作用的多糖中有单聚糖、杂多糖、粘多糖，其构效关系和作用尚不清楚。在粘性多糖中乙酰基的存在是降血糖活性的重要抑制因子。如秋葵粘质F和车前子粘质A降糖活性较弱，脱乙酰化后，两者降血糖活性提高。抗衰老作用免疫功能具有增龄性变化，即年龄增大，其免疫功能下降或紊乱，结果胸腺萎缩，T细胞损耗，从而导致机体衰老，寿命缩短。多糖类能增强老年人的免疫功能而呈现抗衰老作用。如刺五加多糖可延长果蝇平均寿命11.7％～23．0％。枸杞子多糖可延长家蚕五龄期寿命5．14％。抗衰老作用某些植物多糖如茶叶多糖、人参多糖、黄芪多糖和某些微生物多糖如银耳多糖、木耳多糖等均有抗衰老作用。促进细胞DNA、蛋白质的合成，促进细胞的增殖生长

促进淋巴细胞DNA，蛋白质合成、IL-2产生。这类多糖如：大黄、茶叶、木耳多糖等。抗感染作用多糖可以提高机体组织细胞对细菌、原虫、病毒和真菌感染的抵抗力。如紫菜多糖、茶叶多糖、大黄多糖、毛木耳多糖。抗辐射损伤作用和升白作用

它是通过强化造血系统和活化吞噬细胞等作用提高机体对辐射的耐受性。如酸枣仁多糖、海带多糖、黑木耳多糖、银耳多糖等，对放射性损伤小鼠有明显保护作用，使动物存活率增加。如茯苓多糖、紫菜多糖、大黄多糖、木耳多糖、茶叶多糖等均能对抗γ射线损伤，并能升高正常动物和辐射损伤动物的白细胞。降血脂和抗凝血作用类肝素、硫酸软骨素、小分子量肝素、多数的植物动物多糖、刺参多糖、真菌多糖等均有降血脂、降胆固醇、抗动脉粥样硬化等作用。此外，肝素、小分子肝素是很强的抗凝剂，甲壳素、芦荟多糖、黑木耳多糖等也具有肝素样的抗凝血作用。第五节我国糖类药物的研究现状

1、目前，对多糖研究的层次与水平还远远落后于蛋白质和核酸，主要反映在其结构与功能的关系上这主要是由多糖结构的复杂性所决定的，仅一级结构的确定就必须解决分子量、单糖的摩尔比与糖基组成、构型、连结次序等问题，使其检测难度很大。糖类药物的研究现状

2.目前多糖制品多为未经优化的粗多糖制剂，不利于发挥多糖的最佳功效。粗多糖成分复杂，如蛋白质、生物碱，多糖的不同组分及其他水溶性成分等，故正负协同作用的成分都可能存在。再者，有些多糖与色素、蛋白质结合，影响多糖的构象变化，相应多糖的活性受一定的影响。我国糖类药物的研究现状

一、单糖和寡糖类

甘露醇、山梨醇、葡萄糖、葡萄糖酸内酯、葡萄糖酸钙、植物钙、肌醇等，均可从转化提取等方法常规制备。二、多糖类

我国多糖类药物上市的有猪苓多糖注射液、云芝多糖注射液、茯苓多糖，肝素、硫酸软骨素等已在85年以前作为生化药品已广泛使用。目前在作为新药申报的有：香菇多糖注射液：作为二类药申报海参多糖：可能要作为一类至少是二类申报透明质酸钠：准备申报四类（发现了它的新用途）低分子肝素：申报二类

三、目前多糖类药物研究过程中存在的问题

纯度问题

多糖药品申报过程中质量标准问题

纯度检查由于多糖的纯度标准不能用通常化合物的纯度标准来衡量，它的纯度只代表相似链长的平均配布，多糖的纯品实际上是一定分子量范围的均一组分。因此在纯度鉴定中必须要有两种以上方法才能肯定某一多糖的均一性。现在常用的纯度检查方法有比旋度法、超离心法、高压电泳法和高效凝胶渗透层析法(HPGPC)等。前三种方法误差较大，而HPGPC是近年来用于测定多糖纯度的新方法，具有快速、高分辨率和重现性好的优点，是目前最常用的方法，在国内外已得到广泛应用。分析结构多糖的结构是生物活性的基础，加强对多糖结构的深入研究，对于阐明多糖类药物的作用机理有重要的理论意义，并可进一步指导多糖类新药的发现。结构分析的方法主要有红外层析、核磁共振、质谱、气相层析、紫外光谱等物理方法和酸水解、过碘酸氧化、碱降解、甲基化反应等化学方法以及酶解法、免疫化学和放射化学法。目前多采用物理和化学方法相结合进行多糖结构的测定。含量测定目前对多糖类药物的含量测定大多采用生物效价、元素含量测定法、单糖比色法，但都不是测定多糖的专属性方法。多糖的含量测定是多糖类药物质量控制中最有效考察产品内在质量的项目，也是该药品稳定性考察最稳定的依据，但都是目前研究中的一个难点。糖链结构分析：以糖蛋白为例分离纯化糖蛋白从糖蛋白释放糖链糖链的分离纯化化学法酶法N-糖苷酶FO-糖苷酶HPAEC-PAD凝集素亲和层析GPC糖链的纯度鉴定与相对分