合成生物基因治疗载体工程师岗位招聘考试试卷及答案

合成生物基因治疗载体工程师岗位招聘考试试卷及答案填空题（每题1分，共10分）1.基因治疗中常用的非整合型病毒载体是______2.阳离子脂质体与DNA结合形成的复合物称为______3.载体构建的核心步骤包括酶切、连接和______4.腺病毒载体通常缺失______基因以降低致病性5.CRISPR-Cas9系统常用的递送载体是______6.非病毒载体中聚合物PEI的主要优势是______7.载体靶向性修饰常通过添加______实现8.慢病毒载体可整合到宿主细胞的______中9.载体纯化常用方法包括超速离心和______10.基因治疗载体安全性评估需检测______答案1.腺相关病毒（AAV）2.脂质-DNA复合物（LPD）3.转化/转染4.E15.AAV/慢病毒6.可修饰性强7.特异性配体8.基因组9.层析法10.插入突变风险单项选择题（每题2分，共20分）1.以下属于非整合型病毒载体的是？A.慢病毒B.腺病毒C.逆转录病毒D.整合酶缺陷型慢病毒2.阳离子脂质体的主要作用是？A.扩增DNAB.切割DNAC.压缩DNA促摄取D.整合基因3.载体构建中限制酶的功能是？A.连接片段B.切割特定序列C.修饰末端D.扩增DNA4.常用于体内基因递送的载体是？A.大肠杆菌质粒B.AAVC.噬菌体D.酵母载体5.慢病毒载体可感染的细胞类型是？A.仅分裂细胞B.仅非分裂细胞C.分裂+非分裂细胞D.仅原核细胞6.载体靶向修饰不包括？A.肽段修饰B.抗体片段修饰C.多糖修饰D.核酸随机修饰7.慢病毒包装细胞需表达的蛋白是？A.Gag/Pol/EnvB.Cas9/gRNAC.荧光蛋白D.细胞因子8.降低载体递送效率的因素是？A.血清稳定B.细胞摄取障碍C.靶向配体D.核定位信号9.基因治疗载体临床前常用动物模型不包括？A.小鼠B.大鼠C.非人灵长类D.大肠杆菌10.可用于瞬时表达的载体是？A.腺病毒B.慢病毒C.逆转录病毒D.整合型AAV答案1.B2.C3.B4.B5.C6.D7.A8.B9.D10.A多项选择题（每题2分，共20分，多选/少选不得分）1.常用病毒载体包括？A.AAVB.慢病毒C.腺病毒D.噬菌体2.非病毒载体优势是？A.无免疫原性B.容量大C.易制备D.整合风险低3.载体构建关键工具酶是？A.限制酶B.DNA连接酶C.Taq酶D.逆转录酶4.载体安全性评估指标包括？A.插入突变B.免疫反应C.毒性D.递送效率5.慢病毒载体特点是？A.基因组整合B.感染分裂+非分裂细胞C.容量≤10kbD.免疫原性低6.阳离子脂质体组成包括？A.阳离子脂质B.中性脂质C.胆固醇D.核酸7.载体靶向策略包括？A.表面配体B.核定位信号C.组织特异性启动子D.增强子8.载体纯化方法有？A.超速离心B.离子交换层析C.亲和层析D.电泳9.载体应用领域包括？A.遗传性疾病B.肿瘤C.感染性疾病D.再生医学10.影响AAV递送效率的因素是？A.血清型B.剂量C.给药途径D.宿主免疫答案1.ABC2.BCD3.AB4.ABC5.ABD6.ABC7.ABCD8.ABC9.ABCD10.ABCD判断题（每题2分，共20分，对√错×）1.腺病毒载体可整合到宿主基因组（×）2.非病毒载体免疫原性比病毒载体低（√）3.慢病毒仅感染分裂细胞（×）4.AAV载体容量约4.7kb（√）5.阳离子脂质体毒性比聚合物低（×）6.平末端连接比粘性末端效率高（×）7.载体靶向仅依赖表面配体（×）8.慢病毒包装需辅助质粒（√）9.腺病毒免疫原性低（×）10.非病毒载体可体内外递送（√）简答题（每题5分，共20分）1.简述AAV载体的主要优势。答案：AAV是基因治疗常用载体，优势为：①免疫原性低，不易引发强烈免疫反应；②可感染分裂/非分裂细胞，适用范围广；③血清型多样（如AAV9靶向中枢神经），可组织特异性递送；④容量适中（4.7kb），满足多数治疗基因需求；⑤无致病性，安全性已在临床验证。2.非病毒载体与病毒载体的核心区别？答案：①来源：病毒载体为改造天然病毒，非病毒为人工合成（脂质体、聚合物）；②整合性：多数病毒可整合，非病毒多瞬时表达；③免疫原性：病毒高，非病毒低；④容量：非病毒容量大（可携大片段），病毒有限；⑤制备：非病毒易规模化，病毒需复杂包装；⑥安全性：非病毒整合风险低，病毒需关注插入突变。3.载体构建的基本流程？答案：①获取目的基因（PCR/合成）；②酶切载体与目的基因（产生互补末端）；③T4连接酶连接重组载体；④转化感受态大肠杆菌；⑤抗性筛选+PCR/酶切验证重组质粒；⑥纯化重组质粒，用于后续转染/包装。4.载体靶向性修饰的两类策略？答案：①细胞外靶向：修饰载体表面（脂质体/AAV）添加特异性配体（肽段/抗体），与靶细胞受体结合；②细胞内靶向：插入核定位信号（NLS）促DNA入核，或用组织特异性启动子使基因仅在靶组织表达；此外，PEG修饰可降低非特异性摄取。讨论题（每题5分，共10分）1.讨论慢病毒载体的应用及安全性挑战。答案：慢病毒因可整合基因组、感染非分裂细胞，常用于遗传性疾病（如脊髓性肌萎缩）、肿瘤治疗。但挑战包括：①插入突变风险（激活原癌基因）；②免疫原性（包装蛋白引发免疫清除）；③容量限制（≤8kb）；④生产难度（避免野生型病毒污染）。目前通过整合酶缺陷型慢病毒（IDLV）降低整合风险，优化包装系统提高安全性，是研究重点。2.如何提高非病毒载体的体内递送效率？答案：非病毒载体体内效率低的优化策略：①表面修饰靶向配体（转铁蛋