植物组织培养试题库(含答案)

植物组织培养试题库(含答案)一、名词解释（每题3分，共30分）1.植物组织培养：在无菌条件下，将植物的细胞、组织、器官（外植体）接种到人工配制的培养基上，在适宜的环境条件下培养，使其增殖、分化或再生完整植株的技术体系。2.外植体：从植物体上切取的用于组织培养的活的细胞、组织或器官，如茎尖、叶片、花药等。3.愈伤组织：外植体在离体培养过程中，细胞脱分化后形成的一团无特定结构和功能的薄壁细胞群体。4.脱分化：已分化的植物细胞在离体条件下失去原有形态和功能，恢复分裂能力，形成愈伤组织的过程。5.再分化：脱分化后的细胞或愈伤组织在特定条件下重新分化为具有特定结构和功能的组织或器官（如根、芽）的过程。6.玻璃化现象：植物组织培养中，试管苗出现半透明、水渍状、质地脆弱的异常现象，主要因环境湿度高、细胞分裂素浓度过大或透气性差导致。7.继代培养：将初代培养获得的培养物（如愈伤组织、丛芽）分割后转移到新鲜培养基中继续培养的过程，目的是扩大繁殖或诱导分化。8.原生质体：植物细胞去除细胞壁后形成的裸露细胞，具有全能性，可用于细胞融合、遗传转化等研究。9.褐变：外植体或愈伤组织在培养过程中，细胞内酚类物质被氧化形成褐色醌类物质，导致组织褐化甚至死亡的现象。10.胚状体：在组织培养中，由体细胞或生殖细胞经脱分化和再分化形成的类似合子胚的结构，可直接发育成完整植株。二、填空题（每空1分，共20分）1.植物组织培养的理论基础是植物细胞全能性。2.MS培养基中大量元素包括N、P、K、Ca、Mg、S（写出6种），微量元素包括Fe、Mn、Zn、Cu、B、Mo（写出6种）。3.植物生长调节物质中，常用的生长素类有2,4-D、IAA、NAA（写出3种），细胞分裂素类有6-BA、KT、ZT（写出3种）。4.外植体灭菌常用的化学试剂是75%酒精（表面消毒）和0.1%升汞（HgCl₂）或2%次氯酸钠（NaClO）（深度灭菌）。5.培养基灭菌常用方法是高压蒸汽灭菌（121℃，20min），而不耐高温的物质（如激素、维生素）需用过滤灭菌（0.22μm滤膜）。6.愈伤组织诱导阶段通常需要较高比例的生长素/细胞分裂素（填激素类型），而芽分化阶段需要较高比例的细胞分裂素/生长素。7.试管苗移栽的关键是逐步降低环境湿度和提高光照强度，使试管苗适应外界环境。8.玻璃化苗的防治措施包括降低培养基中细胞分裂素浓度、增加培养基中琼脂浓度、改善培养容器透气性（写出3条）。三、选择题（每题2分，共20分）单项选择1.植物组织培养中，培养基的pH一般调节为（）。A.4.0-5.0B.5.8-6.2C.7.0-7.5D.8.0-8.5答案：B2.下列激素中，诱导愈伤组织效果最显著的是（）。A.IAAB.6-BAC.2,4-DD.GA₃答案：C3.外植体灭菌时，75%酒精的处理时间通常为（）。A.30s-1minB.5-10minC.15-20minD.30min以上答案：A4.下列材料中，脱毒效果最好的外植体是（）。A.茎尖（0.1-0.5mm）B.叶片C.茎段D.花药答案：A5.原生质体分离常用的酶是（）。A.纤维素酶+果胶酶B.蛋白酶+淀粉酶C.脂肪酶+蔗糖酶D.纤维素酶+蛋白酶答案：A多项选择6.影响植物组织培养成功的关键因素包括（）。A.外植体类型与生理状态B.培养基成分C.培养环境（温度、光照）D.操作无菌程度答案：ABCD7.褐变的防治措施有（）。A.选择幼嫩外植体B.培养基中添加活性炭C.缩短转接周期D.提高培养温度答案：ABC8.试管苗移栽前需进行炼苗，目的是（）。A.增强光合作用能力B.降低细胞含水量C.提高抗逆性D.促进根系发育答案：ABCD9.下列属于器官发生途径的是（）。A.愈伤组织分化出芽和根B.茎尖直接分化出丛芽C.体细胞胚发育成植株D.原生质体分裂形成愈伤组织答案：AB10.下列培养基中，属于常用基本培养基的是（）。A.MS培养基B.B5培养基C.N6培养基D.LB培养基答案：ABC四、判断题（每题1分，共10分）1.外植体越大，越容易诱导成功。（×）2.MS培养基适合所有植物的组织培养。（×）3.高压蒸汽灭菌可用于激素溶液的灭菌。（×）4.脱分化过程需要光照。（×）5.玻璃化苗的叶片通常厚实浓绿。（×）6.愈伤组织的质地可分为致密型和松散型，松散型更利于体细胞胚的诱导。（√）7.茎尖培养脱毒的原理是病毒在茎尖分生组织中分布较少。（√）8.原生质体融合前需用高渗溶液维持其形态。（√）9.继代次数越多，试管苗的遗传稳定性越高。（×）10.移栽时，试管苗的根系需彻底清洗培养基，避免杂菌污染。（√）五、简答题（每题5分，共20分）1.简述植物组织培养培养基的主要成分及各成分的作用。答案：培养基主要成分包括：（1）无机营养：大量元素（如N、P、K）和微量元素（如Fe、Mn），提供植物生长必需的矿质元素；（2）有机营养：碳源（如蔗糖，提供能量和渗透调节）、维生素（如维生素B₁，促进代谢）、氨基酸（如甘氨酸，参与蛋白质合成）；（3）植物生长调节剂：生长素（如2,4-D，诱导脱分化）和细胞分裂素（如6-BA，促进芽分化）；（4）凝固剂（如琼脂，固定培养基）；（5）其他添加物（如活性炭，吸附有害物质）。2.外植体选择与灭菌的关键注意事项有哪些？答案：（1）外植体选择：优先选择幼嫩、生长旺盛的组织（如茎尖），避免老熟或带菌材料；不同植物最佳外植体类型不同（如兰花用茎尖，菊花用叶片）。（2）灭菌注意事项：先清洗外植体表面杂质（自来水冲洗），再用75%酒精快速处理（30s-1min），后用0.1%升汞或2%次氯酸钠灭菌（5-15min），最后用无菌水冲洗3-5次；灭菌时间需严格控制，避免外植体死亡或灭菌不彻底。3.愈伤组织诱导的主要影响因素有哪些？答案：（1）外植体类型：幼嫩组织（如茎尖）比老熟组织（如叶片）更易诱导；（2）培养基成分：生长素（尤其是2,4-D）浓度是关键，通常需较高生长素/细胞分裂素比例；（3）培养条件：暗培养或弱光利于脱分化，温度一般25±2℃；（4）植物种类：草本植物比木本植物更容易诱导愈伤组织。4.玻璃化现象的发生原因及防治措施是什么？答案：原因：（1）培养基中细胞分裂素浓度过高；（2）培养容器透气性差，湿度长期高于90%；（3）培养基中琼脂浓度低，渗透压不足；（4）光照强度过低或时间过短。防治措施：（1）降低细胞分裂素浓度，适当增加生长素比例；（2）使用透气性好的封口膜（如棉塞）；（3）提高琼脂浓度（7-8g/L）或添加蔗糖（30-40g/L）增加渗透压；（4）增加光照强度（2000-3000lx）和时间（12-16h/d）。六、论述题（每题10分，共20分）1.试述从外植体选择到试管苗移栽的完整组织培养流程及各环节技术要点。答案：完整流程包括：（1）外植体选择与处理：选择幼嫩、无病的组织（如茎尖0.5-1mm），自来水冲洗2h，75%酒精30s，0.1%升汞10min，无菌水冲洗5次；（2）初代培养：将灭菌外植体接种到诱导培养基（如MS+2,4-D2.0mg/L+6-BA0.5mg/L），暗培养3d后转16h光照（25℃），诱导愈伤组织或直接分化芽；（3）继代培养：20-30d后，将愈伤组织分割（0.5cm³）或丛芽切分，转接至增殖培养基（如MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L），扩大繁殖；（4）生根培养：将高2-3cm的无根苗转接至生根培养基（1/2MS+IBA1.0mg/L+NAA0.2mg/L），光照16h/d，促进根系发育；（5）炼苗与移栽：生根苗闭瓶炼苗3d，开盖炼苗2d（增加光照），洗净培养基后移栽至基质（泥炭:珍珠岩=3:1），保持湿度80%，逐渐降低湿度至自然水平。各环节关键：无菌操作（超净台酒精消毒、器械灼烧）、培养基优化（根据植物调整激素比例）、环境控制（温度、光照、湿度）。2.比较茎尖培养、叶片培养和花药培养的特点及应用价值。答案：（1）茎尖培养：特点是外植体小（0.1-0.5mm）、脱毒效果好（病毒难以侵入茎尖分生组织），但操作难度大（需解剖镜）；应用于脱毒苗生产（如马铃薯、香蕉）和快速繁殖。（2）叶片培养：外植体易获取（成熟植株叶片），但诱导愈伤组织需较高生长素（如2,4-D2.0mg/L），分化能力因植物而异（如烟草易分化，木本植