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2025年实验动物模考试题与参考答案一、单项选择题(每题1分,共30分。每题只有一个正确答案,错选、多选、漏选均不得分)1.根据《实验动物管理条例》,我国实验动物生产单位必须取得的许可证类型是A.实验动物使用许可证B.实验动物生产许可证C.动物防疫合格证D.生物安全实验室备案凭证答案:B解析:生产单位必须持有“实验动物生产许可证”,使用单位必须持有“实验动物使用许可证”,二者不可混用。2.下列哪一级生物安全实验室可开展感染人类病原体的动物实验A.BSL1B.BSL2C.BSL3D.BSL4答案:C解析:BSL3及以上方可进行感染人类病原体的动物实验,BSL2仅适用于中度潜在危害病原体。3.小鼠的妊娠期平均为A.15dB.19dC.21dD.23d答案:B解析:小鼠妊娠期18.5–20.5d,平均19d,是制定繁殖计划的关键参数。4.导致裸鼠缺乏T细胞功能的基因突变是A.Foxn1nuB.PrkdcscidC.Rag1nullD.Il2rgnull答案:A解析:Foxn1nu突变使胸腺上皮发育不全,T细胞缺失;Prkdcscid导致V(D)J重组障碍,B、T细胞均缺;Rag1null为重组酶缺失;Il2rgnull影响细胞因子信号。5.实验动物环境标准GB149252010规定,小鼠屏障系统换气次数应达到A.8次/hB.10次/hC.15次/hD.20次/h答案:C解析:屏障系统小鼠换气次数15–20次/h,低于15次/h视为不合格。6.下列哪种标记法最适合长期识别深色被毛豚鼠个体A.耳缺刻B.耳标钳金属标签C.皮下RFID芯片D.苦味酸涂毛答案:C解析:深色被毛使耳缺刻与苦味酸难辨识,金属耳标易脱落,RFID芯片终身唯一且读取快速。7.建立人源肿瘤异种移植模型(PDX)时,最理想的免疫缺陷宿主是A.BALB/c裸鼠B.NODSCIDC.NSG(NODPrkdcscidIl2rgnull)D.C57BL/6Rag1null答案:C解析:NSG小鼠缺失T、B、NK三重免疫细胞,人源组织植入率>80%,为PDX金标准。8.大鼠尾静脉注射时,最佳进针角度为A.5°B.15°C.30°D.45°答案:B解析:15°几乎与血管平行,可降低穿透概率;>30°易刺穿对侧壁。9.实验动物“3R”原则中,“Refinement”对应的中文准确表述是A.替代B.减少C.优化D.责任答案:C解析:Replacement=替代,Reduction=减少,Refinement=优化,核心为减轻痛苦。10.检测小鼠微卫星标记遗传质量时,推荐使用的标记数目为A.5个B.10个C.20个D.30个答案:C解析:国标要求至少20个微卫星位点,覆盖19条常染色体及X染色体,误判率<1%。11.下列哪项不是实验动物“应激性腹泻”常见诱因A.运输震动B.饲料换批C.低剂量抗生素预防D.光照周期突变答案:C解析:低剂量抗生素通常抑制致病菌,反而减少腹泻;其余均为典型应激源。12.兔热源实验所用家兔体温基线测定时间应为A.给药前0.5hB.给药前1hC.给药前2hD.给药前4h答案:C解析:中国药典2020版规定热源实验需在给药前2h测两次体温,取均值作为基线。13.斑马鱼胚胎毒性试验OECDTG236中,观察终点不包括A.卵凝结B.体节形成C.心跳抑制D.孵化率答案:B解析:体节形成属发育进程指标,而非毒性终点;其余三项为必测终点。14.小鼠灌胃最大安全容积(ml/10gbw)为A.0.5B.0.8C.1.0D.1.5答案:C解析:指南规定≤1ml/10g,过量易致胃扩张、反流甚至窒息。15.下列哪种麻醉剂对大鼠具有明显镇痛作用但无肌肉松弛作用A.戊巴比妥钠B.氯胺酮C.异氟烷D.丙泊酚答案:B解析:氯胺酮为NMDA受体拮抗剂,镇痛强但肌张力高,需与甲苯噻嗪联用。16.实验动物设施竣工后,首次环境检测合格有效期为A.3个月B.6个月C.1年D.2年答案:C解析:GB149252010规定,静态检测合格后每年复检一次。17.树鼩属于A.啮齿目B.灵长目C.攀鼩目D.食虫目答案:C解析:树鼩独立为攀鼩目(Scandentia),与灵长类近缘但非灵长目。18.实验用比格犬的封闭群命名标准为A.Beagle(C)B.Beagle(B)C.Beagle(Outbred)D.Beagle/China答案:C解析:国际惯例以“Outbred”标注封闭群,C代表近交系。19.小鼠血清生化检测中,对溶血最敏感的指标是A.GLUB.ALTC.LDHD.CREA答案:C解析:LDH细胞内浓度高,红细胞破裂即显著升高,溶血样本常超标。20.下列哪项不是实验动物伦理审查委员会(IACUC)必须包含的成员A.兽医师B.公众代表C.实验动物技师D.律师答案:D解析:国标要求至少含科学家、兽医师、公众代表、非隶属成员,律师非强制。21.长期毒性试验中,犬的给药周期通常设为A.14dB.28dC.90dD.180d答案:C解析:ICHM3(R2)规定啮齿类28d,非啮齿类90d,支持Ⅰ期临床。22.下列哪种基因编辑技术可实现单碱基精准转换且不产生双链断裂A.ZFNB.TALENC.CRISPR/Cas9D.CRISPR/Cas9BE(BaseEditor)答案:D解析:BaseEditor将dCas9与脱氨酶融合,实现C→T或A→G,无DSB。23.实验大小鼠饲料辐照灭菌常用剂量为A.5kGyB.10kGyC.25kGyD.50kGy答案:C解析:25kGy可杀灭芽孢且维生素损失<15%,为国际通行剂量。24.下列哪项不是斑马鱼作为疾病模型的优势A.胚胎透明B.基因组与人类同源性>90%C.产卵量小D.药物水溶给药方便答案:C解析:斑马鱼单对产卵>200枚,数量大,利于高通量。25.小鼠强迫游泳实验主要用于评价A.焦虑B.抑郁C.认知D.攻击答案:B解析:不动时间反映“行为绝望”,为经典抑郁模型。26.实验动物运输箱外壁必须贴有的标签不包括A.物种B.数量C.基因型D.运输温度范围答案:C解析:基因型属内部科研信息,非法定必需;其余为GB14925强制。27.大鼠尾套法测血压时,预热温度应控制在A.30℃B.34℃C.38℃D.42℃答案:B解析:34℃使尾部血管扩张而不致烫伤,为公认最佳温度。28.下列哪种试剂可用于小鼠胚胎冷冻保护且毒性最低A.DMSOB.甘油C.乙二醇D.丙二醇答案:C解析:乙二醇渗透快、胚胎毒性低,冻存复苏率>90%,为常用玻璃化剂。29.实验动物职业暴露后,最优先的处置措施是A.报告领导B.伤口挤血+流动水冲洗C.疫苗接种D.记录事故答案:B解析:立即挤血并冲洗15min可显著降低病原体载量,为WHO推荐第一步。30.下列哪项不是实验动物福利审核“五项自由”内容A.免于饥渴B.免于恐惧C.免于疼痛D.免于实验答案:D解析:五项自由包括免于饥渴、不适、疼痛、恐惧、表达天性,实验无法避免但须优化。二、多项选择题(每题2分,共20分。每题有两个或两个以上正确答案,多选、少选、错选均不得分)31.关于NSG小鼠,下列描述正确的是A.缺乏T、B、NK细胞B.寿命较NODSCID延长C.需高剂量辐照才能植入人CD34+细胞D.携带Prkdcscid和Il2rgnull双突变答案:A、B、D解析:NSG无需辐照即可高水平植入人CD34+细胞,故C错误。32.实验动物设施“三流”分离是指A.人流B.物流C.动物流D.废物流答案:A、B、C解析:废物流属物流分支,核心为“三流”独立单向,避免交叉。33.下列哪些属于实验动物“应激”生理指标A.血糖升高B.嗜酸性粒细胞增多C.皮质酮升高D.胸腺萎缩答案:A、C、D解析:应激时糖皮质激素升高,胸腺萎缩;嗜酸性粒细胞减少而非增多。34.小鼠胚胎采集操作正确的是A.孕鼠颈椎脱臼处死B.70%乙醇消毒腹部C.用预热PBS冲输卵管D.胚胎移入KSOM培养液答案:A、B、C、D解析:全部符合胚胎采集SOP,确保无菌、恒温、时效。35.关于大鼠尾静脉注射失败原因,正确的是A.针头过粗导致穿透B.未预热尾部血管塌陷C.进针过深进入尾动脉D.注射速度过快致爆裂答案:A、B、C、D解析:尾动脉壁厚易回抽鲜红色血,爆裂罕见但确可因速度过快发生。36.下列哪些属于实验动物“遗传污染”案例A.129/Sv与C57BL/6混笼繁殖B.标记错误导致回交代数计算错误C.胚胎移植时携带隐性基因D.引种未附遗传背景报告答案:A、B、C解析:D为管理缺陷,非直接污染事件。37.实验动物饲料脂肪酸败可引起A.维生素E缺乏B.肝脏脂肪变性C.繁殖率下降D.肾小管坏死答案:A、B、C解析:酸败产生过氧化物,消耗VE,致生殖障碍;肾小管坏死罕见。38.下列哪些药物可用于小鼠镇痛A.丁丙诺啡B.卡洛芬C.美洛昔康D.氯胺酮答案:A、B、C解析:氯胺酮为麻醉剂,镇痛剂量需联合用药,单用无持续镇痛。39.斑马鱼行为学测试包括A.noveltankdivingB.shoalingtestC.YmazeD.Morriswatermaze答案:A、B、C解析:Morris水迷宫主要用于大小鼠,斑马鱼用Tmaze或Ymaze。40.实验动物生物安全柜操作正确的是A.使用前紫外灭菌15minB.工作区铺吸水垫C.操作者手臂频繁进出D.关机前风机运行5min答案:A、B、D解析:手臂频繁进出破坏气流屏障,增加污染风险。三、判断题(每题1分,共10分。正确请填“T”,错误填“F”)41.裸鼠因无胸腺,故对射线敏感性低于正常小鼠。答案:F解析:裸鼠DNA修复能力未增强,且免疫缺陷,放射敏感性更高。42.实验动物设施压差梯度:清洁走廊>饲养间>污染走廊。答案:T解析:确保气流由洁到污,防止污染回溯。43.大鼠可经硬膜外导管长期给药,维持4周无需更换。答案:F解析:硬膜外导管易纤维化堵塞,通常7–10d需更换。44.小鼠灌胃针球头外径不得大于1.5mm。答案:T解析:国标规定20g小鼠使用1.25–1.5mm球头,防止食管穿孔。45.实验动物运输途中温度低于15℃无需额外保温。答案:F解析:低于18℃即需加温,防止低温应激。46.树鼩可自然感染乙肝病毒,是HBV模型。答案:T解析:树鼩为唯一可自然感染HBV的非灵长类。47.实验动物伦理审查批准号格式为“SYXK(省简称)年号序号”。答案:T解析:与生产许可证格式“SCXK”区分,使用许可证为“SYXK”。48.小鼠精子冷冻复苏后ICSI受精率可达80%以上。答案:T解析:现代玻璃化技术使C57BL/6精子ICSI受精率>80%,技术成熟。49.实验动物尸体经消毒液浸泡后即可直接作为生活垃圾丢弃。答案:F解析:须无害化处理(高温高压或焚烧),禁止直接丢弃。50.实验动物福利审核评分≥80分为合格。答案:T解析:国际AAALAC评分≥80即通过,<70需整改复评。四、填空题(每空1分,共20分)51.小鼠的正常体温范围为________℃。答案:36.5–38.0解析:低于35℃为低体温,高于39℃为发热。52.实验动物生产许可证有效期为________年。答案:5解析:SYXK使用许可证同样5年,期满前6个月申请换发。53.大鼠尾静脉有三条,常用________侧静脉。答案:左右两条;通常选左侧或右侧,背侧静脉较难固定。54.实验动物环境指标中,氨浓度应≤________mg/m³。答案:14解析:氨刺激呼吸道,>14mg/m³可致支气管上皮病变。55.斑马鱼胚胎发育至________小时体节全部形成。答案:24解析:体节数达30对,用于发育毒理评估。56.小鼠强迫游泳实验水温控制在________℃。答案:23–25解析:低温增加不动时间,出现假阳性。57.实验动物饲料粗蛋白含量一般维持________%。答案:18–22解析:繁殖料≥20%,维持料≥18%,低于16%致生长迟缓。58.树鼩的染色体数为________对。答案:30解析:2n=60,与人类近缘,基因组测序已完成。59.实验动物设施竣工后,需进行________检测和________检测两阶段。答案:静态;动态解析:静态为空置状态,动态为饲养动物运行状态。60.实验动物伦理审查意见应在收到完整材料后________个工作日内出具。答案:10解析:国标规定最长不超过10个工作日,特殊情况可延5日。五、简答题(每题6分,共30分)61.简述建立人源化小鼠模型(CD34+造血干细胞移植)的关键步骤及注意事项。答案:(1)选择新生NSG小鼠(D0–D2),亚致死辐照1.0–1.2Gy;(2)经肝内或面静脉注射5×10⁴–1×10⁵人CD34+细胞;(3)移植后4周检测外周血hCD45+比例>25%视为成功;(4)注意无菌饲养,饮用水中添加恩诺沙星2周;(5)定期监测GvHD,出现体重下降>10%或脱毛需处死。解析:新生鼠血脑屏障未完善,细胞植入率高;辐照剂量过高致肠损伤,过低则植入失败。62.实验动物运输应激的生理机制及减缓措施。答案:机制:下丘脑垂体肾上腺轴激活→皮质酮升高→糖异生、免疫抑制;交感兴奋→心率升高、胃肠道缺血。减缓:①运输前3d驯化运输箱;②提供垫料及苹果块补水;③维持恒温(22–26℃)、恒湿(40–70%);④途中避免急刹、鸣笛;⑤抵达后暗室静养24h再实验。解析:运输应激导致数据变异增大,预适应可降低10–30%皮质酮峰值。63.比较CRISPR/Cas9与ES细胞打靶技术的优缺点。答案:CRISPR优点:周期短(2个月)、成本低、无物种限制;缺点:存在脱靶、复杂基因座效率低。ES细胞优点:精确、无脱靶、可大型片段敲入;缺点:仅小鼠、周期长(8–12个月)、需嵌合体阶段。解析:大动物缺乏优质ES细胞,CRISPR成为唯一选择;对于复杂条件性敲除,ES打靶仍不可替代。64.实验动物遗传质量监测的微卫星标记法实验流程。答案:(1)剪尾0.5cm,提取DNA;(2)选20个多态微卫星位点,荧光引物PCR;(3)毛细管电泳检测片段长度;(4)软件计算等位基因数、杂合度;(5)与标准品比对,差异>20%判定污染。解析:微卫星法成本低、通量高,可检出1%外源基因渗入。65.简述实验动物安乐死“美学”原则及CO₂法操作要点。答案:美学原则:死亡过程无惊恐、无疼痛、无挣扎,保持动物完整性。CO₂法:①流速为30–70%容器体积/min,避免骤冷;②预先放入垫料,减少湿冷应激;③确认呼吸停止后,夹趾无反应;④继续充CO₂1min,随后颈椎脱臼确认。解析:流速过快致疼痛,过慢延长死亡;幼鼠对CO₂耐受高,需延长暴露时间。六、案例分析题(每题10分,共20分)66.某实验室从外单位引进SPF级C57BL/6J小鼠50只,运输途中空调故障,车厢温度升至38℃持续2h。到货后动物出现呼吸急促、口周发绀,死亡率10%。问题:(1)最可能的病理变化;(2)如何急救;(3)后续实验是否可用?答案:(1)高热应激致肺充血水肿、呼吸性碱中毒,继发代谢性酸中毒;(2)立即转移至25℃空调房,提供含5%葡萄糖饮水,皮下补液0.9%NaCl1ml/20g,必要时吸氧;(3)存活动
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