2025年检验科细菌组上岗、轮岗考核试题(附答案)

2025年检验科细菌组上岗、轮岗考核试题(附答案)一、单选题（每题2分，共30分）1.关于革兰染色操作，以下步骤顺序正确的是A.结晶紫→碘液→95%乙醇→稀释石碳酸复红B.碘液→结晶紫→95%乙醇→稀释石碳酸复红C.结晶紫→95%乙醇→碘液→稀释石碳酸复红D.稀释石碳酸复红→碘液→95%乙醇→结晶紫2.分离流感嗜血杆菌时，需在培养基中添加的生长因子是A.X因子（血红素）和V因子（NAD）B.X因子（NAD）和V因子（血红素）C.Ⅴ因子（维生素B12）和X因子（半胱氨酸）D.Ⅹ因子（泛酸）和Ⅴ因子（生物素）3.以下哪种细菌需采用巧克力琼脂培养基进行初次分离？A.金黄色葡萄球菌B.肺炎链球菌C.淋病奈瑟菌D.大肠埃希菌4.氧化酶试验阳性的细菌是A.肠杆菌科细菌B.假单胞菌属C.葡萄球菌属D.肠球菌属5.关于血培养标本采集，错误的操作是A.成人每次采集10-20ml，儿童1-5mlB.发热初期或寒战时采集C.严格消毒皮肤后，先抽厌氧瓶再抽需氧瓶D.怀疑布鲁菌感染时，需延长培养时间至21天6.可产生β-内酰胺酶的革兰阳性球菌是A.肺炎链球菌B.屎肠球菌C.金黄色葡萄球菌D.A群链球菌7.用于检测MRSA（耐甲氧西林金黄色葡萄球菌）的关键药物是A.苯唑西林B.头孢西丁C.万古霉素D.利奈唑胺8.以下哪种细菌在麦康凯琼脂上不生长？A.铜绿假单胞菌B.沙门菌属C.鲍曼不动杆菌D.粪肠球菌9.关于分枝杆菌抗酸染色，正确的结果判断是A.抗酸菌呈蓝色，背景呈红色B.抗酸菌呈红色，背景呈蓝色C.抗酸菌呈绿色，背景呈红色D.抗酸菌呈紫色，背景呈无色10.用于鉴定霍乱弧菌的特异性试验是A.0/129敏感试验B.动力试验C.氧化酶试验D.靛基质试验11.以下哪种情况提示痰标本为合格标本？A.鳞状上皮细胞>25个/低倍视野B.中性粒细胞<10个/低倍视野C.鳞状上皮细胞:中性粒细胞<1:2.5D.黏液丝>15条/低倍视野12.检测产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的肠杆菌科细菌时，需选择的药物组合是A.头孢他啶+克拉维酸、头孢噻肟+克拉维酸B.亚胺培南+西司他丁、美罗培南C.氨苄西林+舒巴坦、哌拉西林+他唑巴坦D.庆大霉素+阿米卡星、环丙沙星13.厌氧培养箱的气体环境通常为A.80%N₂、10%H₂、10%CO₂B.70%N₂、20%O₂、10%CO₂C.50%N₂、30%O₂、20%CO₂D.90%N₂、5%H₂、5%CO₂14.关于支原体培养，错误的描述是A.需使用含血清和酵母浸液的培养基B.肺炎支原体可引起“煎蛋样”菌落C.解脲脲原体可分解尿素产碱D.培养时间通常为1-2天15.实验室生物安全二级（BSL-2）的核心要求不包括A.操作时穿防护服、戴手套B.配备生物安全柜C.实验室内设洗眼装置D.严格限制无关人员进入二、多选题（每题3分，共30分，少选得1分，错选不得分）1.需严格无菌操作采集的标本包括A.脑脊液B.痰液C.关节腔积液D.中段尿2.关于细菌耐药机制，正确的描述有A.青霉素结合蛋白（PBP）改变导致β-内酰胺类耐药B.外膜孔蛋白缺失可引起碳青霉烯类耐药C.氨基糖苷类修饰酶可灭活阿米卡星D.拓扑异构酶突变导致喹诺酮类耐药3.以下细菌中，触酶试验阳性的是A.葡萄球菌属B.链球菌属C.肠球菌属D.微球菌属4.血培养报阳后需进行的操作包括A.涂片革兰染色镜检B.转种至血平板和麦康凯平板C.直接进行药敏试验（如为纯培养）D.记录报阳时间5.痰标本涂片镜检的意义包括A.评估标本质量B.初步判断可能的病原体C.指导临床经验性用药D.替代细菌培养6.以下属于苛养菌的是A.流感嗜血杆菌B.肺炎克雷伯菌C.淋病奈瑟菌D.嗜肺军团菌7.关于β-内酰胺酶抑制剂复合制剂，正确的是A.克拉维酸可抑制ESBLsB.舒巴坦对不动杆菌属有协同作用C.他唑巴坦对铜绿假单胞菌有效D.所有β-内酰胺酶抑制剂均无抗菌活性8.实验室质量控制中，需每日监测的项目包括A.培养箱温度B.药敏纸片效价C.染色液有效性D.生物安全柜气流9.厌氧培养失败的常见原因有A.标本暴露于空气时间过长B.厌氧指示剂失效C.培养基未预还原D.培养时间不足48小时10.关于分枝杆菌实验室检测，正确的是A.结核分枝杆菌需在L-J培养基上培养2-8周B.快速生长分枝杆菌（如龟分枝杆菌）培养时间<7天C.抗酸染色可区分结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌D.分子检测（如XpertMTB/RIF）可同时检测利福平耐药三、简答题（每题8分，共40分）1.简述痰标本的质量评估标准及不合格标本的处理原则。2.列举VITEK2Compact全自动微生物鉴定仪的工作原理及主要检测参数。3.说明ESBLs检测的临床意义及CLSI推荐的确证试验方法。4.简述血培养报阳后的处理流程（从仪器报警至发出报告）。5.列举实验室生物安全三级（BSL-3）与二级（BSL-2）的主要区别（至少5项）。四、案例分析题（每题15分，共30分）案例1：患者男性，68岁，因“发热伴意识模糊3天”入院。体温39.5℃，血压85/50mmHg，血白细胞18.2×10⁹/L（中性粒细胞89%）。临床怀疑血流感染，已采集2套血培养（双侧肘静脉），分别于6小时、8小时报阳。（1）分析该患者血培养采集是否规范？若存在问题，可能影响结果的哪些方面？（2）涂片镜检见革兰阳性球菌（葡萄串状），需进一步做哪些鉴定试验？（3）若鉴定为金黄色葡萄球菌，需重点检测的耐药基因是什么？其对应的耐药表型是什么？（4）针对该患者，经验性抗感染治疗的首选药物及依据是什么？案例2：患者女性，45岁，慢性阻塞性肺疾病急性加重期，咳嗽、咳大量黄脓痰。痰培养结果：肺炎克雷伯菌（≥10⁷CFU/ml），ESBLs阳性，对亚胺培南敏感，对头孢他啶、左氧氟沙星耐药。（1）该痰标本需先进行哪些质量评估？若评估不合格，实验室应如何处理？（2）涂片镜检可能观察到哪些形态学特征？（3）ESBLs阳性的肺炎克雷伯菌感染，临床治疗需避免使用哪些药物？推荐的首选药物是什么？（4）实验室需对该菌株进行哪些耐药监测并上报？答案一、单选题1.A2.A3.C4.B5.C6.C7.B8.D9.B10.A11.C12.A13.A14.D15.D二、多选题1.AC2.ABCD3.AD4.ABD5.ABC6.ACD7.ABC8.ACD9.ABC10.ABD三、简答题1.质量评估标准：低倍镜下观察，合格痰标本需满足鳞状上皮细胞<10个/低倍视野且中性粒细胞>25个/低倍视野，或二者比例<1:2.5；不合格标本表现为鳞状上皮细胞过多（>25个/低倍视野）或中性粒细胞过少（<10个/低倍视野）。处理原则：及时联系临床重新留取，备注“标本不合格，可能影响结果准确性”，若临床坚持检测，需在报告中注明。2.工作原理：基于微生物对不同碳源的利用或代谢产物（如酶活性、pH变化）引起的显色反应，通过光电比色法连续监测96孔反应板的颜色变化，自动分析鉴定编码和药敏MIC值。主要检测参数：鉴定（细菌种属）、药敏（20-30种抗生素的MIC值及敏感/中介/耐药判定）、特殊耐药表型（如MRSA、ESBLs）。3.临床意义：ESBLs可水解青霉素类、头孢菌素类（除头霉素类、碳青霉烯类）及单环β-内酰胺类，导致上述药物治疗失败；检测可指导临床避免使用易被水解的药物，选择头霉素类、碳青霉烯类或β-内酰胺酶抑制剂复合制剂。确证试验方法（CLSI推荐）：双纸片协同试验（头孢他啶/头孢他啶+克拉维酸、头孢噻肟/头孢噻肟+克拉维酸），若加克拉维酸的纸片抑菌圈直径比单用增大≥5mm，判定为ESBLs阳性。4.处理流程：①仪器报警后，记录报阳时间及瓶号；②无菌操作取出培养瓶，振荡混匀后涂片革兰染色镜检，记录菌体形态、染色性；③转种至血平板（需氧）和巧克力平板（苛养菌），厌氧瓶转种厌氧血平板；④35℃培养18-24小时后观察菌落形态，进行初步鉴定（如触酶、凝固酶试验）；⑤纯培养后使用全自动鉴定仪或手工生化试验完成种属鉴定；⑥依据CLSI标准进行药敏试验，审核结果后签发报告（注明“血培养阳性，分离到XX菌，药敏结果如下”）。5.主要区别：①BSL-3实验室需设独立的缓冲间和污染区、半污染区、清洁区三区划分；②必须使用Ⅱ级或Ⅲ级生物安全柜进行操作；③工作人员需穿戴正压防护服或N95口罩+双层手套；④实验室内空气需经高效过滤器（HEPA）处理后排出，不得循环；⑤严格限制人员进入，需经过生物安全培训并考核；⑥涉及高致病性病原微生物（如结核分枝杆菌、布鲁菌）时，需执行更严格的消毒（如121℃高压蒸汽30分钟）和废弃物处理流程。四、案例分析题案例1：（1）采集规范分析：患者为成人，采集2套（双侧）符合要求，但需确认每套是否采集10-20ml（题干未明确）；若血量不足可能降低阳性率。报阳时间短（6-8小时）提示可能为高浓度菌血症或快速生长菌（如葡萄球菌）。（2）进一步鉴定试验：触酶试验（葡萄球菌阳性，链球菌阴性）、凝固酶试验（区分金黄色葡萄球菌与凝固酶阴性葡萄球菌）、血浆凝固酶或凝聚因子试验（确认是否产凝固酶）；若需区分MRSA，需检测头孢西丁药敏或mecA基因。（3）重点检测基因：mecA基因（编码PBP2a）；耐药表型：对苯唑西林、头孢西丁耐药（MRSA），需报告对所有β-内酰胺类耐药（除头孢洛林）。（4）经验性治疗首选：万古霉素或利奈唑胺（若为MRSA）；依据：血流感染中金黄色葡萄球菌尤其是MRSA占比高，需覆盖耐药菌；若为MSSA（甲氧西林敏感），可选用苯唑西林或头孢唑林，但需结合当地耐药率。案例2：（1）质量评估：低倍镜下观察鳞状上皮细胞和中性粒细胞数量，合格标准为鳞状上皮细胞<10个/低倍视野且中性粒细胞>25个/低倍视野；若不合格（如鳞状上皮细胞过多），实验室应联系临床重新留取，备注“标本不合格”。（2）涂片镜检特征：革兰阴性杆菌（短杆或球杆状），常呈单个或成对