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文档简介

生物免疫学单克隆抗体技术测验试题冲刺卷考试时长:120分钟满分:100分班级:__________姓名:__________学号:__________得分:__________试卷名称:生物免疫学单克隆抗体技术测验试题冲刺卷考核对象:生物医学相关专业学生、行业初学者题型分值分布:-判断题(10题,每题2分)总分20分-单选题(10题,每题2分)总分20分-多选题(10题,每题2分)总分20分-案例分析(3题,每题6分)总分18分-论述题(2题,每题11分)总分22分总分:100分一、判断题(每题2分,共20分)1.单克隆抗体是由单个B细胞克隆产生的特异性抗体。2.杂交瘤技术是制备单克隆抗体的核心方法。3.B细胞表面存在BCR(B细胞受体),可直接识别抗原。4.腹水法是单克隆抗体纯化的一种常用方法。5.转基因小鼠可用于生产单克隆抗体。6.单克隆抗体具有高度特异性,但亲和力较低。7.佐剂在单克隆抗体制备中用于增强免疫原性。8.膜联蛋白A(AnnexinA)可用于固定化单克隆抗体。9.单克隆抗体在肿瘤治疗中可发挥靶向作用。10.Fc片段是单克隆抗体结合补体的关键区域。二、单选题(每题2分,共20分)1.下列哪种方法不属于杂交瘤技术的关键步骤?A.B细胞与骨髓瘤细胞的融合B.HAT培养基的选择性培养C.体外转录合成抗体D.筛选阳性克隆2.单克隆抗体纯化的主要目的是?A.增加抗体产量B.提高抗体特异性C.降低抗体成本D.改善抗体稳定性3.下列哪种载体常用于表达单克隆抗体?A.病毒载体B.质粒载体C.染色体载体D.以上都是4.以下哪种方法不属于单克隆抗体固定化技术?A.交联法B.吸附法C.化学键合法D.融合表达法5.单克隆抗体在免疫印迹中的主要作用是?A.检测核酸B.检测蛋白质C.检测多糖D.检测脂质6.下列哪种酶常用于单克隆抗体酶联免疫检测?A.超氧化物歧化酶B.过氧化物酶C.脱氧核糖核酸酶D.腺苷酸激酶7.单克隆抗体在流式细胞术中的作用是?A.标记细胞表面抗原B.激活细胞凋亡C.抑制细胞增殖D.促进细胞分化8.以下哪种方法不属于单克隆抗体质量控制?A.亲和力测定B.纯度分析C.稳定性测试D.产量统计9.单克隆抗体在药物开发中的优势是?A.成本低廉B.作用广泛C.特异性强D.稳定性差10.以下哪种技术可用于单克隆抗体的快速筛选?A.ELISAB.WesternBlotC.FACSD.PCR三、多选题(每题2分,共20分)1.单克隆抗体制备的步骤包括?A.抗原制备B.B细胞免疫C.杂交瘤建立D.抗体纯化E.体外扩增2.单克隆抗体的应用领域包括?A.医学诊断B.药物研发C.肿瘤治疗D.基础研究E.食品检测3.影响单克隆抗体稳定性的因素包括?A.pH值B.温度C.金属离子D.表面活性剂E.氧化剂4.单克隆抗体固定化技术的优势包括?A.可重复使用B.提高检测效率C.降低成本D.增强抗体活性E.减少非特异性结合5.单克隆抗体在免疫印迹中的优化方法包括?A.抗体浓度调整B.温育时间控制C.封闭条件优化D.底物选择E.电泳参数设置6.单克隆抗体在流式细胞术中的应用包括?A.细胞分选B.表面标记C.细胞计数D.细胞凋亡检测E.细胞周期分析7.单克隆抗体质量控制的方法包括?A.SDSB.亲和力测定C.纯度分析D.稳定性测试E.生物学活性检测8.单克隆抗体在药物开发中的类型包括?A.单克隆抗体药物B.融合蛋白C.ADC药物D.免疫检查点抑制剂E.抗体药物偶联物9.影响单克隆抗体生产效率的因素包括?A.细胞系选择B.培养条件C.基因表达调控D.纯化工艺E.诱导剂浓度10.单克隆抗体在免疫检测中的常见问题包括?A.非特异性结合B.抗体交叉反应C.检测灵敏度低D.抗体降解E.信号干扰四、案例分析(每题6分,共18分)案例1:某研究团队需制备针对乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的单克隆抗体,用于临床诊断。实验过程中,研究人员发现杂交瘤细胞生长缓慢,抗体产量低。请分析可能的原因并提出解决方案。案例2:某制药公司计划开发一种靶向HER2阳性乳腺癌的单克隆抗体药物。在药物研发初期,研究人员需验证抗体的特异性及亲和力。请简述实验设计思路及关键步骤。案例3:某实验室采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中的某蛋白,但发现抗体结合效率低,信号弱。请分析可能的原因并提出优化方案。五、论述题(每题11分,共22分)1.论述单克隆抗体在肿瘤免疫治疗中的应用及其面临的挑战。2.比较并分析单克隆抗体与多克隆抗体的优缺点,并说明其在不同领域的应用差异。标准答案及解析一、判断题1.√2.√3.√4.√5.√6.×(单克隆抗体具有高特异性和高亲和力)7.√8.√9.√10.√解析:-第6题错误,单克隆抗体具有高特异性和高亲和力,而非低亲和力。-其他选项均符合单克隆抗体技术的基本原理和应用。二、单选题1.C2.B3.D4.D5.B6.B7.A8.D9.C10.A解析:-第1题,体外转录合成抗体不属于杂交瘤技术步骤,正确选项为C。-第5题,单克隆抗体在免疫印迹中主要用于检测蛋白质,正确选项为B。-第9题,单克隆抗体特异性强是其主要优势,正确选项为C。三、多选题1.ABCDE2.ABCDE3.ABCDE4.ABDE5.ABCDE6.ABDE7.ABCDE8.ABCDE9.ABCDE10.ABCDE解析:-第4题,融合表达法不属于固定化技术,正确选项为D。-第10题,所有选项均为免疫检测中的常见问题,全选。四、案例分析案例1:可能原因:1.抗原质量差,免疫原性弱;2.B细胞或骨髓瘤细胞培养条件不当;3.融合效率低;4.培养基营养不足。解决方案:1.优化抗原制备,提高免疫原性;2.调整细胞培养条件(如CO2浓度、温度);3.改进融合方法(如电穿孔);4.使用高营养培养基(如FBS浓度)。案例2:实验设计思路:1.制备HER2阳性乳腺癌细胞系和正常细胞系;2.通过ELISA或流式细胞术检测抗体与HER2的结合效率;3.进行竞争性结合实验验证特异性;4.通过细胞毒性实验评估抗体杀伤肿瘤细胞的能力。关键步骤:1.细胞系培养与HER2表达验证;2.抗体固定与待测样本孵育;3.酶标检测或荧光信号采集;4.数据统计分析。案例3:可能原因:1.抗体浓度过低;2.封闭条件不当,导致非特异性结合;3.底物选择不当,信号弱;4.温育时间不足。优化方案:1.提高抗体工作浓度;2.优化封闭条件(如封闭剂类型、孵育时间);3.选择高灵敏度底物(如TMB);4.延长温育时间,确保充分结合。五、论述题1.单克隆抗体在肿瘤免疫治疗中的应用及其面临的挑战应用:-靶向治疗:单克隆抗体可特异性识别肿瘤相关抗原(如HER2、PD-L1),阻断信号通路或招募免疫细胞杀伤肿瘤;-免疫检查点抑制:PD-1/PD-L1抑制剂(如纳武利尤单抗)可解除免疫抑制,增强T细胞活性;-肿瘤疫苗:与肿瘤相关抗原结合,激发机体免疫应答。挑战:-肿瘤异质性导致抗体疗效不稳定;-免疫原性抗体可能引发超敏反应;-药物研发成本高、周期长。2.单克隆抗体与多克隆抗体的比较及应用差异比较:-特异性:单克隆抗体特异性强,多克隆抗体易交叉反应;-产量:多克隆抗体产量高,单克隆抗体需杂交瘤技术;

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