《微生物的分离和培养》教案

1/5第一节微生物的分离和培养【学习目标】1．学会微生物的分离与培养。2．掌握无菌操作技能。【教学地位】本节内容介绍了实验室常采用的灭菌方法，配制培养基的方法，接种微生物的方法以及微生物的分离培养技术。本节内容是无菌操作的核心内容之一，是高考中常考的内容。【教法指导】1．有关培养基的问题，建议教师通过实例、图片等形式讲解，以增进学生的感性认识。2．有关无菌技术，建议教师引导学生理清实验原理、实验方法。3．培养基的概念、类型、成分等内容可借助图片、课件、实例向学生展示，并设置问题启发诱导。4．大肠杆菌的接种与分离培养要创造条件，让学生走进实验室进行实际操作。【新课导入建议】1．通过课题背景实例引出本章要解决的问题。2．通过微生物培养和分离图示引出本节内容。【课前自主学】一手提式高压灭菌锅1.实验室常采用的灭菌方法实验室常利用高温处理达到灭菌效果，包括采用干热灭菌或湿热灭菌等方法。2．手提式高压灭菌锅的使用使用步骤包括：加水→装锅→加热排气→保温保压→出锅等。思考交流：1．高压灭菌锅是依赖高压灭菌吗？【提示】不是，是通过高压来提高湿热的温度灭菌的。二配制培养基1.培养基的概念为人工培养微生物而制备的，提供适合微生物生长、繁殖或积累代谢产物的营养基质。2．培养基的类型(1)天然培养基eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(含义：是指采用动植物组织或微生物细胞以及它,们的提取物或粗消化物配制而成的培养基,优点：取材便利、营养丰富、配制简便,缺点：营养成分难以控制、实验结果的重复性较差))(2)合成培养基eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(含义：是指由准确称量的分析纯等高纯度,化学试剂加蒸馏水配制而成的培养基,优点：化学成分及其含量明确、实验的可重,复性好,缺点：配制繁琐、成本较高))3．培养基的成分各种培养基的配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等最基本的物质。思考交流：2．在固体培养基中加入的琼脂能为微生物提供营养吗？为什么？【提示】不能，微生物不能分解琼脂。三接种微生物1．接种的概念指在无菌条件下将微生物接入培养基的操作过程。2．不同接种工具的使用(1)穿刺接种要用接种针。(2)斜面划线接种或平板划线接种要用到接种环。(3)涂抹平板接种要用到玻璃刮铲。四大肠杆菌的接种与分离培养1.牛肉膏蛋白胨培养基的配制步骤①配制培养液；②调节pH至7.2；③分装：培养基的高度约为试管长度的1/5；④包扎；⑤灭菌：高压蒸汽灭菌是常用的灭菌方法；⑥搁置斜面：待试管冷却至50℃左右，斜面长度不超过试管总长的1/2。思考交流：3．牛肉膏蛋白胨能培养病毒吗？为什么？【提示】不能，因为病毒只能进行活细胞寄生生活。2．斜面接种和培养大肠杆菌(1)斜面接种的主要目的有菌种转移、扩大培养、保存纯净菌种等。(2)具体操作步骤准备接种→接种环灭菌→试管口灭菌→挑取少许菌体→划线接种→培养大肠杆菌→低温保存。思考交流：4．通常在酒精灯火焰附近接种微生物的原因是什么？【提示】酒精灯火焰附近的局部高温使得微生物不能存活。正误判断：1．牛肉膏蛋白胨培养基主要用于培养酵母菌。(×)【提示】主要用于培养细菌。2．接种是将微生物接入培养基后再灭菌。(×)【提示】接种是在无菌条件下将微生物接入培养基。3．通常认为消毒是一种部分灭菌的方法。(√)4．肉眼看到的一个菌落肯定是由一个大肠杆菌生长和繁殖形成的。(×)【提示】不一定，有可能是由几个没有分离开的大肠杆菌形成的。【课堂互动探究】【问题导思】①培养基中碳源、氮源、水和无机盐的来源和作用是什么？②培养基的配制应遵循哪些原则？1．培养基的成分营养要素含义作用主要来源碳源凡能提供所需碳元素的物质构成生物体细胞的物质和一些代谢产物，有些是异养生物的能源物质①无机化合物：CO2、NaHCO3②有机化合物：糖类、脂肪酸、花生饼粉、石油等氮源凡能提供所需氮元素的物质合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物①无机化合物：N2、NH3、铵盐、硝酸盐②有机化合物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等水在生物体内含量很高，在低等生物体内含量更高不仅是优良的溶剂，而且可维持生物大分子结构的稳定无机盐为微生物提供除碳、氮元素以外的各种重要元素细胞内的组成成分，生理调节物质；某些化能自养菌的能源，酶的激活剂例一：下列制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述中，错误的是()A．操作顺序为配制培养液、调节pH、分装、包扎、搁置斜面、灭菌B．在配制培养基过程中要加入琼脂作为凝固剂C．将培养基冷却至50℃左右时进行搁置斜面D．可以用3%的HCl或NaOH溶液调节培养液的pH【审题导析】该题的解题关键是配制牛肉膏蛋白胨培养基的步骤。【精讲精析】选项分析判断A操作顺序为配制培养液→调节pH→分装→包扎→灭菌→搁置斜面B固体培养基在配制时需添加琼脂作凝固剂C待试管冷却至50℃左右，将试管口部枕在高约1cm的木条上，使其自然倾斜D根据实际情况用质量分数为3%的HCl或NaOH溶液调节培养基的pH【答案】A【问题导思】①怎样区分消毒和灭菌？②实验操作过程中怎样实施无菌操作？1．消毒与灭菌的区别条件结果常用的方法消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体上绝大多数微生物(包括病原微生物和有害微生物的营养细胞)煮沸消毒法(如100℃下5～6min可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢)、巴氏消毒法、化学药剂消毒法灭菌强烈的物理或化学方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子干热灭菌、高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌2.常用的无菌技术(1)